逍遥泡腾片的研究

1、中药新药研究 题 目：逍遥泡腾片的研究 班 级：2010级研究生1班姓 名： 王 娜学 号： 2010087逍遥泡腾片的研究1.立题目的及立题依据：1.1立题目的随着社会的进步,现在人们工作压力越来越大,许多人精神恍惚抑郁,在中医看来属于肝郁气滞.现代医学治疗肝郁目前尚无理想的方法。中国药典2005年版一部收载品种“逍遥丸”为治疗肝郁名方，具有舒肝健脾、养血调经的作用，用于肝气不舒、胸胁涨痛、头晕目眩、食欲减退、月经不调等症，治疗效果较好。但原方丸存在着服用量大，携带较为不便，药物起效缓慢、生物利用度较低等缺点，因此，运用现代学技术对逍遥丸这一传统中药进行剂型改进实验，研制出一种疗效可靠、方便

2、实用、生物利用度高的新剂型治疗肝郁，具有重要的社会意义和较高的经济价值。泡腾片是近年来国外开发应用的一种新颖片剂。它与普通片剂的不同之处，就在于它含有泡腾崩解剂，在泡腾崩解剂的作用下，即刻产生大量气泡(CO2)，使片剂迅速崩解和融化。它具有如下如下优点：便于保存和携带；泡腾片剂崩解快速、服用方便、起效迅速；经过调味后的泡腾片，口味更佳，良药不再苦口，使病人更乐于接受。因此在对原处方深入研究的基础上，参考大量文献，对逍遥丸处方药物进行了提取，将其制备成泡腾片这一新剂型。1.2.立题依据：逍遥丸为调肝养血之名方，临床应用广泛。但对于逍遥丸的研究，目前剂型仅停留在汤剂、合剂、片剂、胶囊剂等传统剂型上

3、。在大量参考文献的基础上，根据方中药材的有效成分及理化性质，对原逍遥丸中全部药材进行提取，制备成泡腾片新剂型。既较好地保持了原方疗效，又使其便于服用和携带，大大提高了其生物利用度，具有良好的实用价值。1.2.1 处方来源本方剂药物是在宋代太平惠民和剂局方记载的传统方剂逍遥丸的基础上研制而成，经临床验证，逍遥丸治疗肝郁疗效显著。1.2.2 处方组成柴胡100g、白芍100g、当归100g、白术100g、茯苓100g、薄荷20g、炙甘草80g1.2.3 方义分析方中柴胡疏肝解郁，使肝气得以条达而为君药；当归甘辛苦温，养血和血，为血中之气药；白芍酸苦微寒，养血敛阴，柔肝缓急；归芍与柴胡同用，补肝体而

4、和肝用，使血和则肝和，血充则肝柔，共为臣药。肝病必传脾，故以白术、茯苓、甘草健脾益气，既能实土以御木侮，又使营血化生有源，共为佐药。薄荷少许，疏郁达肝，辛散达郁亦为佐药，合用为方，使肝郁得疏，血虚得养，脾弱得复，气血兼顾，肝脾同调。2.制备工艺研究2.1 剂型选择根据处方药物性质、处方日服剂量、处方的功能主治和临床用药的需要，对剂型进行筛选。原方以丸剂内服，临床疗效较好，但丸剂服用量较大，且作用缓慢。采用泡腾片剂型，使药物能够快速溶散供人体吸收，提高生物利用度，加快起效速度。同时通过-环糊精(-CD)包合挥发性成分，掩盖了挥发油的不良气味，减少了刺激性，提高制剂的稳定性，便于储存、运输和使用。

5、2.2 工艺路线的拟定本方七味药材中，柴胡、当归、白术、薄荷含较多挥发油且具有重要药理功能，因此，在制备工艺中应先提取挥发油,采用水蒸气蒸馏法提取。其余药材根据有效成分的理化性质多为水溶性的特点，采用水为溶媒进行煎煮提取。为增强其稳定性，掩盖挥发油的不良气味，减少刺激性，挥发油可应用-CD进行包合；将药渣加入白芍、甘草、茯苓药材中加水煎煮提取；提取后的药液与挥发油提取后的药液合并，浓缩干燥。工艺路线如下：柴胡、当归白术、薄荷白芍、甘草茯苓提取挥发油 合并药渣挥发油药液煎煮 滤过 滤液滤液 -CD包合-CD包合物合并浓缩过滤 稠膏真空干燥干浸膏 粉碎，制颗粒颗粒加入 压片成品2.3 挥发油提取工

