药物杂质检查

1、第三章第三章 药物的杂质检查药物的杂质检查基本内容基本内容概述概述一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法特殊杂质的检查方法特殊杂质的检查方法基本要求基本要求 一、一、掌握掌握一般杂质检查的原理、方法和计算。一般杂质检查的原理、方法和计算。 二、二、熟悉熟悉特殊杂质检查的方法和原理。特殊杂质检查的方法和原理。 三、了解热重分析在药物分析中的应用。三、了解热重分析在药物分析中的应用。一、药物纯度的概念与要求一、药物纯度的概念与要求第一节第一节 概述概述1.1.药物纯度的概念：药物纯度的概念： 药物的纯度是指药物的纯净程度。药物的纯度是指药物的纯净程度。 对药物纯度的认识是在防治疾病的实践中积累起来的

2、对药物纯度的认识是在防治疾病的实践中积累起来的如：阿司匹林中除了水杨酸外，还存如：阿司匹林中除了水杨酸外，还存在乙酰水杨酸酐等水杨酸的衍生物，在乙酰水杨酸酐等水杨酸的衍生物，具有具有致敏致敏作用。作用。2.2.对药物纯度的要求随着临床应用的实践对药物纯度的要求随着临床应用的实践和分析测试技术的发展，在不断改进，和分析测试技术的发展，在不断改进，使之更加完善使之更加完善。如：度冷丁（如：度冷丁（）19481948年收入年收入BPBP，19701970年经年经GCGC分离鉴定出分离鉴定出两种无效异构体两种无效异构体（）和（和（），有时高达），有时高达20%20%30%30%。3.3.杂质杂质：药物

3、中存在的无治疗作用的、影响药物：药物中存在的无治疗作用的、影响药物稳定性和疗效、甚至对人体健康有害的物质稳定性和疗效、甚至对人体健康有害的物质。4.4.药物纯度的评价：药物纯度的评价： 应把药物的性状、理化常数、杂质检查、含应把药物的性状、理化常数、杂质检查、含量测定等作为一个有联系的整体来评价药物的量测定等作为一个有联系的整体来评价药物的纯度。纯度。5.5.与试剂的纯度不同与试剂的纯度不同，不能用化学试剂的规格代，不能用化学试剂的规格代替药品标准，更不能将化学试剂当作药品直接用替药品标准，更不能将化学试剂当作药品直接用于临床。于临床。如：试剂规格的如：试剂规格的BaSO4,BaSO4,允许存

4、在可溶性钡盐允许存在可溶性钡盐; ;药品中不允许：可药品中不允许：可导致医疗事故导致医疗事故1 1杂质的杂质的来源来源 生产过程生产过程中引入中引入 贮藏过程贮藏过程中产生中产生二、杂质的来源二、杂质的来源(C6H10O5)x +H2OH+(C6H10O5)y C12H22O112C6H12O6H2O, H+淀粉糊精麦芽糖葡萄糖（生产过程中产生）（生产过程中产生） 酸度：酸度：水解试剂带入水解试剂带入 乙醇中不溶物：乙醇中不溶物：水解中间体水解中间体( (糊精糊精) ) SO SO3 32-2-：产品用产品用H H2 2SOSO3 3漂白漂白 可溶性淀粉：可溶性淀粉：水解不完全水解不完全A +

5、 B C D + E原料原料中间产物中间产物副产物副产物产品产品试剂试剂溶剂溶剂催化剂催化剂金属容器、管道、装置金属容器、管道、装置异构体异构体多晶型多晶型制剂时的辅料制剂时的辅料贮藏过程中产生：贮藏过程中产生：外界条件影响：日光、空气、温度、湿度、外界条件影响：日光、空气、温度、湿度、 微生物等引起药物产生微生物等引起药物产生例例： 麻醉乙醚麻醉乙醚 O醛及有毒的醛及有毒的过氧化物过氧化物2 2杂质的种类杂质的种类（1 1）杂质的来源分类）杂质的来源分类 一般杂质一般杂质 特殊杂质特殊杂质一般杂质一般杂质: :在自然界分布比较广泛在自然界分布比较广泛, ,在多种药物的生在多种药物的生产或贮存

