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文档简介
1、遗传学PPT实验材料-黑腹果蝇生活史 果蝇的生活周期长短与温度有密切关系。一般来说,30以上温度能使果蝇不育或死亡,低温能使生活周期延长,生活力下降,饲养果蝇的最适温度为20-25。实验材料-黑腹果蝇的饲养方法 果蝇以酵母菌为主要食料,凡能发酵的基质都可做为果蝇饲料。实验室里主要有玉米饲料、米粉饲料、香蕉饲料等实验材料-黑腹果蝇的饲养方法玉米饲料香蕉饲料米粉饲料I. 取应加水量的一半,加入琼脂,煮沸,使充分溶解,加糖,煮沸溶解。 II. 取另一半水混合玉米粉,加热调成糊状。 III. 将上述两者混合,煮沸。以上操作都要搅拌,以免沉积物烧焦。 IV. 待稍冷后酵母粉及丙酸,充分调匀,分装,按用量
2、配置,可得饲料200mL左右I. 取应加水量的一半,加入琼脂,煮沸,使充分溶解,加糖,煮沸溶解。 II. 取另一半水混合米粉,加热调成糊状。 III. 将上述两者混合,煮沸。以上操作都要搅拌,以免沉积物烧焦。 IV. 待稍冷后酵母粉及丙酸,充分调匀,分装,按用量配置,可得饲料200mL左右 I. 将熟透的香蕉捣碎制成香蕉浆。 II. 将琼脂加到水中煮沸,使充分溶解 III. 将琼脂加入香蕉浆,煮沸。 IV. 稍冷后加入酵母粉及丙酸,充分调匀,分装。实验材料-研究的性状及显隐性实验中观察的性状一般都可以用肉眼鉴定,另一些可在解剖镜下鉴定。实验技术流程 亲本的纯种培养第一天,将所需品系(野生型/特
3、别性状突变型)的雌雄果蝇麻醉后进行挑选,挑出所需品系的果蝇5-10对,分别培养,25培养8天。杂交亲本的确定确定进行杂交实验的亲本,挑选性状符合的处女蝇。雌蝇一定要选处女蝇。处女蝇的挑选方法:亲本饲养2周之后,提前1012小时把培养瓶内所有活的成虫倒干净,然后在倒掉成虫的12小时内吧新羽化的成虫倒出来,装进消毒过的培养瓶或者平底试管进行适度麻醉,麻醉后放在消毒过的白瓷板或者硬纸板上把雌雄蝇分别挑出,雌蝇即为处女蝇。根据实验所需处女蝇数量的多少,可连续收集,但不要超过3天。后代的性状观察与记录将所需品系的雌蝇与雄蝇放在一起培养,如果需要观察F1代的性状,7-8天后,需要倒掉亲本,避免F1代雌蝇与
4、父本杂交,影响结果。实验结果的分析与讨论杂交的遗传式 实验步骤实验步骤 4.1亲本的纯种培养亲本的纯种培养 4.2杂交杂交1(伴性遗传的观察)(伴性遗传的观察) 4.3 杂交杂交2(伴性遗传的进一步观察)(伴性遗传的进一步观察) 4.4 杂交杂交3(连锁与交换的观察)(连锁与交换的观察) 王辰伊 亲本的纯种培养亲本的纯种培养 4.1.1 亲本饲养瓶的准备亲本饲养瓶的准备 准备好两个品系的雌雄黑腹果蝇饲养瓶:准备好两个品系的雌雄黑腹果蝇饲养瓶: 野生型,红眼(野生型,红眼(+)长翅()长翅(+)直刚毛()直刚毛(+) 突变型,白眼(突变型,白眼(w)小翅()小翅(m)卷刚毛()卷刚毛(sn)4.
