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文档简介
1、会计学1生物人教必修二基因工程及其应用生物人教必修二基因工程及其应用3、基因操作的工具、基因操作的工具(1)基因的剪刀)基因的剪刀 。分布分布: 。作用特点作用特点: ,即识别特定核苷酸序,即识别特定核苷酸序列,切割特定切点。列,切割特定切点。结果结果: (碱基互补配对)(碱基互补配对)(2)基因的针线)基因的针线 。连接的部位连接的部位: (梯子的扶手),(梯子的扶手),不是氢键(梯子的踏板)。不是氢键(梯子的踏板)。结果结果: 。限制性内切酶限制性内切酶主要在微生物中主要在微生物中特异性特异性产生黏性末端产生黏性末端DNA连接酶连接酶磷酸二酯键磷酸二酯键两个相同的黏性末端的连接两个相同的黏
2、性末端的连接3、基因操作的工具、基因操作的工具(3)基因的运载工具)基因的运载工具 。作用作用: 。具备的条件具备的条件:能在:能在 内复制并稳定地保存;内复制并稳定地保存;具有具有 ;具有某些;具有某些 基因。基因。种类种类: 、 和和 。质粒的特点质粒的特点:质粒是基因工程中最常用的:质粒是基因工程中最常用的 ;最常用的质粒是最常用的质粒是 的质粒;存在于许多细菌的质粒;存在于许多细菌及酵母菌等生物中;质粒的存在对宿主细胞及酵母菌等生物中;质粒的存在对宿主细胞 ;质粒的复制只能在质粒的复制只能在 内完成;细胞染色体外能内完成;细胞染色体外能自主复制的小型自主复制的小型 。运载体运载体将外源
3、基因送入受体细胞将外源基因送入受体细胞宿主细胞宿主细胞多个限制酶切点多个限制酶切点标记标记质粒质粒噬菌体噬菌体动植物病毒动植物病毒运载体运载体大肠杆菌大肠杆菌无影响无影响宿主细胞宿主细胞环状环状DNA分子分子例例1 1:实施基因工程第一步的一种方法是把所需的基因实施基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来,这要利用限制性内切酶。一种从供体细胞内分离出来,这要利用限制性内切酶。一种限制性内切酶能识别限制性内切酶能识别DNA分子中的分子中的GAATTC顺序,切点顺序,切点在在G和和A之间,这是应用了酶的(之间,这是应用了酶的( )A、高效性、高效性B、专一性、专一性C、多样性、多
4、样性D、催化活性受外界条件影响、催化活性受外界条件影响B例例2 2:下列黏性末端属于同一种限制酶切割而成的是(下列黏性末端属于同一种限制酶切割而成的是( )A、B、C、D、B4、基因操作的基本步骤、基因操作的基本步骤(1) (人们所需要的的基因)。(人们所需要的的基因)。提取途径有两条提取途径有两条:一条是从一条是从 ;另一种是另一种是 。人工合成方法人工合成方法有有 (利用(利用mRNA););根据根据 推测出核苷酸序列,推测出核苷酸序列,通过化学方法合成通过化学方法合成 。(2) (以质粒为运载体)。(以质粒为运载体)。步骤步骤:用一定的:用一定的 切割质粒;用切割质粒;用 切割目的基因;
5、加入切割目的基因;加入 ;质粒和目的基因结合成质粒和目的基因结合成 分子。分子。结果结果:可能有三种情况:目的基因与目的基因结合;质:可能有三种情况:目的基因与目的基因结合;质粒与质粒结合;目的基因与质粒结合。粒与质粒结合;目的基因与质粒结合。提取目的基因提取目的基因供体细胞的供体细胞的DNA中直接分离基因中直接分离基因人工合成基因人工合成基因反转录法反转录法蛋白质中氨基酸的序列蛋白质中氨基酸的序列DNA目的基因与运载体结合目的基因与运载体结合限制酶限制酶同一种限制酶同一种限制酶DNA连接酶连接酶重组重组DNA4、基因操作的基本步骤、基因操作的基本步骤(3) 。导入方法导入方法: 。导入过程导
6、入过程: 。(4)目的基因的表达与检测)目的基因的表达与检测检测检测:根据受体细胞中是否具有:根据受体细胞中是否具有 ,判断目的基因导入与否。判断目的基因导入与否。如大肠杆菌质粒中含抗青霉素基因,把某种生物放入带如大肠杆菌质粒中含抗青霉素基因,把某种生物放入带有青霉素的培养基中培养,若有抗性,说明导入成功;有青霉素的培养基中培养,若有抗性,说明导入成功;若无抗性,说明导入失败。若无抗性,说明导入失败。表达表达:受体细胞表现出:受体细胞表现出 ,如棉花抗,如棉花抗虫性状的表现。虫性状的表现。将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径运载体
