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文档简介

1、生物化学检验生物化学检验第九章糖代谢紊乱检验刘观昌菏泽医学专科学校刘观昌菏泽医学专科学校第一节概述本章学习要求1 1掌掌握糖尿病的概念、诊断标准及分型方法;血糖及握糖尿病的概念、诊断标准及分型方法;血糖及OGTTOGTT概念、实验原理、操作方法和临床应用;概念、实验原理、操作方法和临床应用;GHbGHb和和GSHGSH测定方法学特点、测定原理和临床应用测定方法学特点、测定原理和临床应用熟悉血糖的来源、去路及调节机制;熟悉胰岛素测定及胰岛素熟悉血糖的来源、去路及调节机制;熟悉胰岛素测定及胰岛素释放试验的临床应用;释放试验的临床应用;C-C-肽测定及肽测定及C-C-肽释放试验的临床应用;肽释放试验

2、的临床应用;其他体液葡萄糖测定的方法学特点和临床应用其他体液葡萄糖测定的方法学特点和临床应用 具有糖类物质检测的能力:能正确采集血液、尿液及具有糖类物质检测的能力:能正确采集血液、尿液及其他体液标本,熟悉各种标本处理要求;具有独立的其他体液标本,熟悉各种标本处理要求;具有独立的糖尿病检测操作能力糖尿病检测操作能力重点讨论糖尿病引起的高血糖症及其相关的实重点讨论糖尿病引起的高血糖症及其相关的实验室检验指标常用的检测指标有:验室检验指标常用的检测指标有:血糖浓度测定;口服葡萄糖耐量试验;血糖浓度测定;口服葡萄糖耐量试验;糖化血红蛋白测定;糖化血清蛋白测定;糖化血红蛋白测定;糖化血清蛋白测定;胰岛素

3、测定及释放试验;胰岛素测定及释放试验;C-C-肽测定及肽测定及C-C-肽释放试验;酮体、乳酸测定肽释放试验;酮体、乳酸测定这些检验指标在糖尿病的病因分类、临床诊断、这些检验指标在糖尿病的病因分类、临床诊断、疗效评估、病情观察及并发症的鉴别诊断方面疗效评估、病情观察及并发症的鉴别诊断方面具有重要的价值具有重要的价值本章主要内容本章主要内容一、血糖及其调节提供能量提供能量葡萄糖葡萄糖作为组织细胞的结构材料,作为组织细胞的结构材料,参与重要的生理活动参与重要的生理活动- 血糖血糖:血液中的:血液中的葡萄糖葡萄糖称为血糖(称为血糖(Blood glucose ,BGBlood glucose ,BG)

4、 正常人空腹血糖正常人空腹血糖3.93.96.1mmol/L6.1mmol/L转变为其他物质转变为其他物质血糖的主要功能血糖的主要功能血糖血糖肝糖原分解(空腹时直接来源)肝糖原分解(空腹时直接来源)食物糖消化吸收食物糖消化吸收(主要来源主要来源)非糖物质糖异生(饥饿时重要来源非糖物质糖异生(饥饿时重要来源)合成糖原合成糖原氧化分解供能氧化分解供能转变成其他糖及糖衍生物转变成其他糖及糖衍生物(一)血糖的来源与去路其他单糖转变其他单糖转变合成非糖物质合成非糖物质9.0mmol/Lmmol/L尿液排出(糖尿)尿液排出(糖尿) 来源来源去路去路葡萄糖在体内的主要代谢过程食物:消化肝糖原、肌糖原非糖食物

5、:蛋白质、脂肪米、面、水果等葡萄糖氧化分解供能无氧酵解供能肝糖原、肌糖原储存分解转变正常应急剩余剩余脂肪储存胰岛素促进细胞对葡胰岛素促进细胞对葡萄糖的摄取和糖原合萄糖的摄取和糖原合成、抑制糖异生成、抑制糖异生胰髙糖血素胰髙糖血素促进糖原分解促进糖原分解和糖异生作用和糖异生作用(二)血糖浓度的调节糖原合成与分解糖原合成与分解糖异生作用糖异生作用下丘脑下丘脑自主神经自主神经胰岛素胰岛素胰岛素样生长因子胰岛素样生长因子胰高血糖素胰高血糖素肾上腺素肾上腺素糖皮质激素糖皮质激素生长激素生长激素神经系统神经系统激素调节激素调节肝的调节肝的调节双向调节双向调节控制激素分泌控制激素分泌高血糖症:空腹血浆血糖(

6、高血糖症:空腹血浆血糖(FPGFPG)7.7.0 0mmol/Lmmol/L生理性:包括生理性:包括饮食性饮食性(高糖饮食)(高糖饮食)情感性情感性(情绪紧张,肾上腺(情绪紧张,肾上腺素分泌增加)素分泌增加)病理性:见于病理性:见于糖尿病糖尿病;内分泌腺(甲状;内分泌腺(甲状腺、腺、肾上腺肾上腺皮质或髓质、胰岛细胞)皮质或髓质、胰岛细胞)功能亢进;颅内压升高刺激血糖中枢;功能亢进;颅内压升高刺激血糖中枢;呕吐、腹泻、高热等引起的脱水呕吐、腹泻、高热等引起的脱水n尿糖:尿糖:若血糖浓度高于肾糖阈值若血糖浓度高于肾糖阈值8.88mmol/L8.88mmol/L,即超过了肾小,即超过了肾小球滤过率,

