生化简明教程章节习题集

1、第三章 酶一、练习题目 (一)名词解释 1全酶 2别构酶 3别构效应 4单体酶 5寡聚酶 6诱导酶 7固定化酶 8酶原 9酶原激活 10序变模型 11齐变模型 12同I酶 13酶的最适pH 14共价调节酶 15酶的辅助因子 16酶的活性中心 17酶的抑制作用 18酶的最适底物 19多酶体系 20邻近效应 21定向效应 22竞争性抑制作用 23非竞争性抑制作用 24反竞争性抑制作用 25核糖酶 26细胞外酶 27细胞内酶 28酶活力 29酶的活力单位 30酶的比活力 31酶的转换系数 32酶工程 33生物酶工程 34维生素 (二)问答题 1简述酶和一般催化剂的共性及特性 2以胰凝乳蛋白酶为例，说

2、明酶作用的机理。 3简述酶促反应速度的影响因素。 4米氏方程 的推导过程。 5简述米氏常数Km值的物理意义。 6简述酶的分离、提纯的步骤。 7遵循米氏方程式的酶催化反应中，求(1)当V=01Vmax时底物浓度 (2)当V=09Vmax时底物浓度。 8过氧化氢酶的Km值为25×10-2M，当底物过氧化氢浓度为l00mM时，求过氧化氢酶被底物所饱和的百分数。 9已知无抑制剂时：Km=11×10-5M，Vmax=50 mmin，有抑制剂时Km=31×10-5M， Vmax=50mmin，试确定抑制剂类型。 10某酶Km为47×10-5M，Vmax是22mmin

3、，在2×10-4M底物和下述抑制剂存在的情况下反应速度为多少?：5×10-4M竞争性抑制剂；5×10-4M非竞争性抑制剂；以上两种情况的 Ki都是3×10-4M。 1l称取25mg蛋白酶粉配制成25ml酶溶液，从中取出01ml酶液，以酪蛋白为底物，用 Folin一酚比色法测定酶活力，得知每小时产生1500g酪氨酸。另取2ml酶液，测得蛋白氮为0.2mg，若以每分种产生1g酪氨酸的酶量为1个活力单位计算，求出：每ml酶液中所含蛋白质量及活力单位；比活力；l克酶制剂的总蛋白及总活力。 12写出各种水溶性维生素的辅酶(辅基)形式、中文名称、英文代号、生化功能。

4、 13进行酶活力测定时应注意什么?为什么测定酶活力时以测初速度为宜? 14为什么酶反应的酸碱催化主要不是依靠H+和OH-?酶反应中有哪些常见的亲核基团和亲电子基团?酶蛋白中既能作为质子供体又能作为质子受体的最有效又最活泼的催化基团是什么?活性中心是疏水区有何意义?15有一克淀粉酶制剂，用水溶解成1000毫升，从中取出1毫升测定淀粉酶活力，测知每5分钟分解0.25克淀粉，计算每克酶制剂所含的淀粉酶活力单位数?(已知淀粉酶活力单位的定义为：在最适条件下每小时分解l克淀粉的酶量称为1个活力单位。) 16怎样区别不可逆抑制剂和可逆抑制剂? (三)填空 1酶是生物细胞产生的以_为主要成分的生物催化剂。

5、2根据酶的组成可分为_和_两类。 3组成酶的蛋白质叫_，其酶蛋白与辅助因子结合后所形成的复合物称为_。 4国际系统分类中分类的原则是将所有的酶促反应按反应性质分为_大类，分别为_ _ _ _ _ _。 5酶的活性中心有两个功能部位，即_部位和_部位。 6酶的结构专一性包括_ _ _，酶的立体异构专一性分为_ _专一性。 7酶分子中具有催化功能的亲核基团主要有：组氨酸的_基，丝氨酸的_基及半胱氨酸的_基。 8胰凝乳蛋白酶在动物小肠中催化蛋白质的水解，它裂解由_族氨基酸羧基端形成的肽键，即由_，_及_形成的肽键。 9胰凝乳蛋白酶的活性中心由_ _ _组成，它的电荷转接系统中 _的共振是这个系统的有