6、过程中容易引入的杂质。产或贮存过程中容易引入的杂质。如：如：pHpH值、溶液澄清度、氯化物、硫酸盐、重金属等值、溶液澄清度、氯化物、硫酸盐、重金属等特殊杂质特殊杂质：在有关药物的生产和贮存过程中，因：在有关药物的生产和贮存过程中，因其生产工艺或药物本身的性质可能引入的杂质。其生产工艺或药物本身的性质可能引入的杂质。（2 2）杂质的理化性质分类）杂质的理化性质分类 无机杂质无机杂质 有机杂质有机杂质 残留溶剂残留溶剂（3 3）杂质的毒性分类）杂质的毒性分类 毒性杂质毒性杂质 普通杂质普通杂质三、杂质的限量检查三、杂质的限量检查在不对人体有害、不影响疗效的情况下，允许药物中在不对人体有害、不影响疗

7、效的情况下，允许药物中存在一定量的杂质。存在一定量的杂质。1.1.杂质限量：杂质限量：药物中所含杂质的最大允许量。药物中所含杂质的最大允许量。表示方法表示方法(g/g)(g/g)：或或ppmppm（百万分率（百万分率,10,10-6-6）2.2.限量检查：限量检查：药物中杂质的检查，一般不要求测定其含量，而只是药物中杂质的检查，一般不要求测定其含量，而只是检查杂质的量是否超过限量。检查杂质的量是否超过限量。杂质限量检查方法：对照法杂质限量检查方法：对照法合格合格不合格不合格 供试液供试液 供试液供试液 对照液对照液 相同条件相同条件 现象现象 现象现象 下反应下反应 比较比较 供试液供试液 对

8、照液对照液 对照液对照液 现象现象 现象现象 NaClNaCl对照液对照液葡萄糖葡萄糖 稀硝酸稀硝酸10ml 硝酸银硝酸银1ml 稀硝酸稀硝酸10ml 硝酸银硝酸银1ml对照液浊度对照液浊度 供试液浊度供试液浊度合格合格杂质限量的计算：杂质限量的计算：杂质限量杂质限量=杂质最大允许量供试品量杂质最大允许量供试品量100 =标准溶液的浓度标准溶液的浓度标准溶液的体积标准溶液的体积 100 供试品量供试品量 即即 L = CV / S 100%式中：式中： L 杂质的限度（杂质的限度（%） C 对照液浓度对照液浓度 （ g/ml） V 对照液的加入体积（对照液的加入体积（ml) S 供试品的量供试

9、品的量(g) 注意注意: 单位统一单位统一例：例：对乙酰氨基酚中氯化物的检查：对乙酰氨基酚中氯化物的检查： 样品样品2.0g 2.0g 溶于溶于100ml100ml水中，取水中，取25ml25ml检查检查ClCl- -，与标准，与标准NaClNaCl溶液溶液(10g/ml) 5ml(10g/ml) 5ml对照液对照液相比，不得更深。相比，不得更深。 C= 10g/ml V=5.0ml S= 25 2.0 100=0.5g6105.010100%0.01%0.5L一氯化物一氯化物检查法检查法： 1. 1.原理：原理： 供试液：供试液：AgAg+Cl+ClAgClAgCl（白色混浊）（白色混浊）

10、对照液：标准氯化钠溶液对照液：标准氯化钠溶液 第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法比浊比浊2.2.条件条件：硝酸酸性条件（稀硝酸硝酸酸性条件（稀硝酸10ml10ml）反应试剂：硝酸银试液反应试剂：硝酸银试液 1.0ml1.0ml杂质对照：杂质对照：NaCl(10NaCl(10g/ml)g/ml)灵敏度范围：灵敏度范围： 50-80 50-80 g/50mlg/50ml 讨论：选择稀硝酸反应条件的意义。讨论：选择稀硝酸反应条件的意义。3.3.讨论讨论u比浊方法：同置黑色背景下，从上至下观察。比浊方法：同置黑色背景下，从上至下观察。u氯化物适宜浓度：氯化物适宜浓度：50-80g/50