7、为质粒,受体细胞为细菌运载体为质粒,受体细胞为细菌标记基因标记基因特定的性状特定的性状例例3 3:下列关于基因工程的叙述,正确的是(下列关于基因工程的叙述,正确的是( )A、重组、重组DNA技术所用的工具本科是限制酶、连接酶和技术所用的工具本科是限制酶、连接酶和运载体运载体B、所有限制酶都只能识别同一种按规定排列的核苷酸、所有限制酶都只能识别同一种按规定排列的核苷酸序列序列C、选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细胞繁殖、选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细胞繁殖快快D、只要目的基因进入了受体细胞就能成功地实现表达、只要目的基因进入了受体细胞就能成功地实现表达C例例4 4:以下说法正确的是(
8、以下说法正确的是( )A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列B、质粒是基因工程中唯一的运载体、质粒是基因工程中唯一的运载体C、运载体必须具备的条件之一是具有多个限制酶切点、运载体必须具备的条件之一是具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接,以便与外源基因连接D、基因治疗主要是对有缺陷的细胞进行修复、基因治疗主要是对有缺陷的细胞进行修复C例例5 5:上海医学遗传研究所成功培育出第一头携带白蛋上海医学遗传研究所成功培育出第一头携带白蛋白的转基因牛,他们还研究出一种可大大提高基因表达白的转基因牛,他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法,使转基因动
9、物乳汁中药物蛋白含量提高水平的新方法,使转基因动物乳汁中药物蛋白含量提高30多倍,转基因动物是指(多倍,转基因动物是指( )A、提供基因的动物、提供基因的动物B、基因组中增加了外源基因的动物、基因组中增加了外源基因的动物C、能产生白蛋白的动物、能产生白蛋白的动物D、能表达基因信息的动物、能表达基因信息的动物B例例6 6:基因工程是在基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的,分子水平上进行设计施工的,在基因操作的基本步骤中,不进行碱基互补配对的步骤在基因操作的基本步骤中,不进行碱基互补配对的步骤是(是( )A、人工合成基因、人工合成基因B、目的基因与运载体结合、目的基因与运载体结合C、将目的基
10、因导入受体细胞、将目的基因导入受体细胞D、目的基因的检测和表达、目的基因的检测和表达C3、基因操作的工具、基因操作的工具(1)基因的剪刀)基因的剪刀 。分布分布: 。作用特点作用特点: ,即识别特定核苷酸序,即识别特定核苷酸序列,切割特定切点。列,切割特定切点。结果结果: (碱基互补配对)(碱基互补配对)(2)基因的针线)基因的针线 。连接的部位连接的部位: (梯子的扶手),(梯子的扶手),不是氢键(梯子的踏板)。不是氢键(梯子的踏板)。结果结果: 。限制性内切酶限制性内切酶主要在微生物中主要在微生物中特异性特异性产生黏性末端产生黏性末端DNA连接酶连接酶磷酸二酯键磷酸二酯键两个相同的黏性末端的连接两个相同的黏性末端的连接4、基因操作的基本步骤、基因操作的基本步骤(3) 。导入方法导入方法: 。导入过程导入过程: 。(4)目的基因的表达与检测)目的基因的表达与检测检测检测:根据受体细胞中是否具有:根据受体细胞中是否具有 ,判断目的基因导入与否。判断目的基因导入与否。如大肠杆菌质粒中含抗青霉素基因,把某种生物放入带如大肠杆菌质粒中含抗青霉素基因,把某种生物放入带有青霉素的培养基中培养,若有抗性,说明导入成功;有青霉素的培养基中培养,若有抗性,说明
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