6、效性的关键。 10胰凝乳蛋白酶为一丝氨酸蛋白酶，在其活性部位上有一个异乎寻常的亲核的_原子。 11在一定酶浓度下，如将反应速度v对底物浓度S作图，二者关系曲线是一条_。当底物浓度较低时，反应速度与底物浓度的关系呈正比，表现为_反应，随底物增加反应速度不再按正比升高，反应表现为_反应，如果再继续加大底物浓度，曲线表现为_反应。 12米氏方程的表达式为_。 13降低酶促反应活化能，提高酶催化效率的重要因素是_、_、_、 _。 14Koshland提出关于酶促作用专性的_学说。 15一条多肽链AsnLysCysAspPheGlu11eArgGluTyrGlyArg，胰蛋白酶水解可得到_个肽。 16脲

7、酶具有_专一性。 17丙二酸是_酶的_性抑制剂。碘乙酸对_酶产生_逆抑制。 18变构酶的特点是由_组成，除结合底物的活性中心外，还有结合_的 中心，动力学上不符合一般的_，当以v对s作图时，它表现出_型曲线，而非_曲线，它是_ 酶。 19米氏常数的求法有_和_方法，其中最常用的方法是_。 201km可近似地表示酶与底物_的大小，Km越大，表明_。 21某酶对A、B、C三种底物的米氏常数分别为，此酶的最适底物为_。 22合成酶类所催化反应的代表方程式是_。 23维生素B2又叫_，做为某些酶的辅基形式为_、_两种。 24泛酸在生物体内主要作为_ 的组成成分存在，其组成物的功能基因是 _，可传递_。

8、 25NAD、FAD、COA的相同之处在于三者均有_作为其成分。 26BCCP的中文名称为_。 27生物素是由噻吩环与尿素结合成的一个_化合物，它是_辅酶，它的生化作用是_。 28维生索B6在生物体内的功能形式是_和_，它可做为_酶的辅酶。 29叶酸以_作辅酶，有_和_两种形式，生化功能是_。 30硫辛酸的68位上有_键，缩写为_，它的生化功能是_。 3l维生素通常根据它们的溶解性质分为_、_两大类，水溶性维生素主要是一 _族。包括_、_、_、_、_、_、_、_，另外还有维生素_，脂溶性维生素有_、_， _和_。32人类若缺乏维生素_，即产生脚气病。（三）填空1蛋白质 2单成份酶、双成分酶3酶

9、蛋白、全酶4六、氧化还原酶类、转移酶类、水解酶类、裂合酶类、异构酶类、合成酶类5结合部位、催化部位6键专一性、基团专一性、绝对专一性、旋光异构专一性、几何异构专一性7咪唑、羟基、巯基8芳香、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸9Aspl02、His57、Serl95、氢键10氧11双曲线、一级反应、混合级反应、零级反应1213邻近定向效应、诱导契合、共价催化、酸碱催化、微环境影响14诱导契合153 16绝对17琥珀酸脱氢酶、竞争、巯基、不可18多个亚基、调节物、别构、米氏方程、S、双、寡聚酶19双倒数作图法、V对V/(S)作图法、双倒数作图法20亲合力、亲合力越小21C22A+B+ATPATP十ADP+P

10、i23核黄素、FMN、FAD24CoA、ACP、一SH、酰基25AMP26生物素羧基载体蛋白27双环、羧化酶、固定C02。28磷酸吡哆醛、磷酸吡哆胺、转氨29还原型产物、DHF、THF、转移一碳基团 SH30二硫、L 、传递氢和酰基作用 SH31水溶性维生素、脂溶性维生素、B、B1(硫胺素)、B2(核黄素)、烟酸和烟酰胺、B6(吡哆素)、泛酸、生物素、叶酸、B12(钴胺素)、C、A、D、E、K32B1(四)选择题 1酶在催化反应时将产生下列哪种能量效应( )。 提高反应物能量 降低反应物能量 降低反应活化能 降低了自由能 2淀粉酶是( )。 合成酶类 水解酶类 裂解酶类 氧化还原酶类 3延胡索

