2015版药典培养基适用性验证

1、I0-ZZSZ-ZA-S1灘牙城口憐制药有限公司验证立项申请表验证立项题目计数培养基适用性检查的验证立项编号TS-YZ-2522-01验证形式验证立项部门质量部申请日期年月曰验证对象计数培养基适用性需氧菌、霉菌及酵母菌计数用的培养基应进行培养基的适用验证目的性检查。本次验证的目的是确认胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡及验证内容萄糖琼脂培养基是否适合需氧菌、霉菌及酵母菌数测定。主管部门冋意对计数培养基适用性检查试验方案进行验证。审核意见年月日对验证方案验证方案编制应科学，合理，方法应切实可行，实施必须按照方的编制及案进行。实施要求验证总负经审核批准对计数培养基适用性检查进行验证。责人批准签字：年月曰

2、验证方案的审批起草部门签名日期化验室质量部批准部门签名日期质量部验证总负责人验证方案目录1、概述2、验证目的3、验证范围4、验证项目小组成员及职责5、验证合格标准6、试验材料7、菌液制备8、适用性检查9、验证记录10、验证结论及综合评价计数培养基适用性检查的验证方案1.验证目的：需氧菌、霉菌及酵母菌计数用的培养基应进行培养基的适用性检查。本次验证的目的是确认胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基是否适合需氧菌、霉菌及酵母菌总数测定。2.参照标准：中国药典2015年版四部1105非无菌产品微生物限度检查法。3.验证项目：胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基的适用性检查。4.验证小组人员

3、及职责：人员组成姓名部门职务/职称职责组长质量部副部长负责验证期间各部门的协调及整个验证过程的具体实施。成员化验室主任负责验证方案的起早及具体实施，确保验证过程能按方案规定的程序进行，负责各种验证资料（检查结果）的整理，负责验证报告的编写。化验室化验员化验室化验员负责验证方案的申核及批准；负责出具检验报告；申查验证报告及发放验证报告；负责验证文件的管理化验室化验员负责验证报告的编写规范；审查验证报告及发放验证报告。5.合格标准：被检固体培养基上的菌落平均数与对照培养基上的菌落平均数的比值应在0.52范围内，且菌落形态大小与对照培养基上的菌落一致。6.试验材料：6.1. 被验证产品：胰酪大豆胨琼

4、脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基。6.2. 仪器设备：6.2.1. YXQ-LS-100G型立式压力蒸汽灭菌器6.2.2. GHT-00双人净化工作台6.2.3. BSC-110011A2-X生物安全柜6.2.4. MJ-250I型霉菌培养箱（2025°C）6.2.5. LRH-250生化培养箱（3035C）6.2.6. 电热恒温干燥箱6.2.7微波炉6.3.验证用培养基梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液，将抱子洗脱。然后，采用适宜的方法吸出抱子悬液至无菌试管内，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液制成约为50100cfu/ml的黑曲霉

5、抱子悬液。8.适用性检查：8.1. 取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽抱杆菌的菌液（50100cfu/ml）各1ml,每株试验菌平行制备2个平皿，分别注入2个无菌平皿中，立即倾注胰酪大豆胨琼脂培养基，并作阴性对照，混匀，凝固，置3035°C培养24小时，计数；取白色念珠菌的菌液（50100cfu/ml）各1ml，分别注入2个无菌平皿中，立即倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基，并作阴性对照，混匀，凝固，置2025C培养72小时，计数；取黑曲霉菌的菌液（50100cfu/ml）1ml，注入无菌平皿中，立即倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，并作阴性对照，混匀，凝固，置2025

6、C培养168小时，计数。8.2. 取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽抱杆菌的菌液（50100cfu/ml）各1ml，分别注入无菌平皿中，立即倾注胰酪大豆胨琼脂对照培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，并作阴性对照，混匀，凝固，置3035C培养24小时，计数；取白色念珠菌的菌液（50100cfu/ml）各1ml，分别注入无菌平皿中，立即倾注沙氏葡萄糖琼脂对照培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，并作阴性对照，混匀，凝固，置2025C培养72小时，计数；取黑曲霉菌的菌液（50100cfu/ml）各1ml,分别注入无菌平皿中，立即倾注沙氏葡萄糖琼脂对照培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，并作阴性对照

