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1、考点名称:实验:绿叶中色素的提取和分离绿叶中色素的提取和分离:1原理(1) 各种色素能溶解在有机溶剂(无水乙醇等)中形成溶液,使色素从生物组织中脱离出来。(2) 各种色素都能溶解在层析液中,但在层析液中的溶解度不同。溶解度大的色素分子随层析液在滤纸上扩散得快,反之则慢,因而不同色素可以在滤纸上通过扩散分开,各种色素分子在滤纸上可形成不同的色素带。2实验过程翦碎,加少许310-和提取邑素!称取5g绿色叶片充井、迅过滤加Uhnl无水乙醇,速研一一色素滤滋一亠棉塞封口制备滤纸条:取干燥处理过的走性滤纸将其剪成长与當略小于试管长与直径的滤纸条并在一端剪去两角;在距这一端1处用铅笔画一条细的横线+f用毛
2、细吸管吸取谑酒画滤液细线气画线+L国干燥后重复画23分离色素:将适量的层析懑倒入试管中插入滤纸条有滤液细线的一端朝下),随后用棉塞塞紧试管管口观察结果:滤纸条上色素带有四条,由上到下分别是胡萝卜素、黄色的叶黄素、蓝绿色的叶绿素、黄色的叶黄素、蓝绿色的叶纟录素a、黄绿色的叶纟录素b,如图TlFTin1m叶緑素準蓝绿色3叶绿素b:黄绿色V叶黄素1黄色实验要点及注意事项:1、实验中几种化学药品的作用 加入少量SiO2,可破坏细胞结构,使研磨更充分,便于色素完全释放。 加入少量CaCO3,可以中和细胞内的有机酸,防止有机酸夺取叶绿素中的镁离子使叶绿素破坏,从而起到保护色素的作用。但SiO2.和CaCO
3、3的加入量要少,否则滤液杂质多、混浊、颜色浅,实验效果差。2、实验成功的关键 叶片要新鲜,颜色要深绿,保证色素的含量。 研磨要迅速充分。叶绿素不稳定,易被破坏,时间过长或研磨不充分都会导致色素的量太少而使实验失败。 滤液细线不仅要求细、直、均匀,而且要求含有较多的色素(可以重复画二至三次)。 滤液细线不能触及层析液,否则色素溶解到层析液中,将得不到清晰的色素带。3、注意事项制备滤纸条时,要剪去两角,这样可以减小边缘效应,使色素在滤纸上扩散均匀,便于观察实验结果。收集滤液后,要及时用棉塞将试管口塞紧,防止滤液挥发。4、滤纸条上的滤液细线,不能触及层析液的原因:滤纸条上的滤液细线如触及层析液,滤纸上的叶绿体色素就会溶解在层析液中,实验就会失败。5、提取和分离叶绿体色素的关键:(1)提取叶绿体色素的关键是:叶片要新鲜、浓绿;研磨要迅速、充分;滤液收集后,要及时用棉塞将试管口塞紧,以免滤液挥发。(2)分离叶绿体色素的关键是:是滤液细线要细且直,而且要重复划几次;是层析液不能没及滤液线。6、收集到的色素滤液绿色过浅,可能原因如下: 未加二氧化硅,研磨不充分。 使用放置数天的菠菜叶,滤液中色素(叶绿素)太少,绿色过浅。 一次加入大量的95%的乙醇,提取浓度太低(正确做法:分次加入少量95%的乙醇
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