专题2课题3_分解纤维素的微生物的分离

1、目标：目标：如何分离土壤中能分解纤如何分离土壤中能分解纤维素的微生物维素的微生物 纤维素纤维素是一种由葡萄糖首尾相是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是连而成的高分子化合物，是含量最含量最丰富的多糖类物质丰富的多糖类物质。纤维素能被土。纤维素能被土壤中某些微生物分解利用，这是壤中某些微生物分解利用，这是因因为它们能够产生为它们能够产生纤维素酶。纤维素酶。草食性动物是怎样消化食物中纤维素的？草食性动物是怎样消化食物中纤维素的？胃中生活着大量分解纤维素的微生物，能胃中生活着大量分解纤维素的微生物，能产生纤维素酶，将纤维素分解成葡萄糖产生纤维素酶，将纤维素分解成葡萄糖 棉花棉花是自然界中纤维素

2、含量最是自然界中纤维素含量最高的天然产物，纤维素的分解需要高的天然产物，纤维素的分解需要在在纤维素酶纤维素酶的催化作用下完成，请的催化作用下完成，请完成下列过程（阅读课本第二段）：完成下列过程（阅读课本第二段）：（一）纤维素与纤维素酶（一）纤维素与纤维素酶 纤维素酶是一种纤维素酶是一种复合酶复合酶，一，一般认为它至少包括三种组分般认为它至少包括三种组分，即，即C1酶、酶、 CX酶和葡萄糖苷酶酶和葡萄糖苷酶，前两种，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。酶将纤维二糖分解成葡萄糖。纤维素纤维素纤维纤维二糖二糖葡萄糖葡萄糖C1酶酶Cx酶酶葡萄

3、糖葡萄糖苷酶苷酶滤滤纸纸崩崩溃溃法法体会纤维素酶作用的实验：体会纤维素酶作用的实验：（二）纤维素分解菌的筛选（二）纤维素分解菌的筛选1、筛选纤维素分解菌的方法是、筛选纤维素分解菌的方法是_。该方法可以通。该方法可以通过过_反应直接筛选。反应直接筛选。刚果红染色法刚果红染色法颜色颜色2、其原理是：刚果红可以与纤维、其原理是：刚果红可以与纤维素形成素形成_，当纤维素被，当纤维素被_分解后，红色复合物无分解后，红色复合物无法形成，出现以法形成，出现以_为为中心的中心的_，我们可以通过，我们可以通过_来筛选纤维素分解菌。来筛选纤维素分解菌。红色复合物红色复合物纤维素酶纤维素酶纤维素分解菌纤维素分解菌

4、透明圈透明圈是否产生透明圈是否产生透明圈练一练：练一练：1.1.下列关于纤维素酶的说法，错误的是下列关于纤维素酶的说法，错误的是A. 纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种B. 纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C. 纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D. 葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖2.利用刚果红染色法可以筛选出纤维素利用刚果红染色法可以筛选出纤维素分解菌，下列说法错误的是分解菌，下列说法错误的是A. 刚果红能与纤维素形成红色复合物刚果红能与纤维素形成红色复合物 B. 刚果红

5、能与纤维二糖形成红色复合物刚果红能与纤维二糖形成红色复合物 C. 刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物D. 若培养基上产生了透明圈，则说明已筛若培养基上产生了透明圈，则说明已筛选出了纤维素分解菌选出了纤维素分解菌土壤取样土壤取样选择培养选择培养梯度稀释梯度稀释将样品涂布到鉴将样品涂布到鉴别纤维素分解菌别纤维素分解菌的培养基上的培养基上挑选产生挑选产生透明圈的透明圈的菌落菌落（操作流程）（操作流程）（此步可省略）（此步可省略）旁栏思考题旁栏思考题本实验流程与课题本实验流程与课题2中中的实验流程有哪些异同？的实验流程有哪些异同？课题课题2是将土样制成的菌悬液直接涂布是将

6、土样制成的菌悬液直接涂布在以尿素为唯一氮源的选择培养基上，在以尿素为唯一氮源的选择培养基上，直接分离得到菌落直接分离得到菌落本课题通过选择培养，使纤维素分解本课题通过选择培养，使纤维素分解菌得到增殖以后，再将菌液涂布到选菌得到增殖以后，再将菌液涂布到选择培养基上。择培养基上。 纤维素分解菌大多分布在纤维素分解菌大多分布在_的环境中。采集土样时，的环境中。采集土样时，应选择富含纤维素的环境。如树林应选择富含纤维素的环境。如树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等等。也可将累的枯枝败叶等等。也可将滤纸埋滤纸埋在土壤在土壤中一个月左右，这样会有能中一个月左右，这

7、样会有能分解纤维素的微生物生长。分解纤维素的微生物生长。【资料一】土壤取样【资料一】土壤取样 富含富含纤维素纤维素旁栏思考题旁栏思考题为什么要在富含纤维为什么要在富含纤维素的环境中找纤维素分解菌？素的环境中找纤维素分解菌？在富含纤维素的环境中纤维素分在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高解菌的含量相对提高旁栏思考题旁栏思考题将滤纸埋在土壤中有将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋进土壤什么作用？你认为滤纸应该埋进土壤多深？多深？ 人工设置纤维素分解菌生存的适人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境，使纤维素分解菌相对聚集。宜环境，使纤维素分解菌相对聚集。将纸埋于深约将纸埋于深约10cm

