项目二好氧发酵设备系统的维护与保养

1、项目二 好氧发酵设备系统的维护与保养 2.2发酵罐的中试设备比拟放大运行 (3-2)3发酵罐罐体主要管道结构 空气路：培养过程中向罐内通无菌空气 取样路：培养过程中取样监控菌体生长情况 尾气路：排气 出料路：移种、放罐 夹套进水路：进冷却水和加热水进行控温 夹套回水路：回收冷却水和加热水重复利用5各种图形的代表的意义各种管道颜色标识代表的意义l50L发酵罐的操作规程第一步、准备工作1.检查压力表是否为零，若不是则开对应的阀门调零。2.检查阀门是否为关闭状态，若不是则顺时针旋转关闭。3.检查蒸汽发生器上的压力表不得低于0.2MPa 4.校正温度和pH探头：温度用沸水或冰水校正，pH用标准溶液校正

2、。5.检查发酵罐的密封性：关F21，F16，开F11，F15，使压力表为0.1MPa，保持5min，再关F11，F15。6.若压力保持不变，说明密封性好则打开F16排气。7.若压力减小，则水封检测漏气点。13第一步：第一步：主要目的主要目的快速检查发酵罐，确保发酵罐正常，可以上罐。PS：电极标定：电极标定目的与注意事项目的与注意事项目的：为了确保电极准确测量，必须在使用前对电极进行标定。注意事项：新电极或放置很久的电极必须激活以后才可以进行标定和使用。PH电极用3moL/L的KCl溶液浸泡6小时激活，溶氧电极通电6小时激活。PH电极标定的时候需要将接地电极放入盛放标准液的烧杯内。接种以后设定好

3、发酵参数，然后进行溶氧电极百分百标定。电极标定所需试剂：电极标定所需试剂：第二步、空气管道的消毒第二步、空气管道的消毒 1.打开F3，F14，微开F12，F13，等排除均匀的蒸汽时，关闭F13，F12，微开F14，调节F3，使压力表保持在0.1MPa，30min，关F14，F3。 开F11，F14，保持压力在0.1MPa，当有干燥冷空气排出时，微开F14，调节F11，保持压力在0.1MPa第三步、空消第三步、空消 1.开F4，F22，当有均匀蒸汽排出时，关F22，开F21，F16，当F16有均匀蒸汽排出时，关F16，当压力达到0.1MPa时，微开F16，调节F21，使压力保持在O.1MPa，3

4、0min. 2.关F4，F21，大开F16进行泄压，到微正压0.02MPa，再关F16.20本本步步 空消空消目的目的 空消主要目的是在进罐生产前对设备清洁和杀灭其他微生物，防止因设备清洁不彻底或设备停用时间过久，微生物滋生，从而对生产造成影响。第四步 投料投料注意事项投料注意事项 增容： 实消过程中部分蒸汽会冷凝形成冷凝水进入培养基中，从而导致培养基体积变大，变大的部分即为增容。 不同的地区，不同的气候，增容量都会不同的，需要通过多次实消灭菌总结才能得到一个经验值。第五步、实消 1.开F2，F37，F16搅拌，当发酵罐内温度达到8090度时，关搅拌，F2，F37. 2.开F4，F22，当有均

5、匀蒸汽出现时，关F22，开F21，微开F16，调节F21使压力保持在0.1MPa，30min. 3.关F4，F21，然后大开F16泄压到微正压。再关F16.实消实消注意事项注意事项 发酵罐实消是对发酵培养基进行彻底的灭菌处理, 利用高温过饱和蒸汽的强穿透能力使各种细菌、真菌蛋白质凝固而死亡。 实消结束以后罐内是无菌的环境，需通入无菌空气进行保压直到培养结束。第六步、参数设定第七步、冷却 1.在控制面板上冷却打到手动，开F33，F32，搅拌，微开F15，调节F11，罐内压力保持在微正压，当温度降到90度时，关搅拌，大开F15，F11，压力保持在0.1MPa。 2.开F16，泄压到微正压。当温度达

