血浆脂蛋白代谢紊乱的生物化学检验ppt课件

1、全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学第五章第五章血浆脂蛋白代谢紊乱的血浆脂蛋白代谢紊乱的生物化学检验生物化学检验 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学KEY POINTSClassification and functions of the main lipids, lipoproteins and apolipoproteins in the blood.Characteristics and functions of the main receptors, lipid-binding protein

2、s and enzymes related to the lipoprotein metabolism. Definition and types of hyperlipidemia. Relationship between the abnormity of lipoprotein metabolism and atherosclerosis. Evaluation, comparison and clinical significance of lipid determinations. 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学Major Obje

3、ctives了解脂蛋白代谢紊乱和动脉粥样硬化的关了解脂蛋白代谢紊乱和动脉粥样硬化的关系。系。熟习脂蛋白的特征、脂代谢有关酶类的特熟习脂蛋白的特征、脂代谢有关酶类的特点和生理功能、高脂蛋白血症分型及其特点和生理功能、高脂蛋白血症分型及其特征。征。掌握血浆脂类组成及脂蛋白的分类、主要掌握血浆脂类组成及脂蛋白的分类、主要载脂蛋白和脂蛋白受体的特征与功能、血载脂蛋白和脂蛋白受体的特征与功能、血浆脂蛋白代谢紊乱的生物化学检验。浆脂蛋白代谢紊乱的生物化学检验。 重点血浆脂蛋白的分类和特征、血浆脂蛋重点血浆脂蛋白的分类和特征、血浆脂蛋白代谢紊乱的生物化学检验。白代谢紊乱的生物化学检验。 难点血浆载脂蛋白和脂

4、蛋白受体的特征与难点血浆载脂蛋白和脂蛋白受体的特征与功能。功能。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学Brief Contents第一节第一节 血浆脂蛋白及其代谢血浆脂蛋白及其代谢第二节第二节 脂蛋白代谢紊乱脂蛋白代谢紊乱第三节第三节 脂蛋白代谢紊乱的生物化学检验脂蛋白代谢紊乱的生物化学检验 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学第一节第一节 血浆脂蛋白及其代谢血浆脂蛋白及其代谢 一、血浆脂蛋白的分类一、血浆脂蛋白的分类 二、血浆脂蛋白的组成和特征二、血浆脂蛋白的组成和特征 三、载脂蛋白的组成和特征三、载脂

5、蛋白的组成和特征 四、脂蛋白受体和脂蛋白结合蛋白四、脂蛋白受体和脂蛋白结合蛋白 五、血浆脂蛋白的代谢五、血浆脂蛋白的代谢 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学一、血浆脂蛋白的分类一、血浆脂蛋白的分类血浆脂质总量为血浆脂质总量为4.07.0g/L。包括：。包括： 1. 胆固醇胆固醇 (total cholesterol，TC) 游离胆固醇游离胆固醇 (free cholesterol，FC) 胆固醇酯胆固醇酯 (cholesterol ester，CE) 2. 磷磷 脂脂 (Phospholipid，PL) 3. 甘油三酯甘油三酯 (triacylg

6、lycerol/triglyceride，TG) 4. 游离脂肪酸游离脂肪酸 (free fatty acid，FFA) 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学血浆脂蛋白构造血浆脂蛋白构造 脂蛋白普通以不溶于水的TG和CE为中心，外表覆盖有少量蛋白质和极性的PL、FFA，从而使脂蛋白颗粒能稳定地分散在血浆中。 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学( (一一) ) 超速离心法超速离心法 根据各种脂蛋白在一定密度的介质中进展离心时，因漂浮根据各种脂蛋白在一定密度的介质中进展离心时，因漂浮速率不同而进展分别的方

7、法。速率不同而进展分别的方法。乳糜微粒乳糜微粒(chylomicron，CM)极低密度脂蛋白极低密度脂蛋白 (very low density lipoprotein，VLDL)低密度脂蛋白低密度脂蛋白(low density lipoprotein，LDL)高密度脂蛋白高密度脂蛋白(high density lipoprotein，HDL)全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学二电泳法二电泳法根据血浆脂蛋白外表电荷量大小不同，在电场中，其迁移速率也不同，分为： 乳糜微粒 -脂蛋白 前-脂蛋白 -脂蛋白全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材

8、 临床检验生物化学临床检验生物化学超速离心法与电泳法分别血浆脂蛋白的超速离心法与电泳法分别血浆脂蛋白的相应关系相应关系 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学二、血浆脂蛋白的组成和特征二、血浆脂蛋白的组成和特征 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学三、载脂蛋白的组成和特征三、载脂蛋白的组成和特征 脂蛋白中的蛋白部分称为载脂蛋白脂蛋白中的蛋白部分称为载脂蛋白(apolipoprotein，apoprotein，Apo) 。载脂蛋白在脂蛋白代谢中的生理功能：载脂蛋白在脂蛋白代谢中的生理功能： 1构成并稳定脂蛋

9、白的构造。构成并稳定脂蛋白的构造。 2修饰并影响与脂蛋白代谢有关的酶的活修饰并影响与脂蛋白代谢有关的酶的活性。性。 3作为脂蛋白受体的配体，参与脂蛋白与作为脂蛋白受体的配体，参与脂蛋白与细胞外表脂蛋白受体的结合及其代谢过程。细胞外表脂蛋白受体的结合及其代谢过程。 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学载脂蛋白的特征及生理功能载脂蛋白的特征及生理功能全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学四、脂蛋白受体和脂蛋白结合蛋白四、脂蛋白受体和脂蛋白结合蛋白 Brown和和Goldstein于于1974年研讨家族性高胆固

