病理方法学学习教案

1、会计学1病理病理(bngl)方法学方法学第一页，共81页。第1页/共80页第二页，共81页。第2页/共80页第三页，共81页。第3页/共80页第四页，共81页。第4页/共80页第五页，共81页。第5页/共80页第六页，共81页。放于密封瓶中，放于密封瓶中，60温箱过夜即温箱过夜即可溶解，也可以加温至可溶解，也可以加温至60，搅，搅拌溶解。拌溶解。第6页/共80页第七页，共81页。第7页/共80页第八页，共81页。第8页/共80页第九页，共81页。第9页/共80页第十页，共81页。第10页/共80页第十一页，共81页。第11页/共80页第十二页，共81页。第12页/共80页第十三页，共81页。第

2、13页/共80页第十四页，共81页。第14页/共80页第十五页，共81页。液的配制：n酸性复红1 gn丽春红2 gn橘黄G 2 gn0.25%醋酸n300 ml混匀，过滤后备用。n亮绿染色(rns)液的配制：亮绿干粉0.1 g0.2%醋酸100 ml充分混匀，过滤后备用。第15页/共80页第十六页，共81页。第16页/共80页第十七页，共81页。第17页/共80页第十八页，共81页。第18页/共80页第十九页，共81页。第19页/共80页第二十页，共81页。第20页/共80页第二十一页，共81页。第21页/共80页第二十二页，共81页。第22页/共80页第二十三页，共81页。第23页/共80页

3、第二十四页，共81页。第24页/共80页第二十五页，共81页。第25页/共80页第二十六页，共81页。第26页/共80页第二十七页，共81页。n(4)(4)加含蛋白酶加含蛋白酶K K裂解液置于裂解液置于3737恒温水浴过夜恒温水浴过夜n(5)Tris(5)Tris饱和酚饱和酚. .氯仿抽提二氯仿抽提二次次第27页/共80页第二十八页，共81页。第28页/共80页第二十九页，共81页。第29页/共80页第三十页，共81页。1.研究(ynji)结果显示固定时间短、扩增片段短扩增 效果好。2.同一种固定方式扩增片段越长，扩增的稳 定性越差;3.同一固定剂固定时间越短，RT-PCR扩增 结果越稳定;4

4、.采用同一固定时间从甲醇、乙醇及丙酮等沉淀类固 定剂固定后石蜡包埋的病毒组织中扩增出病毒RNA 的阳性结果比醛类固定后包埋组织高，RT-PCR扩 增长片段的稳定性高。第30页/共80页第三十一页，共81页。第31页/共80页第三十二页，共81页。第32页/共80页第三十三页，共81页。第33页/共80页第三十四页，共81页。第34页/共80页第三十五页，共81页。第35页/共80页第三十六页，共81页。第36页/共80页第三十七页，共81页。第37页/共80页第三十八页，共81页。第38页/共80页第三十九页，共81页。第39页/共80页第四十页，共81页。第40页/共80页第四十一页，共81

5、页。第41页/共80页第四十二页，共81页。第42页/共80页第四十三页，共81页。第43页/共80页第四十四页，共81页。第44页/共80页第四十五页，共81页。第45页/共80页第四十六页，共81页。第46页/共80页第四十七页，共81页。第47页/共80页第四十八页，共81页。第48页/共80页第四十九页，共81页。第49页/共80页第五十页，共81页。第50页/共80页第五十一页，共81页。第51页/共80页第五十二页，共81页。第52页/共80页第五十三页，共81页。（3）冲洗的时间要足够，才能彻底洗去结合的物质。切片用一小烧杯柔和地于切片上冲洗，就能彻底冲洗去未结合的物质，无需附加

6、其它条件，冲洗好于切片上再注入PBS，持续(chx)2分钟左右就完全足够了。第53页/共80页第五十四页，共81页。前常用的PBS的PH在浓度是，使用效果好。第54页/共80页第五十五页，共81页。第55页/共80页第五十六页，共81页。第56页/共80页第五十七页，共81页。第57页/共80页第五十八页，共81页。第58页/共80页第五十九页，共81页。第59页/共80页第六十页，共81页。第60页/共80页第六十一页，共81页。 陈陈 鹤鹤第61页/共80页第六十二页，共81页。第62页/共80页第六十三页，共81页。第63页/共80页第六十四页，共81页。性的支架（性的支架（permea

7、ble supports）。）。第64页/共80页第六十五页，共81页。第65页/共80页第六十六页，共81页。第66页/共80页第六十七页，共81页。第67页/共80页第六十八页，共81页。第68页/共80页第六十九页，共81页。第69页/共80页第七十页，共81页。第70页/共80页第七十一页，共81页。第71页/共80页第七十二页，共81页。第72页/共80页第七十三页，共81页。第73页/共80页第七十四页，共81页。第74页/共80页第七十五页，共81页。第75页/共80页第七十六页，共81页。第76页/共80页第七十七页，共81页。第77页/共80页第七十八页，共81页。第78页/共80页第七十九页，共81页。三、注意事项：1.在用PBS缓冲液冲洗时，注意贴壁慢慢加入，以免冲散单层贴壁细胞，影响实验拍照结果。2.一般做划痕实验，都是无血清或者低血清（2%）否则细胞增殖就不能忽略。3.按照6孔板背后画线的垂直方向划痕，可以(ky)形成若干交叉点，作为固定的检测点，以解决了前后观察时位置不固定的问题。第79页/共80页第八十页，共81页。NoImage内容(nirng)总结会计学。（一） 组织洗涤。2.同一种固定方式扩增片段越长，扩增的稳。