第八章仪器分析法(多图)

1、1第八章第八章 仪器分析法仪器分析法 第一节第一节 概述概述 利用利用精密仪器精密仪器，检测，检测物理性质物理性质或或物理化学物理化学性质性质进，根据所产生的测试信号定性分析和定进，根据所产生的测试信号定性分析和定量分析。量分析。 仪器分析的特点仪器分析的特点 ： 1灵敏度高灵敏度高 2选择性强选择性强 3价格昂贵，普及困难价格昂贵，普及困难 模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-228463842仪器分析法在药典中的使用情况仪器分析法在药典中的使用情况 模块四模块四 药物含

2、量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-228463843目标：目标：1掌握掌握紫外可见紫外可见分光光度法、分光光度法、气相色谱法气相色谱法和和高效液高效液相色谱相色谱法的原理、方法及在药物含量测定中的应用法的原理、方法及在药物含量测定中的应用。2了解了解荧光荧光分析法、分析法、原子吸收原子吸收分光光度法在药品含分光光度法在药品含量测定中的应用。量测定中的应用。3掌握常用仪器分析法的掌握常用仪器分析法的含量计算含量计算。4熟悉常用仪器的熟悉常用仪器的基本结构及使用方法基本结构及使用方法。 模块四模

3、块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-228463844第二节第二节 光谱分析法光谱分析法一、紫外一、紫外-可见分光光度法可见分光光度法基本原理基本原理：分子光谱，电子跃迁：分子光谱，电子跃迁 max min sh AElC摩尔吸收系数百分吸收系数1%1cmE） 模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-228463845仪器仪器:光源、单色器、吸收池、检测器及测量系统

4、。光源、单色器、吸收池、检测器及测量系统。 仪器校正仪器校正:1. 波长准确度校正波长准确度校正2吸光度准确度校正吸光度准确度校正 对溶剂的要求对溶剂的要求 :模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-228463846测定方法测定方法 :（一）对照品比较法（一）对照品比较法 分别配制供试品溶液和对照品溶液，对照品分别配制供试品溶液和对照品溶液，对照品溶液应为供试品溶液的溶液应为供试品溶液的10010，溶剂一致，溶剂一致，测定吸光度，测定吸光度 .RXRxAAcc %100%XR

5、RAcDVAW原料模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-228463847实例：贝诺酯的含量测定实例：贝诺酯的含量测定 精密称取贝诺酯精密称取贝诺酯0.07495g，用无水乙醇定量，用无水乙醇定量配成配成100ml溶液，再定量稀释溶液，再定量稀释100倍后，照分光光倍后，照分光光度法在度法在240nm波长处测定吸光度为波长处测定吸光度为0.473。另取。另取经经105干燥干燥2小时的贝诺酯对照品小时的贝诺酯对照品0.03667g，用，用无水乙醇定量配成无水乙醇定量配成100m

6、l溶液，再定量稀释溶液，再定量稀释50倍倍后，同法测定吸光度为后，同法测定吸光度为0.462，求贝诺酯的百分含，求贝诺酯的百分含量。量。 模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-228463848%100%0.03667 10.473100100100 500.4621*100%0.07495100.2%XRRsACDVAW贝诺酯模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU

7、020-228463849（二）吸收系数法（二）吸收系数法 配制供试品溶液，在规定的波长处测定其吸光度配制供试品溶液，在规定的波长处测定其吸光度，按吸收系数计算含量。注意仪器的校正和检定。，按吸收系数计算含量。注意仪器的校正和检定。 1%11%100%cmADVELW原料RXRxAAcc 模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-2284638410实例：卡比马唑的含量测定实例：卡比马唑的含量测定 精密称取本品精密称取本品0.05012g，配成，配成500ml溶液，溶液，再定量稀

8、释再定量稀释10倍后，照分光光度法在倍后，照分光光度法在292nm波长波长处测定吸光度为处测定吸光度为0.555。按。按C7H10N2O2S的百分的百分吸收系数为吸收系数为557，求卡比马唑的百分含量。，求卡比马唑的百分含量。 模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-22846384111%11%100%11000.55550010010100%99.4%557 0.05012cmADVELW卡比马唑模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析

