草莓植物组织培养

1、草莓组织培养的影响因素浅析草莓组织培养的影响因素浅析 草莓作为一种经济植物具有较高的应用价值草莓作为一种经济植物具有较高的应用价值,利用植物组培得到草莓的脱毒茁利用植物组培得到草莓的脱毒茁,可以大大降低可以大大降低草莓种植过程中出现的品种老化和品质下降草莓种植过程中出现的品种老化和品质下降,明明显提高经济效益。显提高经济效益。 利用组培快繁技术还可从对草莓脱毒苗进行利用组培快繁技术还可从对草莓脱毒苗进行快速繁殖快速繁殖,出苗整齐出苗整齐,可进行周年生产可进行周年生产,不受季节不受季节限制限制,从而实现新品种的工厂化育苗。从而实现新品种的工厂化育苗。1 培养程序和培养基培养程序和培养基 5-6月

2、于晴天的下午在健壮、无病的草莓刚抽出的匍匐茎上取茎月于晴天的下午在健壮、无病的草莓刚抽出的匍匐茎上取茎尖，大小为尖，大小为03-04mm，作为组织培养的外植体。，作为组织培养的外植体。 用于草莓茎尖培养诱导芽分化的基本培养基为用于草莓茎尖培养诱导芽分化的基本培养基为MS，附加，附加6-BA05mg/L，NAA02mg/L，蔗糖，蔗糖30g/L，琼脂粉，琼脂粉65gL，pH值调至值调至58-60。 在草莓茎尖的扩大繁殖阶段，采用在草莓茎尖的扩大繁殖阶段，采用MS培养基附加培养基附加6-BA05mg/L、NAA001mg/L。 扩大繁殖主要是将丛生苗分块即每扩大繁殖主要是将丛生苗分块即每5-7株切

3、成一块，转入继代培株切成一块，转入继代培养基。在转苗过程中，养基。在转苗过程中，去掉原生叶片有利于新苗分化去掉原生叶片有利于新苗分化，在扩大繁殖在扩大繁殖中随时清除愈伤组织，有利于新苗增殖和生长。中随时清除愈伤组织，有利于新苗增殖和生长。 诱导生根培养基用诱导生根培养基用12MS附加不同浓度附加不同浓度IBA。 以以IBA01mg/L的浓度处理的生根率最高，的浓度处理的生根率最高，为为100，平均根条数为，平均根条数为24条。条。 不加不加IBA及及IBA浓度超过浓度超过02mg/L，多数，多数苗都是先于苗基切口处产生愈伤组织，随后苗都是先于苗基切口处产生愈伤组织，随后在愈伤组织上分化生根，致

4、使成活率大大降在愈伤组织上分化生根，致使成活率大大降低。低。 使用无土育苗基质，要求基质具有良好的保水保使用无土育苗基质，要求基质具有良好的保水保肥能力，透气性能好，肥能力，透气性能好，PH5.56.5，物理化学性质，物理化学性质稳定，最好经过灭菌。稳定，最好经过灭菌。 一般用一般用23种基质混合使用，如草炭、蛭石按体种基质混合使用，如草炭、蛭石按体积比积比21混合。混合。 在移苗前在移苗前1d，将混合好、已润湿的基质装入穴，将混合好、已润湿的基质装入穴盘，轻压；用盘，轻压；用1000倍的普力克浇透，以杀死基质倍的普力克浇透，以杀死基质中残存的病原菌。第二天移苗时，基质含水量大约中残存的病原菌

5、。第二天移苗时，基质含水量大约为为80%，即适合移苗。，即适合移苗。2操作技术要点及培养条件操作技术要点及培养条件 (1)灭菌与接种灭菌与接种 预处理预处理 灭菌彻底，常把接种材料先进行湿润处理，使灭菌剂能顺利地渗入材料。可用多种灭菌彻底，常把接种材料先进行湿润处理，使灭菌剂能顺利地渗入材料。可用多种湿润剂，我们采用的是湿润剂，我们采用的是75的酒精，湿润的时间为半分钟至的酒精，湿润的时间为半分钟至1分钟。分钟。 灭菌处理灭菌处理 在草莓组织培养中常用灭菌剂的种类很多。在草莓组织培养中常用灭菌剂的种类很多。用过次氯酸钠用过次氯酸钠10水溶液水溶液(含有含有效氯效氯04-05)，浸泡接种材料，浸