10、醇血年研讨家族性高胆固醇血症症(familial hypercholesterolemia，FH)患者代谢缺患者代谢缺陷时，在成纤维细胞膜上发现了陷时，在成纤维细胞膜上发现了LDL受体受体(LDL receptor，LDLR)的存在。以后相继发现有的存在。以后相继发现有VLDL受体和清道夫受体等。受体和清道夫受体等。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学一低密度脂蛋白受体受体构造一低密度脂蛋白受体受体构造 由836个氨基酸残基组成36面体构造蛋白，分子量约115kD，由五种不同的区域构成全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化

11、学临床检验生物化学LDL受体基因构造及功能受体基因构造及功能 人LDL受体基因长度45kD，由18个外显子和17个内含子组成。受体亲和性 含ApoB100的脂蛋白可与LDL受体以高亲和力结合。 LDL受体广泛分布于肝、动脉壁平滑肌细胞、肾上腺皮质细胞、血管内皮细胞、淋巴细胞、单核细胞和巨噬细胞 。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学LDL受体途径受体途径 LDL receptor pathway假设胞内游离胆固醇浓度升假设胞内游离胆固醇浓度升高，那么：高，那么：抑制抑制HMGCoA复原酶，以复原酶，以减少本身的胆固醇合成；减少本身的胆固醇合成；抑制

12、抑制LDL受体基因的表达，受体基因的表达，减少减少LDL受体的合成，从而受体的合成，从而减少减少LDL的摄取；的摄取；激活内质网激活内质网ACAT，使游，使游离胆固醇在胞质内酯化成胆离胆固醇在胞质内酯化成胆固醇酯储存，以供细胞的需固醇酯储存，以供细胞的需求。求。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学二极低密度脂蛋白受体 构造与LDL受体类似。仅对含ApoE的脂蛋白VLDL、VLDL残粒有高亲和性结合，对LDL为显著的低亲和性。在肝内几乎未发现，广泛分布在代谢活泼的心肌，骨骼肌、脂肪组织等细胞.VLDL受体不受细胞内胆固醇负反响抑制。全国高等学校医学规

13、划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学三清道夫受体三清道夫受体(scavenger receptor，SR) 清道夫受体构造 SRs分为SR-A、SR-B、SR-C、SR-D、SR-E和SRF六大类。清道夫受体配体 均为多阴离子化合物。 乙酰化或氧化等修饰的LDL； 多聚次黄嘌呤核苷酸，多聚鸟嘌呤核苷酸； 多糖如硫酸右旋糖酐； 细菌脂多糖，如内毒素等。清道夫受体功能 1.巨噬细胞经过清道夫受体去除细胞外液中的修饰LDL，尤其是氧化LDL，是机体的一种防御功能。 2.具有去除血管过多脂质和病菌毒素等。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床

14、检验生物化学四四LDLLDL受体相关蛋白受体相关蛋白LRPLRPLRP体内分布：广泛，在肝细胞、巨噬细胞、平体内分布：广泛，在肝细胞、巨噬细胞、平滑肌细胞、神经细胞等均有表达，以肝本质细胞滑肌细胞、神经细胞等均有表达，以肝本质细胞中含量最丰富。中含量最丰富。LRP功能：能识别多种配体蛋白酶一蛋白酶抑功能：能识别多种配体蛋白酶一蛋白酶抑制剂、毒素的受体、某些病毒、乳铁蛋白等并制剂、毒素的受体、某些病毒、乳铁蛋白等并在体内去除之。在体内去除之。LRP是含是含ApoE的的CM残粒、残粒、VLDL残粒的受体，使富含残粒的受体，使富含ApoE的的CM残粒、残粒、VLDL残粒能从血浆中快速去除。残粒能从血

15、浆中快速去除。LRP与动脉粥样硬化与动脉粥样硬化AS的构成有亲密关系。的构成有亲密关系。LRP参与了参与了LDL的氧化过程，与血管损伤有关。的氧化过程，与血管损伤有关。LRP与泡沫细胞的生成有关。与泡沫细胞的生成有关。 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学五五HDLHDL受体和受体和HDLHDL结合蛋白结合蛋白 在不同细胞的外表及细胞内已分别出了多种可与在不同细胞的外表及细胞内已分别出了多种可与HDLHDL结合的蛋白质。结合的蛋白质。某些蛋白质可特异性识别并以高亲和力与某些蛋白质可特异性识别并以高亲和力与HDLHDL结合，结合，引发下游的生物学效应

16、，称之为引发下游的生物学效应，称之为HDL-RHDL-R。有些蛋白质也可与有些蛋白质也可与HDLHDL结合，但不产生或只产生较结合，但不产生或只产生较弱的效应，那么称之为弱的效应，那么称之为HDLHDL结合蛋白结合蛋白HBPHBP。 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学六胆固醇酯转运蛋白六胆固醇酯转运蛋白 胆固醇酯转运蛋白胆固醇酯转运蛋白CETPCETP属于脂质转运蛋白属于脂质转运蛋白lipid lipid transfer proteintransfer protein，LTPLTP，是由肝、小肠、肾上腺、脾、，是由肝、小肠、肾上腺、脾、脂肪组织