11、ml50-80g/50ml。 u硝酸酸性：作用。硝酸酸性：作用。u避光。避光。u供试液若不澄清，需经滤过处理。供试液若不澄清，需经滤过处理。u供试液若有色，需经处理后方可检查。供试液若有色，需经处理后方可检查。 供试品有色：供试品有色： （1 1）内消色法内消色法，按中国药典附录规定的方法处理。，按中国药典附录规定的方法处理。供试品供试品+ + AgNOAgNO3 3放置放置1010minmin过滤过滤澄清溶液澄清溶液+ +标准标准NaClNaCl+ +水水对照溶液对照溶液供试品供试品+ + AgNOAgNO3 3+ +水水供试品溶液供试品溶液暗处放置暗处放置5 5minmin后比较后比较（2

12、 2）外消色法外消色法：如高锰酸钾中氯化物的检查，：如高锰酸钾中氯化物的检查， 可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。二、硫酸盐二、硫酸盐检查法检查法 1. 1.原理：原理：供试液：供试液：SOSO2 2 BaBa2 2 BaSOBaSO（白色混浊）（白色混浊）对照液：标准硫酸钾溶液对照液：标准硫酸钾溶液2.2.方法方法mlml240稀盐酸水供试品mlml240稀盐酸水标准液后比较摇匀水10505%252mlmlBaCl比浊比浊3.3.讨论讨论u比浊方法：同置黑色背景下，从上至下观察。比浊方法：同置黑色背景下，从上至下观察。u硫酸盐适宜比浊浓度：硫

13、酸盐适宜比浊浓度：100-500g/50ml100-500g/50ml。u盐酸酸性。盐酸酸性。u供试液如不澄清，需滤过。供试液如不澄清，需滤过。u供试液若有色，可采用内消色法处理。供试液若有色，可采用内消色法处理。 三铁盐检查法三铁盐检查法 ( (一）硫氰酸盐法一）硫氰酸盐法 1.1.原理：原理：供试液：供试液：FeFe3 3 6SCN6SCNFe(SCN)Fe(SCN)6 6 3 3（红色）（红色）对照液：标准铁溶液对照液：标准铁溶液比色比色2.2.方法方法: :ml25水供试品ml25水标准液，摇匀比较水硫氰酸铵水mlmlml5035330mgml504过硫酸铵稀盐酸3.3.讨论讨论u比色

14、方法：白色背景下，从侧面观察。比色方法：白色背景下，从侧面观察。u盐酸酸性作用。盐酸酸性作用。u过硫酸铵的作用。过硫酸铵的作用。uFeFe3 3的适宜比色范围：的适宜比色范围：1010- -50g/50ml50g/50ml。u色调不一致时或所呈硫氰酸铁的颜色较浅不便比色调不一致时或所呈硫氰酸铁的颜色较浅不便比较时：可分别移入分液漏斗中，加正丁醇或异戊醇较时：可分别移入分液漏斗中，加正丁醇或异戊醇提取，分别取醇层比色。提取，分别取醇层比色。 (二）巯基醋酸法（二）巯基醋酸法（BP ） 原理原理：巯基醋酸还原：巯基醋酸还原Fe3+为为Fe2+，在氨碱性试液中与，在氨碱性试液中与 Fe 2 +作用生

15、成红色配位离子。作用生成红色配位离子。 2Fe3+ + 2HSCH2COOH 2Fe2+ + SCH2COOH + 2H+ SCH2COOH Fe2+ + 2HSCH2COOH Fe(SCH2COOH)2 + 2H+ Fe(SCH2COOH)2 Fe(SCH2COOH)2 2- + 2H2O 2OH-四、重金属检查法四、重金属检查法 重金属是指在实验条件下重金属是指在实验条件下与硫代乙酰胺与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色或硫化钠作用显色的金属杂质，如银、铅、的金属杂质，如银、铅、汞、铜、镉、锡、锑、铋等，由于药品生产汞、铜、镉、锡、锑、铋等，由于药品生产过程中遇到铅的机会比较多，铅在体内又易过程中

