乙肝实验室诊断

1、乙型肝炎的实验室诊断乙型肝炎的实验室诊断(Laboratory Diagnosis of Hepatitis B)罗福康罗福康 主治医师、讲师主治医师、讲师新桥医院检验科新桥医院检验科Page 2教学设计（教学设计（1）教学对象教学对象 2011级临床医学五年制本科 2011级医学影像五年制本科 2011级高原医学五年制本科教学目标教学目标 掌握乙肝两对半的临床意义。 掌握HBV-DNA检测的临床意义。 掌握CHB治疗流程。 了解ELISA、RT-QPCR和化学发光检测原理。新桥医院检验科新桥医院检验科教学设计（教学设计（2）教学方法教学方法 采用启发式、互动式和问题式教学方法，以问题为线索组

2、织整个教学内容，激发学员学习兴趣，引导学员掌握教学内容。教学手段教学手段 充分运用视频、图片、图表讲解重点和难点内容，穿插提问、辅助板书教学。新桥医院检验科新桥医院检验科教学设计（教学设计（3）教学内容教学内容 乙型肝炎概述 乙型肝炎免疫标志物诊断 HBV-DNA检测 乙型肝炎实验室诊断的临床应用 病例分析教学时间安排教学时间安排 导课2分钟 集中讲解、板书、穿插视频、提问互动30分钟 病例分析讨论5分钟 小结、布置思考题3分钟新桥医院检验科新桥医院检验科HBV Immunology Markers Test新桥医院检验科新桥医院检验科How to read the report?谢谢Over

3、view-HBV Prevalence新桥医院检验科新桥医院检验科 CHBHCCCirrhosis新桥医院检验科新桥医院检验科Overview Progression of HBV infectionOverview HBV Structure新桥医院检验科新桥医院检验科HBV immunological markersHBsAg: 与肝组织中与肝组织中cccDNA水平的变化相一致。水平的变化相一致。HBsAb: 保护性抗体。保护性抗体。HBeAg: HBV复制活跃复制活跃及血清及血清传染性强传染性强指标。指标。HBeAb: 是是HBeAg对应抗体，对应抗体，不是中和抗体不是中和抗体。HBcA

4、g: 病毒病毒复制活跃复制活跃，传染性强，预后差。，传染性强，预后差。HBcAb: IgM 在感染后在感染后最早出现最早出现。Pre-S1/S2：判断：判断急性感染急性感染/病毒复制病毒复制水平。水平。新桥医院检验科新桥医院检验科Main models of HBV immunological markersHBsAgHBsAbHBeAgHBeAbHBcAb-IgG 临床意义临床意义+急性或慢性感染急性或慢性感染(大三阳大三阳)+乙肝后期或慢性感染乙肝后期或慢性感染(小三阳小三阳)+急慢性乙肝或急慢性乙肝或HBsAg携带者携带者痊愈或恢复期痊愈或恢复期,有免疫力有免疫力痊愈痊愈,有免疫力有免疫

5、力疫苗接种或曾经感染过疫苗接种或曾经感染过,有免疫力有免疫力新桥医院检验科新桥医院检验科 Principle of Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) 新桥医院检验科新桥医院检验科Double antibodies sandwich methodPrinciple of Chemiluminescent Enzyme Immunoassay (CLEIA) 新桥医院检验科新桥医院检验科钩状效应（钩状效应（Hook Effect）钩状效应即HOOK效应,是指由于抗原抗体比例不合适而导致假阴性的现象，其中抗体过量叫做前带效应；抗原过量叫做后带效应。

6、新桥医院检验科新桥医院检验科HBVDNA TestDerect, sensitive and specificAcute infectionWindow phaseMethod :RT-QPCRReference range：30IU/ml新桥医院检验科新桥医院检验科Real-time Fluorescence Quantitative PCR荧光定量PCR是通过荧光染料(Fluorescent Dyes)或荧光标记的特异性的探针(Taqman probe,etc.)，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，荧光强度与产物浓度成正比。结合相应的软件可以对产物进行分析，计算待测样品模板的

7、初始浓度。 新桥医院检验科新桥医院检验科 Principle of Taqman probe method新桥医院检验科新桥医院检验科Fluorescent Dyes MethodStandard treatment strategy for CHB patientsCHBCirrhosis(+)Cirrhosis(-)HBeAg +HBV-DNA20000IU/mlHBeAg -HBV-DNA2000IU/mlALT2ULNALT2000IU/mlHBeAg -,HBV-DNA200IU/mlHBV-DNA(+)NA新桥医院检验科新桥医院检验科Page 18QUESTIONSWhat are

8、 the main differences of treatment betwwen the cirrhosis(-) and cirrhosis(+) CHB patients?Why the IFN is prohibitted for the cirrhosis(+) CHB patients?Course of NA treatment and drug withdrawal for HBeAg+ CHB patients在达到HBV-DNA低于检测下限、ALT复常、HBe血清学转换后；再巩固至少1年，（经过2次复查，每次间隔6个），结果保持不变；总疗程已达2年者，可考虑停药；延长疗程

9、可减少复发。新桥医院检验科新桥医院检验科 在达到HBV-DNA低于检测下限、ALT复常； 再巩固至少1年半，（经过至少3次复查，每次间隔6个月），结果保持不变； 总疗程已达2年半者，可考虑停药； 由于停药后复发率高，可以延长疗程。 新桥医院检验科新桥医院检验科Course of NA treatment and drug withdrawal for HBeAg- CHB patientsQuestion:Why do the HBeAg- CHB patients need longer course of NA treatment?Case analysisCase history 男，3

10、4岁，因“反复上腹痛2年，肝区疼痛1月”入院；2年前出现上腹痛，2012-11-02于我科住院，诊断为“慢性乙型肝炎；慢性胃窦炎伴糜烂”，给予输液和口服“恩替卡韦”治疗好转出院，1月前出现肝区疼痛，为求进一步诊治来院就诊，门诊以“慢性乙型肝炎”入院。 查体：正常。新桥医院检验科新桥医院检验科Case analysis新桥医院检验科新桥医院检验科Hepatitis immunological markers tests唐唐Case analysis新桥医院检验科新桥医院检验科HBV-DNA test唐唐Case analysis新桥医院检验科新桥医院检验科Biochemical tests唐唐C

11、ase analysisQuestions1.What will we get from these reports？2.What other examinations needed for diognosis ？新桥医院检验科新桥医院检验科 SAg/eAg/CAb+ ALT is normal Hyperlipidemia Sensitive to Entecavir SVR? Abdomen Ultrasound Gastroscope Tumor markers Quantitation test of HBsAgCase analysisResults of other examina

12、tions 1. Ultrasound： chronic liver disease 2. Gastroscope：reflux esophagitis, chronic non-atrophic antral gastritis 3. Quantitation test of HBsAg： 96.93IU/ml 4. Tumor markers ：negtive 新桥医院检验科新桥医院检验科Case analysisTreatment 1. Entecavir Tablets 2. Rabeprazole Sodium Enteric-Coated Capsules 3. Itopride Tablets 4. Hydrotalcite Tablets新桥医院检验科新桥医院检验科Summary HBV immunological markers tests HBV-DNA test The standard therapy strategy for the CHB patients Case analysis新桥医院检验科新桥医院检验科Questions: What will interfere the ELISA