药物特殊毒性评价实用教案

1、会计学1药物特殊毒性药物特殊毒性(d xn)评价评价第一页，共46页。 毒理学毒理学特殊毒性特殊毒性(d (d xn)xn)评价评价一般一般(ybn)(ybn)毒性毒性评价评价急性毒性急性毒性长期毒性长期毒性目目的的局部毒性局部毒性遗传毒性遗传毒性 致癌性致癌性 生殖毒性生殖毒性 依赖性依赖性第1页/共46页第二页，共46页。先天先天(xintin)愚型愚型海豹海豹(hi bo)肢畸形肢畸形第2页/共46页第三页，共46页。第3页/共46页第四页，共46页。体细胞或生殖细胞中的遗传信息，体细胞或生殖细胞中的遗传信息，DNA是大分子物质，它决定了生是大分子物质，它决定了生命现象的基本属性命现象的

2、基本属性第第1 1节节 药物致遗传损伤药物致遗传损伤(snshng)(snshng)的类型的类型第4页/共46页第五页，共46页。结果可造成细胞或机体的死亡结果可造成细胞或机体的死亡(swng)、或细胞、机体结构形态或、或细胞、机体结构形态或功能的改变功能的改变染色体畸变染色体畸变(jbin)（chromosome aberration）基因突变（基因突变（gene mutation）第5页/共46页第六页，共46页。第6页/共46页第七页，共46页。第7页/共46页第八页，共46页。第8页/共46页第九页，共46页。三联密码转录和翻译(fny)时，发生较多遗传信息的改变。多环芳香烃类、等能引

3、起插入性移码突变第9页/共46页第十页，共46页。第10页/共46页第十一页，共46页。第11页/共46页第十二页，共46页。在诱变因素的作用在诱变因素的作用(zuyng)下，染色下，染色体从长轴上断下一个片段体从长轴上断下一个片段染色体的断片染色体的断片(dunpin)未与断裂端未与断裂端连接连接结果：失去一个片段及所携带的遗传结果：失去一个片段及所携带的遗传密码密码断片与同源染色体连接断片与同源染色体连接结果：使部分遗传密码重复出现结果：使部分遗传密码重复出现断片作断片作180倒转后，再接到断端倒转后，再接到断端结果：所携带的遗传密码紊乱结果：所携带的遗传密码紊乱两条非同源染色体同时断裂，

4、两个断片交两条非同源染色体同时断裂，两个断片交换位置后相接换位置后相接结果：所携带的遗传密码紊乱结果：所携带的遗传密码紊乱二、染色体畸变二、染色体畸变第12页/共46页第十三页，共46页。由酮式异构体变为烯醇式异构体，引起碱基错误配对，最终产生转换型碱基置换第13页/共46页第十四页，共46页。第14页/共46页第十五页，共46页。第15页/共46页第十六页，共46页。人类基因库是指人群生殖细胞所具有的能传给下一代的全部基因总和。基因组是指单一个体所具有全部基因在人群中每个个体新携带的有害基因的平均水平叫做人群的遗传负荷(fh)（Genntic load）或突变负荷(fh)（mutation

5、load)第16页/共46页第十七页，共46页。第17页/共46页第十八页，共46页。可遗传(ychun)的突变都是坏事？第18页/共46页第十九页，共46页。反应的化合物反应的化合物临床疗程长，尤其是用于儿童临床疗程长，尤其是用于儿童和青年人的药物和青年人的药物在大部分人群中使用的药物在大部分人群中使用的药物一般用于预防的药物一般用于预防的药物普遍滥用的药物普遍滥用的药物以高浓度与精子接触起作用的以高浓度与精子接触起作用的药物药物第第4 4节节 药物遗传毒性药物遗传毒性(d (d xn)xn)评价评价第19页/共46页第二十页，共46页。第第4 4节节 药物遗传毒性评价药物遗传毒性评价国际经

6、济合作国际经济合作(hzu)(hzu)发展组织发展组织（OECDOECD）推荐方法）推荐方法第20页/共46页第二十一页，共46页。啮齿动物显性致死试验测定测定(cdng)基因点突变基因点突变染色体畸变染色体畸变染色体畸变染色体畸变生殖细胞染色体畸变生殖细胞染色体畸变第21页/共46页第二十二页，共46页。一些国家一些国家(guji)(guji)新药遗传毒性试验的新药遗传毒性试验的项目项目 试验项目试验项目 日本日本 欧共体欧共体 加拿大加拿大 中国中国 微生物回复突变试验微生物回复突变试验 +哺乳动物培养细胞染哺乳动物培养细胞染色体畸变试验色体畸变试验 +啮齿动物微核试验啮齿动物微核试验 +

