何首乌 检验标准操作规程

1、何首乌检验标准操作规程文件编码：S0P-QC-ZJ-3115-02 题 目 何首乌检验标准操作规程制定部门：质量检验中心颁发部门：质量管理部分发部门：质量管理部、质量检验中心制定人： 日期: 年 月 日 审核人： 日期: 年 月 日批准人： 日期： 年 月 日生效日期: 年 月 日变更历史：1.2003年3月制定； 2.中国药典2005年版2005年7月执行修订； 3.中国药典2010年版2010年10月执行修订。 目的：建立何首乌检验标准操作规程。规范检验操作，确保何首乌质量。适用范围：适用于何首乌的检验。责 任 者：质量管理部经理、质检中心主任、质量检验员。内 容： 1品名：何首乌 2取样

2、：按药材和饮片取样标准操作规程（SOP-QC-ZJ-6065）取样 3 检验依据：何首乌内控质量标准（STP-QS-ZJ-3043） 4性状：取本品置明亮处用肉眼观察，本品呈团块状或不规则纺锤形，尺量长6-15cm，直径4-12cm。表面红棕色或红褐色，皱缩不平，有浅沟，并有横长皮孔样突起及细根痕。体重，质坚实，不易折断，断面浅黄棕色或浅红棕色，显粉性，皮部有411个类圆形异型维管束环列，形成云锦状花纹，中央木部较大，有的呈木心。鼻闻气微，口尝少许味微苦而甘涩。 5鉴别： 5.1仪器：显微镜、电热恒温水浴锅、电热恒温鼓风干燥箱、薄层喷雾气压泵、三用紫外分析仪、电子天平、高速粉碎机 5.2试剂与

3、试液： 5.2.1试剂：乙醇、苯. 5.2.2试液 水合氯醛：取水合氯醛5g，加水15ml与甘油10ml使溶解，即得。 甘油乙醇：取甘油、稀乙醇各1份，混合，即得。 磷钼酸硫酸试液：取磷钼酸2g，加水20ml使溶解，再缓缓加入硫酸30ml摇匀，即得。 5.3对照品与对照药材：何首乌对照药材 5.4操作方法 5.4.1按显微鉴别法标准操作规程（SOP-QC-ZJ-6034）检查。 本品横切面：取本品几根放入250 ml烧杯中，加水100ml，用水润30分钟软化后，取中上部，用刀片徒手切片，切成20m的薄片，选取平整的薄片置载玻片上，滴加水合氯醛试液2滴，将载玻片置酒精灯火焰上方2cm处往返摆动加

4、热至边缘起小泡，即停止加热，补充试液后再加热，直至透化完全。透化后放冷，加甘油乙醇2滴，盖上盖玻片。置显微镜下下观察，木栓层为数列细胞，充满棕色物。韧皮部较宽，散有类圆形异型维管束4-11个，为外韧型，导管稀少。根的中央形成层成环；木质部导管较少，周围有管胞及少数木纤维。薄壁细胞含草酸钙簇晶及淀粉粒。 取本品适量敲碎成小块，置高速粉碎机内破碎成粉末，过四号筛（65目）称取粉末约10g，平铺于洁净的白纸上，在明亮处用肉眼观察，粉末黄棕色。解剖针挑取少许置载玻片上，滴加水合氯醛试液2滴，将载玻片置酒精灯火焰上方2cm处往返摆动加热至边缘起小泡，即停止加热，补充试液后再加热，直至透化完全。透化后放冷

5、，加甘油乙醇2滴，盖上盖玻片。置显微镜下观察：淀粉粒单粒类圆形，直径450m，脐点人字形、星状或三叉状，大粒者隐约可见层纹；复粒由29分粒组成。草酸钙簇晶直径1018（160）m，偶见簇晶与较大的方形结晶合生。棕色细胞类圆形或椭圆形，壁稍厚，胞腔内充满淡棕色、棕色或红棕色物质，并含淀粉粒。具缘纹孔导管直径17178m。棕色块散在，形状、大小及颜色深浅不一。 5.4.2取上述本品粉末0.25g，置250ml具塞磨口锥形瓶中，加乙醇50ml，连接加热回流装置，加热回流1小时，滤过，滤液置蒸发皿中浓缩至3ml，置小试管中密塞，作为供试品溶液。另取何首乌对照药材0.25g，置具塞磨口锥形瓶中加乙醇50

