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文档简介
1、 【实验目的实验目的】 观察各种因素对血液凝固的影响。观察各种因素对血液凝固的影响。 【实验原理实验原理】 本实验采用预先去除本实验采用预先去除Ca2+制备抗凝的动物制备抗凝的动物血液,在实验中复血液,在实验中复Ca2+,观察哪些因素可以影,观察哪些因素可以影响血液凝固的过程,从而加深对血液凝固基响血液凝固的过程,从而加深对血液凝固基本过程的理解。本过程的理解。【实验对象实验对象】 家兔家兔【实验器材与药品实验器材与药品】 小试管、计时器、水浴箱、刻度吸管、棉花、冰块、小试管、计时器、水浴箱、刻度吸管、棉花、冰块、液体石蜡、肝素液体石蜡、肝素8U(置小试管内)、抗凝全血、(置小试管内)、抗凝全
2、血、0.18 mol/L CaCl2溶液、溶液、0.9% NaCl注射液、注射液、2%草酸钾草酸钾溶液、溶液、25%枸橼酸钠溶液。枸橼酸钠溶液。【实验步骤和观察项目实验步骤和观察项目】 1、麻醉、麻醉:1.5%戊巴比妥钠耳缘静脉注射戊巴比妥钠耳缘静脉注射麻醉,剂量麻醉,剂量2ml/kg体重。体重。 2、固定、备皮、固定、备皮 3、颈总动脉插管、颈总动脉插管 4 4、取血、取血:打开动脉夹,经颈动脉插管:打开动脉夹,经颈动脉插管一次性采血(多次放血可能会出现血液一次性采血(多次放血可能会出现血液凝固于插管内而不能再放血凝固于插管内而不能再放血) ),按照每,按照每100ml100ml血液加入血液
3、加入25%25%的枸橼酸钠的枸橼酸钠4ml4ml进进行体外抗凝。行体外抗凝。(1)观察纤维蛋白原在凝血过程中的作用)观察纤维蛋白原在凝血过程中的作用 取取2支小试管分别加入支小试管分别加入抗凝血抗凝血35 mL,再加入,再加入0. 18 mol/L CaCl2 35滴滴,轻摇试管混匀。将第一管,轻摇试管混匀。将第一管静置静置作为对照作为对照,第二管用,第二管用竹签搅动竹签搅动12 min后取出竹签,后取出竹签,用水用水轻轻漂洗轻轻漂洗,观察竹签上是否存在纤维蛋白丝,观察竹签上是否存在纤维蛋白丝,另外观察各管内的血液是否发生凝固并比较各管之另外观察各管内的血液是否发生凝固并比较各管之间有无差异。
4、间有无差异。(2)血液凝固的加速或延缓血液凝固的加速或延缓 取试管取试管6支并作好标记,按下表准备各实验条件,支并作好标记,按下表准备各实验条件,复钙后各管应立即混匀并开始计时,记录各管血复钙后各管应立即混匀并开始计时,记录各管血液凝固时间并分析其原因。液凝固时间并分析其原因。 表表 影响血液凝固的因素影响血液凝固的因素 实验条件实验条件凝血时间凝血时间影响因素影响因素血液血液Ca2+少量棉花少量棉花内表面涂润滑油内表面涂润滑油37水浴水浴冰浴冰浴草酸钾草酸钾12ml肝素肝素 8 U抗凝血抗凝血1 mL抗凝血抗凝血1 mL抗凝血抗凝血1 mL抗凝血抗凝血1 mL抗凝血抗凝血1 mL抗凝血抗凝血
5、1 mL0. 18 mol/L CaCl2 12滴滴0. 18 mol/L CaCl2 12滴滴0. 18 mol/L CaCl2 12滴滴0. 18 mol/L CaCl2 12滴滴0. 18 mol/L CaCl2 12滴滴0. 18 mol/L CaCl2 12滴滴5.实验观察实验观察 每隔每隔30s将各试管轻轻倾斜一次,观察其中的将各试管轻轻倾斜一次,观察其中的血液是否已凝固,发现其中的血液已呈凝胶状而血液是否已凝固,发现其中的血液已呈凝胶状而不再流动时记录其时间不再流动时记录其时间,最后计算出各试管血液,最后计算出各试管血液凝固所需的时间凝固所需的时间(在本实验条件下,如超过在本实验条件下,如超过30分钟分钟血液仍未凝则视为血液仍未凝则视为“不凝不凝”)。分析讨论分析讨论 1、比较第、比较第1管(放棉花管)与第管(放棉花管)与第2管(石蜡油润管(石蜡油润滑管)内血液凝固的速度,并分析产生区别的滑管)内血液凝固的速度,并分析产生区别的原因。原因。 2、比较第、比较第3管(管(37管)与第管)与第4管(冰浴管)内管(冰浴管)内血液凝固的速度,并分析产生区别的原因。血液凝固的速度,并分析产生区别的原因。 3、分析第、分析第5管与第管与第6管内血凝方面发生变化的原管内血凝方面发生变化的原因。因。【注意事项注意事项】1.1.实验用的所有试管必须实验用的所有试管必须清洗干净清洗
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