17、及巨噬细胞合成的一种疏水性糖蛋白。脂肪组织及巨噬细胞合成的一种疏水性糖蛋白。cDNAcDNA编码的编码的CETPCETP含含476476氨基酸残基，分子量为氨基酸残基，分子量为53kD53kD；成熟；成熟CETPCETP含含4 4个天冬酰个天冬酰N-N-糖链，分子量为糖链，分子量为74kD74kD。 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学CETP对胆固醇的逆转运过程对胆固醇的逆转运过程 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学五、血浆脂蛋白的代谢五、血浆脂蛋白的代谢一血浆脂蛋白代谢亲密相关一血浆脂蛋白代谢亲密

18、相关的酶类的酶类参与脂质代谢的酶有：参与脂质代谢的酶有：脂蛋白脂肪酶脂蛋白脂肪酶lipoprotein lipaselipoprotein lipase，LPLLPL肝脂酶肝脂酶hepatic triglyceride lipasehepatic triglyceride lipase，HTGLHTGLLCATLCAT等。等。 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学1LPLLPL是脂肪细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞、乳腺是脂肪细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞、乳腺细胞以及巨噬细胞等本质细胞合成和分泌的一种细胞以及巨噬细胞等本质细胞合成和分泌的一种糖蛋白，分子量

19、为糖蛋白，分子量为60kD。ApoC为其必需的辅因子。为其必需的辅因子。作用是分解脂蛋白中心成分的甘油三酯，并促使作用是分解脂蛋白中心成分的甘油三酯，并促使脂蛋白之间转移胆固醇、磷脂及载脂蛋白。脂蛋白之间转移胆固醇、磷脂及载脂蛋白。活性活性LPL以同源二聚体方式存在，经过静电引力以同源二聚体方式存在，经过静电引力与毛细血管内皮细胞外表的多聚糖结合，肝素可与毛细血管内皮细胞外表的多聚糖结合，肝素可以使此结合方式的以使此结合方式的LPL释放入血，并提高其活性。释放入血，并提高其活性。 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学2HTGLHTGL亦称为肝性亦称

20、为肝性LPLhepatic LPL其特其特点：点：HTGL活性不需求活性不需求ApoC作为激活剂；作为激活剂；SDS可抑制可抑制HTGL活性，而不受高盐浓度及鱼活性，而不受高盐浓度及鱼精蛋白的抑制；精蛋白的抑制；主要作用于小颗粒脂蛋白如主要作用于小颗粒脂蛋白如VLDL残粒、残粒、CM残粒及残粒及HDL，调理胆固醇从周围组织转运，调理胆固醇从周围组织转运到肝，使肝内的到肝，使肝内的VLDL转化为转化为LDL。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学3LCATLCAT由由416个氨基酸残基组成，分子量为个氨基酸残基组成，分子量为6.3kD，属于糖蛋白。属于

21、糖蛋白。LCAT由肝脏合成释放入血液，以游离或与脂蛋由肝脏合成释放入血液，以游离或与脂蛋白结合的方式存在。白结合的方式存在。作用是将作用是将HDL中的卵磷脂的中的卵磷脂的C2位不饱和脂肪酸转位不饱和脂肪酸转移给游离胆固醇，生成溶血卵磷脂和胆固醇酯，移给游离胆固醇，生成溶血卵磷脂和胆固醇酯，使使HDL变成成熟的变成成熟的HDL球状颗粒。球状颗粒。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学二血浆脂蛋白代谢二血浆脂蛋白代谢外源性代谢途径：饮食摄入的胆固醇和外源性代谢途径：饮食摄入的胆固醇和TGTG在小肠中合成在小肠中合成CMCM及其代谢过程。及其代谢过程。内源

22、性代谢途径：包括内源性代谢途径：包括 由肝脏合成由肝脏合成VLDLVLDL，VLDLVLDL转变为转变为IDLIDL和和LDLLDL，LDLLDL被肝脏或其它器官代谢的过程。被肝脏或其它器官代谢的过程。 HDLHDL的代谢过程。的代谢过程。 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学1CM代谢代谢从食物中摄取的脂质从食物中摄取的脂质( (主要是主要是TG)TG)，在肠内被胰腺，在肠内被胰腺分泌的脂酶水解成脂肪酸和甘油一酯分泌的脂酶水解成脂肪酸和甘油一酯MGMG，由，由肠粘膜吸收进入细胞内再重新合成肠粘膜吸收进入细胞内再重新合成TGTG及磷脂。及磷脂。新合

23、成的新合成的TGTG与少量的胆固醇、磷酯、与少量的胆固醇、磷酯、ApoB48ApoB48、ApoAIApoAI构成构成CMCM，经淋巴管至胸导管进入血液循环。，经淋巴管至胸导管进入血液循环。CMCM在血液中从在血液中从HDLHDL转移获得转移获得ApoCApoC和和ApoEApoE而变化成熟而变化成熟型型CMCM。接着接着CMCM中的中的TGTG被被LPLLPL水解产生甘油一酯及脂肪酸，水解产生甘油一酯及脂肪酸，后者被细胞摄取利用或储存。后者被细胞摄取利用或储存。剩下的残留物被称为剩下的残留物被称为CMCM残粒残粒(CM remnant)(CM remnant)，随血，随血液进入肝脏迅速被代谢

24、。液进入肝脏迅速被代谢。 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学CM代谢代谢全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学2VLDL、IDL、LDL代谢代谢体内合成的内源性体内合成的内源性TGTG与与ApoB100ApoB100、C C、E E等在肝脏合等在肝脏合成成VLDLVLDL释放入血液。释放入血液。TGTG经血管壁的经血管壁的LPLLPL水解生成脂肪酸被末梢组织利用。水解生成脂肪酸被末梢组织利用。失去失去TGTG之后的之后的VLDLVLDL转变成转变成VLDLVLDL残粒残粒IDLIDL。IDLIDL有两条