16、遇到铅的机会比较多，铅在体内又易积蓄中毒，故检查时以积蓄中毒，故检查时以铅铅作为代表。作为代表。 第一法第一法( (硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法) ) 用于溶于水、稀酸和乙醇的药物用于溶于水、稀酸和乙醇的药物 1.1.原理：原理： 供试液：供试液：CHCH3 3CSNHCSNH2 2 + H + H2 2O CHO CH3 3CONHCONH2 2 + H + H2 2S S H H2 2S + PbS + Pb2 2 PbS+ 2HPbS+ 2H（黄棕黑黄棕黑） 对照液：标准铅溶液对照液：标准铅溶液ml25规定方法供试品mlmlpH2525 . 3规定溶剂醋酸盐缓冲液标准液后比较摇匀，硫代乙酰胺

17、 22ml5 . 3pH比色比色2.2.方法：方法：3.3.讨论讨论u 同置白色背景下，从上至下观察。同置白色背景下，从上至下观察。u pH3.5pH3.5醋酸盐缓冲液。醋酸盐缓冲液。u PbPb2 2适宜比色范围：适宜比色范围：10-20g/25ml10-20g/25ml。u 供试液有色时供试液有色时, ,需预先处理。需预先处理。u 供试品有微量供试品有微量FeFe3+3+: :在弱酸性溶液中氧化硫化氢析出在弱酸性溶液中氧化硫化氢析出S S产生混浊影响比色，可加产生混浊影响比色，可加VcVc或盐酸羟胺使或盐酸羟胺使FeFe3+3+还原成还原成FeFe2+2+再检查。再检查。 第二法：炽灼后的

18、第二法：炽灼后的硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法 用于在水、稀酸、乙醇中难溶，或含芳环、杂环用于在水、稀酸、乙醇中难溶，或含芳环、杂环 （能与重金属离子形成配位化合物）的有机药物（能与重金属离子形成配位化合物）的有机药物 1. 1.原理：原理：C-MC-M炽灼破坏后炽灼破坏后MnMn第一法检查第一法检查 2.2.方法：方法：500500600600炽灼炽灼 第三法：硫化钠法第三法：硫化钠法 用于难溶于稀酸但能溶解于碱性水溶液的药物用于难溶于稀酸但能溶解于碱性水溶液的药物 （磺胺类、巴比妥类）（磺胺类、巴比妥类） 供试液：供试液：PbPb2 2NaNa2 2S SPbSPbSNaNa（灰黑色）（灰黑色）

19、 对照液：标准铅溶液对照液：标准铅溶液 第四法第四法(微孔滤膜法微孔滤膜法)： 用于重金属限量低（含用于重金属限量低（含2-5g2-5g重金属）的药物。重金属）的药物。2010 2010 版版中国药典中国药典已不收载。已不收载。比色比色 五砷盐检查法五砷盐检查法 （一）古蔡氏法：古蔡氏法： 1.1.原理：原理：金属锌与酸作用产生新生态的氢，金属锌与酸作用产生新生态的氢，氢与药物中微量砷盐反应，生成具挥发性的氢与药物中微量砷盐反应，生成具挥发性的砷化氢气体，遇溴化汞试纸产生黄至棕色的砷化氢气体，遇溴化汞试纸产生黄至棕色的砷斑，与一定量标准砷溶液在同样条件下生砷斑，与一定量标准砷溶液在同样条件下生

20、成的砷斑比较，颜色不得更深。成的砷斑比较，颜色不得更深。 -3432333AsOAsHHOAsAs砷斑 2HgBr棕黄 Ag 吡啶 DDCAg-红色胶态 Zn+HCl古蔡氏法古蔡氏法:SbH3+HgBr2SbH2(HgBr)+HBr 锑斑锑斑供试品、供试品、HCl、Zn、KI、SnCl2Pb(Ac)2棉棉HgBr2试纸试纸古蔡氏法仪器装置图古蔡氏法仪器装置图KIKI和酸性和酸性SnClSnCl2 2的作用：的作用： AsO43- + 2I- +2H+ AsO33- + I2 + H2O AsO43- + Sn2+ + 2H+ AsO33- + Sn4+ H2O I2 + Sn2+ 2I- +

