病理学技术第一次课1

1、病理学技术概况齐晓薇 副主任医师江南大学附属医院病理学教研室病理学的定义lPathology 是病痛（是病痛（ pathos）的研究的研究(logos) l联系基础医学与临床医学的桥梁联系基础医学与临床医学的桥梁 l研究疾病状态下细胞、组织和器官结构和功能的研究疾病状态下细胞、组织和器官结构和功能的改变改变l通过各种手段解释疾病，为临床诊断，治疗和疾通过各种手段解释疾病，为临床诊断，治疗和疾病的预防提供依据病的预防提供依据2022-4-292病理学技术 病理学包括病理学理论和病理学技术。病理学技术是病理学包括病理学理论和病理学技术。病理学技术是“病理学之母病理学之母”。病理学的理论和技术被视为

2、一辆车的两。病理学的理论和技术被视为一辆车的两个轮子，缺一不可，互为依存，互相促进，两者的结合决个轮子，缺一不可，互为依存，互相促进，两者的结合决定着病理学的发展。定着病理学的发展。 病理学技术包括尸体解剖、大体标本的制作、制片（石病理学技术包括尸体解剖、大体标本的制作、制片（石腊切片、冰冻切片、半薄切片、超薄切片等）、组织化学腊切片、冰冻切片、半薄切片、超薄切片等）、组织化学方法，免疫组化技术、原位杂交、分子病理技术、电镜技方法，免疫组化技术、原位杂交、分子病理技术、电镜技术、图像分析等。术、图像分析等。 病理技术的发展促进了病理学理论的进步。病理技术的发展促进了病理学理论的进步。2022-

3、4-293病理学的发展器官病理学时代：lGiovanni Battista Morgagni （1682 ,1 1771,11） l意大利解剖学家l现代解剖病理学之父l编写疾病的位置与原因，包含646例解剖记录 l奠定了病理学发展的基础l遗憾：没有将病理与临床联系2022-4-294病理学的发展组织病理学时代组织病理学时代lRudolf Virchow （1821,10-1902,12) 德国医生l现代病理学之父l编著细胞病理学l开创了细胞病理学时代2022-4-295病理学的发展现代病理学时代现代病理学时代(近400年历史）l电子显微镜：细胞超微结构的观察l免疫病理学：免疫组化技术的应用l分

4、子病理学：疾病遗传和基因的研究l数字病理学：2022-4-296病理学技术l传统病理学技术传统病理学技术 HE染色技术 组织化学染色 细胞病理学技术 l现代病理学技术现代病理学技术2022-4-297传统病理学技术l病理学技术的基础和根本，是临床和科研最常用的技术l全手工操作发展为自动化的机器：脱水机，包埋机，封片机，染色机，包埋盒和切片打号机，液基细胞制片技术l材料的优化：塑料包埋盒，一次性切片刀l试剂的该进：试剂的商业化，非污染环保试剂l低温恒冷切片机替代二氧化碳制冷机等l（前三次课主要讲述传统病理学技术，包括组织切片技术、生物染料和苏木精-伊红染色方法染色技术和原理、常用的特殊染色方法）

5、2022-4-298现代病理学技术l 免疫组织化学技术：发展快，应用广，已成为临床诊断，靶向药物的免疫组织化学技术：发展快，应用广，已成为临床诊断，靶向药物的筛选以及科研的重要手段；尽管存在问题。筛选以及科研的重要手段；尽管存在问题。l 电镜技术：包括透射电镜，扫描电镜，免疫电镜等，用于肿瘤的分型，电镜技术：包括透射电镜，扫描电镜，免疫电镜等，用于肿瘤的分型，肾脏病的诊断，肌肉疾病的诊断等；科研。肾脏病的诊断，肌肉疾病的诊断等；科研。l 分子病理技术：近分子病理技术：近20年来发展最快，分子生物学技术与病理形态结合，年来发展最快，分子生物学技术与病理形态结合，用于疾病诊断和分类，靶向药物的筛选

6、，病原体的检测，遗传学研究用于疾病诊断和分类，靶向药物的筛选，病原体的检测，遗传学研究等。等。l 数字化病理：病理切片数字化病理：病理切片扫描技术，远程会诊，图像分析系统，档案的数字化管理。 病理技术的进步促使人类的认识从大体、细胞、超微病理技术的进步促使人类的认识从大体、细胞、超微结构、分子基因水平逐步深入。结构、分子基因水平逐步深入。2022-4-2992022-4-2910免疫组化(pubmed检索） 应用免疫学（抗原抗应用免疫学（抗原抗体反应）和组织化学（化体反应）和组织化学（化学反应）的原理，对组织学反应）的原理，对组织切片或细胞标本中的某些切片或细胞标本中的某些成份进行原位定性、定