9、法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-2284638412制剂的含量计算制剂的含量计算 %100%XRRACDVAW平均片重标示量标示量对照品比较法对照品比较法 %100%XRRACDAc标示标示量片剂：注射剂：模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-2284638413实例：硫酸阿托品注射液（规格：实例：硫酸阿托品注射液（规格：5mg/1ml5mg/1ml）含量测定）含量测定 精密量取本品精密量取本品0.5ml（约相当于硫酸阿托品（约

10、相当于硫酸阿托品2.5mg），置），置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，另取硫酸阿托品对照品另取硫酸阿托品对照品25.47mg，精密称定，置，精密称定，置25ml量瓶量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。精密量取对照品溶液与供试品溶液各精密量取对照品溶液与供试品溶液各2ml，分别置预先精密，分别置预先精密加入三氯甲烷加入三氯甲烷10ml的分液漏斗中，各加溴甲酚绿溶液的分

11、液漏斗中，各加溴甲酚绿溶液2.0ml，振摇提取，振摇提取2分钟后，静置使分层，分取澄清的三氯甲烷液分钟后，静置使分层，分取澄清的三氯甲烷液，照紫外，照紫外-可见分光光度法，在可见分光光度法，在420nm的波长处分别测定吸的波长处分别测定吸光度，对照与供试品的吸光度为光度，对照与供试品的吸光度为0.450和和0.432，依法计算（，依法计算（分子量分子量694.8）的标示百分含量。）的标示百分含量。 模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-2284638414100%25.475

12、0.43250251000.4500.5100597.8%XRRACDA硫酸阿托品标示量标示量模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-2284638415制剂的含量计算制剂的含量计算 吸收系数法吸收系数法 片剂：注射剂：1%11%100%cmADVELW平均片重标示量标示量1%11%100%cmADELc标示标示量模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-2284

13、638416实例：盐酸氯丙嗪片的含量测定实例：盐酸氯丙嗪片的含量测定 取标示量为取标示量为25mg的盐酸氯丙嗪片的盐酸氯丙嗪片20片，除片，除去糖衣后精密称定，总重量为去糖衣后精密称定，总重量为2.4215g，研细，研细，精密称量片粉精密称量片粉0.2290g，置，置500ml量瓶中，加盐酸量瓶中，加盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置，置100ml量瓶中，加同一溶剂稀释至刻度，量瓶中，加同一溶剂稀释至刻度，摇匀，在摇匀，在254nm波长处测得吸光度为波长处测得吸光度为0.440，按，按为为915计算，求其含量占标示量的百分率？计算

14、，求其含量占标示量的百分率？模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-22846384171%11%100%1% 0.44020 5002.42159150.229020100%0.025101.7%cmADVELW平均片重盐酸氯丙嗪标示量标示量模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-2284638418注意事项注意事项 取吸收池时，手指拿毛玻璃面的两侧。取吸收池

15、时，手指拿毛玻璃面的两侧。含量测定至少配制含量测定至少配制2份，平均值的偏差应在份，平均值的偏差应在0.5%以内以内 模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-2284638419二、二、 原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法基本原理基本原理 由待测元素灯发出的特征谱线通过供试品蒸由待测元素灯发出的特征谱线通过供试品蒸气时，被蒸气中待测元素的基态原子所吸收气时，被蒸气中待测元素的基态原子所吸收 。 通过测定辐射光强度减弱的程度可求出供试通过测定辐射光强度减弱的程度可求出供试品中待

16、测元素的含量。品中待测元素的含量。 模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-2284638420原子吸收分光光度计原子吸收分光光度计光源：心阴极灯，锐线光源光源：心阴极灯，锐线光源原子化系统：火焰原子化和无火焰原子化。原子化系统：火焰原子化和无火焰原子化。 分光系统：衍射光栅分光系统：衍射光栅 检测系统检测系统 ：检测器、放大器、对数转换器和显示：检测器、放大器、对数转换器和显示装置装置 模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教