7、出现尿糖球滤过率,出现尿糖n 高血糖症的分类及原因高血糖症的分类及原因二、高血糖症与糖尿病(一)糖尿病分型及特点临床特点临床特点1.1.主要见于主要见于儿童、青儿童、青少年、少年、发病率低,占发病率低,占5 510%10%,起病急。,起病急。2 2. .胰岛素胰岛素绝对缺乏绝对缺乏,对胰岛素治疗敏感;对胰岛素治疗敏感;3 3. .自身抗体阳性;自身抗体阳性;4 4. .易发生酮症酸中毒易发生酮症酸中毒输入文字输入文字输入文字输入文字1 1. .妊娠期间首次妊娠期间首次发现的发现的DMDM;2 2. .部分患者分娩部分患者分娩后可恢复正常后可恢复正常妊娠期糖尿病妊娠期糖尿病1 1型糖尿病型糖尿病

8、2 2型糖尿病型糖尿病(90%)(90%)特殊类型糖尿病特殊类型糖尿病临床特点临床特点1 1. .多有病因可寻如多有病因可寻如胰岛素受体基因胰岛素受体基因异常,胰岛异常,胰岛B B细胞基细胞基因缺陷等因缺陷等1 1. .多见于多见于中、老年中、老年人,起病缓慢人,起病缓慢2 2. .胰岛素胰岛素相对不足相对不足或胰岛素抵抗或胰岛素抵抗 3 3. .酮症酸中毒少于酮症酸中毒少于1 1型型19991999年年ADAADA与与WHOWHO提出的分型提出的分型临床特点临床特点临床特点临床特点(二)糖尿病的诊断标准糖尿病症状糖尿病症状(多饮,多食,多尿(多饮,多食,多尿,不明原因体重,不明原因体重下降)

9、下降)随机血糖随机血糖11.111.1空腹血糖空腹血糖7.07.0持续持续8 8小时无任小时无任何热量摄入何热量摄入OGTT 2hPGOGTT 2hPG11.111.175g75g葡萄糖负荷试葡萄糖负荷试验验标准二标准二标准三标准三标准一标准一19991999年年WHOWHO提出的提出的DMDM诊断标准诊断标准3种标准都可单独诊断糖尿病,但需要另一天采取静脉血重复测试,两种标准都可单独诊断糖尿病,但需要另一天采取静脉血重复测试,两次实验有相关性才能确证。次实验有相关性才能确证。糖尿病的诊断标准:糖尿病的诊断标准:,不主张作第三次,不主张作第三次OGTTOGTT试验。试验。糖尿病的代谢变化糖尿病

10、的代谢变化高血糖:一方面组织细胞对葡萄糖摄取利用障碍,葡萄糖消耗高血糖:一方面组织细胞对葡萄糖摄取利用障碍,葡萄糖消耗减少,另一方面肝糖原分解增多,糖异生作用加强,导致血糖减少,另一方面肝糖原分解增多,糖异生作用加强,导致血糖增加。增加。糖尿:血糖超过肾糖阈时可出现糖尿,严重的出现酮体,由于糖尿:血糖超过肾糖阈时可出现糖尿,严重的出现酮体,由于尿液中葡萄糖和酮体成分增多,可引起渗透性利尿,故引起多尿液中葡萄糖和酮体成分增多,可引起渗透性利尿,故引起多尿及水盐丢失。尿及水盐丢失。高脂血症:一方面肝脏合成高脂血症:一方面肝脏合成TG增多,以增多,以VLDL形式向血液中释形式向血液中释放增多,但血中

11、放增多,但血中LPL活性降低,活性降低,VLDL分解减少,造成高分解减少,造成高VLDL血症。另一方面,糖尿病患者肾上腺素,生长激素,去甲肾上血症。另一方面,糖尿病患者肾上腺素,生长激素,去甲肾上腺素增多,使腺素增多,使TC合成的限速酶合成的限速酶HMG-COA活性增强活性增强,胆固醇增多,胆固醇增多,出现高出现高TC,TG,VLDL血症。血症。蛋白质代谢异常:由于胰岛素绝对或相对不足,蛋白质合成减蛋白质代谢异常:由于胰岛素绝对或相对不足,蛋白质合成减少,分解加速,导致机体出现负氮平衡,体重减轻,生长发育少,分解加速,导致机体出现负氮平衡,体重减轻,生长发育迟缓等。迟缓等。糖尿病的代谢变化糖尿