6、泡接种材料10-15分钟；次氯酸钙分钟；次氯酸钙(漂白粉漂白粉)，用其，用其饱和上清液，浸泡接种材料饱和上清液，浸泡接种材料15-30分钟；过氧化氢分钟；过氧化氢10-12水溶液浸泡水溶液浸泡10-20分钟；新洁尔灭分钟；新洁尔灭5-10水溶液，浸泡水溶液，浸泡10-15分钟；升汞分钟；升汞01水水溶液，浸泡溶液，浸泡8-10分钟。其中前分钟。其中前4种灭菌剂对接种材料比较安全，但因灭菌种灭菌剂对接种材料比较安全，但因灭菌时间较长，常常使接种材料的外层氧化变褐，以致影响培养效果。升汞有时间较长，常常使接种材料的外层氧化变褐，以致影响培养效果。升汞有很强的杀菌能力，但浸泡时间稍长会造成接种材料中

7、毒。因此，在草莓组很强的杀菌能力，但浸泡时间稍长会造成接种材料中毒。因此，在草莓组织培养中，如把握好时间，升汞是应用较多的灭菌剂。灭菌后的接种材料，织培养中，如把握好时间，升汞是应用较多的灭菌剂。灭菌后的接种材料，要用无菌水充分清洗，通常要换水要用无菌水充分清洗，通常要换水3-5次。次。 接种接种 以培养无病毒苗为主要目的的草莓组织培养，所接种的茎尖以培养无病毒苗为主要目的的草莓组织培养，所接种的茎尖材料很小，在接种时首先要求准确熟练地剥取茎尖生长点，并材料很小，在接种时首先要求准确熟练地剥取茎尖生长点，并使用固体培养基比较适宜，接种时应注意不能将整个茎尖埋入使用固体培养基比较适宜，接种时应注

8、意不能将整个茎尖埋入培养基中。培养基须用培养基中。培养基须用1-11大气压热压灭菌大气压热压灭菌20分钟。分钟。 从材料接种到生根苗长成，这期间的培养温度一般应稳定在从材料接种到生根苗长成，这期间的培养温度一般应稳定在252。每日光照。每日光照12小时，光强发小时，光强发2000Lx为宜。培养室温度为宜。培养室温度在在18-26范围内，瓶苗可以正常生长及发根，范围内，瓶苗可以正常生长及发根，但在但在28以上以上时，绿苗普遍变黄，生根率降低，根尖发黄老化，幼苗易产生时，绿苗普遍变黄，生根率降低，根尖发黄老化，幼苗易产生玻璃化现象。玻璃化现象。 对影响草莓组培繁殖系数的碳源因素进行了探对影响草莓组

9、培繁殖系数的碳源因素进行了探讨研究。讨研究。 结果显示结果显示:蔗糖和市售白砂糖为草莓组培快繁的蔗糖和市售白砂糖为草莓组培快繁的最佳碳源。最佳碳源。 恒温培养恒温培养26天天,繁殖系数均能达到繁殖系数均能达到15以上以上,从经济从经济角度考虑角度考虑,可以用白砂糖取代蔗糖可以用白砂糖取代蔗糖;用白砂糖作碳源用白砂糖作碳源,当浓度为当浓度为3时时,草莓脱毒组培苗的繁殖系数最高草莓脱毒组培苗的繁殖系数最高,长势最好长势最好。 用不同质量的有根或无根组培苗用不同质量的有根或无根组培苗(285.6mg、201.6mg、153.4mg)在在山皮土和合成土中进行扦插试验结山皮土和合成土中进行扦插试验结果表

10、明果表明,苗木质量越大苗木质量越大,成活率越高成活率越高;苗苗木质量相同时木质量相同时,在合成土中扦插成活在合成土中扦插成活率高率高.提高移栽成活率的关键提高移栽成活率的关键 选择不定根直接生自茎基，根多且粗壮，叶片在选择不定根直接生自茎基，根多且粗壮，叶片在3片以片以上，叶大、厚、深绿的生根苗，成活率普遍较高。上，叶大、厚、深绿的生根苗，成活率普遍较高。 栽培基质要用清水冲洗干净，或用多菌灵或甲基托布津栽培基质要用清水冲洗干净，或用多菌灵或甲基托布津掺拌灭菌，用煤渣作基质时，还要用掺拌灭菌，用煤渣作基质时，还要用02冰乙酸中和使冰乙酸中和使碱性降低。碱性降低。 移栽时采取移栽时采取“深栽浅埋深栽浅埋”。深栽就是在移栽时根要栽。深栽就是在移栽时根要栽得深，浅埋的标准是使小苗的根颈与土表平齐，或略高于得深，浅埋的标准是使小苗的根颈与土表平齐，或略高于土表。土表。 注意控制光照与温度、湿度。小苗移栽后，放在温室内注意控制光照与温度、湿度。小苗移栽后，放在温室内或塑料拱棚内培