莨菪烷类抗胆碱药物的分析

1、LoadingLoading 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析80k药物分析班第一节第一节 莨菪烷类药物的结构和性质莨菪烷类药物的结构和性质第二节第二节 鉴别实验鉴别实验第三节第三节 特殊杂质与检查特殊杂质与检查第四节第四节 含量测定含量测定第一第一节节 莨菪烷类药物的结构和性质莨菪烷类药物的结构和性质1 第一节第一节 莨菪烷类药物的结构和性质莨菪烷类药物的结构和性质一、典型药物 莨菪烷生物碱是从茄科植物，如颠茄、莨菪和白曼陀罗等中提取的具有对M受体阻断作用的生物碱。这类生物碱都是由莨菪醇与不同有机酸所成的酯。NH3COH含氮的醇含氮的醇( (莨菪醇莨菪醇)

2、)第一第一节节 莨菪烷类药物的结构和性质莨菪烷类药物的结构和性质H2SO4NH3CH22H2OOHOOH硫酸莨菪碱H2SO4OOHOHNH3CH2H2O硫酸阿托品l酯的结构，易水解l五元脂环上有叔胺氮原子l手性Cl酯的结构，易水解l五元脂环上有叔胺氮原子l消旋体，无旋光性第一第一节节 莨菪烷类药物的结构和性质莨菪烷类药物的结构和性质1.水解性（酯水解生成醇和酸）OHOOHNCH3OHHNCH3+HOOCOH阿托品 莨菪醇 莨菪酸2.碱性：阿托品和东莨菪碱结构中，五元脂环含有叔胺氮原子， 较强的碱性，易于酸成盐，如阿托品pKb1为4.353.旋光性：可用于鉴别阿托品和东莨菪碱第二第二节节 鉴别实

3、验鉴别实验第二第二节节 鉴别实验鉴别实验一、托烷生物碱一般鉴别试验一、托烷生物碱一般鉴别试验(Vitaili反应反应)HOOCOH+3HNO3HOOCOHNO2O2NNO2+3H2OKOHC2H5OHHOOCOHNO2O2NNOHOKOHHOOCOHNO2O2NNOKOChP检查法：取供试品约10mg，加发烟硝酸5滴，置水浴上蒸干，得黄色的残渣，放冷，加乙醇23滴，加固体氢氧化钾一小粒，即显深紫色。莨菪酸硝基化脱羧化共轭结构深紫第二第二节节 鉴别实验鉴别实验二二、与与硫酸硫酸- -重铬酸钾的重铬酸钾的反应反应（氧化反应）氧化反应）HOOCOHH2OH2SO4HOOCCH22O2CHO+2CO2

4、H2O药物水解后生成莨菪酸，可与硫酸-重铬酸钾在加热的条件下，发生氧化反应，生成苯甲醛而逸出苦杏仁的臭味。反应式如下：第二第二节节 鉴别实验鉴别实验三、与生物碱显色剂或沉淀剂的反应生物碱在酸性溶液中与重金属盐或大分子酸生成难溶性盐、复盐或配合物沉淀。生物碱沉淀试剂生物碱沉淀试剂反应条件与结果反应条件与结果碘化铋钾试液碘化铋钾试液橙色或棕红色沉淀橙色或棕红色沉淀碘化钾碘试液碘化钾碘试液棕色或棕褐色沉淀棕色或棕褐色沉淀碘化汞钾试液碘化汞钾试液白色或淡黄色沉淀白色或淡黄色沉淀三硝基苯酚试液三硝基苯酚试液结晶性沉淀并有特定熔点结晶性沉淀并有特定熔点硅乌酸试液硅乌酸试液白色或淡黄色或黄棕色沉淀白色或淡黄

5、色或黄棕色沉淀磷乌酸试液磷乌酸试液淡黄色沉淀淡黄色沉淀第二第二节节 鉴别实验鉴别实验四、光谱鉴别法紫外光谱法一般通过比较一般通过比较 maxmax、minmin或吸收光谱的一致性来进行或吸收光谱的一致性来进行鉴别以及吸光系数。鉴别以及吸光系数。红外光谱法CHPCHP收载的原料药一般都采用红外光谱法进行鉴别收载的原料药一般都采用红外光谱法进行鉴别第二第二节节 鉴别实验鉴别实验五、色谱鉴别法色谱法一般用于已知生物碱的鉴别，主要有TLC、HPLC、GC、PC等第二第二节节 鉴别实验鉴别实验六、硫酸盐和溴化物的反应 药物大都以硫酸盐或溴化物的形式存在，它们的水溶液则分别显硫酸盐或溴化物的鉴别反应。Ch

6、P氢溴酸东莨菪碱的鉴别：取供试品溶液，加稀硝酸使成酸性，滴加硝酸银试液，即生成淡黄色凝乳状沉淀，分离，沉淀能在氨试液中微溶，但在硝酸中几乎不溶。取供试品溶液，滴加氯试液，溴即游离，加三氯甲烷振摇，三氯甲烷层显黄色或红棕色。第三节第三节 特殊杂质与检查特殊杂质与检查第三节第三节 特殊杂质与检查特殊杂质与检查氢溴酸东莨菪碱制备工艺洋金花粗粉乙醇/渗漉渗漉液减压蒸馏浸膏H2SO4/提取酸性提取液Na2CO3, CHCl3/提取总生物碱Na2CO3, CHCl3/分离东莨菪碱HBr/成盐氢溴酸东莨菪碱（粗品）75% C2H5OH/精制成品根据其制备工艺，本品可通过酸度、其它生物碱、和易氧化物质检查进行