7、体外真核细胞基因突体外真核细胞基因突变试验变试验 +- 第22页/共46页第二十三页，共46页。第23页/共46页第二十四页，共46页。第24页/共46页第二十五页，共46页。试验前必须进行菌株的基因型鉴定、自发回变数鉴定及试验前必须进行菌株的基因型鉴定、自发回变数鉴定及对鉴别对鉴别(jinbi)性致突变物的反应鉴定，合格后才能用于致突变性致突变物的反应鉴定，合格后才能用于致突变试验试验第25页/共46页第二十六页，共46页。第26页/共46页第二十七页，共46页。对鉴别性致突变物的反应对鉴别性致突变物的反应第27页/共46页第二十八页，共46页。第28页/共46页第二十九页，共46页。第29

8、页/共46页第三十页，共46页。第30页/共46页第三十一页，共46页。第31页/共46页第三十二页，共46页。DMSO0.4 ml；乙醇；乙醇0.1 ml第32页/共46页第三十三页，共46页。第33页/共46页第三十四页，共46页。为何为何(wih)要制备要制备S9 ？为何要诱导为何要诱导(yudo)制备制备S9 ？S9代谢活化系统：经诱导的大鼠肝脏匀浆，离心后所上清即为代谢活化系统：经诱导的大鼠肝脏匀浆，离心后所上清即为S9上清液，再向其中加入一些辅助因子，如辅酶上清液，再向其中加入一些辅助因子，如辅酶II（NADP）、）、6-磷酸葡萄糖、磷酸葡萄糖、K+/Mg2+等，组成混合液，从而构

9、成还原型等，组成混合液，从而构成还原型辅酶辅酶II再生系统。肝再生系统。肝S9的成分主要是混合功能氧化酶，大多的成分主要是混合功能氧化酶，大多数化合物在体内经过其代谢。数化合物在体内经过其代谢。第34页/共46页第三十五页，共46页。第35页/共46页第三十六页，共46页。第36页/共46页第三十七页，共46页。第37页/共46页第三十八页，共46页。用细胞遗传学方法检测受试物是否影响用细胞遗传学方法检测受试物是否影响DNA结构结构或改变遗传信息的实验过程，从而判定或改变遗传信息的实验过程，从而判定(pndng)受试物的遗受试物的遗传毒性传毒性第38页/共46页第三十九页，共46页。相细胞进行

10、染色体畸变分析相细胞进行染色体畸变分析第39页/共46页第四十页，共46页。2 2 某一测试点呈现可重复的并有某一测试点呈现可重复的并有统计学意义的增加统计学意义的增加畸变率畸变率结果结果5%10%20%50%第40页/共46页第四十一页，共46页。各种有核细胞中均可见到微核，各种有核细胞中均可见到微核，但只有在无核的红细胞中才易但只有在无核的红细胞中才易辩认。在骨髓中无核红细胞有辩认。在骨髓中无核红细胞有嗜多染红细胞（晚幼红细胞）嗜多染红细胞（晚幼红细胞）和成熟红细胞两种，正常情况和成熟红细胞两种，正常情况下，嗜多染红细胞占多数。由下，嗜多染红细胞占多数。由于毒性物质影响了骨髓红细胞于毒性物

11、质影响了骨髓红细胞尤其是嗜多染红细胞，使二者尤其是嗜多染红细胞，使二者比例失衡，故在骨髓涂片中一比例失衡，故在骨髓涂片中一般均在嗜多染红细胞中进行观般均在嗜多染红细胞中进行观察。察。第41页/共46页第四十二页，共46页。阳性（环磷酰胺）。阳性（环磷酰胺）。剂量（剂量（mg/kg）给药途径给药途径平均微核率（平均微核率（）50腹腔注射腹腔注射24.60100腹腔注射腹腔注射78.0060皮下注射皮下注射36.1060肌内注射肌内注射17.00100肌内注射肌内注射33.00100经口给药经口给药21.00 环磷酰胺不同途径给药对小鼠微核出现环磷酰胺不同途径给药对小鼠微核出现(chxin)率的影响率的影响第42页/共46页第四十三页，共46页。剂量（剂量（mg/kg）给药途径给药途径平均微核率（平均微核率（）50腹腔注射腹腔注射24.60100腹腔注射腹腔注射78.0060皮下注射皮下注射36.1060肌内注射肌内注射17.00100肌内注射肌内注射33.00100经口给药经口给药21.00 环磷酰胺不同途径环磷酰胺不同途径(tjng)给药对小鼠微核出现率的影响给药对小鼠微核出现率的影响第43页/共46页第四十四页，共46页。动物动物(dngw)染毒染毒涂片涂片(t pin)制备骨髓液制备骨髓液Giemsa染色染色10-15min镜