11、酸酶对延胡索酸的专一性为( )。 绝对专一 相对专一 立体专一 基团专一 4关于米氏常数(Km)下列说法哪一项是正确的( )。 酶促反应达到最大反应速度时的底物浓度。 Km随底物浓度的增大而增大。 它是酶促反应的特征性常数。 随酶浓度的增大而减少。 5酶催化反应的最适温度( )。 与反应时间长短无关 随反应时间的延长而提高 随反应时间的延长而降低。 6当反应速度是最大反应速度的90时，其Km值等于( )。 19S 16S 13S 12S7目前公认的酶与底物结合的学说为( )。 活性中心学说 诱导契合学说 锁钥学说8有机磷化合物、有机汞化合物等是一种( )。 竞争性抑制剂 不可逆抑制剂 非竞争性

12、抑制剂 9一个酶的竞争性抑制剂产生下列哪种动力学效应( )。Km增大，Vmax不变 Km不变，Vmax减小Km减小，Vmax不变 Km不变，Vmax增大 10变构酶是一种( )。 诱导酶 单体酶 寡聚酶 多酶体系 11有机磷杀虫剂其杀虫机制是有机磷化合物与乙酰胆碱酯酶活性中心的哪一个基团发生反应( )。 , 巯基 羧基 羟基 咪唑基 12酶保持催化活性必须( )。 酶分子的完整无缺 有金属离子参加 有辅酶参加 有特定构象的活性中心及必需基团。 13关于竞争性抑制剂作用哪项是错误的( )。 抑制剂与底物结构类似 抑制剂与底物一样，与酶活性中心进行可逆结合 抑制剂与酶结合，但不被酶催化形成产物 抑

13、制作用不能用提高底物浓度解除 14关于酶催化反应机制的叙述哪项是错误的( )。 ES复合物形成是催化反应的先决条件。 ES复合物形成是可逆的并可进一步使底物形成产物。 s通过诱导契合结合在酶活性中心上。 一个酶分子只能催化一个底物转化后而被消耗。 15当酶与底物结合形成ES复合物时( )。 酶和底物的构象都发生改变 主要是酶构象发生改变 主要是底物构象发生改变 主要是辅酶构象发生改变 16转氨酶的辅酶为( )。 毗哆醛 磷酸吡哆醛 磷酸毗哆酸 焦磷酸硫胺素 17CoA的功能基团为( )。 一SH 一COOH 一OH 一NH2 18下列哪种辅酶不含有维生素( )。 CoA CoQ FAD NAD

14、 19下面有关酶活力的叙述不正确的是( )。 在酶提纯过程中，总活力逐渐下降比活力逐渐提高 酶催化反应速度愈大，酶活力也愈大 测定酶活力大小即测定酶促反应速度的快慢 为了使测定准确，通常将酶与底物先混合一段时间后，再测定反应速度大小 20含有金属元素的维生素是( )。 VB1 VB2 VB6 VB12 21丙酮酸脱氢酶系未涉及的维生素是( )。 硫胺素 核黄素 生物素 泛酸 22指出哪种情况下酶的纯度最高( )。 500mg蛋白中含270酶活力单位 300mg蛋白中含130酶活力单位 700mg蛋白中含 300酶活力单位 200mg蛋白中含110酶活力单位 23糙皮病的治疗可以用( )。 硫胺

15、素 烟酸 吡哆醇 泛酸醛缩酶 24催化l、6一二磷酸果糖 磷酸二羟丙酮+3磷酸甘油醛反应的酶属于( )。 氧化还原酶类 转移酶类 裂合酶类 合成酶类 25下面哪一种化合物是由谷氨酸、对氨基苯甲酸和一个蝶啶合成的( )。 维生素B12 叶酸 生物素 辅酶A 26NAD、NADP、COA、FMN和ATP全部含有( )。 至少一个磷酸 腺苷 核糖 一种维生素 27下列物质中酰基携带体是( )。 TPP FMN HSCoA FH4 28酶的不可逆抑制的机制是由于抑制剂( )。 使酶蛋白变性 与酶的催化活性中心以共价键结合很紧 与酶的非必需基团结合 29酶学史上第一个得到结晶的酶是：( )。 胰蛋白酶

16、过氧化物酶 脲酶 核糖核酸酶 30酶的活性中心( )。具有三维空间结构 只占微小区域，并形成凹穴 是辅因子结合的部位包括所有的必需基团 包括结合部位和催化部位两个功能部位 31下列酶属于裂合酶类的有( )。 蛋白酶 醛缩酶 水化酶 过氧化物酶 转氨酶 32pH能影响酶促反应速度是因为pH能影响( )。 必需基团的解离程度 底物的解离程度酶与底物的结合程度 辅因子的解离程度 酶分子的构象 33同工酶的特点是( )。 可催化相同的反应 有多种存在形式 不同组织中，各种形式的比例不同不同形式电泳区带不同 不同形式均具有相同的理化性质 34酶的作用特点有( )。 结构不变 活性不可调节 高度催化效率

