T细胞斑点试验实用教案VIP

1、结核(jih)感染T细胞斑点检测 T细胞斑点试验（T-SPOT），又叫作结核( jih)感染干扰素释放试验（Interferon Gamma Release Assays，IGRAs 第1页/共16页第一页，共17页。结核(jih)的现状 结核病是全球严重的公共卫生(n n wi shn)问题之一。据WHO统计，全球约有20亿人感染结核分枝杆菌，每年有约200万人死于结核。 我国是世界上22个结核病高负担国家之一，结核感染导致的死亡人数是其他传染性疾病总死亡人数的2倍以上。第2页/共16页第二页，共17页。基于T淋巴细胞检测结核(jih)感染的原理T-SPOT.TB在诊断结核感染方面具有良好的

2、敏感性和特异性，在现有(xin yu)结核诊断方法存在缺陷的今天， T-SPOT.TB 可以给临床诊断提供参考。基于结核抗原特异性T细胞向病变部位集中的特点， T-SPOT.TB的检测物已不局限于静脉血，支气管肺泡灌洗液、痰液、胸腹水、脑脊液等也可用于对肺内及肺外结核的诊断。第3页/共16页第三页，共17页。T-SPOT的意义(yy) 1:菌阴，结核病患者的辅助诊断 2：肺外结合的鉴别诊断 3：免疫力低下/受抑制(yzh)患者的结核诊断/感染筛查 4：儿童结核病的辅助诊断第4页/共16页第四页，共17页。T-SPOT注意事项 1:肝素抗凝全血，常温保存,不得冷冻或冷藏。 2:采血量：三岁以下2

3、ML，3-9岁4ML，9岁以上6ML，免疫力低下或白细胞低下采6ML（本公司一律两管） 3:样本必须(bx)4小时内送达。 4：输血受试者或PET-CT受试者，两周后检测。 5：受试者需阅读知情同意书并填写申请单。第5页/共16页第五页，共17页。基于T淋巴细胞检测(jin c)结核感染的原理第6页/共16页第六页，共17页。结核的传统(chuntng)诊断手段结核菌素皮试：低敏感性：免疫力低下人群中其敏感性大大降低。低特异性：与卡介苗接种和其他环境分枝杆菌有交叉，易造成“假阳性”结果。细菌学检查：常规培养：2月；快速(kui s)培养：1周； 阳性率取决于采集标本中细菌数量，不利于早期诊断。

4、病理学检查：阳性率低，对取材标本有较高要求，有创伤，对肉芽肿性病变需进一步鉴别。第7页/共16页第七页，共17页。基于T淋巴细胞检测结核(jih)感染的原理结核感染(gnrn)的免疫应答反应以细胞免疫为主，结核感染(gnrn)后体内长期存在抗原特异性的记忆性T细胞当再次遇到抗原刺激时，能迅速活化增殖，释放r干扰素r干扰素是结核分枝杆菌感染(gnrn)后机体免疫应答中最重要的细胞因子第8页/共16页第八页，共17页。基于T淋巴细胞检测结核(jih)感染的原理T-SPOT.TB技术：利用结核杆菌感染者外周血单个核细胞（PBMC）中存在结核特异(ty)性T细胞，这些淋巴细胞在受到结核特异(ty) 抗

5、原刺激后分泌r干扰素而设计的T细胞免疫斑点试验。检测外周血中受结核特异(ty)抗原刺激释放r干扰素的T淋巴细胞，经酶联免疫显色后，通过ELISPOT分析系统 对斑点进行计数，1个斑点代表一个细胞，计算出抗原特异(ty)性细胞的频率。第9页/共16页第九页，共17页。基于T淋巴细胞检测结核(jih)感染的原理空白对照孔内斑点数小于10且阳性对照孔内斑点数大于20时视为试验有效T-SPOT.TB试验结果用每106 PBMCs中斑点形成细胞(xbo)（SFCs）的数目来描述，即SFCs/106 PBMCs第10页/共16页第十页，共17页。基于T淋巴细胞检测结核感染(gnrn)的原理包第11页/共1

6、6页第十一页，共17页。基于T淋巴细胞检测结核(jih)感染的原理第12页/共16页第十二页，共17页。T-SPOT.TB的临床意义 T-SPOT.TB高灵敏度 第13页/共16页第十三页，共17页。提 问 出报告时间：一、三、五检测三个工作日出。 标本类型：肝素抗凝全血两管 需注意:4小时(xiosh)内送检，8小时(xiosh)内完成检测 价格：660元 方法学：酶联免疫斑点法 英文：T-SPOT第14页/共16页第十四页，共17页。第15页/共16页第十五页，共17页。谢谢您的观看(gunkn)！第16页/共16页第十六页，共17页。NoImage内容(nirng)总结结核(jih)感染T细胞斑点检测。我国是世界上22个结核(jih)病高负担国家之一，结核(jih)感染导致的死亡人数是其他传染性疾病总死亡人数的2倍以上。3：免疫力低下/受抑制患者的结核(jih)诊断/感染筛查。4：输血受试者或PET-CT受试者，两周后检测。低敏