25、代谢途径：一是直接经肝脏有两条代谢途径：一是直接经肝脏ApoEApoE受体结受体结合摄取进入肝细胞代谢；二是经合摄取进入肝细胞代谢；二是经HTGLHTGL作用转变成作用转变成以以ApoB100ApoB100和游离胆固醇为主要成份的和游离胆固醇为主要成份的LDLLDL，经末，经末梢组织的梢组织的LDL-RLDL-R结合进入细胞内，进展代谢。结合进入细胞内，进展代谢。 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学VLDL、IDL、LDL代谢代谢全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学3HDL代谢代谢在肝脏和小肠合成时属

26、于未成形的在肝脏和小肠合成时属于未成形的HDLHDLnascent HDLnascent HDL，HDLnHDLn。HDLnHDLn获取获取CMCM、VLDLVLDL表层的磷脂和表层的磷脂和ApoAApoA而变成园盘状的新而变成园盘状的新生生HDLHDL。新生新生HDLHDL从末梢组织细胞膜获得游离胆固醇，经从末梢组织细胞膜获得游离胆固醇，经LCATLCAT作用生作用生成成CECE进入进入HDLHDL内部，构成成熟型内部，构成成熟型HDL3HDL3和球型和球型HDL2HDL2。HDL3HDL3在在CETPCETP介导下，与介导下，与VLDLVLDL、LDLLDL进展进展CE/TGCE/TG交换

27、，使末梢交换，使末梢组织的组织的FCFC保送到肝脏。保送到肝脏。HDL2HDL2中的中的TGTG经肝脏的经肝脏的HTGLHTGL作用，可以再变成作用，可以再变成HDL3HDL3，使，使HDLHDL在在逆转运中再利用，从而防止动脉粥样硬化的发生。逆转运中再利用，从而防止动脉粥样硬化的发生。 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学第二节第二节 脂蛋白代谢紊乱脂蛋白代谢紊乱一、高脂蛋白血症一、高脂蛋白血症二、低脂蛋白血症二、低脂蛋白血症全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学一、高脂蛋白血症一、高脂蛋白血症高脂血症

28、高脂血症hyperlipidemia是指血浆中胆固醇和是指血浆中胆固醇和/或或TG程度升高。程度升高。由于血脂在血中以脂蛋白方式运输，因此实践上由于血脂在血中以脂蛋白方式运输，因此实践上高脂血症就是高脂蛋白血症高脂血症就是高脂蛋白血症hyperlipoproteinemia，HLP。 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学一高脂蛋白血症的分型一高脂蛋白血症的分型 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学二原发性高脂蛋白血症二原发性高脂蛋白血症 家族性多基因性高胆固醇血症家族性多基因性高胆固醇血症家族性高胆固醇

29、血症家族性高胆固醇血症家族性异常家族性异常-脂蛋白血症脂蛋白血症家族性乳糜微粒血症家族性乳糜微粒血症 家族性高甘油三酯血症家族性高甘油三酯血症 其他家族性高脂血症其他家族性高脂血症全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学三继发性脂蛋白血症三继发性脂蛋白血症 糖尿病糖尿病甲状腺功能减退甲状腺功能减退 肾脏疾患肾脏疾患肥胖症肥胖症 酗酒酗酒 药物药物全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学四高四高HDL血症血症血浆血浆HDL-HDL-胆固醇胆固醇HDL-CHDL-C含量超越含量超越2.6mmol/L2.6mmol/

30、L，定义为高，定义为高HDLHDL血症。血症。CETPCETP及及HTGLHTGL活性降低是引起高活性降低是引起高HDLHDL血症的主要缘由。假设血症的主要缘由。假设CETPCETP缺陷，缺陷，HDLHDL内的内的CECE蓄积，使蓄积，使HDLHDL增多；假设增多；假设HTGLHTGL活性降低，活性降低，HDLHDL被肝细胞摄取减少并使被肝细胞摄取减少并使HDL2HDL3HDL2HDL3转换过程减慢而停留在血转换过程减慢而停留在血液中，并使其浓度添加，出现高液中，并使其浓度添加，出现高HDLHDL血症。血症。高高HDLHDL血症分为原发性和继发性两类。血症分为原发性和继发性两类。原发性高原发性

31、高HDLHDL血症的病因有：血症的病因有：CETPCETP缺损；缺损；HTGLHTGL活性降低；活性降低；其他。其他。继发性高继发性高HDLHDL血症病因有：运动失调；饮酒过量；原发血症病因有：运动失调；饮酒过量；原发性胆汁性肝硬化；治疗高脂血症的药物引起；其他。性胆汁性肝硬化；治疗高脂血症的药物引起；其他。 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学二、低脂蛋白血症二、低脂蛋白血症 低脂蛋白血症的诊断低脂蛋白血症的诊断 血 清血 清 T C 在在 3 . 3 m m o l / L 以 下 ， 或以 下 ， 或 T G 在在0.45mmol/L以下，或

32、以下，或LDL-C在在2.1mmol/L以下者，以下者，属于低脂蛋白血症。属于低脂蛋白血症。TC和和TG同时降低者多见，同时降低者多见，脂蛋白中多见脂蛋白中多见HDL、LDL和和VLDL降低。降低。病因病因 原发性低脂蛋白血症的缘由有原发性低脂蛋白血症的缘由有ApoA缺乏或变缺乏或变异、异、LCAT缺乏症、无缺乏症、无-脂蛋白血症脂蛋白血症Tangier病、无病、无-脂蛋白血症、低脂蛋白血症、低-脂蛋白血症等。脂蛋白血症等。 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学三种无脂蛋白血症的主要特点三种无脂蛋白血症的主要特点 全国高等学校医学规划教材全国高等学