6、艺的考察根据有关资料，对方中柴胡、当归、白术、薄荷挥发油采用水蒸气蒸馏法提取，对影响挥发油提取效果的加水量、蒸馏时间分别进行考察。2.3.1 加水量的考察称取柴胡、当归、白术、薄荷四味药材2倍量处方量共640g，分别加不同量水浸泡过夜，提取挥发油5h，以收油率为指标，筛选加水量，见下表：加水量考察结果加水量(倍) 6 7 8收油量(ml)2.3.2 提取挥发油时间考察称取两倍处方量柴胡、当归、白术、薄荷共640g，粉碎成粗粉，按中国药典2005版一部附录挥发油测定提取挥发油，至油量不再增多读数。以挥发油收率为指标，记录不同时间的挥发油量，结果见表：挥发油收集量时 间(h) 1 2 3 5挥发油

7、量(ml)2.4 挥发油包合方式研究采用BCD包合的方法有多种，常用的制备方法有饱和水溶液法、研磨法、超声波法、冷冻干燥法，此外国外的报道中还有喷雾干燥法。根据参考文献，本实验采取三种方式对逍遥泡腾片挥发油进行包合试验。在实验中，对挥发油包合影响较大的因素如包合方式、-CD的比例、搅拌时间、温度等。每一因素各取3个水平进行正交试验，以挥发油包合率作为考察指标。每次试验挥发油用量为1m1。包合率为评价包合效果好坏的重要指标，包合率越高，包合效果越好，在工业大生产中才有意义。包合实验因素水平表水平 包合方法 挥发油与环糊精的比例 搅拌时间（h） 温度()1 饱和水溶液法2 研磨法3 超声波法2.5

8、 白芍、甘草、茯苓提取条件的考察2.5.1 提取溶剂的选择白芍有效成分为芍药苷，芍药苷水溶性和醇溶性均良好，但甘草、茯苓有效成分均为水溶性，从临床实践出发，为保证制剂新剂型与原方功能主治相同，采用水做溶剂煎煮提取，工艺简单，成本较低，对提取设备要求也不高。2.5.2 提取工艺条件优选考察提取工艺中加水量(A)、煎煮时间(B)、煎煮次数(C)三个因素，每个因素选择三个水平，进行正交试验。考虑到白芍为方中处方量较大的重要药物，同时白芍、甘草和茯苓中均含有大量的三萜类成分和苷类化合物，因此以正丁醇浸出物和芍药苷为评价指标优选最佳提取工艺。煎煮条件的因素水平表水平 A加水量(倍) B煎煮时间（h） C

9、煎煮次数(次) 1232.6 制粒工艺考察2.6.1 浓缩干燥方中苷类有效成分，加热时间过长易分解，导致有效物质含量降低、药品临床疗效降低，因此采用减压浓缩、真空干燥，降低浓缩温度，减少药液受热时间，减少有效成分的破坏。2.6.2 填充剂的筛选全浸膏制备固体制剂，大多成型困难，且易于吸湿结块，因此常加入适当的辅料加以改善。根据文献报道，结合本品的特点，选用淀粉、糊精、乳糖为填充剂。 2.6.3 润滑剂筛选由于颗粒流动性较差，压片困难，必须使用润滑剂加以改善。常用润滑剂有滑石粉，其用量一般为36，或硬脂酸镁，其用量一般为0.31，微粉硅胶是常用的助流剂，其用量一般为12等，但有文献报道滑石粉可在