21、Sn4+ 4I- + Zn2+ ZnI42-AsO43-AsO33-AsH3慢快 KI SnCl2将五价砷还原为三将五价砷还原为三价砷，价砷，加快反应速度加快反应速度53抑制锑化氢的生成抑制锑化氢的生成促进促进AsHAsH3 3的生成的生成形成形成Zn-Sn齐，去极化齐，去极化 Pb(AC)Pb(AC)2 2棉棉的作用：的作用： 消除锌粒和供试品中可能含有的少量的消除锌粒和供试品中可能含有的少量的硫化物硫化物的影响。的影响。 S S2-2- + 2H + 2H+ + H H2 2S S H H2 2S + HgBrS + HgBr2 2 2HBr + HgS 2HBr + HgS （汞斑）（汞

22、斑） H H2 2S + Pb(Ac)S + Pb(Ac)2 2 PbS + 2HAcPbS + 2HAc 2.2.供试品处理供试品处理（1 1）供试品为）供试品为S S2-2-,SO,SO3 32-2-, S, S2 2O O3 32-2-等等: : 因在酸中生成因在酸中生成H H2 2S,S, SO SO2 2, ,与与HgBrHgBr作用生成作用生成HgSHgS或或HgHg，干扰砷斑检查。，干扰砷斑检查。 用用硝酸氧化硝酸氧化成硫酸盐可消除。成硫酸盐可消除。（2 2）供试品为）供试品为FeFe3+3+ ，能消耗，能消耗KIKI，SnClSnCl2 2 ，可，可先加足量先加足量 SnClS

23、nCl2 2。（3 3）环状环状结构有机药物，先结构有机药物，先有机破坏有机破坏（4 4）含锑含锑药物，改用药物，改用白田道夫白田道夫（Betterdorff Betterdorff ）法）法 2As3+ + 3SnCl2 + 6HCl 2As+ 3SnCl4 + 6H+胶态、棕褐色胶态、棕褐色 （二）二乙基二硫代氨基甲酸银法（二）二乙基二硫代氨基甲酸银法 （silver diethyl dithio carbamate) （Ag-DDCAg-DDC法法） 1.1.原理：原理： 供试液：供试液：AsHAsH3 3+ 6Ag+ 6Ag（DDCDDC）AgAg （红色胶态）（红色胶态） 对照液：标

24、准砷溶液对照液：标准砷溶液 比色或测定AAg(DDC)Ag(DDC)的的 吡啶溶液吡啶溶液 仪器装置仪器装置 小结小结 六、溶液颜色检查法六、溶液颜色检查法 控制药物中控制药物中有色杂质有色杂质的含量的含量 1. 1. 目视比色法目视比色法5 5种色调种色调1010种色号种色号标准比色液标准比色液标准贮备液标准贮备液比色原液比色原液K2Cr2O7CoCl2CuSO42. 分光光度法分光光度法 有色杂质对光有吸收，通过测定吸收度可控制其限量有色杂质对光有吸收，通过测定吸收度可控制其限量3. 色差计法色差计法 通过比较供试品、标准比色液与水之间的色差值通过比较供试品、标准比色液与水之间的色差值黄绿

25、、黄黄绿、黄橙黄橙黄,橙红橙红棕红棕红 七、易炭化物检查法七、易炭化物检查法 检查药物中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微量检查药物中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微量有有机杂质机杂质。 这类杂质多数结构未知，常采用加硫酸呈色后与对这类杂质多数结构未知，常采用加硫酸呈色后与对照液比较的方法进行检查。照液比较的方法进行检查。八、溶液澄清度检查法八、溶液澄清度检查法( (检查检查不溶性杂质不溶性杂质) ) 与浊度标准液比较与浊度标准液比较 浊度标准贮备液：硫酸肼乌洛托品浊度标准贮备液：硫酸肼乌洛托品甲醛腙甲醛腙 （白色混浊）（白色混浊） 浊度标准原液浊度标准原液 浊度标准液：浊度标准液：5 5个级号个级

