培养基适用性检查报告

1、培养基适用性检查报告1 .试验目的：对培养基性能的质量控制，以保证微生物检验的质量。2 .适用范围：适用于细菌、霉菌及酵母菌计数用培养基和控制菌检查用的培养基的适用性检查。需检查的培养基包括成品培养基、由脱水培养基和按处方配制的培养基。3 .试验内容：3.1. 计数培养基的适用性检查3.1.1. 菌种：大肠埃希菌CMCC(B)44102金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003枯草芽抱菌CMCC(B)63501白色念珠菌CMCC(F)98001黑曲霉CMCC(F)980033.1.2. 菌液制备：接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽抱菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基或琼脂斜面培养基中，33c培养2

2、4小时，接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基或改良马丁琼脂斜面培养基中，26c培养48小时。上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数50100cfu的菌悬液。接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基中，26c培养7天，加入4ml含0.05%(ml/ml)聚山梨酯80的0.9%的无菌氯化钠溶液，将抱子洗脱。然后，用管口带有薄的无菌棉花吸出抱子悬液至无菌试管内，用含0.05%(ml/ml)聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数50100cfu的菌悬液。国液制备后若在室温下放置，应在2小时内使用；若保存在28C,可在24小时内使用。黑曲霉抱子悬液可保存在28C

3、,在验证过的贮存期内使用。3.1.3,适应性检查3.1.3.1,细菌计数用培养基适应性检查取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽抱杆菌各1ml(50100cfu),分别注入无菌平皿中，立即倾注营养琼脂培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，混匀，凝固，置33c培养48小时，计数。用被检培养基和对照培养基(若无对照培养基可用其他厂家生产的培养基)按上述方法进行试验，并记录。试验结果报告见表1。报检测日期告日期生被检培养基名产厂称家生对照培养基名产厂称家菌落数：单位肠埃黄色草芽(cfu)希菌葡萄球菌1均抱杆菌均均被检培养基对照培养基平均菌落数比菌落形态大小结果判定备注表1细菌计数用培养基适用性检查检验人

4、：复核人：3.1.3.1.霉菌及酵母菌计数用培养基适应性检查取白色念珠菌、黑曲霉各1ml（50100cfu）,分别注入无菌平皿中，立即倾注玫瑰红钠琼脂培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，混匀，凝固，置26c培养72小时，计数。用被检培养基和对照培养基（若无对照培养基可用其他厂家生产的培养基）按上述方法进行试验，并记录。3.1.4.结果判定若被检培养基上的菌落平均数不小于对照培养基上的菌落平均数的70%（或与其他厂家生产培养基上菌落平均数相互比值不小于70%,且菌落形态大小与对照培养基（或与其他厂家生产培养基）上的菌落一致，判该培养基的适用性检查符合规定。试验结果报告见表2表2霉菌及酵母菌计数用

5、培养基适用性检查检测日期告日期生被检培养基名产厂称家生对照培养基名菌落数：单位色念(cfu)曲霉珠菌1均被检培养基对照培养基平均菌落数比菌落形态大小结果判定备注检验人：复核人：3.2.1,菌种:大肠埃希菌CMCC(B)44102金黄色葡萄球菌CMCC(B)260033.2.2. 菌液制备接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中或营养琼脂培养基上，33c培养24小时，用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数为10100cfu的菌悬液。菌液制备后若在室温下放置，应在2小时内使用；若保存在28C,可在24小时内使用。3.2.3. 适用性检查控制菌检查用培养基的适用性检查项目包括

6、促生长能力、抑制能力及指示能力的检查。大肠埃希菌培养基的检测项目及所用菌株见表3。表3大肠埃希菌检查用培养基的促生长能力、抑制能力及指示能力检查试验培养菌株胆盐乳糖培养基促生长能力大肠埃希菌(BL)抑制能力金黄色葡萄球菌4-甲基伞形酮葡萄甘促生长能力+指示大肠埃希菌酸培养基(MUG能力曙红亚甲基蓝琼脂培养基（EMB或麦康促生长能力+指示大肠埃希菌凯琼脂培养基能力（Mac。胆盐乳糖培养基（液体培养基促生长能力检查）分别接种1ml（不大于100cfu）的大肠埃希菌于100ml胆盐乳糖被检培养基和对照培养基（或与其他厂家生产培养基）中，33c培养18小时，与对照培养基管（或与其他厂家生产培养基）比较

7、，被检培养基管大肠埃希菌应生长良好。胆盐乳糖培养基（培养基抑制能力检查）接种3ml（不少于100cfu）的金黄色葡萄球菌于100ml胆盐乳糖被检培养基和对照培养基（或与其他厂家生产培养基）中，33c培养24小时，金黄色葡萄球菌不得生长。4-甲基伞形酮葡萄甘酸培养基（液体培养基促生长能力、指示能力检查）分别接种0.2ml（不大于100cfu）的大肠埃希菌至5mlMU助检培养基和对照培养基（或与其他厂家生产培养基）的试管内，133c培养，于5小时、24小时在366nm紫外光下观察，被检培养基应与对照培养基管（或与其他厂家生产培养基）大肠埃希菌生长情况一致，并呈现荧光。观察后，分别沿被检培养基与对照