10、各脏器中分布，并能引起与过敏有关的炎性反应。根据参考文献，硬脂酸镁制得的片剂较优，用量通常为1。2.6.4 矫味剂口服泡腾片中加入适量的矫味剂，可以改善口感，增加患者的适应性。参考文献可知：常用辅料为蔗糖、甜蜜素、糖精钠、阿巴斯甜、甜菊苷等。若选用蔗糖，其用量较大。糖精钠存在争议，文献认为无毒，但有长期服用导致膀胱癌的报道。蛋白糖也叫甜味素，是由天门冬氨酸及苯丙氨酸合成的甜味剂。甜度是蔗糖的200倍，口感很像蔗糖。它的热值很低，不受胰岛素调控，也不增加血糖浓度，因此选用蛋白糖做为矫味剂。但蛋白糖用量过大，自身会产生苦味，因此应控制用量为0.10.4。3质量标准研究3.1 原料药材质量标准白芍：

11、为毛茛科植物芍药 Paeonia lactiflora Pall的干燥根。符合中国药典2005年版一部68页白芍项下有关规定。当归：为伞形科植物当归 Angelica sinensis(Oliv.) Diels.的干燥根。符合中国药典2005年版一部89页当归项下有关规定。白术：为菊科植物白术 Atractylodes macrocephala Koidz的干燥根茎。符合中国药典2005年版一部68页白术项下有关规定。薄荷：为唇形科植物薄荷 Mentha haplocalyx Briq的干燥地上部分。符合中国药典2005年版一部261页薄荷项下有关规定。柴胡：为伞形科植物柴胡 Bupleuru

12、m chinense DC.或狭叶柴胡 Bupleurum scorzonerifolium willd.的干燥根。符合中国药典2005年版一部198页柴胡项下有关规定。茯苓：为多孔菌科真菌茯苓 Poria cocos(Schw.) wblf的干燥菌核。符合中国药典2005年版一部166页茯苓项下有关规定。甘草：为豆科植物甘草 Glycyrrhiza uralensis Fisch的干燥根及根茎。符合中国药典2005年版一部59页甘草项下有关规定。3.2 鉴别(1)白芍的鉴别：取本品10片，研细，加乙醇15ml，静置15分钟，时时振摇。滤过，滤液浓缩至约2ml，加入已处理好的中性氧化铝柱上，用

13、95乙醇35ml洗脱，收集洗脱液，浓缩至1ml，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。按处方比例取除白芍外的药材适量，按逍遥泡腾片的制备工艺和供试品溶液的制备方法制成缺白芍阴性对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)实验，吸取上述三种溶液各耻l，分别点于同一硅胶G板上，以三氯甲烷一甲醇(5：1)为展开剂展开，取出晾干，喷以5香草醛硫酸溶液，加热至斑点清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同的紫色斑点。(2)当归的鉴别：取本品10片，研细，加20ml环己烷超声处理15分钟，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液。另

14、取当归对照药材1g，同法制成对照药材溶液。按处方比例取除当归以外的药材适量，按逍遥泡腾片的制备工艺和供试品的制备方法制成阴性对照溶液。照薄层色谱实验法(中国药典2005年版一部附录VI B)实验，吸取上述三种溶液，点于同一硅胶G板上，以环己烷乙酸乙酯(8.5：1.5)为展开剂，取出晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点。(3)柴胡的鉴别：取本品10片，研细，加甲醇20m1，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，用水饱和正丁醇振摇提取两次，每次15m1，合并正丁醇液，浓缩蒸干，残渣加甲醇2ml溶解，作为供试品溶液。

15、另取柴胡对照药材粉末lg，加10ml乙醚振摇5min，弃取乙醚液，药渣挥干乙醚，加20m1乙醇回流30min，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml溶解，水饱和正丁醇振摇提取2次，每次15ml，合并正丁醇液，蒸干，加1m1甲醇溶解，作为对照药材溶液。按处方比例取柴胡外的药材适量，按逍遥泡腾片的制备工艺和供试品溶液的制备方法制成缺柴胡阴性对照溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)实验，吸取上述三种溶液各耻l，分别点于同一硅胶G板上，以三氯甲烷一甲醇一水(7：3：1)的下层溶液为展开剂展开，取出晾干，喷5对二甲氨基苯甲醛的10硫酸溶液，加热至斑点清晰，供试品色谱中在与对照药材色谱相应