26、号 澄清澄清：系指供试品溶液的澄清度相当于所用溶剂或：系指供试品溶液的澄清度相当于所用溶剂或 未超过未超过0.50.5号浊度标准液号浊度标准液H2OH2O九、炽灼残渣检查法（控制非挥发性无机杂质）九、炽灼残渣检查法（控制非挥发性无机杂质） 炽灼残渣：炽灼残渣：有机药物经炭化或经加热使挥发性无机物分解后，有机药物经炭化或经加热使挥发性无机物分解后，高温炽灼，所产生的非挥发性高温炽灼，所产生的非挥发性无机杂质无机杂质的硫酸盐。的硫酸盐。 加硫酸炽灼法：加硫酸炽灼法：700700800800; ; 如炽灼残渣需作如炽灼残渣需作重金属检查重金属检查，则炽灼温度应控制在，则炽灼温度应控制在5005006

27、00600 恒重：供试品连续两次炽灼或干燥后的重量差异在恒重：供试品连续两次炽灼或干燥后的重量差异在0.3mg0.3mg以下以下除尽硫酸蒸气湿润炭化供试品低温放冷缓缓炽灼ml15 . 0SOH42恒重放冷灰化炽灼干燥炽灼800700800700十、干燥失重测定法十、干燥失重测定法检查药物中水分和其他挥发性物质检查药物中水分和其他挥发性物质干燥失重：药品在规定条件下，经干燥后所减失的量干燥失重：药品在规定条件下，经干燥后所减失的量。 1.1.常压恒温干燥法常压恒温干燥法 适用于受热较稳定的药物适用于受热较稳定的药物 温度：温度：105105 2.2.减压干燥法减压干燥法 适用于熔点低、受热分解的

28、药物适用于熔点低、受热分解的药物 3.3.干燥剂干燥法干燥剂干燥法 适用于受热易分解或升华的药物适用于受热易分解或升华的药物 干燥剂：干燥剂：硅胶、硫酸、五氧化二磷硅胶、硫酸、五氧化二磷 4. 4.热分析法热分析法 （在程序控制温度下，测定物质的物理、化学性质与温在程序控制温度下，测定物质的物理、化学性质与温度关系的一类技术。）度关系的一类技术。）热重分析法（热重分析法（TGATGA） 在程序升温下，测量物质的质量与温度的关系。在程序升温下，测量物质的质量与温度的关系。 特点：样品用量少、灵敏、快速特点：样品用量少、灵敏、快速 常用于贵重和易氧化药物的干燥失重测定。常用于贵重和易氧化药物的干燥

29、失重测定。草酸钙草酸钙(CaC(CaC2 2O O4 4HH2 2O)O)的热重曲线的热重曲线G1G2G310008006004002000WT1T2T3398838635478134226T()在温度在温度T1时时 CaC2O4H2O CaC2O4+H2O在温度在温度T2时时 CaC2O4 CaCO3+CO在温度在温度T3时时 CaCO3 CaO+CO2 . .差热分析法（差热分析法（DTA)DTA) 是在程序升温下，测量供试品和参比物之间的温是在程序升温下，测量供试品和参比物之间的温度差与温度关系的一种技术。度差与温度关系的一种技术。 参比物是一种惰性物质，在加热过程中不发生相参比物是一种

30、惰性物质，在加热过程中不发生相变和化学变化。因此温差变和化学变化。因此温差( (T)T)只与被测物质的量质只与被测物质的量质 变化有关。变化有关。 T= 0 T= 0 被测物未发生吸热或放热反应被测物未发生吸热或放热反应 T= - T= - 为吸热峰为吸热峰 ，峰顶向下，峰顶向下 T= + T= + 为放热峰为放热峰 ，峰顶向上，峰顶向上 测定药物熔点测定药物熔点应用应用 尖峰为物理变化尖峰为物理变化 药物定性分析药物定性分析 宽峰为化学变化宽峰为化学变化 估测药物的纯度估测药物的纯度鉴别鉴别 . .差示扫描量热法差示扫描量热法( (DSC) DSC) 是在程序升温下，测量是在程序升温下，测量