12、病的代谢变化 酮血症:由于在感染,外伤,手术及拮抗胰岛素的激素分酮血症:由于在感染,外伤,手术及拮抗胰岛素的激素分泌增加的情况下,脂肪动员增加,酮体生成增多,当酮体泌增加的情况下,脂肪动员增加,酮体生成增多,当酮体超过肝外组织氧化时,酮体就在血液中积聚,超过肝外组织氧化时,酮体就在血液中积聚,当含量当含量2.0mmol/Lmmol/L时称为酮血症。时称为酮血症。酮体中除了丙酮以外为中性,酮体中除了丙酮以外为中性,乙酰乙酸和乙酰乙酸和- -羟丁酸均为酸性物质,因此羟丁酸均为酸性物质,因此,酮体产生过多,酮体产生过多会引起酮症酸中毒,是糖尿病的严重急性并发症。会引起酮症酸中毒,是糖尿病的严重急性并

13、发症。 乳酸性酸中毒:乳酸性酸中毒:正常人乳酸与丙酮酸比值为正常人乳酸与丙酮酸比值为10:110:1,糖尿病糖尿病患者由于胰岛素缺乏,糖酵解作用加强。丙酮酸大量还原患者由于胰岛素缺乏,糖酵解作用加强。丙酮酸大量还原成乳酸,导致高乳酸血症,甚至引起高渗透性和乳酸中毒成乳酸,导致高乳酸血症,甚至引起高渗透性和乳酸中毒性休克。性休克。三、低血糖症 低糖血症低糖血症:由于某些病理或生理原因使血糖浓度由于某些病理或生理原因使血糖浓度低于参考值下限(低于参考值下限(2.78mmol/Lmmol/L)而出现交感神经兴)而出现交感神经兴奋性增高和脑功能障碍,从而引起饥饿感,心悸,奋性增高和脑功能障碍,从而引起

14、饥饿感,心悸,肢冷出汗等症状,严重时出现意识丧失,昏迷甚至肢冷出汗等症状,严重时出现意识丧失,昏迷甚至死亡。死亡。诊断标准:诊断标准:Whipple三联征确诊三联征确诊1.低血糖症状低血糖症状2.发作时空腹血糖浓度低于发作时空腹血糖浓度低于2.78mmol/Lmmol/L3.3.补充葡萄糖后症状迅速缓解补充葡萄糖后症状迅速缓解空腹低血糖空腹低血糖原因:原因:1.组织细胞对葡萄糖利用过多组织细胞对葡萄糖利用过多2.糖摄入不足或吸收不良糖摄入不足或吸收不良3.肝功能障碍,失去对血糖有效调节肝功能障碍,失去对血糖有效调节4.降糖药物过量降糖药物过量5.胰岛素分泌过多胰岛素分泌过多临床上反复发生的空腹

15、性低血糖,提示有器临床上反复发生的空腹性低血糖,提示有器质性疾病,胰岛素瘤是最多见的病因。质性疾病,胰岛素瘤是最多见的病因。 餐后(反应性)低血糖餐后(反应性)低血糖 主要是胰岛素反应性释放过多,多见于功能性疾主要是胰岛素反应性释放过多,多见于功能性疾病病 1.功能性(反应性)低血糖:发生于餐后或口服功能性(反应性)低血糖:发生于餐后或口服葡萄糖耐量试验葡萄糖耐量试验2-5个小时的暂时性低血糖。个小时的暂时性低血糖。 2.2型糖尿病或糖耐量受损伴有的低血糖:空腹型糖尿病或糖耐量受损伴有的低血糖:空腹血糖正常,血糖正常,OGTT2h糖耐量受损,糖耐量受损,3-5小时将至小时将至正常。正常。 营养

16、性低血糖:多发生于餐后营养性低血糖:多发生于餐后1-3h。患者由于上。患者由于上消化道手术或迷走神经切除术,由于胃迅速排空消化道手术或迷走神经切除术,由于胃迅速排空使葡萄糖吸收增快,血糖浓度明显增高并刺激胰使葡萄糖吸收增快,血糖浓度明显增高并刺激胰岛素一过性分泌过量,导致低血糖。岛素一过性分泌过量,导致低血糖。第二节糖代谢检验一、血清(浆)葡萄糖的测定 标本采集:标本采集:(1 1)空腹静脉血:至少空腹静脉血:至少8 8小时内无热量摄入小时内无热量摄入(2 2)随机血:不论是否有食物摄入,全天任何时候均可)随机血:不论是否有食物摄入,全天任何时候均可(3 3)全血:便携式血糖计床旁检查时用)全

17、血:便携式血糖计床旁检查时用 标本处理:标本处理:采血后采血后1 1小时内小时内分离出血清或血浆,后者置分离出血清或血浆,后者置2 28 8冰箱保冰箱保存存3 3天以上天以上注意抗凝剂的正确使用注意抗凝剂的正确使用(一)标本的采集及处理(一)标本的采集及处理(二)血糖测定方法1 1. .无机化学法:无机化学法:Folin-WuFolin-Wu法,基于葡萄糖醛基的还原性法,基于葡萄糖醛基的还原性2 2. .有机化学法:邻甲苯胺法、联苯胺法、氨基联苯法等有机化学法:邻甲苯胺法、联苯胺法、氨基联苯法等CuCu2+2+OHOH- -CuCu+ + GluGlu磷钼酸磷钼酸显色显色邻甲苯胺邻甲苯胺 +