33、校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学第三节第三节 脂蛋白代谢紊乱的生物化学检验脂蛋白代谢紊乱的生物化学检验一、血浆脂质测定一、血浆脂质测定二、血浆脂蛋白测定二、血浆脂蛋白测定三、血浆载脂蛋白测定三、血浆载脂蛋白测定四、血浆脂代谢相关酶的测定四、血浆脂代谢相关酶的测定五、脂质相关蛋白基因突变分析五、脂质相关蛋白基因突变分析六、血脂和脂蛋白检测的临床运用六、血脂和脂蛋白检测的临床运用 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学一、血浆脂质测定一、血浆脂质测定一一TG测定测定 1化学法化学法 2酶法测定酶法测定 二二TC测定测定 1化学法化学法 2

34、酶法测定酶法测定 三三FFA测定测定四磷脂测定四磷脂测定 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学一甘一甘 油油 三三 酯酯 测测 定定1化学法化学法 根本操作步骤包括：根本操作步骤包括： TG的抽提分别有机溶剂，去除干扰物的抽提分别有机溶剂，去除干扰物PL、FG等等 吸附剂或分溶抽提；吸附剂或分溶抽提； 皂化皂化 使使TG水解生成甘油；水解生成甘油； 氧化氧化 甘油成甲醛甘油成甲醛 过碘酸；过碘酸； 显色定量甲醛。显色定量甲醛。 A.甲醛与变色酸在硫酸溶液中加热产生紫红色甲醛与变色酸在硫酸溶液中加热产生紫红色Eegriwe反响，反响，570nm测定吸

35、光度。测定吸光度。 B.甲醛与乙酰丙酮在铵离子存在下加热生成黄色的产物甲醛与乙酰丙酮在铵离子存在下加热生成黄色的产物Hantgsch反响，反响，412nm测定吸光度。测定吸光度。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学2甘甘 油油 三三 酯酯 酶酶 法法 测测 定定评价：操作简便，快速准确，并能在自动化生物化学分析仪上进展批量测定。 所测结果包括了血清中FG，如何处理？全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学TG参考范围与临床意义参考范围与临床意义血清TG参考范围：成人0.451.69mmol/L40150mg

36、/dl。目前我国的血脂异常防治建议提出，成年人的适宜TG程度1.69mmol/L150mg/dl；1.69mmol/L为TG升高。TG升高可见于家族性高TG血症、家族性混合性高脂血症、冠心病、动脉粥样硬化、糖尿病、肾病综合症、甲状腺功能减退、胆道堵塞、糖原累积症、妊娠、口服避孕药、酗酒等。 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学二二 总总 胆胆 固固 醇醇 测测 定定血清中胆固醇：血清中胆固醇：CE占占70；FC占占30。测定方法分为化学法和酶法两大类。测定方法分为化学法和酶法两大类。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学

37、临床检验生物化学1化学比色法化学比色法普通包括：抽提；皂化；毛地黄皂苷沉淀纯化；普通包括：抽提；皂化；毛地黄皂苷沉淀纯化；显色比色四个阶段。显色比色四个阶段。颜色反响有三类：颜色反响有三类： 1胆固醇与醋酐胆固醇与醋酐-硫酸试剂产生蓝绿色。如硫酸试剂产生蓝绿色。如L-B法、法、Abell法。法。 2胆固醇与高铁硫酸试剂产生紫红色，如硫磷铁法。胆固醇与高铁硫酸试剂产生紫红色，如硫磷铁法。 3胆固醇与邻苯二甲醛硫酸生成紫红色，如邻苯二胆固醇与邻苯二甲醛硫酸生成紫红色，如邻苯二甲醛法。甲醛法。代表性的方法：代表性的方法： 1硫磷铁法硫磷铁法Bowman法：用无水乙醇提取胆固法：用无水乙醇提取胆固醇，

38、沉淀蛋白质，提取液中加硫磷铁试剂显色。醇，沉淀蛋白质，提取液中加硫磷铁试剂显色。 2 Abell法：血清中参与氢氧化钠乙醇溶液，使法：血清中参与氢氧化钠乙醇溶液，使CE皂化为皂化为FC；参与正己烷；参与正己烷-水提取后，水提取后，FC进入正己烷相，以进入正己烷相，以醋酐醋酐-硫酸试剂显色定量。硫酸试剂显色定量。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学2. 总总 胆胆 固固 醇酶法测定醇酶法测定1 CE在胆固醇酯酶在胆固醇酯酶(cholesterol esterase，CHE)作用作用下水解成下水解成FC和和FFA；2FC再经胆固醇氧化酶再经胆固醇氧化酶

39、(cholesterol oxidase，COD)氧氧化成化成4胆甾烯酮和胆甾烯酮和H2O2；3再分别定量再分别定量O2的耗费或者的耗费或者H2O2的生成量，或者的生成量，或者4胆甾烯酮生成量，以作为胆甾烯酮生成量，以作为FC的定量根据。的定量根据。A.测定测定4胆甾烯酮法胆甾烯酮法 240nmB.定量定量O2的耗费的耗费 电位丈量电位丈量C.测定测定H2O2的生成量的生成量全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学TC参考范围与临床意义参考范围与临床意义血清血清TC参考范围：成人参考范围：成人2.855.69mmol/L110220mg/dl。目前我国