7、，混匀，凝固，置2025C培养168小时，计数。9. 验证记录10. 验证结论及综合评价评价人：日期：附表1：计数培养基适用性检查验证记录试验时间年月日完成时间验证菌株平皿号验证培养基组（cfu/ml）阴性对照(cfu/ml)对照培养基组（cfu/ml）大肠埃希菌（培养3天计数）12平均值金黄色葡萄球菌（培养3天计数）12平均值枯草芽抱杆菌（培养3天计数）12平均值白色念珠菌（培养5天开始计数）12平均值黑曲霉菌1（培养5天开始计数）2平均值结论复核人试验复核人试验人验证报告的审批起草部门签名日期化验室质量部批准部门签名日期质量部验证总负责人验证报告1.验证目的：需氧菌、霉菌及酵母菌计数用的培

8、养基应进行培养基的适用性检查。本次验证的目的是确认胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基是否适合需氧菌、霉菌及酵母菌总数测定。2.参照标准：中国药典2015年版四部1105非无菌产品微生物限度检查法。3.验证项目：胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基的适用性检查。4.验证小组人员及职责：人员组成姓名部门职务/职称职责组长质量部副部长负责验证期间各部门的协调及整个验证过程的具体实施。成员化验室主任负责验证方案的起早及具体实施，确保验证过程能按方案规定的程序进行，负责各种验证资料（检查结果）的整理，负责验证报告的编写。化验室化验员化验室化验员负责验证方案的申核及批准；负责出具检验报告；申

9、查验证报告及发放验证报告；负责验证文件的管理化验室化验员负责验证报告的编写规范；审查验证报告及发放验证报告。5.合格标准：被检固体培养基上的菌落平均数与对照培养基上的菌落平均数的比值应在0.52范围内，且菌落形态大小与对照培养基上的菌落一致。6.试验材料：6.1. 被验证产品：胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基。6.2. 仪器设备：6.2.1. YXQ-LS-100G型立式压力蒸汽灭菌器6.2.2. GHT-00双人净化工作台6.2.3. BSC-110011A2-X生物安全柜6.2.4. MJ-250I型霉菌培养箱（2025°C）6.2.5. LRH-250生化培养箱（30

10、35C）6.2.6. 电热恒温干燥箱6.2.7微波炉6.3.验证用培养基梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液，将抱子洗脱。然后，采用适宜的方法吸出抱子悬液至无菌试管内，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液制成约为50100cfu/ml的黑曲霉抱子悬液。8.适用性检查：8.1. 取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽抱杆菌的菌液（50100cfu/ml）各1ml,每株试验菌平行制备2个平皿，分别注入2个无菌平皿中，立即倾注胰酪大豆胨琼脂培养基，并作阴性对照，混匀，凝固，置3035°C培养24小时，计数；取白色念珠菌的菌液（50100cfu

11、/ml）各1ml，分别注入2个无菌平皿中，立即倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基，并作阴性对照，混匀，凝固，置2025C培养72小时，计数；取黑曲霉菌的菌液（50100cfu/ml）1ml，注入无菌平皿中，立即倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，并作阴性对照，混匀，凝固，置2025C培养168小时，计数。8.2. 取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽抱杆菌的菌液（50100cfu/ml）各1ml，分别注入无菌平皿中，立即倾注胰酪大豆胨琼脂对照培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，并作阴性对照，混匀，凝固，置3035C培养24小时，计数；取白色念珠菌的菌液（50100cfu/ml）各1m

12、l，分别注入无菌平皿中，立即倾注沙氏葡萄糖琼脂对照培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，并作阴性对照，混匀，凝固，置2025C培养72小时，计数；取黑曲霉菌的菌液（50100cfu/ml）各1ml,分别注入无菌平皿中，立即倾注沙氏葡萄糖琼脂对照培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，并作阴性对照，混匀，凝固，置2025C培养168小时，计数。9. 验证记录10. 验证结论及综合评价附表1：计数培养基适用性检查验证记录试验时间年月日完成时间年月验证菌株平皿号验证培养基组（cfu/ml）阴性对照(cfu/ml)对照培养基组（cfu/ml）大肠埃希菌（培养3天计数）12平均值金黄色葡萄球菌（培养3天计数）12平均值枯草芽抱杆菌（培养3天计数）12平均值白色念珠菌（培养5天开始计数）12平均值黑曲霉菌1（培养5天开始计数）2平均值结论复核人试验复核人试验人制药有限公司验证证书验证文件名称计数培养基适用性检查的验证验证文件编号TS-YZ-2522-01验证对象计数培养基适用性检查验证结论合格证书