18、Glu + Glu 葡萄糖基胺葡萄糖基胺 希夫氏碱希夫氏碱 蓝绿色化合物蓝绿色化合物缩合缩合脱水脱水分子重排分子重排特异性差特异性差干扰因素多干扰因素多3 3. .酶法酶法(1 1)己糖激酶法()己糖激酶法(HKHK)(2 2)葡萄糖氧化酶法()葡萄糖氧化酶法(GOD-PODGOD-POD偶联法)偶联法)(3 3)葡萄糖脱氢酶法()葡萄糖脱氢酶法(GDHGDH) 葡萄糖葡萄糖ATPATP葡萄糖葡萄糖- - -磷酸磷酸ADPADP 葡萄糖葡萄糖-6-6-磷酸磷酸NADPNADP G-6-PD G-6-PD - -磷酸葡萄糖内酯磷酸葡萄糖内酯+NADPH+NADPH NADPHNADPH在在340

19、nm340nm有吸收峰,其吸光度增加与标本中的葡萄糖浓度成正比有吸收峰,其吸光度增加与标本中的葡萄糖浓度成正比n原理:原理:n评价评价:本法本法特异性高,灵敏度高,干扰因素少特异性高,灵敏度高,干扰因素少,不受轻度溶血,不受轻度溶血 ,脂,脂血,黄疸,血,黄疸,VC,等干扰。适用于自动化分析,为葡萄糖测定的等干扰。适用于自动化分析,为葡萄糖测定的参考方法参考方法,但是试剂较贵,但是试剂较贵1.己糖激酶法(法)1.1.操作简单,操作简单,特异性较高特异性较高,是血糖测定的,是血糖测定的首选首选方法方法2.2.GOD-PODGOD-POD法线性范围可达成法线性范围可达成19mmol/L 19mmo

20、l/L ,回收率,回收率94%94%105%,105%,变异总数为变异总数为0.7%0.7%2.0%2.0%,准确度和精密度都能达到临床要求,操作简便,可用于自,准确度和精密度都能达到临床要求,操作简便,可用于自动生化仪。是我国临检中心目前新推荐的动生化仪。是我国临检中心目前新推荐的常规方法常规方法2、葡萄糖氧化酶法(GOD)n原理原理葡萄糖葡萄糖O O2 2+H+H2 2O O GODGOD 葡萄糖酸内酯葡萄糖酸内酯2 2O O2 22 22 2O O2 2 + 4-+ 4-氨基安替比林氨基安替比林+ +酚酚 PODPOD 红色醌类化合物红色醌类化合物 + + 2 2O +OO +O2 2红

21、色醌类化合物在红色醌类化合物在505nm505nm有吸收峰,其吸光度增加在一定范围内与标有吸收峰,其吸光度增加在一定范围内与标本中的葡萄糖浓度成正比本中的葡萄糖浓度成正比n评价评价不足(1 1)GODGOD仅对仅对-葡萄糖高度特异性,对葡萄糖高度特异性,对型型- -葡萄糖作用弱。葡萄糖变葡萄糖作用弱。葡萄糖变旋酶,可促使旋酶,可促使型到型到型的变旋反应,若没有,可延长孵育时间可达到型的变旋反应,若没有,可延长孵育时间可达到自发变旋的目的自发变旋的目的(2 2)PODPOD的特异性较低,一些还原性物质如尿酸、维生素的特异性较低,一些还原性物质如尿酸、维生素C C、胆红素和、胆红素和谷胱甘肽等可消

22、耗谷胱甘肽等可消耗H H2 2O O2 2,引起负误差(测定结果偏低),引起负误差(测定结果偏低)。正常情况下,。正常情况下,血液中上述物质浓度不高,对血糖测定形响不大。如果有一些具有氧化血液中上述物质浓度不高,对血糖测定形响不大。如果有一些具有氧化剂作用的化合物参与反应,则可引起正误差剂作用的化合物参与反应,则可引起正误差(3 3)严重溶血、脂血标本对结果有影响严重溶血、脂血标本对结果有影响,干扰比色测定(,干扰比色测定(GODPODGODPOD波波长为长为505505nmnm)(4 4)本法)本法不宜于测定尿糖,因为尿液中尿酸等干扰物质浓度过高不宜于测定尿糖,因为尿液中尿酸等干扰物质浓度过