8、的腐殖土壤中。的腐殖土壤中。1、纤维素分解菌选择培养基属于、纤维素分解菌选择培养基属于_（固体、液体）培养基，（固体、液体）培养基，原因是原因是_。【资料二】选择培养【资料二】选择培养阅读资料二阅读资料二“选择培养基选择培养基”，回，回答以下几个问题：答以下几个问题：液体液体没有添加琼脂成分没有添加琼脂成分2、该培养基对微生物、该培养基对微生物_（具有，不具有）选择作用。如（具有，不具有）选择作用。如果具有，其选择机制是果具有，其选择机制是_。以纤维素粉为唯一碳源，能分解以纤维素粉为唯一碳源，能分解纤维素的微生物可以大量繁殖纤维素的微生物可以大量繁殖 具有具有 若设置一个对照实验说明选择培若设

9、置一个对照实验说明选择培养的作用，应控制的变量是将养的作用，应控制的变量是将_改为改为_。3、你能否设计一个对照实验，、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用？说明选择培养基的作用？葡萄糖葡萄糖纤维素粉纤维素粉思考思考2实验流程中实验流程中“选择培选择培养养” 的目的是什么？的目的是什么？ 其目的是增加纤维素分解其目的是增加纤维素分解菌的浓度，菌的浓度，以确保能够从样品以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。中分离到所需要的微生物。【资料三】刚果红染色法【资料三】刚果红染色法方法一：方法一：先培养微生物，再加先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应入刚果红进行颜色反应方法二：方法二：在倒平

10、板时就加入刚在倒平板时就加入刚果红果红染色法染色法优点优点缺点缺点方法一方法一（后加刚后加刚果红果红） 方法二方法二（先加刚（先加刚果红）果红） 颜色反应基本颜色反应基本上是纤维素分上是纤维素分解菌的作用解菌的作用 操作繁琐，刚操作繁琐，刚果红会使菌落之间果红会使菌落之间发生混杂发生混杂操作简便，操作简便，不存在菌落不存在菌落混杂问题混杂问题 产生淀粉酶的产生淀粉酶的微生物也产生模糊微生物也产生模糊透明圈，有些微生透明圈，有些微生物能降解色素，形物能降解色素，形成明显的透明圈。成明显的透明圈。思考：这两种方法各有哪些优点与不足思考：这两种方法各有哪些优点与不足选择培养的操作方法选择培养的操作方

11、法将土样加入装有将土样加入装有30ml选择培养基选择培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在的锥形瓶中，将锥形瓶固定在摇摇床床上，在一定温度下上，在一定温度下震荡震荡培养培养12天，直至培养液变浑浊。也天，直至培养液变浑浊。也可重复选择培养。可重复选择培养。思考：据思考：据“摇床摇床”、“震荡震荡”分析纤维分析纤维素分解菌的异化作用类型？素分解菌的异化作用类型？旁栏思考题为什么选择培养能旁栏思考题为什么选择培养能够够“浓缩浓缩”所需的微生物？所需的微生物？ 在选择培养的条件下，可以使那些在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这

12、种营到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到此可以起到“浓缩浓缩”的作用。的作用。指微生物的种类少了，而指微生物的种类少了，而某些微生物的数量多了某些微生物的数量多了 为了确定分离得到的是纤维素为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行分解菌，还需要进行_实验，纤维素酶的发酵方法有实验，纤维素酶的发酵方法有_ 发酵和发酵和_ 发酵。纤维素发酵。纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的等纤维素所产生的_ 含量进含量进行定量测定。行定量测定。发酵产纤维素酶发酵产纤维素酶 液体液体 固体固体 葡萄

13、糖葡萄糖 D1 1、下列材料中纤维素含量最高的、下列材料中纤维素含量最高的是是 ( )( ) A A杨树杨树 B B小麦小麦 C C玉米玉米 D D棉花棉花C2、纤维素酶能够分解、纤维素酶能够分解 ( ) A纤维素的微生物纤维素的微生物 B淀粉的微生物淀粉的微生物 C纤维素纤维素 D淀粉淀粉B3、刚果红能与哪项物质形成红色、刚果红能与哪项物质形成红色复合物复合物 ( ) A纤维二糖纤维二糖 B纤维素纤维素 C葡萄糖葡萄糖 D麦芽糖麦芽糖B4、寻找纤维素分解菌应到、寻找纤维素分解菌应到( ) A湿润的环境中湿润的环境中 B富含纤维素的环境中富含纤维素的环境中 C富含无机盐的环境中富含无机盐的环境中 D池塘中池塘中D5、纤维素分解菌的选择培养基有选、纤维素分解菌的选择培养基有选择作用，原因在于其含有择作用，原因在于其含有 ( ) ANaNO3 BKCl C酵母膏酵母膏 D纤维素粉纤维素粉A6、下列哪种生物能产生纤维素、下列哪种生物能产生纤维素酶酶 ( ) A纤维素分解菌纤维素分解菌 B牛牛 C羊羊 D兔兔D7、选择培养时应将锥形瓶固定、选择培养时应将锥形瓶固定在在 ( ) A桌子上桌子上 B温箱里温箱里 C窗台上窗台上 D摇床上摇床上B8、选择培养的结果：培养液变、选择培养的结果：培养液变 ( ) A清澈清澈 B浑浊浑浊 C红色红色 D产生透明圈产生透明圈C9