6、ml，加热回流1小时，滤过，滤液置蒸发皿中浓缩至3ml，置小试管中密塞，制成对照药材溶液。按薄层色谱法标准操作规程（SOP-QC-ZJ-6039）试验，用点样器吸取上述两种溶液各2l，分别点于同一以羧甲基纤维素纳为黏合剂的硅胶H薄层板上，以苯-乙醇（2：1）为展开剂，展至约3.5cm，取出，晾干，再以苯-乙醇（4：1）为展开剂，展至约7cm，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视，供试品色谱中，在对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光条斑；再喷以磷钼酸硫酸溶液，稍加热，立即置紫外光灯（365nm）下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 6检查6.1水

7、分：按水分测定法标准操作规程（SOP-QC-ZJ-6020）烘干法测定，不得过10.0%。6.1.1仪器：鼓风电热恒温干燥箱、电子天平。6.1.2操作方法：接通电子天平电源，启动电子天平，使电子天平预热30分钟。取洁净的称量瓶，置烘箱内100105干燥2小时，取出，置干燥器中室温放置30分钟，精密称定重量；再置烘箱内100105干燥1小时，取出置干燥器中室温放置30分钟，精密称定重量，直至连续两次干燥后称重的差异在0.3mg以下为止。取供试品适量粉碎，称取最粗粉（全部通过一号筛，混有能通过3号筛不超过20%）2-5g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过5mm。精密称定，记录数据，打开瓶

8、盖在100105干燥5小时，将瓶盖盖好，移置干燥器中，冷却30分钟，精密称定，再在上述温度干燥1小时 ，冷却，称重，并记录数据，至连续两次称重的差异不超过5mg为止。根据减失的重量，计算出供试品中含水量(%)。 6.2总灰分：按灰分测定法标准操作规程（SOP-QC-ZJ-6016)总灰分测定法测定，不得过5.0%6.2.1仪器：节能电阻炉、电子天平、坩锅。6.2.2操作方法：接通电子天平电源，启动电子天平，使电子天平预热30分钟。取洁净的坩埚，置节能电阻炉内，将坩埚盖斜盖于坩埚上，加热至600炽灼约1小时，停止加热，待节能电阻炉温度冷却至约300，取出坩埚，置干燥器内，盖好坩埚盖，放冷至室温，

9、精密称定重量；再以同样条件重复操作，直至连续两次干燥后称重的差异在0.3mg以下为止。取样品置高速粉碎机内，迅速破碎成通过二号筛（24目）的粗粉，混合均匀后，取约粉末3-5g，置炽灼至恒重的坩埚中，在电子天平上精密称定（准确至0.01g），放入节能电阻炉内，缓缓炽热，至完全炭化呈黑色炭化，逐渐升高温度至500-6001小时，直至完全灰化，停止加热，待节能电阻炉温度冷却至约300，取出坩埚，置干燥器内，盖好坩埚盖，放冷至室温，精密称定重量；再以同样条件重复操作，直至连续两次干燥后称重的差异在0.3mg以下为止。并记录数据。根据残渣重量，计算供试品中总灰分的含量。 6.3二氧化硫残留量：按二氧化硫

10、残留量测定法标准操作规程（SOP-QC-ZJ-6062）测定，不得过150mg/kg。6.3.1仪器：SO2测定装置（1000ml）、电热套、10ml棕色滴定管、250ml锥形 瓶、磁力搅拌器、100ml量筒。 6.3.2试液6mol/L盐酸溶液：取盐酸54ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀。淀粉指示液：本液应临用新制。取可溶性淀粉0.5g，加水5ml搅匀后，缓慢倾入100ml沸水中，随加随搅拌继续煮沸2分钟，放冷，倾取上层清液，即得。0.01mol/L碘滴定液： 6.3.3 仪器装置：A为1000ml两颈圆底烧瓶；B为竖式回流冷凝管；C 为（带刻度)分液漏斗；D 为连接氮气流入口；E

11、 为二氧化硫气体导出口； 6.3.4操作方法：取鉴别项下过四号筛（65目）药材细粉约10g，精密称定，置两颈圆底烧瓶中， 加水300 400ml（应加水至没过氮气导气管的下端），取6mol/L盐酸溶液10ml加入带刻度分液漏斗中。锥形瓶里加入水125ml和淀粉指示液1ml作为吸收液，置于磁力搅拌器上不断搅拌。打开冷凝管，将冷凝管的上端口处连接一橡胶导气管置于锥形瓶内液面以下。连接导气管入口。开通氮气，调节适宜的气体流量（氮气流速约为0.2L/min,至蒸馏瓶内有气泡均匀排出）。打开带刻度分液漏斗的活塞，使盐酸溶液10ml流入烧瓶中。给两颈烧瓶内的溶液加热至沸，并保持微沸约3分钟后开始用碘滴定液