7、位成份进行原位定性、定位甚至定量研究的技术。甚至定量研究的技术。 现代病理学技术免疫组织化学技术的应用：免疫组织化学技术的应用：l临床诊断和鉴别诊断临床诊断和鉴别诊断l肿瘤的分型肿瘤的分型l肿瘤起源的判断肿瘤起源的判断l靶向药物的筛选靶向药物的筛选l肿瘤生物学行为的判断肿瘤生物学行为的判断l病原体的检测病原体的检测l2022-4-29112022-4-2912分子病理分子病理(pubmed检索）检索）现代病理学技术分子病理学技术：分子病理学技术：lFISHlPCRl原位杂交原位杂交l基因测序基因测序分子病理学技术的应用分子病理学技术的应用l诊断与鉴别诊断诊断与鉴别诊断l肿瘤预后判断肿瘤预后判断

8、l药物的筛选药物的筛选l.2022-4-2913分子病理在临床中的应用l 肺非小细胞癌肺非小细胞癌EGFR突变的检测：突变的检测：EGFR突变阳性者应用络氨酸激突变阳性者应用络氨酸激酶药物（易瑞沙）有效，否则效果不佳酶药物（易瑞沙）有效，否则效果不佳l 大肠癌大肠癌k-ras基因检测：基因检测：ras基因突变患者对西妥昔单抗（爱必妥）基因突变患者对西妥昔单抗（爱必妥）治疗无效，患者预后差治疗无效，患者预后差l 乳腺癌乳腺癌her-2基因检测：基因检测： her-2基因扩增患者对曲妥珠单抗（赫赛基因扩增患者对曲妥珠单抗（赫赛汀）有效，否则效果不佳汀）有效，否则效果不佳l 非小细胞肺癌非小细胞肺癌

9、ALK基因检测：基因检测：ALK基因发生重排患者对克唑替尼基因发生重排患者对克唑替尼有效，否则效果不佳有效，否则效果不佳l C-kit突变的检测：突变的检测：C-kit突变可用于选择是否使用药物突变可用于选择是否使用药物”格列卫格列卫l 血尿的诊断：检测血尿的诊断：检测9号，号，3号，号，17号，号，7号染色体可以辅助膀胱癌号染色体可以辅助膀胱癌的诊断和预测术后复发的可能的诊断和预测术后复发的可能l 淋巴瘤的分型：应用淋巴瘤的分型：应用FISH检测可辅助淋巴瘤的分型，为临床治检测可辅助淋巴瘤的分型，为临床治疗提供依据。疗提供依据。l .2022-4-2914电子显微镜技术 电子显微镜，包括透射

10、电镜和扫描电镜电子显微镜，包括透射电镜和扫描电镜 电镜技术包括负染色技术、冷冻蚀刻技术、电镜细胞化学电镜技术包括负染色技术、冷冻蚀刻技术、电镜细胞化学技术、电镜技术、电镜X射线显微分析技术、电镜放射自显影技术等射线显微分析技术、电镜放射自显影技术等 主要用于肾小球肾炎的分型主要用于肾小球肾炎的分型 确定肿瘤细胞的组织发生、类型和分化程度确定肿瘤细胞的组织发生、类型和分化程度 扫描电镜能够直接观察样品的表面的结构，血管腔面改变扫描电镜能够直接观察样品的表面的结构，血管腔面改变2022-4-2915共聚焦激光扫描显微镜 （confocal laser scanning microscopy） 利用

11、计算机及图像处理系统对组织，细胞及亚细利用计算机及图像处理系统对组织，细胞及亚细胞结构进行断层扫描，再现三维立体空间结构，胞结构进行断层扫描，再现三维立体空间结构，将形态学研究从平面图像水平提高到三维立体水将形态学研究从平面图像水平提高到三维立体水平；在观察培养细胞形态结构的同时，直接显示平；在观察培养细胞形态结构的同时，直接显示培养活体细胞内的代谢变化。培养活体细胞内的代谢变化。2022-4-2916生物芯片技术 基因芯片、蛋白质芯片、细胞芯片、组织芯片、以及元件基因芯片、蛋白质芯片、细胞芯片、组织芯片、以及元件型微阵列芯片、通道型微阵列芯片、生物传感芯片等新型型微阵列芯片、通道型微阵列芯片、生物传感芯片等新型生物芯片。可对生物芯片。可对DNA、RNA、多肽、蛋白质、细胞、组织、多肽、蛋白质、细胞、组织以及其它生物成分进行高效快捷的测试和分析。以及其它生物成分进行高效快捷的测试和分析。 2022-4-2917组织芯片 组织芯片又称组织微列阵（组织芯片又称组织微列