17、高度特异性 催化条件温和 35结合蛋白酶类的特点是( )。 辅因子种类多，酶蛋白种类少 酶蛋白决定催化反应类型一种酶蛋白可与多种辅团子结合 一种辅因子可与多种酶蛋白结合酶蛋白与辅因子组成全酶才有活性 36非竞争性抑制剂的特点是( )。 与酶结合后使酶不能与底物结合 不与底物竞争酶的活性中心抑制程度与底物浓度某无关 对酶的抑制程度仅仅取决于抑制剂浓度抑制剂结构与底物相似 37解释酶作用专一性机理的学说有( )。 诱导契合学说 锁钥学说 中间产物学说 张力学说 流动镶嵌学说 38与酶促反应高效性有关的因素是( )。 酸碱催化 共价催化 邻近效应与定向效应 张力学说 微环境影响 (四)选择题 1 2

18、 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 (五)是非题 1最适温度，最适pH值皆是酶的特征物理常数。 2别构酶的别构中心只负责调节酶反应速度的快慢。 3固定化酶的一个优点是比溶液酶稳定。 4变构酶的酶蛋白具有四级结构。 5同功酶是一组结构和功能相同的酶。 6酶对底物的酸碱催化作用是依靠酶溶液中的H+和OH-。 7酶的抑制作用是使酶活性下降甚至丧失，酶变性作用也是使酶的生物活性破坏。因此酶的抑制作用就是酶变性。 8Km值越大，底物与酶的

19、亲和力越高。 9非竞争性抑制作用，它的效应在于降低最大反应速度，而不改变Km值。 10竞争性抑制作用可以通过加大底物浓度来解除。 11酶反应的专性取决于辅助因子的分子结构。 12酶蛋白和辅因子只要有其中之就有催化活力。 13酶促反应的初速度与底物浓度无关。 14当底物处于饱和水平时，酶促反应的速度与酶的浓度成正比。 15并不是所有的酶都是先合成酶原，再激活发挥酶催化作用。 16辅因子与激活剂的作用相同。 17在生物体内，NADH和NADPH的生理生化作用相同。因此可相互替代。 18和其它化学反应一样，酶促反应也是随着温度升高反应速度加快。 19植物几乎能合成生长必需的所有维生素而动物和人则不能

20、。 20水溶性维生素多是构成辅酶或辅基的成分。 21因为酶的活性中心凹穴内常呈非极性环境、所以酶的活性中心的氨基酸全部为非极性氨基酸。 22烟酰胺在机体中做为NAD和NADP的组分在代谢中传递酰基。 23黄素蛋白的辅基为FMN和FAD。 24酶分子中除活性部位外，其它部位对酶的催化作用是不必要的。 25一胡萝卜素是合成维生素A的前体物质，故称为维生素A原。 (五)是非判断题1× 2 3 4 5× 6× 7× 8× 9 10 11× 12× 13× 14 15 16× 17× 18× 1

21、9 20 2L× 22× 23 24× 25二、参考答案 (一)名词解释 1全酶(holoenzyme)：酶蛋白与辅助因子结合后形成的复合物称为“全酶”，即全酶=酶蛋白+辅助因子 2别构酶(又称变构酶 allosteric enzyme)：这种酶是寡聚酶，除了活性中心外还有一个别构中心，当专一性的代谢调节物非共价地结合到别构中心时，它的催化活性即发生改变。 3别构效应(allosteric effect)：调节物与酶分子的别构中心结合后，诱导出或稳定住酶分子的某种构象，使酶活性中心对底物的结合与催化作用受到影响，从而调节酶的反应速度及代谢过程，此效应称酶的别构效应