23、高,但,但可用于测定脑脊液糖可用于测定脑脊液糖 3.葡萄糖脱氢酶法(1 1)GDHGDH对葡萄糖具有高度特异性,其测定结果与对葡萄糖具有高度特异性,其测定结果与HKHK法具有法具有良好的一致性良好的一致性(2 2)一般浓度的抗凝剂或防腐剂及血浆中其他物质不干扰)一般浓度的抗凝剂或防腐剂及血浆中其他物质不干扰测定。但当血胆红素测定。但当血胆红素342mol/L342mol/L和血红蛋白和血红蛋白1g/L1g/L时,可时,可使测定葡萄糖浓度分别增高使测定葡萄糖浓度分别增高0.72mmol/L0.72mmol/L和和0.22mmol/L0.22mmol/L。脂血。脂血标本会干扰测定,故须做标本对照管

24、标本会干扰测定,故须做标本对照管 GDH+NAD+NADH -D-葡萄糖D-葡萄糖酸内酯n原理原理n评价评价血糖测定参考区间与临床意义空腹血糖空腹血糖:3.93.96.1mmol/L6.1mmol/L随机血糖:随机血糖:7.8mmol/L7.8mmol/L)肾糖阈:肾糖阈:9.0mmol/L9.0mmol/L,血糖高于此值出现糖尿,血糖高于此值出现糖尿。临床意义:临床意义:生理性高血糖:高糖饮食生理性高血糖:高糖饮食1-2h1-2h,情绪激动,情绪激动病理性高血糖:病理性高血糖:1.1.糖尿病糖尿病2.2.内分泌疾病内分泌疾病腺垂体功能亢进:巨人症,肢端肥大症腺垂体功能亢进:巨人症,肢端肥大症

25、肾上腺皮质功能亢进:库欣综合征肾上腺皮质功能亢进:库欣综合征甲状腺功能亢进甲状腺功能亢进3.3.应激性高血糖:颅脑损伤,脑出血应激性高血糖:颅脑损伤,脑出血4.4.脱水引起血液浓缩:呕吐、腹泻、高热脱水引起血液浓缩:呕吐、腹泻、高热血糖降低血糖降低空腹血糖降低:空腹血糖降低:1.长期饥饿,剧烈运动长期饥饿,剧烈运动2.内分泌疾病引起的胰岛素绝对或相对过量,如胰岛内分泌疾病引起的胰岛素绝对或相对过量,如胰岛B细胞增细胞增生或肿瘤引起胰岛素分泌过多生或肿瘤引起胰岛素分泌过多3.对抗胰岛素激素分泌不足如垂体,肾上腺皮质或甲状腺功对抗胰岛素激素分泌不足如垂体,肾上腺皮质或甲状腺功能减退而使生长激素,肾

26、上腺素分泌减少能减退而使生长激素,肾上腺素分泌减少4.严重肝脏疾病使得肝脏生糖作用减低或肝糖原不能有效的严重肝脏疾病使得肝脏生糖作用减低或肝糖原不能有效的调节血糖调节血糖.反应性低血糖反应性低血糖药物影响药物影响 正常人在食入一定量的葡萄糖后,血糖仅仅暂时升高,一般不超过9.0mmml/L,但在2小时后血糖浓度又恢复到空腹水平,称为耐糖现象。二、糖耐量试验 概念概念:口服或注射一定葡萄糖后,每间隔一定时:口服或注射一定葡萄糖后,每间隔一定时间测定血糖水平,称为间测定血糖水平,称为糖耐量试验(糖耐量试验(GTTGTT),是一,是一种种葡萄糖负荷试验葡萄糖负荷试验,常用于,常用于了解机体对葡萄糖的

27、了解机体对葡萄糖的调节能力调节能力。临床实际测定时,常用口服葡萄糖的。临床实际测定时,常用口服葡萄糖的方式测定,称为方式测定,称为口服葡萄糖耐量试验(口服葡萄糖耐量试验(OGTTOGTT)。)。对于对于症状不明显的或血糖升高达不到症状不明显的或血糖升高达不到DMDM诊断标准诊断标准的可疑糖尿病患者,可以通过该项试验早期发现的可疑糖尿病患者,可以通过该项试验早期发现或排除糖尿病。或排除糖尿病。OGTTOGTT适应证适应证1.1.空腹血糖水平在空腹血糖水平在临界值临界值而又疑为糖尿病患者而又疑为糖尿病患者2.2.空腹或餐后血糖浓度正常,但有发展为糖尿病可能的人空腹或餐后血糖浓度正常,但有发展为糖尿

28、病可能的人3.3.以前耐量试验异常的危险人群以前耐量试验异常的危险人群4.4.妊娠期糖尿病的诊断妊娠期糖尿病的诊断5.5.临床上出现肾病、神经病变和视网膜病而又无法做出合理临床上出现肾病、神经病变和视网膜病而又无法做出合理 解释者解释者6.6.作为流行病学研究的手段作为流行病学研究的手段FPG:6.07.0mmol/LWHO推荐的OGTT标准化做法1.1.试验前试验前3 3天,病人每日饮食含糖量不低于天,病人每日饮食含糖量不低于150150克,并维持正克,并维持正常活动常活动2.2.影响试验的一些药物应在影响试验的一些药物应在3 3天前停用天前停用3.3.受试前应空腹受试前应空腹1010161