12、（0.01mol/L）滴定，吸收液置于磁力搅拌器上不断搅拌，至吸收液显蓝色或蓝紫色持续30秒钟不完全消褪，记录样品消耗滴定液体积A。空白试验校正：两颈圆底烧瓶中， 加水300 400ml（应加水至没过氮气导气管的下端），取6mol/L盐酸溶液10ml加入带刻度分液漏斗中。锥形瓶里加入水125ml和淀粉指示液1ml作为吸收液，置于磁力搅拌器上不断搅拌。打开冷凝管，将冷凝管的上端口处连接一橡胶导气管置于锥形瓶内液面以下。连接导气管入口。开通氮气，调节适宜的气体流量（氮气流速约为0.2L/min,至蒸馏瓶内有气泡均匀排出）。打开带刻度分液漏斗的活塞，使盐酸溶液10ml流入烧瓶中。给两颈烧瓶内的溶液加

13、热至沸，并保持微沸约3分钟后开始用碘滴定液（0.01mol/L）滴定，吸收液置于磁力搅拌器上不断搅拌，至吸收液显蓝色或蓝紫色持续30秒钟不完全消褪，记录空白消耗滴定液体积B。每1ml的碘滴定液（0.01mol/L）相当于0.6406mg的SO2。C为碘滴定液浓度的校正因子 7 含量测定：按高效液相色谱法标准操作规程（SOP-QC-ZJ-6041）测定。 7.1二苯乙烯苷 7.1.1仪器：高效液相色谱仪、电子天平、超声波清洗机。 7.1.2试剂与试液 7.1.2.1试剂：乙腈、乙醇。 7.1.2.2试液 稀乙醇：取乙醇52.9ml，加水稀释至100ml。 7.1.3对照品：2，3，5，4-四羟基

14、二苯乙烯-2-0-D-葡萄糖苷对照品 7.1.4操作方法：避光操作。 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅键合硅胶为填充剂；以乙腈-水（25：75）为流动相；检测波长为320nm。理论板数按2，3，5，4-四羟基二苯乙烯-2-0-D-葡萄糖苷计算应不低于2000。对照品溶液的制备 精密称取2，3，5，4-四羟基二苯乙烯-2-0-D-葡萄糖苷对照品约5mg，置25ml容量瓶中，加稀乙醇溶解稀释至刻度，制成每1ml含0.2mg的溶液，即得。供试品溶液的制备 取本品粉碎粉末（过四号筛）约0.2g，精密称定W，置锥形瓶中，精密加入稀乙醇25ml，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用稀乙醇

15、补足减失的重量，摇匀，上清液滤过，取续滤液，即得。测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10l，注入液相色谱仪，测定，即得。本品含2，3，5，4-四羟基二苯乙烯-2-0-D-葡萄糖苷（C20H22O9）不得少于1.1%。 7.2结合蒽醌： 7.2.1仪器：高效液相色谱仪、电子天平、超声波清洗机。 7.2.2试剂与试液 7.2.2.1试剂：甲醇 7.2.2.2试液 0.1%磷酸：取磷酸1ml，加水稀释至1000ml。 7.2.3对照品：大黄素对照品、大黄素甲醚对照品 7.2.4操作方法：色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.1%磷酸溶液（80：20）为流动相

16、；检测波长为254nm。理论板数按大黄素峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备 取大黄素对照品、大黄素甲醚对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每1ml含大黄素C对1(约80g)，大黄素甲醚C对1(约40g)的溶液，即得。供试品溶液的制备 取本品粉末（过四号筛）1g，精密称定W样，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，加热回流1小时，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液5ml作为供试品溶液A（测游离蒽醌用）。另精密量取续滤液25ml，置具塞锥形瓶中，水浴蒸干，精密加8%盐酸溶液20ml，超声处理（功率100W，频率40kHZ）5分钟，加三氯甲烷20ml，水浴中加热回流1小时，取出立即冷却，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗涤容器，洗液并入分液漏斗中，分取三氯甲烷液，酸液再用三氯甲烷振摇提取3次，每次15ml，合并三氯甲烷液，回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液B（测总蒽醌用）。测定法 分别精密吸取对照品溶