40、的血脂异常防治建。目前我国的血脂异常防治建议中以议中以5.17mmol/L200mg/dl为适宜程度，为适宜程度，5.205.66mmol/L201 219mg/dl为临界范围为临界范围或边缘升高，或边缘升高，5.69mmol/L220mg/dl为升高。为升高。高胆固醇血症和高胆固醇血症和AS的发生有亲密关系。的发生有亲密关系。TC升高见于各种高脂蛋白血症、梗阻性黄疸、肾升高见于各种高脂蛋白血症、梗阻性黄疸、肾病综合征、甲状腺功能低下、慢性肾功能衰竭、病综合征、甲状腺功能低下、慢性肾功能衰竭、糖尿病等。此外，吸烟、饮酒、紧张、血液浓缩糖尿病等。此外，吸烟、饮酒、紧张、血液浓缩等也可使等也可使T

41、C升高。升高。TC降低见于各种脂蛋白缺陷形状、肝硬化、恶性降低见于各种脂蛋白缺陷形状、肝硬化、恶性肿瘤、营养不良、巨细胞性贫血等。肿瘤、营养不良、巨细胞性贫血等。 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学三游离脂肪酸测定三游离脂肪酸测定 FFA在血中浓度很低，成人在血中浓度很低，成人0.40.9mmol/L；儿童和肥胖成人；儿童和肥胖成人稍高。其含量程度受脂代谢、糖代谢和内分泌功能等要素影响。稍高。其含量程度受脂代谢、糖代谢和内分泌功能等要素影响。血中血中FFA半寿期为半寿期为12min，极短。血清中的，极短。血清中的FFA是与清蛋白是与清蛋白结合进展

42、运输。结合进展运输。 FFA测定标本：一定要留意在测定标本：一定要留意在4条件下分别血清并进展测定。条件下分别血清并进展测定。由于血中有各种脂肪酶存在，易使血中由于血中有各种脂肪酶存在，易使血中TG和和PL的酯型脂肪酸的酯型脂肪酸分解成非酯化的分解成非酯化的FFA，使血中，使血中FFA值上升。储存的标本仅限于值上升。储存的标本仅限于24h内。内。血清血清FFA测定方法：测定方法： 1非酶法测定非酶法测定 非酶法测定包括滴定法、比色法、原子吸非酶法测定包括滴定法、比色法、原子吸收分光光度法和高效液相层析法。前三种方法准确性差，高效收分光光度法和高效液相层析法。前三种方法准确性差，高效液相层析法仪

43、器太昂贵，不便于批量操作。液相层析法仪器太昂贵，不便于批量操作。 2酶测定法酶测定法 血清中主要用脂肪酶测定。可分别测定产物血清中主要用脂肪酶测定。可分别测定产物乙酰乙酰CoA、AMP或辅酶或辅酶A(CoA)，进展定量。酶法测定结果准，进展定量。酶法测定结果准确可靠快速，易于批量检测。确可靠快速，易于批量检测。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学四磷脂测定四磷脂测定血清中血清中PL包括：卵磷脂包括：卵磷脂(60)和溶血卵磷脂和溶血卵磷脂(210)； 磷脂酰乙醇胺等磷脂酰乙醇胺等(2)； 鞘磷脂鞘磷脂(20)。血清血清PL定量方法定量方法: 1化学测

44、定法化学测定法 抽提分别；灰化；抽提分别；灰化； 显色、比色。显色、比色。 2酶测定法酶测定法 可分别利用磷脂酶可分别利用磷脂酶A、B、C、D等等4种酶作用，种酶作用，加水分解，测定其产物，对加水分解，测定其产物，对PL进展定量，普通多采用磷脂酶进展定量，普通多采用磷脂酶D(PL-D)。PL-D可作用于含有卵磷脂、溶血卵磷脂和鞘磷脂以及可作用于含有卵磷脂、溶血卵磷脂和鞘磷脂以及含胆碱的磷脂，这三种磷脂约占血清总磷脂的含胆碱的磷脂，这三种磷脂约占血清总磷脂的95。 该法快速准确，便于自动化仪器进展批量检测。该法快速准确，便于自动化仪器进展批量检测。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材

45、 临床检验生物化学临床检验生物化学二、血浆脂蛋白测定二、血浆脂蛋白测定一电泳法一电泳法二超速离心法二超速离心法三脂蛋白胆固醇测定三脂蛋白胆固醇测定1沉淀分别法沉淀分别法 2均相测定法均相测定法 3间接法间接法 四四Lp(a)测定测定全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学二、血浆脂蛋白测定二、血浆脂蛋白测定一电泳分别法一电泳分别法原理：不同脂蛋白因蛋白质含量不同、其电荷量不原理：不同脂蛋白因蛋白质含量不同、其电荷量不同，故可用电泳方法进展分别，并根据血浆脂蛋白同，故可用电泳方法进展分别，并根据血浆脂蛋白电泳迁移率不同予以判别确认。电泳迁移率不同予以判别

46、确认。方法：方法： 1预染、电泳预染、电泳:血浆脂蛋白用亲脂染料如苏丹黑血浆脂蛋白用亲脂染料如苏丹黑B等进展预染再电泳；等进展预染再电泳； 2扫描、计算：置于光密度计内进展扫描，计扫描、计算：置于光密度计内进展扫描，计算出各种脂蛋白的百分比，该数值乘以血浆总脂量，算出各种脂蛋白的百分比，该数值乘以血浆总脂量，即可求出即可求出-脂蛋白、脂蛋白、-脂蛋白和前脂蛋白和前-脂蛋白含量。脂蛋白含量。电泳支持物普通常用醋酸纤维薄膜、琼脂糖凝胶或电泳支持物普通常用醋酸纤维薄膜、琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶。聚丙烯酰胺凝胶。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学二超速