29、6小时小时4.4.试验前和试验中,病人精神和身体都处于休息状态试验前和试验中,病人精神和身体都处于休息状态5.5.整个试验期间,不可吸烟、喝咖啡和进食等整个试验期间,不可吸烟、喝咖啡和进食等病人准备病人准备WHO推荐的OGTT标准化做法1.1.葡萄糖负荷量:成人将葡萄糖负荷量:成人将7575克葡萄糖溶于克葡萄糖溶于250ml250ml左右的温开水左右的温开水中,于中,于5 5分钟内饮入;妊娠妇女用量为分钟内饮入;妊娠妇女用量为100100克;儿童按克;儿童按1.75g/kg1.75g/kg体重给予,最大值不超过体重给予,最大值不超过7575克,同样于克,同样于5 5分钟内服完分钟内服完2.2.

30、标本留取:标本收集:受试者在服糖前静脉抽血测空腹血标本留取:标本收集:受试者在服糖前静脉抽血测空腹血糖。服糖后,糖。服糖后,每隔每隔3030分钟抽血样一次,共四次。若疑为反应分钟抽血样一次,共四次。若疑为反应性低血糖症的病例,可酌情延长抽血时间(口服法可延长至性低血糖症的病例,可酌情延长抽血时间(口服法可延长至6 6小时),于抽血同时,每间隔小时),于抽血同时,每间隔1 1小时留取尿液作尿糖试验小时留取尿液作尿糖试验实验过程实验过程实验结果判定及临床意义实验结果判定及临床意义OGTTOGTT结合结合FPGFPG结果可协助糖尿病的诊断及相关状态的判定。结果可协助糖尿病的诊断及相关状态的判定。1

31、1. .FPG FPG 6.1mmol/L6.1mmol/L,2h PG 2h PG 7.8mmol/L7.8mmol/L为为糖耐量正常糖耐量正常(NGTNGT)2 2. .FPG 6.1FPG 6.17.0mmol/L7.0mmol/L,2h PG2h PG7.8mmol/L7.8mmol/L为为空腹血糖受损空腹血糖受损(IFGIFG)3 3. .FPG FPG 7.0mmol/L7.0mmol/L,2h PG 7.82h PG 7.811.1mmol/L11.1mmol/L为为葡萄糖耐量受损葡萄糖耐量受损(IGTIGT),),临床上称为亚临床或无症状性糖尿病临床上称为亚临床或无症状性糖尿病

32、4 4. .FPG7.0mmol/LFPG7.0mmol/L,2h PG11.1mmol/L2h PG11.1mmol/L为为糖尿病性糖耐量糖尿病性糖耐量(DMDM)糖耐量曲线绘制糖耐量曲线绘制葡萄糖耐量曲线葡萄糖耐量曲线其他糖耐量异常 平坦型糖耐量曲线平坦型糖耐量曲线:空腹血糖水平正常,糖负荷:空腹血糖水平正常,糖负荷后不见血糖以正常形式升高,不出现血糖高峰,后不见血糖以正常形式升高,不出现血糖高峰,曲线表现为低平,在较短时间内(曲线表现为低平,在较短时间内(1小时以内)血小时以内)血糖可恢复原值。糖可恢复原值。 疾病:疾病: 见于胃排空延迟或小肠吸收不良见于胃排空延迟或小肠吸收不良 内分泌

33、疾病所致升高血糖激素分泌减少或胰岛素内分泌疾病所致升高血糖激素分泌减少或胰岛素分泌过多,此时由于糖异生作用减弱,组织对糖分泌过多,此时由于糖异生作用减弱,组织对糖的氧化利用加强而表现为糖耐量增加的氧化利用加强而表现为糖耐量增加其他糖耐量异常 储存延迟型糖耐量曲线:服糖后血糖水平储存延迟型糖耐量曲线:服糖后血糖水平急剧升高,峰值出现早,且超过急剧升高,峰值出现早,且超过11.1mol/L,2hPG低于空腹水平。低于空腹水平。 疾病见于疾病见于 胃切除患者胃切除患者 肠道吸收葡萄糖加速肠道吸收葡萄糖加速 严重肝损害严重肝损害 肝脏不能迅速摄取和处理葡萄肝脏不能迅速摄取和处理葡萄糖使得血糖升高,引起

34、反应性胰岛素分泌糖使得血糖升高,引起反应性胰岛素分泌增多,肝外组织利用葡萄糖加快所致增多,肝外组织利用葡萄糖加快所致应激状态应激状态运动量的大小运动量的大小糖的摄入量糖的摄入量禁食的程度禁食的程度损伤损伤药物药物内分泌疾病等内分泌疾病等 影响影响OGTTOGTT的因素的因素1.1.空腹血糖空腹血糖6.1mmol/L6.1mmol/L2.2.服糖后服糖后30306060分钟血糖生高达分钟血糖生高达峰值,一般峰值,一般10mmol/L10mmol/L3.3.服糖后服糖后2 2小时内恢复至空腹血小时内恢复至空腹血糖水平糖水平参考范围参考范围妊娠期糖尿病妊娠期糖尿病(GDMGDM)的筛查与诊断)的筛查