5、1.2 果蝇的麻醉与转瓶果蝇的麻醉与转瓶将长有果蝇的培养瓶在海绵垫上敲,使果蝇全部震将长有果蝇的培养瓶在海绵垫上敲,使果蝇全部震落在培养瓶底部,然后迅速打开培养瓶的棉塞,把落在培养瓶底部,然后迅速打开培养瓶的棉塞,把果蝇倒入去盖的麻醉瓶中,立即盖好麻醉瓶。果蝇倒入去盖的麻醉瓶中,立即盖好麻醉瓶。根据实验要求,将麻醉的果蝇转移至另一个培养瓶根据实验要求,将麻醉的果蝇转移至另一个培养瓶或者置于白瓷板上观察。或者置于白瓷板上观察。对果蝇进行检查时,用乙醚麻醉,使果蝇对果蝇进行检查时,用乙醚麻醉,使果蝇处于昏迷状态。使用时将乙醚滴处于昏迷状态。使用时将乙醚滴23滴到滴到麻醉瓶的棉花球上,注意不要让乙醚
6、流入麻醉瓶的棉花球上,注意不要让乙醚流入瓶内,麻醉瓶要保持干燥,否则会粘住果瓶内,麻醉瓶要保持干燥,否则会粘住果蝇翅膀,影响观察。蝇翅膀,影响观察。杂交1伴性遗传的观察实验设计杂交图谱正交正交反交反交4.2.1 杂交用饲养瓶的准备杂交用饲养瓶的准备亲代培养:亲代培养:第一天,将两个品系的雌雄果蝇麻醉后进行第一天,将两个品系的雌雄果蝇麻醉后进行挑选,其中在野生型中挑出挑选,其中在野生型中挑出34对,突变型对,突变型中挑出中挑出78对,分别培养,对,分别培养,25培养培养8天。天。4.2.2亲本处女蝇的挑选亲本处女蝇的挑选 第第8天,待培养瓶中出现蛹且呈黑色时,将两天,待培养瓶中出现蛹且呈黑色时,
7、将两个品系的亲代果蝇麻醉弃去,野生型品系继续培养,个品系的亲代果蝇麻醉弃去,野生型品系继续培养,待用。待用。 12小时后,将孵化的突变型成蝇麻醉后分出小时后,将孵化的突变型成蝇麻醉后分出雌蝇,至另一培养瓶,培养处女蝇待用。再雌蝇,至另一培养瓶,培养处女蝇待用。再12小时小时后,继续挑选雌雄蝇,放入处女蝇培养瓶中,以后后,继续挑选雌雄蝇,放入处女蝇培养瓶中,以后每隔每隔12小时挑选一次,直至挑出小时挑选一次,直至挑出10只处女蝇。只处女蝇。4.2.3 雄性果蝇的挑选雄性果蝇的挑选 麻醉野生型品系,挑出麻醉野生型品系,挑出10只雄果蝇,放入只雄果蝇,放入突变处女蝇培养瓶中,杂交突变处女蝇培养瓶中,
8、杂交25培养。杂交组合培养。杂交组合为:为: 雌,突变型雌,突变型X 雄,野生型雄,野生型4.2.4 F1代生长情况的观察代生长情况的观察 上述杂交果蝇培养上述杂交果蝇培养8天以后,将亲代果蝇天以后,将亲代果蝇麻醉弃去,观察新长出的子一代果蝇性状。麻醉弃去,观察新长出的子一代果蝇性状。4.2.5 F1代性状的观察记录及统计代性状的观察记录及统计 4.2.6 F2代生长情况的观察培养子二代果蝇:8天以后,麻醉子一代果蝇,弃去。新生长的果蝇是子二代果蝇,观察性状子一代果蝇自交:子一代果蝇收集30对果蝇(不必再挑选处女蝇),转移至三个新的培养瓶中,每瓶10对,25继续培养。 亲本挑选时,由于需要该种
9、性状该种基因型的亲本挑选时,由于需要该种性状该种基因型的亲本,所以需要处女蝇,当亲本杂交亲本,所以需要处女蝇,当亲本杂交F1代出现后,代出现后,只有红眼雌性和白眼雄性,雌雄果蝇都各只有一种只有红眼雌性和白眼雄性,雌雄果蝇都各只有一种性状,随机挑取果蝇时,所选的性状也只是那种性性状,随机挑取果蝇时,所选的性状也只是那种性状,所以是不是处女蝇都不会影响实验结果。状,所以是不是处女蝇都不会影响实验结果。4.2.7 F2代性状的观察记录及统计代性状的观察记录及统计 记录记录F2代性状代性状 杂交2伴性遗传的进一步观察江辰峰 前置实验:挑选出纯合红眼雌果蝇 1亲代培养: 将野生型的雌雄果蝇麻醉后进行挑选