47、离心分别纯化法二超速离心分别纯化法超速离心法：根据血浆中各种脂蛋白的比重超速离心法：根据血浆中各种脂蛋白的比重(密密度度)的差别，在强大离心力作用下进展分别纯化的差别，在强大离心力作用下进展分别纯化的一种方法。的一种方法。普通操作方法：将血浆置于已预备好的不同密普通操作方法：将血浆置于已预备好的不同密度梯度的盐溶媒介质中，在强大离心力作用下，度梯度的盐溶媒介质中，在强大离心力作用下，各脂蛋白依其本身的各脂蛋白依其本身的Sf不同，分散于离心管中不同，分散于离心管中的密度梯度溶媒层，到达分别纯化的目的。的密度梯度溶媒层，到达分别纯化的目的。超速离心法是分别纯化脂蛋白的有效技术超速离心法是分别纯化脂

48、蛋白的有效技术,目前目前广泛运用于脂蛋白、载脂蛋白代谢的研讨中。广泛运用于脂蛋白、载脂蛋白代谢的研讨中。 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学三血浆脂蛋白胆固醇测定三血浆脂蛋白胆固醇测定脂蛋白中胆固醇含量较为稳定，因此目前脂蛋白中胆固醇含量较为稳定，因此目前以测定脂蛋白中胆固醇总量的方法作为脂以测定脂蛋白中胆固醇总量的方法作为脂蛋白的定量根据。蛋白的定量根据。高密度脂蛋白高密度脂蛋白-胆固醇胆固醇(HDL-C)低密度脂蛋白低密度脂蛋白-胆固醇胆固醇(LDL-C)极低密度脂蛋白极低密度脂蛋白-胆固醇胆固醇(VLDL-C)全国高等学校医学规划教材全国高

49、等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学1. 沉淀分别法沉淀分别法原理：脂蛋白的组成及理化性质不同，在不同的聚阴离原理：脂蛋白的组成及理化性质不同，在不同的聚阴离子、子、2价金属离子价金属离子(Mn2+，Mg2+、Ca2+、Ni2+、Co2+)及及不同不同pH值条件下，使脂蛋白与聚阴离子结合构成复合物值条件下，使脂蛋白与聚阴离子结合构成复合物沉淀，以到达分别定量各种脂蛋白的目的。沉淀，以到达分别定量各种脂蛋白的目的。方法：方法： 1肝素肝素-锰沉淀血清中锰沉淀血清中VLDL和和LDL，离心沉淀，离心沉淀，HDL那么留在上清液，再定量那么留在上清液，再定量HDL-C量，即为血浆量，即

50、为血浆HDL的量。的量。 2聚乙烯硫酸盐沉淀聚乙烯硫酸盐沉淀LDL，离心去上清液留沉淀。，离心去上清液留沉淀。再定量沉淀其中的再定量沉淀其中的LDL-C，即血浆的，即血浆的LDL量。量。评价：操作简单，无需昂贵的仪器，是临床运用的检测评价：操作简单，无需昂贵的仪器，是临床运用的检测方法。方法。 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学2匀相测定法匀相测定法1血浆高密度脂蛋白胆固醇测定血浆高密度脂蛋白胆固醇测定 原理：原理：CM、VLDL、LDL在多聚阴离子在多聚阴离子存在下与试剂存在下与试剂发生凝集构成遮避圈，抑发生凝集构成遮避圈，抑制其外表的游离胆固

51、醇反响或试剂制其外表的游离胆固醇反响或试剂与与CM、VLDL、LDL中的胆固醇反响生成中的胆固醇反响生成H2O2，并将，并将H2O2去除；试剂去除；试剂与与HDL构成可溶性复合体，使构成可溶性复合体，使HDL中的胆固醇中的胆固醇直接与酶试剂反响。直接与酶试剂反响。 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学SPD法测定法测定HDL-C在血清中参与试剂在血清中参与试剂，在反响促进剂合成的多，在反响促进剂合成的多聚物聚物/ /外表活性剂的作用下，血清中外表活性剂的作用下，血清中CMCM、VLDLVLDL及及LDLLDL与试剂构成可溶性复合物，其表层的与试剂构

52、成可溶性复合物，其表层的FCFC在在CHODCHOD的催化下反响生成的催化下反响生成H2O2H2O2，H2O2H2O2在在PODPOD的作用下被去的作用下被去除。除。参与试剂参与试剂，与，与HDLHDL颗粒成为可溶性复合物，颗粒成为可溶性复合物，HDLHDL中的胆固醇与胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶反响，中的胆固醇与胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶反响，生成生成H2O2H2O2，并作用于色原体产生颜色反响，其颜，并作用于色原体产生颜色反响，其颜色的深浅与色的深浅与HDL-CHDL-C的含量成正比。的含量成正比。 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学HDL-C参考

53、范围与临床意义参考范围与临床意义血清血清HDL-C参考范围：参考范围： 成年男性成年男性1.161.42mmol/L4555 mg/dl 女性女性1.291.55 mmol/L5060mg/dlHDL-C与冠心病的开展成负相关。与冠心病的开展成负相关。HDL-C降低见于急性感染、糖尿病、慢性降低见于急性感染、糖尿病、慢性肾功能衰竭、肾病综合征等。肾功能衰竭、肾病综合征等。HDL-C含量过高如超越含量过高如超越2.6mmol/L，也，也属于病理形状，为高属于病理形状，为高HDL血症。高血症。高HDL血血症可分为原发性和继发性两类。症可分为原发性和继发性两类。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医