7、控制一、氢溴酸东莨菪碱中有关物质的检查一、氢溴酸东莨菪碱中有关物质的检查第三节第三节 特殊杂质与检查特殊杂质与检查1. 酸度酸度如氢溴酸东莨菪碱为弱酸弱碱盐、通过其5%的水溶液pH为4.05.5可控制酸性杂质2. 易氧化物易氧化物可能杂质为阿扑东莨菪碱、及其它含有不饱和双键的有机物，他们的紫外吸收波长会红移、可使高锰酸钾溶液褪色NH3CHOOCH2(杂质)NH3CHOOOCH2(杂质)第三节第三节 特殊杂质与检查特殊杂质与检查3. 3. 其它生物碱其它生物碱本品水溶液加入氨水试液不得发生混浊。当有其它生物碱存在时，则易产生混浊。ChP氢溴酸东莨菪碱其他生物碱的检查：取本品0.10g，加水2ml

8、溶解后，分成两等份；一份中加氨试液23d，不得发生浑浊；另一份中加氢氧化钾试液数滴，只许发生瞬即消失的类白色浑浊。 其他生物碱还常用TLC和HPL C法检查。其杂质限量判断主要有标准品对照法、自身稀释对照法等方法。第三节第三节 特殊杂质与检查特殊杂质与检查二、硫酸阿托品中有关物质的检查二、硫酸阿托品中有关物质的检查硫酸阿托品为消旋体，无旋光性，而莨菪碱为左旋体，可以利用旋光性对莨菪碱杂质进行检查。ChP用HPLC法检查其中有关物质，通过峰面积的比值及保留时间来控制杂质限度第四节第四节 含量测定含量测定第四节第四节 含量测定含量测定莨菪烷类抗胆碱药物药理活性较强、临床使用剂量较少，因此测定方法要

9、专属、灵敏酸性染料比色法非水溶液滴定法高效液相色谱法一、酸性染料比色法一、酸性染料比色法在一定的pH条件下，某些生物碱药物可与某些酸性染料结合而呈色，进而可用分光光度法进行测量。第四节第四节 含量测定含量测定基本原理基本原理酸性染料如磺酸酞类指示剂等，如溴甲酚绿、溴麝香草酚蓝、溴甲酚紫、溴酚蓝等其与酸性离子定量结合、生成具有吸收光谱明显红移的有色离子对，且可以被有机溶剂定量萃取，通过测定有机相中有色离子对的特征波长处的吸光度，即可进行含量测定。其反应示意图如下：其反应示意图如下： 也可将呈色的有机相碱化，使与有机碱结合的酸性染料释放出来，测定其吸光度，再计算出碱性药物的含量第四节第四节 含量测

10、定含量测定第四节第四节 含量测定含量测定影响因素1. 水性最佳pH值：使得BH+和In-最多 pH过低抑制酸性染料的解离、使酸性阴离子浓度过低影响离子对的形成； pH过高，有机药物呈游离态，也抑制离子对的形成，因此须有一个最佳pH值存在，使离子对生成最有利。 其选择方法一般根据药物与染料的pK值及水相与有机相的分配系数而定2. 酸性染料及其浓度： 定量结合，产物溶解性好；可稍过量。 一般认为对测定结果影响不大，只要量足够大就可以； 但浓度过高的话就会形成严重的乳化层，且不易于除去，往往影响测定结果。第四节第四节 含量测定含量测定4. 水分的影响： 影响结果，脱水剂或滤纸除去水分5. 酸性染料里

11、面的有色杂质 影响结果，先用萃取溶剂萃取除去3.有机溶剂的选择：u提取效率高，氯仿最理想；u一般应选择对有机碱药物与酸性染料形成离子对萃取效率高、能与离子对形成氢键、不与或极少与水混溶的有机溶剂作为萃取溶剂。第四节第四节 含量测定含量测定二、二、 非水溶液滴定法非水溶液滴定法 非水溶液滴定法是在非水溶剂中进行的酸碱滴定测定法。主要用来测定有机碱及其氢卤酸盐、硫酸盐、磷酸盐以及有机酸碱金属盐类的含量。 硫酸是二元酸，在水溶液中可以发生二级解离，生成SO42-。但是冰醋酸非水介质中，只能发生一级解离，生成HSO4-,即只提供一个H+。所以硫酸盐类药物在冰醋酸中，只能滴定至硫酸氢盐，可用高氯酸滴定液直接滴定。 (BH+)2 SO42- + HClO4 (BH+)ClO4 + (BH+) HSO42- 硫酸阿托品与高氯酸反应的化学计量摩尔比为1:1.第四节第四节 含量测定含量测定三三. .高效液相色谱法高效液相色谱法 莨菪烷类药物HPLC分析测定时，常采用烷基磺酸盐作为离子对试剂，流动相一般呈酸性，以利于碱性药物的质子化。 ChP2010中采用HPLC测定氢溴酸东莨菪碱及其片剂和注射液