17、研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-2284638421测定方法测定方法 1标准曲线法模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-22846384222标准加入法标准加入法模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-2284638423三、荧光分析法三、荧光分析法基本原理：基本原理： 某些物质（分子结构常常具有长共轭结构、刚某些物质（分子

18、结构常常具有长共轭结构、刚性和共平面性）受紫外光或可见光照射激发后，性和共平面性）受紫外光或可见光照射激发后，它会在极短的时间内发射出较照射光波长为长的它会在极短的时间内发射出较照射光波长为长的光，这种光称为荧光。光，这种光称为荧光。 光致发光光致发光 激发光谱和发射光谱激发光谱和发射光谱 模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-2284638424荧光分析仪荧光分析仪 1光源：现在大多数仪器采用高压氙灯光源：现在大多数仪器采用高压氙灯 2单色器：由光栅和狭缝组成。单色器：由光

19、栅和狭缝组成。 3样品池：常用石英池，质地应较纯样品池：常用石英池，质地应较纯 模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-2284638425测定方法测定方法选定激发光波长和发射光波长，并配制对照品选定激发光波长和发射光波长，并配制对照品溶液和供试品溶液，测定跑光强度。溶液和供试品溶液，测定跑光强度。 XXBXrrrbRRccRR模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 0

20、20-2284638426第三节第三节 色谱分析法色谱分析法 色谱的种类：按流动相所处的物理状态分类色谱的种类：按流动相所处的物理状态分类，可以将色谱法分为气相色谱（，可以将色谱法分为气相色谱（GC）、液相色谱）、液相色谱（LC）和超临界流体色谱（）和超临界流体色谱（SFC）。）。 气相色谱又可以分为气气相色谱又可以分为气-固、气固、气-液色谱，液液色谱，液相色谱可分为液相色谱可分为液-固和液固和液-液色谱。液色谱。 气相色谱法是一种很重要的，以气体为流动气相色谱法是一种很重要的，以气体为流动相，以液体或固体为固定相的色谱方法相，以液体或固体为固定相的色谱方法 分离效能、灵敏度、选择性、分析速

21、度分离效能、灵敏度、选择性、分析速度模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法硅胶柱上加上中药提取物硅胶柱上加上中药提取物硅胶柱上加上中药提取物模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法 色谱法原理：一、吸附色谱法原理：一、吸附混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同。模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章

22、 仪器分析法仪器分析法 色谱法原理一、吸附色谱法原理一、吸附当流动相流过时，各组分以不同的速度随流动相流出色谱柱。模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法 色谱法原理：二、分配色谱法原理：二、分配混合成分混合成分在固定相在固定相与流动相与流动相之间分配之间分配模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法 色谱法原理：三、分子筛色谱法原理：三、分子筛因混合物中因混合物中各种分子体各种分子体积大小不一积大小不一样而分离样而分离模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法色谱法分类色谱法分

23、类模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法从粗颗粒到细颗粒从粗颗粒到细颗粒色谱所用色谱所用硅胶颗粒硅胶颗粒变细之后变细之后分离效能分离效能大为提高大为提高，同时阻，同时阻力也增大力也增大。模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法各种加压泵各种加压泵为提高分离效果，出现了为提高分离效果，出现了从中压到高压的各种加压从中压到高压的各种加压泵泵模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法从玻璃柱到不锈钢柱从玻璃柱到不锈钢柱模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器

24、分析法仪器分析法二、高效液相色谱法high performance liquid chromatographHPLC模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法HPLCHPLC基本组成示意图基本组成示意图模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法色谱柱色谱柱模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法输液泵输液泵模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法检测器检测器对没

25、有紫外吸收的对没有紫外吸收的物质的检测，以蒸物质的检测，以蒸发光散射检测器用发光散射检测器用得较多得较多检测器种类很多，现在最常用的是紫外检测器模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法进样器进样器 手动进样器Rheodyne 7725i几乎成了所有液几乎成了所有液相色谱仪的手动相色谱仪的手动进样器进样器模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法进样器进样器 手动进样器六通阀模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法进样器进样器自动进样器可由自动进样器可由软件完全控制软件完全控制模