22、。 4单体酶(1noBomerlc enzyme)：有些酶的分子结构只有一条多肽链，称为单体酶。 5寡聚酶(oligomeric enzyme)：有些酶分子结构是由两个以上的亚基组成，称为寡聚酶。亚基可以相同也可以不同，亚基间靠非共价键结合。 6诱导酶(induced enzyme)：是指当细胞中加入特定诱导物后，诱导产生的酶。 7固定化酶(immobilized enzyme)：是指通过物理或化学方法将酶固定于不溶性高分子支持物 (或载体)上。或将酶包起来成为种不溶于水的状态，而制成的种酶制剂形式。 8酶原(proenzymee)：是酶的无活性的前体。 9酶原的激活(proenzyme ac

23、tivation)：是酶的无活性的前体(酶原)转变为有活性酶的过程。 10别构酶的序变模型：这种模型主张酶分子中一个亚基结合小分子物质(底物或调节物)后构象发生了变化，其它亚基构象逐个地依次发生相同的变化。 11别构酶的齐变模型：这种模型主张别构酶的所有亚基或者全部呈坚固紧密的、不利于结合底物的“T”型状态；或者全部是松散的、有利于结合底物的“R”状态。这两种状态间的转变对于每一个亚基都是同时、齐步发生的。 12同功酶(tsoenzyme)：是指能催化同一种化学反应，但其酶蛋白本身的结构组成却有所不同的一组酶。 13酶的最适pH值(optimalpH)：pH对酶反应速度有显著的影响，在某一pH

24、值下，酶的反应具有最大速度，高于或低于此值、反应速度下降，通常称此pH为酶的最适pH值。 14共价调节酶(covalent regulatory enzyme)：由其它酶对其结构进行共价修饰，而使其在活性与非活性形成之间相互转变的一类酶。 15酶的辅助因子(cofactor)：)双成份酶分子中，除蛋白质外，非蛋白质部分称为酶的辅助因子。与酶蛋白结合松驰的称为辅酶，与酶蛋白结合紧密牢固的称为辅基。 16酶的活性中心(active center)：就是酶分子在三维结构上比较靠近的少数几个氨基酸残基或是这些残基上某些基团，它们在一级结构上可能相距甚远，甚至位于不同肽链上，通过肽链的盘绕折叠而在空间构

25、象上相互靠近，处于相邻的空间位置，形成一定的立体空间结构。对于需要辅因子的酶除具上述特点外，辅因子参与活性中心的组成，活性中心有两个功能部位，即结合部位和催化部位。 17酶的抑制作用(inhibition)：凡使酶的活力下降，但不引起酶蛋白变性的作用称为酶的抑制作用。 18酶的最适底物(又称天然底物optimal substrate)：如果一个酶有几个底物，其中Km值最小的底物，称为该酶的最适底物。 19多酶体系(multienzyme system)：是由若干种功能相关的酶分子彼此嵌合形成的复合体。 20邻近效应(proximity)：由于酶和底物间的亲和性，底物分子有向酶活性中心靠近的趋势

26、，大大增加了其有效浓度，同时也使底物分子间的反应基团相互靠近，从而提高酶催化活性的效应。 21定向效应(orientation)：当底物和酶接近时，会诱导酶分子活性中心的催化基团和结合基团与底物的反应基团之间正确定向排列，所产生的有利于酶促反应的效应。 22竞争性抑制作用(competitive inhibition)：是一种可逆的抑制作用，抑制剂和底物竞争酶的结合部位，从而影响了底物和酶的正常结合。 23非竞争性抑制作用(noncompetitive inhibition)：酶可以同时与底物和抑制剂结合，两者无竞争作用，但生成的中间产物(ESI)不能进一步分解为产物，因此酶活性降低。 24反

27、竞争性抑制作用(uncompetitive inhibition)：这类抑制剂不能同游离的酶结合，它必须在酶和底物结合后才能与酶结合形成ESI复合物，此复合物不能进一步分解为产物，这类抑制作用称为反竞争性抑制作用。 25核糖酶(irbozyme)：是RNA生物催化剂，泛指具有催化作用的RNA。 26细胞外酶：细胞内产生后，分泌到细胞外进行作用的酶。 27细胞内酶：在细胞内合成后，并不分泌到细胞外，而在细胞内起催化作用，称为细胞内酶。 28酶活力(又称酶活性enzyme activity)：是指酶催化一定化学反应的能力，酶活力的大小，用它在一定条件下所催化的某一反应速度来表示。 29酶的活力单位

