实习二 Vc含量的测定综述.

1、实习二 果蔬中还原性维生素果蔬中还原性维生素C C的含的含量测定量测定 l 维生素维生素C C是一种己糖醛基酸，有抗坏血病的作是一种己糖醛基酸，有抗坏血病的作用，所以又称作抗坏血酸。维生素用，所以又称作抗坏血酸。维生素C C广泛存在于植广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特别是枣、辣椒物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑桔等食品中含量尤、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑桔等食品中含量尤丰富。丰富。l 维生素维生素C C具有较强的还原性，对光敏感，氧化具有较强的还原性，对光敏感，氧化后的产物称为脱氢抗坏血酸，仍然具有生理活性后的产物称为脱氢抗坏血酸，仍然具有生理活性。

2、进一步水解则生成。进一步水解则生成2 2，3 -3 -二酮古乐糖酸，失去生二酮古乐糖酸，失去生理作用。理作用。目的目的学习和掌握用学习和掌握用2,6-2,6-二氯酚靛酚滴定法测定植二氯酚靛酚滴定法测定植物材料中抗坏血酸含量的原理与方法。物材料中抗坏血酸含量的原理与方法。原理原理 2,6- 2,6-二氯酚靛酚是一种染料，在碱性溶液中呈蓝色二氯酚靛酚是一种染料，在碱性溶液中呈蓝色，在酸性溶液中呈红色。抗坏血酸具有强还原性，能，在酸性溶液中呈红色。抗坏血酸具有强还原性，能使使2,6-2,6-二氯酚靛酚还原褪色，其反应如下：二氯酚靛酚还原褪色，其反应如下：CCCCCHCH2OHOOHOHHOHONO-

3、OC lC lNO HOC lC l+（ 蓝 色 ）OH-H+抗 坏 血 酸2,6-二 氯 酚 靛 酚（ 红 色 ）CCCCCHCH2OHOOOHOHONO HOHC lC lH还 原 型 2,6-二 氯 酚 靛 酚（ 无 色 ）+脱 氢 抗 坏 血 酸当用当用2,6-2,6-二氯酚靛酚滴定含有抗坏血酸的酸性溶液二氯酚靛酚滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时，滴下的时，滴下的2,6-2,6-二氯酚靛酚被还原成无色；二氯酚靛酚被还原成无色；当溶液中的抗坏血酸全部被氧化成脱氢抗坏血酸当溶液中的抗坏血酸全部被氧化成脱氢抗坏血酸时，滴入的时，滴入的2,6-2,6-二氯酚靛酚立即使溶液呈现红色。二氯酚靛酚立即使

4、溶液呈现红色。因此用这种染料滴定抗坏血酸至溶液呈淡红色即因此用这种染料滴定抗坏血酸至溶液呈淡红色即为滴定终点，根据染料消耗量即可计算出样品中为滴定终点，根据染料消耗量即可计算出样品中还原型抗坏血酸的含量。还原型抗坏血酸的含量。1 1实验材料实验材料取新鲜水果（蔬菜）样品取新鲜水果（蔬菜）样品100g100g，加，加100g 2100g 2草酸溶草酸溶液液，用研钵制成匀浆。过滤，弃滤渣，称取，用研钵制成匀浆。过滤，弃滤渣，称取10g10g匀匀浆，移入浆，移入100mL100mL容量瓶，用容量瓶，用1 1草酸定容至刻度，草酸定容至刻度，摇匀后静置备用。摇匀后静置备用。实验材料、主要仪器和试剂实验材