26、块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法色谱工作站色谱工作站色谱工作站色谱工作站就是就是HPLC的软件控制的软件控制系统系统模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法色谱工作站色谱工作站工作站的两工作站的两大功能大功能1.控制仪器控制仪器2.处理数据处理数据模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法液相色谱仪器常见种类 high performance liquid chromatograph模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法液相色谱仪

27、（2）模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法液相色谱仪（3）模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法液相色谱仪（4）模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法液相色谱仪（5）模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法液相色谱仪（6）模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法高效液相色谱法在药典中的使用高效液相色谱法在药典中的使用模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器

28、分析法高效液相图谱高效液相图谱各成分各成分依次流依次流出色谱出色谱柱，从柱，从进样到进样到出峰的出峰的时间称时间称为保留为保留时间时间模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法三、定性方法三、定性方法定性定性: 确定确定成分归属，成分归属，依据与对照依据与对照品相比较时品相比较时，相同的保，相同的保留时间留时间模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法定量方法定量方法外标法外标法内标法内标法模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法定量方法定量方法外标法外标法对照品浓度对照品峰面积

29、样品峰面积样品浓度模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法内标法内标法供试液（样品供试液（样品+内标）内标）内标物内标物对照液（对照对照液（对照+内标）内标）是样品中不存在的物质是样品中不存在的物质与被测组分峰靠近与被测组分峰靠近能与各组分完全分离能与各组分完全分离与被测组分的量接近与被测组分的量接近模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法对对样样内内对对内内样样样样样样内内内内对对对对内内内内相对相对WWAAAAWAWAWAWAf 校

30、正因子：校正因子：模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法1KAA 内内对对2KAA 内内样样%100%样品取样量12WWKK对样品模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法例例内标液内标液 取正三十二烷加正己烷溶解并稀取正三十二烷加正己烷溶解并稀释成释成1.0mg/ml溶液溶液对照液对照液 精密称取精密称取VitE对照品对照品0.2011g置棕置棕色具塞锥形瓶中，精密加入内标液色具塞锥形瓶中，精密加入内标液10ml，密塞，振摇使溶解，取密塞，振摇使溶解，取 13ul注入注入GC仪，仪，测定，计算测定，计算供试液供试

31、液 精密称取供试品精密称取供试品0.1998g置棕置棕 色具塞锥形瓶中，精密加入内标液色具塞锥形瓶中，精密加入内标液 10ml，密塞，振摇使溶解，取密塞，振摇使溶解，取13ul 注注入入GC仪，测定，计算仪，测定，计算模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法对照液对照液 内内对对AA供试液供试液805741296513 内内样样AA模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法HPLCHPLC操作注意事项操作注意事项流动相严格过滤（流动相严格过滤（0.45m微孔滤膜）微孔滤膜），不要相信任何商，不要相信任何商家宣传的流动

32、相已过滤的保证。家宣传的流动相已过滤的保证。样品严格过滤。样品严格过滤。流动相需经脱气处理。流动相需经脱气处理。模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-2284638467基本原理基本原理 ： 色谱分离体系包括两个相，其中的一相固定色谱分离体系包括两个相，其中的一相固定不动，称为固定相；另一相是携带试样混合物流不动，称为固定相；另一相是携带试样混合物流过此固定相的气体或液体，称为流动相。当两相过此固定相的气体或液体，称为流动相。当两相作相对运动时，反复多次地利用混合物中所有组作

33、相对运动时，反复多次地利用混合物中所有组分性质的差异使彼此得到分离。两相及两相的相分性质的差异使彼此得到分离。两相及两相的相对运动构成了色谱法的基础。对运动构成了色谱法的基础。 模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-2284638468气相色谱系统气相色谱系统 ：主要由分离系统、检测系：主要由分离系统、检测系统和温度控制系统统和温度控制系统 模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN

34、 JISHU 020-2284638469系统适用性试验系统适用性试验 模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-22846384701.1.基线和色谱峰基线和色谱峰 无试样通过检测器时，检测到的信号即为基线。2.2.保留值保留值 （1）时间表示的保留值）时间表示的保留值 保留时间（保留时间（tR）：）：组分从进样到柱后出现浓度极大值时所需的时间 死时间（死时间（tM）：）：不与固定相作用的气体（如空气）的保留时间。 调整保留时间（调整保留时间（tR ）：）：tR= tRtM 模

35、块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-2284638471用来衡量色谱峰宽度的参数， 有三种表示方法：有三种表示方法：（1）标准偏差）标准偏差( )： 即0.607倍峰高处色谱峰宽度的一半。（2）半峰宽）半峰宽(Y1/2)： 色谱峰高一半处的宽度 Y1/2 =2.354 （3）峰底宽）峰底宽(Wb)： Wb=4 模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-22846

36、38472塔板理论-柱分离效能指标色谱柱长：色谱柱长：L，虚拟的塔板间距离：虚拟的塔板间距离：H，色谱柱的理论塔板数：色谱柱的理论塔板数：n，则三者的关系为：则三者的关系为： n = L / H理论塔板数与色谱参数之间的关系为：理论塔板数与色谱参数之间的关系为：222116545)()(./bRRWtYtn模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-2284638473分离度的表达式：R =0.8：两峰的分离程度可达89%；R =1.0：分离程度98%；R =1.5：达99.7%（

37、相邻两峰完全分离的标准）。(2)(1)(2)(1)2()RRbbttRWW模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-2284638474测定方法测定方法内标法加校正因子法（内标法加校正因子法（R：对照品：对照品S：内标：内标X：待测样品）：待测样品） 校正因子：校正因子： sSRRA cfAc%100%XssXAfcAc原料含量计算： 模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISH

38、U 020-2284638475 按按中国药典中国药典2010版（二部）的规定测定维生素版（二部）的规定测定维生素E，做系统适用性实验时的数据如上表。做系统适用性实验时的数据如上表。 取维生素取维生素E对照品对照品20.80mg(98.0%)，精密加入浓度为，精密加入浓度为1.044mg/ml的内标物（正三十二烷）溶液的内标物（正三十二烷）溶液10.00ml溶解，取溶解，取1l 注入气相色谱仪，对照品峰面积为注入气相色谱仪，对照品峰面积为481736，内标物峰面，内标物峰面积为积为238787，求维生素，求维生素E的理论塔板数、维生素的理论塔板数、维生素E与内标物的与内标物的分离度和校正因子各

39、为多少？再精密称取维生素分离度和校正因子各为多少？再精密称取维生素E供试品供试品22.68mg，内标物，内标物28.00mg，用气相色谱法测得供试品峰面，用气相色谱法测得供试品峰面积为积为529887，内标物峰面积为，内标物峰面积为644911，计算供试品中维生素，计算供试品中维生素E的含量。的含量。 w物质物质Rt/minW(1/2h)/minW/min对照品对照品8.880.250.6内标物内标物5.740.61.2实例实例 模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-2284

40、63847622/28.885.54 ()5.54*69900.25Rhtnw21122 8.885.742()3.490.6 1.2RRttRww2387871.0440.967848176320.80*98.0%10.0sSRRAcfAc模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-2284638477%100%*100%5298870.9678*28.00644911*100%98.2%22.68XXssssXxAAfcfmAAEcm维生素模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-2284638478高效液相色谱法高效液相色谱法液相：固定相为液相液相：固定相为液相高效、高压、高速高效、高压、高速高柱效、高选择性、分析速度快、灵敏度高、重高柱效、高选择性、分析速度快、灵敏度高、重复性好、应用范围广复性好、应用范围广 模块四模块四 药物含量测定技术药物含量测定技术第八章第八章 仪器分析法仪器分析法药物分析教研室药物分析教研室 YAOWU JIANYAN JISHU 020-2284638479高效液相色谱仪