35、与诊断GDMGDM的危害的危害: 致先天性胎儿畸形及胎儿死亡多于正常孕妇致先天性胎儿畸形及胎儿死亡多于正常孕妇需要筛查的人群需要筛查的人群: 肥胖、直系亲属有糖尿病、有流产、滞胎或畸胎病史的肥胖、直系亲属有糖尿病、有流产、滞胎或畸胎病史的孕妇,年龄大于孕妇,年龄大于3535岁,宜进行岁,宜进行OGTTOGTTGDMGDM的筛查方法的筛查方法: 在妊娠在妊娠24242828周内,测定口服周内,测定口服5050克葡萄糖克葡萄糖1 1小时后的血小时后的血糖浓度。若为糖浓度。若为7.0mmol/L7.0mmol/L以上者,则提示有妊娠性糖尿病的以上者,则提示有妊娠性糖尿病的可能性,这些妇女应进一步作可

36、能性,这些妇女应进一步作OGTTOGTT三、糖化血红蛋白(GHb)测定糖化血红蛋白(GHb)的种类GHbGHb形成及分类形成及分类HbAHbA5%5%有关糖化血红蛋白的几个问题1.1.概念概念:是红细胞内是红细胞内血红蛋白与糖类结合(糖基化)血红蛋白与糖类结合(糖基化)的一类产物的一类产物 HbAHbA1C 1C (与葡萄糖结合糖基化)量最多(与葡萄糖结合糖基化)量最多2.2.种类种类 HbA HbA1a11a1(与(与1,61,6- -二磷酸果糖结合糖基化)二磷酸果糖结合糖基化) HbA HbA1a21a2(与葡萄糖(与葡萄糖-6-6-磷酸结合糖基化)磷酸结合糖基化) HbA HbA1b1b

37、 (与丙酮酸结合糖基化)(与丙酮酸结合糖基化)3.3.糖基化的特点:糖基化的特点:(1 1)过程缓慢且不可逆过程缓慢且不可逆(2 2)生成量与血糖浓度成正比)生成量与血糖浓度成正比(3 3)其含量水平与短期血糖波动无关,可反应测定前)其含量水平与短期血糖波动无关,可反应测定前2 2 3 3个月的平均血糖水平个月的平均血糖水平 使用离子交换高压液相色谱使用离子交换高压液相色谱HPLCHPLC来测定来测定HbAHbAlClC的百分含的百分含量目前被认为是分析量目前被认为是分析HbAHbAlClC的金标准的金标准。采用。采用HPLCHPLC方法工方法工作的全自动糖化血红蛋白分析仪器,以其快速、简便、

38、作的全自动糖化血红蛋白分析仪器,以其快速、简便、精巧、准确等特点,受到越来越多用户的欢迎精巧、准确等特点,受到越来越多用户的欢迎GHbGHb测定方法有层析、电泳测定方法有层析、电泳法、比色法、放免法等。最法、比色法、放免法等。最初使用较多的是阳离子交换初使用较多的是阳离子交换层析法,现主要使用商品化层析法,现主要使用商品化的微柱法的微柱法临床意义1.1.糖尿病的诊断糖尿病的诊断:随机检测,:随机检测,8%8%者多不考虑糖尿病,者多不考虑糖尿病,9%9%时,预告糖尿病的灵敏度为时,预告糖尿病的灵敏度为68%68%,特异性,特异性94%94%;10%10%者则者则有有89%89%为糖尿病为糖尿病2

39、.2.糖尿病患者疗效判断糖尿病患者疗效判断: :可作为糖尿病长期控制的良好指标,可作为糖尿病长期控制的良好指标,尤以尤以型糖尿病和妊娠性糖尿病的治疗监控更为有效型糖尿病和妊娠性糖尿病的治疗监控更为有效3.3.判断预后判断预后: : 糖尿病合并视网膜病者,如糖尿病合并视网膜病者,如GHbGHb为为8%8%10%10%,提,提示病变为中等程度,可用激光治疗;示病变为中等程度,可用激光治疗;10%10%为严重程度,为严重程度,预后较差预后较差四、糖化血清蛋白测定概念:概念:血清白蛋白和其它血清蛋白质可与葡萄糖发生糖化反血清白蛋白和其它血清蛋白质可与葡萄糖发生糖化反应形成糖化蛋白,糖化的白蛋白和其它蛋