28、(activeumt，U)：一个酶活力，是指在特定条件下，在lmin内能转化1mol底物的酶量，或转化底物中1mol有关基团的酶量，特定条件是选定25，最适pH值，底物浓度采用饱和浓度。 30酶的比活力(specific activity)：即每毫克酶蛋白所含酶的活力单位数。比活力高，表示酶纯度高。 31酶的转换系数(turnover number)：为单位时间内每个酶分子转换底物的分子数。 32酶工程(enzyme engineeHng)：是指酶制剂在工业上的大规模生产及应用，分化学酶工程和生物酶工程两大类。 33生物酶工程：是在化学酶工程基础上发展起来的，以酶和DNA重组技术为主的现代分子

29、生物学技术相结合的产物。它包括三个方面：用DNA重组技术大量生产酶；对酶基因修饰产生遗传修饰酶；设计新的酶基因，合成自然界没有的新酶。 34维生素(vitamin)：是一类参与生物生长发育和代谢所必需的微量的小分子有机化合物。 (二)问答题 1简述酶和一般催化剂的共性及特性1共性：用量少而催化效率高不改变化学反应的平衡点可降低反应的活化能。 特怔：酶具有极高的催化效率；酶的催化作用具有高度的底物专一性；酶的催化活性易受外界条件影响；酶的催化活性在细胞内受到严格的调节控制；酶的催化活性与辅因子有关。2以胰凝乳蛋白酶为例，说明酶作用的机理。胰凝乳蛋白酶：裂解由芳香族氨基酸(苯丙氨酸、酪氨酸及色氨酸

30、)羧基端形成的肽链。 电荷转接系统，胰凝乳蛋白酶为一丝氨酸蛋白酶，在其活性部位上有一个异乎寻常的亲核的丝氨酸侧链基团的氧原子，这个氧原子是酶的催化活性所必需的，由ASPl02、His57、Ser195之间通过氢键构成一个电荷转接系统，使得催化部位的Ser195的羟基的质子被有效地撤走，结果就使该残基上的氧原子成为强烈亲核的，His的咪唑环起到一个桥梁作用，氢键的共振是这个系统的有效性的关键。 水解肽键所需置换反应原理：胰凝乳蛋白酶的水解肽键是经过两步置换反应进行的，第一步产生一个胺：当Serl95的氧原子处于强烈亲核的状态时，氧原子对底物上的羰基进行亲核攻击，结果形成一个不稳定的四联体的过渡态

31、。这个四联体很快分解，C-N共价键裂解，产生一个酰基一酶中间产物(酯化的Ser195)及第一个产物一胺。第二步产生一个酸：由于水分子的进入，水分子的氧原子对酰基一酶中间产物的酰基碳进行亲核攻击而发生酶的脱酰基作用，使Ser195的氧与酰基碳之间的CO键裂解，产生一个酸及复原的酶。 3简述酶促反应速度的影响因素。底物浓度的影响：所有的酶反应，如果其它条件恒定，则反应速度决定于酶浓度和底物浓度，如果酶浓度保持不变，当底物浓度增加，反应速度随着增加，并以双曲线形式达到最大速度。 pH值对酶促反应速度的影响：pH值对酶反应速度有显著的影响，酶有最适的pH值，在最适Pu值两侧，酶促反应速度呈下降趋势，大

32、部分酶的pH值一酶活性曲线近于钟罩形。 温度对酶促反应速度的影响：每种酶都有最适的反应温度，在最适温度两侧，反应速度也呈钟罩形曲线。温度对酶促反应的影响有两个方面，一方面是当温度升高时，反应速度加快；另一方面，随着温度的升高而使酶逐步变性，降低了酶的反应速度。 酶浓度对酶反应速度的影响：在酶促反应中，如果底物浓度足够大，足以使酶饱和，则反应速度与酶浓度呈正比。 激活剂对酶促反应速度的影响：激活剂能够提高酶的活性或通过除去抑制剂而解除对酶的抑制作用。 抑制剂对酶反应的影响：抑制剂可以降低酶的活性，但不引起酶蛋白的变性，根据抑制剂与酶的作用方式可将抑制作用分为两大类：不可逆的抑制作用、可逆的抑制作