31、维持样品和参比物的温度相同维持样品和参比物的温度相同，系统所需输给待测物质和参比物的系统所需输给待测物质和参比物的能量差能量差随温度（或时间）随温度（或时间）变化的热分析技术。变化的热分析技术。 供试品吸热：系统供能增加供试品吸热：系统供能增加 供试品放热：系统供能减少供试品放热：系统供能减少应用：鉴别、晶型鉴别、纯度检查、测定熔点或水分应用：鉴别、晶型鉴别、纯度检查、测定熔点或水分不同纯度苯甲酸的不同纯度苯甲酸的DSCDSC曲线曲线温度温度97.2%98.6%标准品标准品十一、水分测定法十一、水分测定法 卡尔卡尔费休法费休法 原理：原理： I I2 2+ SO+ SO2 2 + + H H2

32、 2O O 2HI + SO 2HI + SO3 3 费休氏液：费休氏液：I I2 2、 SOSO2 2、无水甲醇、无水甲醇、无水吡啶无水吡啶 终点：费休氏液：淡黄终点：费休氏液：淡黄红棕色红棕色 永停法永停法 十二、有机溶剂残留量测定法十二、有机溶剂残留量测定法 主要检查药物在生产过程中引入的主要检查药物在生产过程中引入的有害的有机溶剂有害的有机溶剂 常采用常采用气相色谱法气相色谱法进行检查进行检查 直接进样法直接进样法 顶空进样法（适用于挥发性大的样品测定）顶空进样法（适用于挥发性大的样品测定） 第三节第三节 特殊杂质检查方法特殊杂质检查方法 特殊杂质：在该药物的生产和贮存过程中，根特殊杂

33、质：在该药物的生产和贮存过程中，根据药物的性质、生产方法和工艺条件，有可能据药物的性质、生产方法和工艺条件，有可能引入的特有杂质。引入的特有杂质。 方法：方法：利用药物和杂质在利用药物和杂质在物理物理和和化学化学性质上的性质上的差异差异进行进行一、物理性质上差异：一、物理性质上差异：臭味及挥发性的差异臭味及挥发性的差异颜色的差异颜色的差异溶解行为的差异溶解行为的差异旋光性质的差异旋光性质的差异二、化学性质上差异：二、化学性质上差异：酸、碱性质的差异酸、碱性质的差异氧化还原性的差异氧化还原性的差异杂质与一定试剂产生沉淀杂质与一定试剂产生沉淀杂质与一定试剂产生颜色反应杂质与一定试剂产生颜色反应杂质

34、与一定试剂反应产生气体杂质与一定试剂反应产生气体三、光谱分析法：三、光谱分析法： （一）紫外分光光度法（一）紫外分光光度法 在在药物无吸收而杂质有吸收药物无吸收而杂质有吸收的波长测定吸收度，规定测得的吸的波长测定吸收度，规定测得的吸 收度不得超过某一限值。收度不得超过某一限值。例如：例如：肾上腺酮肾上腺酮及及肾上腺素肾上腺素的紫外吸收曲线的紫外吸收曲线HOHOOCCH2NHCH3HOHOOHCHCH2NHCH3220 260 300 nmmax310nm利用药物和杂质对光选择性吸收性质的利用药物和杂质对光选择性吸收性质的差异差异 （二）原子吸收分光光度法（二）原子吸收分光光度法 用于用于金属金

35、属元素的测定。元素的测定。 试样试样预处理预处理原子化器原子化器待检元素的原子蒸气待检元素的原子蒸气 求出待检元素含量求出待检元素含量检测器检测器吸收特定吸收特定的光的光 （三）红外分光光度法（三）红外分光光度法 用于药物中用于药物中无效或低效晶型无效或低效晶型的测定。的测定。晶晶型结构型结构不同，化学键的不同，化学键的键长、键角键长、键角等发生等发生不同程度的变化，导致红外吸收光谱中某不同程度的变化，导致红外吸收光谱中某些特征峰的些特征峰的频率、峰形、强度频率、峰形、强度等出现显著等出现显著差异。差异。四、色谱分析法四、色谱分析法（一）（一）TLCTLC1.1.杂质对照品法杂质对照品法判断结

