植物组培-胚培养

1、植物胚培养植物胚培养 胚及具胚器官（如子房、胚珠）在离体培养条件下，使胚及具胚器官（如子房、胚珠）在离体培养条件下，使胚发育成幼苗的技术。胚发育成幼苗的技术。 作用与意义作用与意义 1. 克服远缘杂种的不育性，获得杂种后代克服远缘杂种的不育性，获得杂种后代 2. 促使发育不全或中途败育的胚发育成熟，使种子无活力促使发育不全或中途败育的胚发育成熟，使种子无活力的植物获得后代（兰花、天麻）的植物获得后代（兰花、天麻） 3. 克服种子休眠克服种子休眠(桃等落叶果树桃等落叶果树)，提早结实，缩短育种年，提早结实，缩短育种年限限 4. 克服多胚品种珠心胚的干扰克服多胚品种珠心胚的干扰(柑桔、芒果、蒲桃柑

2、桔、芒果、蒲桃) 5. 胚培养诱导变异及多倍体胚培养诱导变异及多倍体 6. 诱导胚性愈伤组织，为细胞悬浮培养、原生质体培养和诱导胚性愈伤组织，为细胞悬浮培养、原生质体培养和融合，以及遗传转化提供很好的材料融合，以及遗传转化提供很好的材料胚器官培养胚器官培养 胚培养胚培养 胚珠培养胚珠培养 受精与非受精受精与非受精 胚乳培养胚乳培养 三倍体三倍体 离体授粉离体授粉 克服受精障碍克服受精障碍胚培养的方法胚培养的方法 取材和消毒取材和消毒 胚的剥离胚的剥离 接种接种 看护培养看护培养 胚乳胚乳植物胚胎发育植物胚胎发育from Chun-Ming Liu 离体胚培养的发育途径离体胚培养的发育途径1.

3、按正常胚胎发育途径形成植株（胚性发育）按正常胚胎发育途径形成植株（胚性发育） 球形胚球形胚 心形胚心形胚 鱼雷形胚鱼雷形胚 子叶期胚子叶期胚 植株植株2. 胚脱分化形成愈伤组织胚脱分化形成愈伤组织3. 早熟萌发早熟萌发 胚在培养中迅速萌发形成幼苗的现象，苗十分瘦弱，胚在培养中迅速萌发形成幼苗的现象，苗十分瘦弱，如向日葵、大白菜、甘蓝（低渗）如向日葵、大白菜、甘蓝（低渗） 胚培养的影响因素胚培养的影响因素 胚龄胚龄 胚龄大小与成活率正相关胚龄大小与成活率正相关 培养基培养基 营养成分与渗透压营养成分与渗透压 培养条件培养条件 温度和光照温度和光照 胚柄的作用胚柄的作用 促进生长（赤霉素）促进生长

4、（赤霉素）成熟胚的培养成熟胚的培养一般指子叶期后至发育完全的胚的离体培养一般指子叶期后至发育完全的胚的离体培养 这时的胚已具有胚芽和胚根，无机大量元素这时的胚已具有胚芽和胚根，无机大量元素和糖便可促进种胚萌发，但远缘杂种胚、次生胚和糖便可促进种胚萌发，但远缘杂种胚、次生胚则需要添加有机物、激素。则需要添加有机物、激素。 生长素生长素 低浓度促进胚的发育，尤其是胚根低浓度促进胚的发育，尤其是胚根 细胞分裂素细胞分裂素 会抑制胚生长，对有些植物促进会抑制胚生长，对有些植物促进 赤霉素促进有后熟作用的种子萌发，打破休眠赤霉素促进有后熟作用的种子萌发，打破休眠幼胚培养幼胚培养幼胚（原胚）指子叶期以前的

5、具胚结构的幼小胚幼胚（原胚）指子叶期以前的具胚结构的幼小胚基本培养基：基本培养基： MS B5 Nitsch等等 N硝酸盐比铵盐好硝酸盐比铵盐好不同发育阶段与渗透压高低有密切的依存关系不同发育阶段与渗透压高低有密切的依存关系胚越年幼，要求的渗透压越高胚越年幼，要求的渗透压越高 以蔗糖最好，或以蔗糖最好，或2-4甘露糖醇甘露糖醇 如如 柑桔柑桔 球形胚之前球形胚之前 10蔗糖蔗糖 曼陀罗曼陀罗 心形期前心形期前 8蔗糖蔗糖 鱼雷形期鱼雷形期 1.0-0.5蔗糖蔗糖 荠菜荠菜 心形期前心形期前 12-18蔗糖蔗糖另外，还可添加植物提取物，如另外，还可添加植物提取物，如 椰乳、马铃薯、椰乳、马铃薯、 香蕉等香蕉等兰科植物兰科植物The effect of additional copper on the growth of callus from immature barley embryos. (a): standard callus