5、料、主要仪器和试剂2 2仪器仪器 （1 1）电子天平）电子天平 （2 2）研钵）研钵 （3 3）容量瓶（）容量瓶（100mL100mL） （4 4）刻度吸管（）刻度吸管（1mL1mL，5mL5mL，10mL10mL） （5 5）锥形瓶（）锥形瓶（250mL250mL） （6 6）滴定管）滴定管3 3试剂试剂（1 1）2 2草酸草酸（2 2）1 1草酸草酸（3 3）标准抗坏血酸溶液（）标准抗坏血酸溶液（0.1mg/mL0.1mg/mL）（4 4）2,6-2,6-二氯酚靛酚溶液二氯酚靛酚溶液（5 5）1%1%的淀粉溶液的淀粉溶液（6 6）0.1000%mol/L0.1000%mol/L碘酸钾标准储

6、备液碘酸钾标准储备液（7 7）0.001%mol/L0.001%mol/L碘酸钾标准应用液碘酸钾标准应用液 （8 8）6%6%的的KIKI溶液溶液1.2,6-1.2,6-二氯酚靛酚溶液的标定：二氯酚靛酚溶液的标定：(1)(1)抗坏血酸标准溶液的标定：确吸取抗坏血酸标准溶液的标定：确吸取2.0mL2.0mL抗坏抗坏血酸标准液于血酸标准液于100mL100mL锥形瓶中，加锥形瓶中，加5mL 15mL 1草酸溶草酸溶液，液，6%6%的的KIKI溶液溶液0.5ml0.5ml，1%1%的淀粉溶液的淀粉溶液2 2滴，再以滴，再以0.001%mol/L0.001%mol/L碘酸钾标准应用液滴至淡蓝色。碘酸钾

7、标准应用液滴至淡蓝色。 抗坏血酸浓度（抗坏血酸浓度（mg/mlmg/ml）= =（耗（耗0.001%mol/L0.001%mol/L碘酸钾碘酸钾mlml数数* *0.0880.088* *6 6）/2/2操作步骤操作步骤(2)(2)二氯酚靛酚溶液的标定：吸取已标定过的抗坏二氯酚靛酚溶液的标定：吸取已标定过的抗坏血酸溶液血酸溶液5ml5ml及及1%1%的草酸的草酸5ml5ml于锥形瓶中，以待标于锥形瓶中，以待标定的定的2,6-2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至溶液呈淡红色，在二氯酚靛酚溶液滴定至溶液呈淡红色，在1515内不褪色为止。内不褪色为止。 1ml1ml染料相当于抗坏血酸的毫克数（记作染料相当于

8、抗坏血酸的毫克数（记作T T）= =（坏血酸浓度（坏血酸浓度（mg/mlmg/ml）* *5 5）/ /滴定消耗染料毫升数滴定消耗染料毫升数 2 2样品测定：准确吸取样品提取液（上清液或滤液样品测定：准确吸取样品提取液（上清液或滤液），每份），每份5.0mL5.0mL，分别放入锥形瓶中，按上面的操，分别放入锥形瓶中，按上面的操作进行滴定并记录所用染料溶液体积（作进行滴定并记录所用染料溶液体积（mLmL）, ,平行平行操作三次，取平均值。操作三次，取平均值。 V V 滴定样品提取液消耗染料平均值（滴定样品提取液消耗染料平均值（mLmL） T T 每每mLmL染料所能氧化抗坏血酸染料所能氧化抗坏血酸mgmg数数 G G 匀浆总重量（匀浆总重量（g g） G1 G1 制备提取液取用匀浆重量（制备提取液取用匀浆重量（g g） A A 样品提取液定容体积（样品提取液定容体积（mLmL） A1 A1 滴定时吸取样品提取液体积（滴定时吸取样品提取液体积（mLmL） W W 样品重量（样品重量（g g）100AGWAGV11100/样品）抗坏血酸含量（gmg结果计算结果计算注意1.操作要尽可能快操作要尽可能快，并防止与铁铜器具接触，并防止与铁铜器具接触，以减少以减少VC的氧化的氧化。2.样品提取液避免强光直射。样品提取液避免强光直射。3. 草酸具有抑制氧化酶，保护草酸具有抑制氧化酶，保护V V