8、培养基（或与其他厂家生产培养基）的管壁加入数滴靛基质试液，液面均应呈玫瑰红色。曙红亚甲蓝琼脂培养基（固体培养基促生长能力、指示能力检查）取大肠埃希菌各0.1ml（含菌数50100cfu）分别涂布于曙红亚甲蓝琼脂被检培养基和对照培养基（或与其他厂家生产培养基）平板上，33c培养18小时，被检培养基上大肠埃希菌生长的菌落大小、形态特征、指示剂反应情况等应与对照培养基（或与其他厂家生产培养基）一致。在曙红亚甲蓝琼脂培养基上，大肠埃希菌的菌落特征：紫黑色、浅紫色、蓝紫色或粉红色，菌落中心呈深紫色或无明显暗色中心，圆形，稍凸起，边缘整齐，表面光滑，湿润，常有金属光泽。麦康凯琼脂培养基（固体培养基促生长能

9、力、指示能力检查）取大肠埃希菌各0.1ml（含菌数50100cfu）分别涂布于麦康凯琼脂被检培养基和对照培养基（或与其他厂家生产培养基）平板上，33c培养18小时，被检培养基上大肠埃希菌生长的菌落大小、形态特征、指示剂反应情况等应与对照培养基（或与其他厂家生产培养基）一致。在麦康凯琼脂培养基上，大肠埃希菌的菌落特征：鲜桃红色或微红色，菌落中心呈深桃红色，圆形，扁平，边缘整齐，表面光滑，湿润。表4大肠埃希菌检查用培养基适用性检查检测日报告日期期培养基促生长胆盐乳糖培养基特性名称能力试验菌培养温培养株度时间被检培批号生长情况养基厂家对照培生长养基厂批号情况家结果判定备注培养基抑制能胆盐乳糖培养基特

10、性名称力试验菌株培养温度时间被检培生长养基厂批号情况家对照培生长养基厂批号情况豕结果判备注名称MUG特性促生长能力、指示能力试验菌培养温株度时间被检培养基厂批号家对照培养基厂批号家5小时24小时靛基生长情况观察观察质指示被检培养基厂对照培养基厂家结果判定备注曙红亚甲蓝琼脂培养基名称促生长能特性力、指示能力试验菌培疗温few株度时间被检培养基厂批号家对照培养基厂批号生长情况菌落大菌落形促生长能特性力、指示能力培养温培养度时间批号被检培养基厂家对照培养基厂家结果判定备注麦康凯琼脂培养基名称试验菌株被检培养基厂对照培养基厂批号家菌落大菌落形生长情况小态被检培养基厂家对照培养基厂家结果判定备注检验人：

11、复核人：3.3. |控制菌（乙型副伤寒沙门菌）培养基的适用性检查3.3.1. 菌种：乙型副伤寒沙门菌CMCC(B)50094金黄色葡萄球菌CMCC(B)260033.3.2. 菌液制备接种乙型副伤寒沙门菌、金黄色葡萄球菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中或营养琼脂培养基上，33c培养24小时，用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数为10100cfu的菌悬液。菌液制备后若在室温下放置，应在2小时内使用；若保存在28C,可在24小时内使用。3.3.3. 适用性检查控制菌检查用培养基的适用性检查项目包括促生长能力、抑制能力及指示能力的检查。沙门菌培养基的检测项目及所用菌株见表5。表5沙门菌检查用培养

12、基的促生长能力、抑制能力及指示能力检查培养基特性试验菌株营养肉汤培养基促生长能力乙型副伤寒沙门菌四硫磺酸钠亮绿培养基促生长能力乙型副伤寒沙门菌抑制能力金黄色葡萄球菌胆盐硫乳琼脂培养基或沙门、志贺菌属琼脂培养基促生长能力+指示能力乙型副伤寒沙门菌三糖铁琼脂培养基指示能力乙型副伤寒沙门菌曙红亚甲基蓝琼脂培养基或麦康凯琼吗故关苴4日1口刁下有号营养肉汤培养基（液体培养基促生长能力检查）分别接种1ml（不大于100cfu）的乙型副伤寒沙门菌于200ml营养肉汤被检培养基和对照培养基（或与其他厂家生产培养基）中，33c培养18小时，与对照培养基管（或与其他厂家生产培养基）比较，被检培养基管沙门菌应生长良