10、,一只雌果蝇和一只雄果蝇配成一对,挑选出多对, 25培养8天。 2 挑选纯合雌果蝇: 观察每一组果蝇后代的性状,若子一代全为红眼果蝇,则选出其中的雌果蝇可作为纯合红眼雌果蝇使用。 PS:该前置实验必须在已知眼色为伴性遗传时方可进行,这与下面证实实验有所冲突切比较复杂。4.3.1 杂交用饲养瓶的准备杂交用饲养瓶的准备亲代培养:亲代培养:第一天,将两个品系的雌雄果蝇麻醉后进行挑选,第一天,将两个品系的雌雄果蝇麻醉后进行挑选,其中在突变型中挑出其中在突变型中挑出34对,野生型中挑出对,野生型中挑出78对对,分别培养,分别培养,25培养培养8天。天。4.3.2亲本处女蝇的挑选亲本处女蝇的挑选 第第8天
11、,待培养瓶中出现蛹且呈黑色时,将两天,待培养瓶中出现蛹且呈黑色时,将两个品系的亲代果蝇麻醉弃去,突变型品系继续培养个品系的亲代果蝇麻醉弃去,突变型品系继续培养,待用。,待用。 12小时后,将孵化的野生型成蝇麻醉后分出小时后,将孵化的野生型成蝇麻醉后分出雌蝇,至另一培养瓶,培养处女蝇待用。再雌蝇,至另一培养瓶,培养处女蝇待用。再12小小时后,继续挑选雌雄蝇,放入处女蝇培养瓶中,以时后,继续挑选雌雄蝇,放入处女蝇培养瓶中,以后每隔后每隔12小时挑选一次,直至挑出小时挑选一次,直至挑出10只处女蝇。只处女蝇。4.3.3 雄性果蝇的挑选雄性果蝇的挑选 麻醉突变型品系,挑出麻醉突变型品系,挑出10只雄果
12、蝇,放入野只雄果蝇,放入野生处女蝇培养瓶中,杂交生处女蝇培养瓶中,杂交25培养。杂交组合为培养。杂交组合为: 雌,野生型雌,野生型X 雄,突变型雄,突变型4.3.4 F1代生长情况的观察代生长情况的观察 上述杂交果蝇培养上述杂交果蝇培养8天以后,将亲代果蝇麻醉天以后,将亲代果蝇麻醉弃去,观察新长出的子一代果蝇性状。弃去,观察新长出的子一代果蝇性状。4.3.5 F1代性状的观察记录及统计代性状的观察记录及统计 4.3.6 F2代生长情况的观察培养子二代果蝇:8天以后,麻醉子一代果蝇,弃去。新生长的果蝇是子二代果蝇,观察性状子一代果蝇自交:子一代果蝇收集30对果蝇(不必再挑选处女蝇),转移至三个新
13、的培养瓶中,每瓶10对,25继续培养。4.3.7 F2代性状的观察记录及统计代性状的观察记录及统计 记录记录F2代性状代性状 杂交3连锁与交换的观察 黄华仪 三点测交的原理杂交亲本的挑选与转瓶 连锁与交换的观察实验 亲本挑选 由果蝇的性状观察实验结果可知,野生型的果蝇性状,在眼色、翅型和刚毛类型都是显性性状,同时,突变型果蝇的性状,在眼色、翅型和刚毛类型都是隐性性状。于是,选用野生型作为父本,突变型作为母本即可。 挑选野生型果蝇与突变型处女蝇,分别放到不同的培养瓶中培养。转瓶 分别麻醉培养瓶中的父本果蝇和母本果蝇,再分别选取8只,放到杂交瓶中。(杂交瓶可以先倒置,等到果蝇苏醒以后,再把培养瓶直立。) 把杂交瓶放到2025的培养箱中。 亲本的选择亲本的选择实验设计 移除亲本果蝇观察F2代性状挑取F1代杂交 大约在七天后,倒掉亲本果蝇。(此时,亲本杂交完成,培养基上已经得到了受精卵,需要把亲本赶掉防止影
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