40、白质也称果糖胺应形成糖化蛋白,糖化的白蛋白和其它蛋白质也称果糖胺(GSP)(GSP)测定的方法:免疫法和化学显色法测定的方法:免疫法和化学显色法1 1. .化学显色法测定原理:果糖胺在碱性溶液中能还原四氧唑化学显色法测定原理:果糖胺在碱性溶液中能还原四氧唑蓝(蓝(NBTNBT),其紫红色甲替产物在),其紫红色甲替产物在530nm530nm有吸收峰,而葡萄糖有吸收峰,而葡萄糖在此条件下不发生反应。此方法技术简单,也可用于自动化在此条件下不发生反应。此方法技术简单,也可用于自动化分析分析2 2. .参考值范围:(参考值范围:(1.91.90.250.25)mmol/Lmmol/L3 3. .临床意

41、义:临床意义:(1 1)GSPGSP对对DMDM诊断意义不大诊断意义不大(2 2)监测)监测DMDM患者过去患者过去1 12 2周周内血糖浓度的变化。可用于内血糖浓度的变化。可用于评评估血糖控制效果,适用于住院调整用药患者。估血糖控制效果,适用于住院调整用药患者。(解释:血清蛋白半衰期较短(血清白蛋白解释:血清蛋白半衰期较短(血清白蛋白1717天,总蛋白天,总蛋白3030天天)(3 3)在反映血糖浓度变化及控制效果方面,在反映血糖浓度变化及控制效果方面,GSPGSP比比GHbGHb更敏更敏感感注意事项注意事项 当患者有血红蛋白变异体当患者有血红蛋白变异体HbS,HbC,会使或许吧会使或许吧寿命

42、下降,此时测定寿命下降,此时测定GHb意义不大,而红细胞寿意义不大,而红细胞寿命命Hb变异体不影响果糖胺的形成,此时测定变异体不影响果糖胺的形成,此时测定GSP更有价值。更有价值。 当清蛋白浓度和半寿期发生明显变化时,对当清蛋白浓度和半寿期发生明显变化时,对GSP产生很大影响。当患者产生很大影响。当患者ALB1g/L,时,如肾病综合征,肝硬化,异常蛋白血时,如肾病综合征,肝硬化,异常蛋白血症或急性时相反应后的患者,该结果只作为参考症或急性时相反应后的患者,该结果只作为参考。五、胰岛素测定及其释放试验胰岛素测定用于了解胰岛素测定用于了解胰岛胰岛细胞合成和分泌功能细胞合成和分泌功能,半寿期,半寿期

43、4.54.5分钟分钟胰岛素测定方法:化学发光免疫比浊法、放射免疫法(胰岛素测定方法:化学发光免疫比浊法、放射免疫法(RIARIA)参考区间:空腹胰岛素参考区间:空腹胰岛素 4.0 4.015.615.6U/mlU/ml(RIARIA)服糖后服糖后30-6030-60分钟胰岛素分泌到达峰值,是空腹胰岛素分钟胰岛素分泌到达峰值,是空腹胰岛素5-105-10倍倍临床意义临床意义胰岛素增高:胰岛素增高:常见于常见于2 2型糖尿病,肥胖者居多,在早期和中期型糖尿病,肥胖者居多,在早期和中期伴有高胰岛素血症。胰岛伴有高胰岛素血症。胰岛B B细胞瘤,垂体功能减退,甲减,妊细胞瘤,垂体功能减退,甲减,妊娠妇女

44、,应激状态娠妇女,应激状态胰岛素减低:胰岛素减低:1 1型糖尿病,型糖尿病,2 2型晚期患者,胰腺炎,胰腺外伤等型晚期患者,胰腺炎,胰腺外伤等胰岛素释放试验曲线胰岛素释放试验曲线 胰岛素释放试验是反映胰岛素释放试验是反映胰岛胰岛细胞储备能力细胞储备能力的实验,与的实验,与OGTTOGTT方法相同,服糖后方法相同,服糖后3030分钟、分钟、1 1小时、小时、2 2小时及小时及3 3小时取小时取血分别测定胰岛素和血分别测定胰岛素和C C肽,了解胰岛功能肽,了解胰岛功能 正常人胰岛素:分泌常与血糖呈平行状态,基础分泌量正常人胰岛素:分泌常与血糖呈平行状态,基础分泌量约约1U/h,全天约全天约40U.

45、在服糖后在服糖后30-60分钟后达到峰值,为分钟后达到峰值,为空腹时浓度的空腹时浓度的5-10倍。,然后胰岛素下降很快,倍。,然后胰岛素下降很快,180分分钟的测定值只比空腹略高。钟的测定值只比空腹略高。 1型糖尿病:空腹值低,服糖后仍无反应或反应低下,呈型糖尿病:空腹值低,服糖后仍无反应或反应低下,呈不反应型不反应型 2型糖尿病:空腹正常或升高,服糖后水平增加,峰值出型糖尿病:空腹正常或升高,服糖后水平增加,峰值出现晚且不及正常人高,常在现晚且不及正常人高,常在120分钟甚至分钟甚至180分钟出现,分钟出现,但该型在晚期也可出现不反应型但该型在晚期也可出现不反应型胰岛素释放曲线类型 胰岛素分泌不足型:空腹胰岛素水平低于正常,试验曲线胰岛素分泌不足型:空腹胰

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