13、好。四硫磺酸钠亮绿培养基（液体培养基促生长能力检查）分别接种1ml（不大于100cfu）的乙型副伤寒沙门菌于10ml四硫磺酸钠亮绿被检培养基和对照培养基（或与其他厂家生产培养基）中，33c培养18小时，与对照培养基管（或与其他厂家生产培养基）比较，被检培养基管乙型副伤寒沙门菌应生长良好。四硫磺酸钠亮绿培养基（培养基抑制能力检查）接种3ml（不少于100cfu）的金黄色葡萄球菌于100ml胆盐乳糖培养基被检培养基和对照培养基（或与其他厂家生产培养基）中，33c培养24小时，金黄色葡萄球菌不得生长。胆盐硫乳琼脂培养基（固体培养基促生长能力、指示能力检查）取乙型副伤寒沙门菌各0.1ml（含菌数501

14、00cfu）分别涂布于胆盐硫乳琼脂被检培养基和对照培养基（或与其他厂家生产培养基）平板上，33c培养18小时，被检培养基上乙型副伤寒沙门菌生长的菌落大小、形态特征、指示剂反应情况等应与对照培养基（或与其他厂家生产培养基）一致在胆盐硫乳琼脂培养基上，乙型副伤寒沙门菌的菌落特征：无色至浅橙色，半透明，菌落中心带黑色或全部黑色或无黑色。沙门、志贺琼脂培养基（固体培养基促生长能力、指示能力检查）取乙型副伤寒沙门菌各0.1ml（含菌数50100cfu）分别涂布于沙门、志贺琼脂被检培养基和对照培养基（或与其他厂家生产培养基）平板上，33c培养18小时，被检培养基上乙型副伤寒沙门菌生长的菌落大小、形态特征、

15、指示剂反应情况等应与对照培养基（或与其他厂家生产培养基）一致。在沙门、志贺琼脂培养基上，乙型副伤寒沙门菌的菌落特征：无色至淡红色，半透明或不透明，菌落中心有时带黑褐色。曙红亚甲蓝琼脂培养基（固体培养基促生长能力、指示能力检查）取乙型副伤寒沙门菌各0.1ml（含菌数50100cfu）分别涂布于曙红亚甲蓝琼脂被检培养基和对照培养基（或与其他厂家生产培养基）平板上，33c培养18小时，被检培养基上乙型副伤寒沙门菌生长的菌落大小、形态特征、指示剂反应情况等应与对照培养基（或与其他厂家生产培养基）一致。在曙红亚甲蓝琼脂培养基上，乙型副伤寒沙门的菌落特征：无色至浅橙色，透明或半透明，光滑湿润的圆形菌落。麦

16、康凯琼脂培养基（固体培养基促生长能力、指示能力检查）取乙型副伤寒沙门菌各0.1ml（含菌数50100cfu）分别涂布于麦康凯琼脂被检培养基和对照培养基（或与其他厂家生产培养基）平板上，33c培养18小时，被检培养基上乙型副伤寒沙门菌生长的菌落大小、形态特征、指示剂反应情况等应与对照培养基（或与其他厂家生产培养基）一致。在麦康凯琼脂培养基上，乙型副伤寒沙门的菌落特征：无色至浅橙色，透明或半透明，菌落中心有时为暗色三糖铁琼脂培养基（固体培养基指示能力检查）取乙型副伤寒沙门菌各0.1ml（不大于100cfu）分别涂布于三糖铁被检培养基和对照培养基（或与其他厂家生产培养基）高层斜面上进行斜面和高层穿刺

17、接种，33c培养18小时，被检培养基上乙型副伤寒沙门菌生长的菌落大小、形态特征、指示剂反应情况等应与对照培养基（或与其他厂家生产培养基）一致。在三糖铁琼脂培养基斜面见红色、底层见黄色；或斜面黄色、底层黑色。表6乙型副伤寒沙门菌检查用培养基适用性检查检测日报告日期期培养基促生长营养肉汤培养基特性名称能力试验菌培养温培养株度时间被检培生长养基厂批号情况家对照培生长养基厂批号情况家结果判定备注性关官夕口仆是四硫磺酸钠亮绿培养基名称试验菌株被检培养基厂家对照培养基厂家结果判定备注后:关苴四硫磺酸钠亮绿培养基特性促生长能力培疗温few度时间批号生长情况批号生长情况特性抑制能/口介茎名称试验菌培养温株度时间被检培生长养基厂批号情况家对照培生长养基厂批号情况家结果判定备注粒美甘上口仆卒名称胆盐硫乳琼脂培养基特性促生长能力、指示能力试验菌株培养温度培养时间批号被检培对照培养基厂批号家菌落大菌落形生长情况小态被检培养基厂家对照培养基厂家结果判定备注培养基沙门、志贺菌属琼脂培名称养基促生长能特性力、指示能力试验菌培养温培养株度时间被检培养基厂批号家对照培养基厂批号家菌落大菌落形生长情况小态被检培养基厂家对照培养基厂家结果判定备注性关官夕口仆是