54、学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学2 血浆血浆LDL-C测定测定SUR法法SUR法检测原理：法检测原理： 试剂试剂中的外表活性剂中的外表活性剂1能改动能改动LDL以外的脂蛋以外的脂蛋白白HDL、CM和和VLDL等构造并解离，所释等构造并解离，所释放出来的微粒化胆固醇分子与胆固醇酶试剂反响，放出来的微粒化胆固醇分子与胆固醇酶试剂反响，产生的产生的H2O2在缺乏偶联剂时被耗费而不显色；在缺乏偶联剂时被耗费而不显色； 加试剂加试剂，外表活性剂，外表活性剂2使使LDL颗粒解离释放胆颗粒解离释放胆固醇，参与固醇，参与Trinder反响而显色，色泽深浅与反响而显色，色泽深浅与LDL-C量呈比例。

55、量呈比例。 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学LDL-C参考范围与临床意义参考范围与临床意义血清血清LDL-C参考范围：成人参考范围：成人2.073.11 mmol/L 80120 mg/dlLDL是是AS的主要危险要素之一，血清的主要危险要素之一，血清LDL-C程度越高，程度越高，AS的危险性越大。的危险性越大。血清血清LDL-C程度随年龄添加而升高。高脂、高热量饮食、运程度随年龄添加而升高。高脂、高热量饮食、运动少和精神紧张等可使动少和精神紧张等可使LDL-C程度升高。程度升高。临床上临床上LDL-C升高可见于家族性高胆固醇血症、家族性升高可

56、见于家族性高胆固醇血症、家族性apoB缺陷症、混合性高脂血症、糖尿病、甲状腺功能低下、缺陷症、混合性高脂血症、糖尿病、甲状腺功能低下、肾病综合征、梗阻性黄疸、慢性肾功能衰竭、肾病综合征、梗阻性黄疸、慢性肾功能衰竭、Cushings综综合征、妊娠、多发性肌瘤、某些药物的运用等。合征、妊娠、多发性肌瘤、某些药物的运用等。LDL-C降低见于家族性无降低见于家族性无或低或低-脂蛋白血症、营养不良、脂蛋白血症、营养不良、甲状腺功能亢进、消化吸收不良、肝硬化、慢性耗费性疾病、甲状腺功能亢进、消化吸收不良、肝硬化、慢性耗费性疾病、恶性肿瘤等。恶性肿瘤等。 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临

57、床检验生物化学临床检验生物化学3间接法间接法利用血清中利用血清中TC、TG和和HDL-C含量，按公式推算含量，按公式推算出出LDL-C的量。的量。Friedewald于于1972年发明的一个阅历式：年发明的一个阅历式： LDL-C=TCHDL-CTG/2.2以以mmol/L 计计 或或 LDL-C=TCHDL-CTG/5以以mg/dl计。计。应留意运用这一公式有如下条件：应留意运用这一公式有如下条件： 空腹血清不含空腹血清不含CM TG浓度在浓度在4.60mmol/L以下以下 型高脂血症除外型高脂血症除外 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学四四

58、Lp(a)测定法测定法目前主要采用免疫透射比浊法目前主要采用免疫透射比浊法ITA、免疫散射、免疫散射比浊法比浊法(INA)、酶联免疫吸附实验、酶联免疫吸附实验ELISA、发、发射免疫测定法射免疫测定法RIA和免疫分散法和免疫分散法RID。免疫透射比浊法运用最为广泛，其原理是利用免疫透射比浊法运用最为广泛，其原理是利用Apo(a)的单克隆抗体，采用多点定标的单克隆抗体，采用多点定标57点，点，用用log-logit多元回归方程进展曲线拟合运算，该法多元回归方程进展曲线拟合运算，该法灵敏度高，便于自动化批量检测。灵敏度高，便于自动化批量检测。Lp(a)-C测定法：防止或减少由于抗原测定法：防止或减

59、少由于抗原Apo(a)多态多态性不同所呵斥的性不同所呵斥的Lp(a)定量的准确性。定量的准确性。测定方法有超速离心法、麦胚血凝素法和琼脂糖测定方法有超速离心法、麦胚血凝素法和琼脂糖凝胶电泳法，后两种方法在临床运用较广。凝胶电泳法，后两种方法在临床运用较广。参考值：参考值：30mg/L以下以下全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学三、载脂蛋白测定三、载脂蛋白测定血清载脂蛋白血清载脂蛋白(Apo)包括包括ApoAI、A 、B100、C 、C、E和和(a)，已属常规检测工程。，已属常规检测工程。血清中载脂蛋白均结合于脂蛋白中，测定时要加血清中载脂蛋白均结合

60、于脂蛋白中，测定时要加用解链剂，使脂蛋白中用解链剂，使脂蛋白中Apo暴露再进展测定。暴露再进展测定。目前测定血清中载脂蛋白的含量的方法是利用相目前测定血清中载脂蛋白的含量的方法是利用相应特异抗体试剂进展测定。应特异抗体试剂进展测定。现有羊抗人现有羊抗人ApoAI、A、B100、C、C、E和和(a)等抗体试剂。测定原理是将某一特异抗体加等抗体试剂。测定原理是将某一特异抗体加到待测人血清中，即与血清中相应抗原构成抗原到待测人血清中，即与血清中相应抗原构成抗原抗体复合物，根据复合物的量，即可测出血清中抗体复合物，根据复合物的量，即可测出血清中某一某一Apo含量。含量。全国高等学校医学规划教材全国高等