6、到设定温度时，关F33，F32，关F16，调节F11，F15，至F15完全关掉，压力保持在0.1MPa，微开F16，泄压到微正压。第八步、接种 1.用酒精棉球擦洗双手和种子罐（由上到下） 2.在接种圈内滴加酒精并点燃，围在接种口处 3.带上隔热手套，用扳手将螺帽拧下，过下火焰之后放在干净器皿中 4.将接种瓶在火焰旁拔下棉塞，瓶口过下火焰，之后迅速悬空倒入发酵罐内，将接种瓶放一旁。 5.用扳手夹住螺帽过下火焰，之后拧紧并用湿抹布熄灭接种圈内的火焰。第八步、接种PS:接种接种注意事项注意事项l接种方法：压差接种法l接种材料：种子液、火焰圈、95%酒精、酒精棉、镊子、打火机、石棉手套l注意事项：环境

7、：关闭车间门窗和排气扇，接种环境周围禁止人员来回走动，降低空气流动性；无菌：拔接种针护套时需靠在火焰附近，接种壶不可倾斜过度，避免种子液流出；接种操作过程中罐压不能掉零；安全：拔出接种壶时接种针不可以指向人员，避免接种针飞出后造成人员受伤；点燃火焰圈不可随处乱扔，熄灭以后才可以继续操作。第九步、保温 在控制面板上的加热打到自动上，开F32PS：中控培养：中控培养注意事项注意事项工艺控制与记录每间隔1小时记录一次参数；主要参数有PH值、溶氧值、温度、发酵罐压力和过滤器压力。取样 依据工艺要求按时取样送交化验部并做好镜检工作。设备巡查检查搅拌电机，看电机有没有异响、过热等； 检查酸碱罐、消泡罐和补

8、料罐装液量，及时补充； 检查管道、阀门，看有无外漏。第十步、取样 1.准备好已消毒的空三角瓶 2.将三角瓶上的报纸拆掉，用手压住纱布，然后开F21，F22，先流掉一部分，之后用三角瓶悬空接溶液，并迅速塞上纱布。 3.关F21，再开F4进行消毒灭菌，之后关F4，F22。第第11步：放罐步：放罐 菌体生长情况符合下罐条件以后即可放罐，放罐操作流程如下：提前1小时通知后提取车间准备放罐取样蒸汽吹洗放罐管道检查升压放罐1.填写记录表格37第第12步：洗罐步：洗罐放罐结束以后立即进行洗罐，洗罐流程如下：卸压：打开罐盖前要先卸掉罐压；电极保养：拔出电极清洗干净以后进行正确保养；PH电极用3摩尔每升的KCl

9、溶液浸泡电极头；溶氧电极直接通电。冲洗罐壁：用高压水枪冲洗罐壁，如果罐壁培养基冲洗不掉则考虑碱煮（10%的碱液用夹套升温到90以后保温30分钟）；1. 排污：排掉污水。38第第13步：检修步：检修 目的：确保阀门、法兰、机械密封和试镜灯等不会泄漏，以备下批生产使用； 方法：罐体通入空气保压在0.15MPa，然后用肥皂水进行试漏，出现泄漏的阀门待压力卸掉以后进行检修，更换相应的垫片。安全与环保等注意事项 我们的发酵属于纯培养，是由单一菌种接种以后进行的培养，其中不可以有任何杂菌，否则会影响产品的使用效果，所以为了确保每一批发酵的成功，在上罐之前，发酵人员必须具备以下两种意识：无菌意识1. 安全意识l无菌意识 由于微生物个体小、分布广泛等特性，发酵染菌的途径有很多，而且如果染菌的话，我们无法及时做出判断，必须培养一段时间才能看出来，发现以后的结果只能是倒罐，造成不小