菊花的组织培养(市公开课)

1、课题课题1 1 菊花的组织培养菊花的组织培养 学习目标学习目标 掌握植物组织培养相关理论知识。掌握植物组织培养相关理论知识。 熟悉植物组织培养的基本过程。熟悉植物组织培养的基本过程。 理解细胞分化概念及脱分化，再分化。理解细胞分化概念及脱分化，再分化。 课题重点与难点课题重点与难点 课题重点：植物组织培养的基本过程。课题重点：植物组织培养的基本过程。 课题难点：植物组织培养过程中使用的无菌课题难点：植物组织培养过程中使用的无菌技术，细胞分化，脱分化，再分化。技术，细胞分化，脱分化，再分化。活动一：活动一：1.什么是什么是细胞分化细胞分化？原因和结果？原因和结果？2.什么是什么是脱分化、再分化脱

2、分化、再分化？ 3.愈伤组织愈伤组织是怎样形成的？有什么特点？是怎样形成的？有什么特点？4.组织培养的组织培养的过程过程？以及组织培养的？以及组织培养的理论基础理论基础？活动二：活动二：1. 影响组织培养的因素？影响组织培养的因素？2.菊花组织培养应注意的问题？菊花组织培养应注意的问题？ 活动三：活动三：用自己的话把菊花组织培养的操作用自己的话把菊花组织培养的操作流程给描述出来流程给描述出来?（提示：（提示：怎样配制怎样配制MS培培养基养基?外植体消毒应如何进行外植体消毒应如何进行?接种、培养、接种、培养、移栽时应注意什么问题移栽时应注意什么问题? ）活动一：活动一：什么是什么是细胞分化细胞分

3、化？原因和结果？原因和结果？什么是什么是脱分化、再分化脱分化、再分化？ 愈伤组织愈伤组织是怎样形成的？有什么特点？是怎样形成的？有什么特点？组织培养的组织培养的过程过程？以及组织培养的？以及组织培养的理论基础理论基础？基础知识基础知识-相关概念相关概念 细胞分化：细胞分化： 在个体发育中，相同细胞的后代在形态、在个体发育中，相同细胞的后代在形态、 结构、生理功能上发生稳定性差异的过程结构、生理功能上发生稳定性差异的过程 基因在特定的时间和空间条件下的基因在特定的时间和空间条件下的选择性表达的结果选择性表达的结果形成各种组织器官形成各种组织器官结果：结果：原因：原因：2.2.脱分化：脱分化：由高

4、度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，又叫去分化。的过程，又叫去分化。概念：概念： 脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官。以重新分化成根或芽等器官。3.3.再分化：再分化： 愈伤组织是愈伤组织是外植体外植体通过通过细胞分裂细胞分裂形成的，其细胞形成的，其细胞排列排列疏松而无规则疏松而无规则，高度高度液泡化液泡化呈呈无定形无定形状态的薄状态的薄壁细胞。壁细胞。4.4.愈伤组织愈伤组织 5.外植体外植体：由活体植物体上提取下来的，接种由活体植物体上提取下来的，接种在培养基上的无菌细胞、组织、器

5、官等。在培养基上的无菌细胞、组织、器官等。6.植物组织培养的基本过程植物组织培养的基本过程 离体器官、 组织或细胞 脱分化 愈伤组织 再分化 根、芽 植物体 离体条件下利用人工培养条件在无菌情况下离体条件下利用人工培养条件在无菌情况下培养、生长、发育再生出完整植株的过程。培养、生长、发育再生出完整植株的过程。7.植物组织培养的理论基础：植物组织培养的理论基础：细胞全能性：具有某种生物细胞全能性：具有某种生物全套遗传信息全套遗传信息的的任何一个活细胞，都具有发育成任何一个活细胞，都具有发育成完整个体完整个体的的能力能力，即每个生物细胞都具有，即每个生物细胞都具有全能性全能性。细胞全能性表达条件细

6、胞全能性表达条件： 离体、离体、一定的营养物质、激素和其他一定的营养物质、激素和其他 外界条件外界条件活动二：活动二： 影响组织培养的因素？影响组织培养的因素？ 菊花组织培养应注意的问题？菊花组织培养应注意的问题？影响植物组织培养的因素：影响植物组织培养的因素： 不同植物的组织培养难度不同不同植物的组织培养难度不同 同一种植物的不同组织培养难度不同同一种植物的不同组织培养难度不同 菊花的组织培养：菊花的组织培养：一般选择未开化植株的一般选择未开化植株的茎上部新萌生的侧枝茎上部新萌生的侧枝（1）、外植体的选取）、外植体的选取 （2）、培养基的配制）、培养基的配制(MS培养基培养基) 大量元素：大

7、量元素：N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素：微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2 2中微生物培养基的配方相比，中微生物培养基的配方相比，MSMS培养基的配方培养基的配方有哪些明显的不同？有哪些明显的不同？答：答：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞需

8、的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。微生物培养基以有机营所产生的特殊营养需求。微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，养为主。与微生物的培养不同，MSMS培养基则需培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。必须的大量元素和微量元素两大类。（4）、消毒）、消毒在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境在培养的整个过程

9、中，都需要是一个无菌环境 （5）、）、pH、温度、光照、温度、光照菊花：菊花： pH=5.8 温度控制在温度控制在1822 每日光每日光照照12h 用自己的话把菊花组织培养的操作流程给用自己的话把菊花组织培养的操作流程给描述出来描述出来?（提示：（提示：怎样配制怎样配制MS培养基培养基?外外植体消毒应如何进行植体消毒应如何进行?接种、培养、移栽时接种、培养、移栽时应注意什么问题应注意什么问题? ）活动三：活动三：制备制备MS固体固体培养基培养基外植体消毒外植体消毒 接种接种 培培 养养栽栽 培培 实验操作实验操作 移移 栽栽冲洗冲洗酒精酒精无菌水冲洗无菌水冲洗氯化汞氯化汞无菌无菌水冲洗至少三次

10、之上水冲洗至少三次之上流水冲洗流水冲洗酒精酒精无菌水冲洗无菌水冲洗氯化汞氯化汞无菌水冲洗至少三次之上无菌水冲洗至少三次之上思考：你打算做几组重复？打算设置对照实验思考：你打算做几组重复？打算设置对照实验吗？吗？ 答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。思思 考考 在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？在整个操作过程中，是如何来实现无菌环