33、用。4米氏方程 的推导过程。E+S ES E+P K-1K2K1对于一个酶促反应： 其中K1，K-1，K2，K-2为速度常数，ES的形成量与E+S和E+P有关，但E+P形成ES的速度极小，特别在反应的初始阶段，因此形成ES的速度Vf=K1(EcES)S)，其中Et为酶的总浓度，ES为酶与底物形成复合物的浓度；Et)Es为游离状态酶的浓度，S)为底物浓度。 ES分解速度Vd为Vd=K-lES+K2ES 当ES的生成速度与分解速度相等时，即Vf=Vd，则K1(EtES)S=K-1ES+K2 ES 整理得：KlEtS=K1ESS+K-1ES+K2ES KlEtS=(KlS+K-l+K2)ES 设V=

34、K2ES 当底物浓度很高时，所有的酶都被底物所饱和而转变为ES复合物，即Et=ES，此时，酶反应达到最大速度Vmax，所以：Vmax=K2Et 故有：5简述米氏常数Km值的物理意义。意义：Km是当酶促反应速度达到最大反应速度一半时的底物浓度。Km是酶的特征常之一，只与酶的性质有关，与酶的浓度无关，Km受pH值及温度的影响，不同的酶Km不同，如果一个酶有几种底物，则对每一种底物各有一个特定的Km。其中Km最小的底物称为该酶的最适底物。1Km可近似地表示酶对底物亲和力的大小，1Km值越大，表示酶对底物亲和力越大，1K值越小，表示酶对底物亲和力越小。 6简述酶的分离、提纯的步骤。选材：应选择酶含量高

35、，易于分离的组织或材料；破碎细胞。抽提：温度一般控制在 0-4，选择适宜的pH值；通常在缓冲系统中进行；分离提纯：将粗提液中的杂质去除，可根据酶的性质进行；保存：分离纯化后将酶制品浓缩、保存，一般在-20以下长期保存。 7遵循米氏方程式的酶催化反应中，求(1)当V=01Vmax时底物浓度 (2)当V=09Vmax时底物浓度。S=19Km S=9Km 8过氧化氢酶的Km值为25×10-2M，当底物过氧化氢浓度为l00mM时，求过氧化氢酶被底物所饱和的百分数。80 提示：当酶促反应达到最大反应速度时，说明酶被底物100饱和，如求出反应速度相当于最大反应速度的百分数，即近似等于酶被饱和的百

36、分数。9已知无抑制剂时：Km=11×10-5M，Vmax=50 mmin，有抑制剂时Km=31×10-5M， Vmax=50mmin，试确定抑制剂类型。竞争性抑制 l0某酶Km为47×10-5M，Vmax是22mmin，在2×10-4M底物和下述抑制剂存在的情况下反应速度为多少?：5×10-4M竞争性抑制剂；5×10-4M非竞争性抑制剂；以上两种情况的 Ki都是3×10-4M。根据竞争性抑制时： 非竞争性抑制时： 11称取25mg蛋白酶粉配制成25ml酶溶液，从中取出01ml酶液，以酪蛋白为底物，用 Folin一酚比色法测定

37、酶活力，得知每小时产生1500g酪氨酸。另取2ml酶液，测得蛋白氮为0.2mg，若以每分种产生1g酪氨酸的酶量为1个活力单位计算，求出：每ml酶液中所含蛋白质量及活力单位；比活力；l克酶制剂的总蛋白及总活力。提示：蛋白质与氮的换算系数为625，因此2ml为02mgN，lml则为01mg×625。0.1ml酶液每小时产生1500g酪氨酸，则lml每分钟产生1500060=250单位 0625mg含有250单位，则lmg含有2500625=400单位 25mg蛋白酶粉配成25ml酶液，lml中含有0.625mg蛋白质，则1mg蛋白酶粉含有 0.625mg蛋白质，1000mg蛋白酶粉含有625mg蛋白质，1g含有0.625g蛋白质。 总活力=250x103活力单位 12写出各种水溶性维生素的辅酶(辅基)形式、中文名称、英文代号、生化功能。 水溶性维生素辅霉中文名称及英文代号生化功能硫胺素VB1焦磷酸硫胺素TPP酮酸氧化脱羧等氧化还原作用传递电子和氢核黄素VB2黄素单核苷酸FMN黄素腺嘌呤二核苷酸FAD氧化还原作用传递电子和氢泛酸VB3辅酶A、CoASH酰基基团的转移烟酸VB5烟酰胺烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NAD烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