16、位置上显相同颜色的红色斑点。(4)甘草的鉴别：取鉴别(3)项下的供试品溶液作为供试品溶液。另取甘草对照药材1g加甲醇超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水40ml使溶解，用正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用水洗涤3次，蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，作为对照药材溶液。按处方比例取除甘草外的药材适量，按供试品溶液的处理方法制成缺甘草阴性对照溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)实验，吸取上述三种溶液各l距l，点于同一硅胶G板上，以乙酸乙酯一甲醇一冰醋酸一水(15：1：1：2)为展开剂展开，取出晾干，喷1硫酸乙醇溶液，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在

17、与对照品相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点。(5)白术的鉴别取鉴别(2)项下的供试品溶液作为供试品溶液。另取白术对照药材，同法制成对照药材溶液。按处方比例取除白术外的药材适量，按逍遥泡腾片的制备工艺和供试品溶液的制备方法制成缺白术阴性对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)实验，吸取上述三种溶液各5ul，分别点于同一硅胶G板上，以石油醚-乙酸乙酯(50：1)为展开剂展开，取出晾干，喷以5香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，并应显有一桃红色主斑点（苍术酮）。(6)薄荷的鉴别取本品10片，研细，按计算量加入挥发油

18、，加乙酸乙酯15ml，超声15分钟，滤过，浓缩至约1ml，作为供试品溶液。另取薄荷脑对照品，加甲醇制成1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。按处方比例取除薄荷外的药材适量，按逍遥泡腾片的制备工艺和供试品溶液的制备方法制成缺薄荷阴性对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)实验，吸取上述三种溶液1-4ul，分别点于同一硅胶G板上，以甲苯一乙酸乙酯(19：1)为展开剂展开，取出晾干，喷以香草醛硫酸试液一乙醇(1：4)的混合溶液，在100加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。3.3 检查按中国药典2005版一部附录I D片剂项下有关要求

19、，测定重量差异、崩解时限、发泡量及微生物限度检查。3.4 含量测定与方法学研究3.4.1 对照品溶液的制备：精密称取芍药苷对照品适量，置于50m1容量瓶中，加甲醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。3.4.2 供试品溶液的制备：取本品10片，精密称定，研细，取约lg，精密称定，置具塞三角瓶中，加甲醇50ml，称定重量，超声处理15min，放冷，称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，取上清液O.45um的微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。3.4.3 线性关系考察： 按药典色谱条件，分别精密吸取上述对照品溶液2，5,10，15，20，25u1，注入液相色谱仪，测得峰面积。以峰面积为纵坐标，芍药

20、苷对照品进样量为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。3.4.4 阴性对照实验：取按工艺制备的缺白芍阴性对照药，按4.4.2项下方法操作，制备缺白芍阴性对照溶液。分别精密吸取芍药苷对照品、供试品和缺白芍阴性对照品溶液各10ul，注入液相色谱仪。3.4.5 精密度试验吸取同一供试品溶液10ul，注入高效液相色谱仪中，重复进样6次，测定峰面积。RSD值应小于3%。3.4.6 稳定性试验取同一批次样品，照供试品溶液的的制备方法处理制备供试品溶液，分别在0，1，2，4，6，8h进样10ul测定峰面积。稳定性试验结果时间（h） 0 1 2 4 6 8峰面积3.4.7 重复性试验取同一批号样品，按上述的含量测定方法进行5份平行测定，计算含量。RSD值应小于3%。重现性实验结果序号 芍药苷（mg/片） RSD(%)123453.4.8 加样回收试验精密称取已知含量的样品5份，每份0.5g，精密称定，分别准确加入浓度为0.0358mgm1的芍药苷对照品溶液50m1，以下按供试品溶液的配置进行操作测定，计算回收率，结果见表：回收率=（测得芍药苷量-样品中芍药苷量）/加入芍药苷量×100%回收率试验结果称样量 样品中芍药 加入芍药苷量 测得芍药苷总量 回收率 平均值 RSD （g） 苷的含量 （mg） （mg） （%） （%） (%）3.4.9 样品含量测定：本标准