36、果：供试品溶液如显判断结果：供试品溶液如显与对照品相应的与对照品相应的杂质斑点杂质斑点，其颜色与对照品溶液主斑点比较，其颜色与对照品溶液主斑点比较，不得更深。，不得更深。需要对照品需要对照品特点：分离效能高，分离的同时进行测定，应用广泛特点：分离效能高，分离的同时进行测定，应用广泛 供试品供试品A对照品对照品BA？B前沿前沿原点原点l0l 2.2.高低浓度对比法高低浓度对比法当杂质结构不能确定、或无杂质对照品时，采用此法当杂质结构不能确定、或无杂质对照品时，采用此法要求：杂质斑点的颜色与主成分斑点颜色相同或相近要求：杂质斑点的颜色与主成分斑点颜色相同或相近供试液供试液稀释稀释对照液对照液点样、

37、展开、干燥、显色点样、展开、干燥、显色结果判断：供试液所显杂质斑点与对照液主斑点比较，结果判断：供试液所显杂质斑点与对照液主斑点比较，不得更深。不得更深。（高）（高）（低）（低） 3.13.1法与法与2 2法并用法并用适用：当药物中存在多个杂质时，其中有的杂质有适用：当药物中存在多个杂质时，其中有的杂质有对照品，有的杂质没有对照品或结构未知对照品，有的杂质没有对照品或结构未知4.4.对照药物法对照药物法适用：无合适杂质对照品，或供试品杂质斑点颜色适用：无合适杂质对照品，或供试品杂质斑点颜色与主成分斑点颜色有差异。与主成分斑点颜色有差异。可用与可用与供试品相同的药物作为对照品，供试品相同的药物作

38、为对照品，此药物所含此药物所含待检杂质需符合限量要求，且稳定性好。待检杂质需符合限量要求，且稳定性好。 （二）高效液相色谱法（二）高效液相色谱法( (HPLC)HPLC) 1.1.内标法加校正因子测定法内标法加校正因子测定法 需要杂质对照品需要杂质对照品校正因子的测定校正因子的测定杂质对照品杂质对照品+内标物质内标物质测定测定对对内内C/AC/AfC/ AAC内内杂杂f供试品供试品+内标物质内标物质测定测定杂杂内内C/AC/ Af2.外标法测定外标法测定需要杂质对照品需要杂质对照品，进样量能够精确控制。，进样量能够精确控制。供试液：供试液：A杂杂对照液：对照液：A对对对杂对杂CCAA对对杂杂A

39、CAC 3.加校正因子的主成分自身对照法加校正因子的主成分自身对照法 建立方法时，需要杂质对照品建立方法时，需要杂质对照品 杂质检查时，不需杂质对照品杂质检查时，不需杂质对照品杂质对照品药物对照品杂质对照品药物对照品 f 校正因子直接载入各品种质量标准中校正因子直接载入各品种质量标准中供试液供试液 对照液：供试液稀释成与杂质限度相当的溶液对照液：供试液稀释成与杂质限度相当的溶液分别分别测定测定对杂对杂AACCfC杂杂 4.4.不加校正因子主成分对照法不加校正因子主成分对照法 用于用于没有杂质对照品没有杂质对照品时杂质的检查时杂质的检查 对照液：供试品的对照液：供试品的稀释液，稀释液，进样测得进

40、样测得A A主主 供试液：进样测得杂质供试液：进样测得杂质A Ai i，杂质，杂质A Ai i A A主主即为合格即为合格. . 5. 5.峰面积归一化法峰面积归一化法适用于粗略测量杂质含量适用于粗略测量杂质含量L% = AL% = Ai i /(A /(Ai i + A + A主主）100% 100% 例如：利巴韦林中有关杂质的检查：例如：利巴韦林中有关杂质的检查：对照品液对照品液(5(5g/ml)g/ml)进样进样1010l,l,调灵敏度，使主峰调灵敏度，使主峰达满量程的达满量程的20%20%25%25%样品液样品液(0.4(0.4mg/ml)mg/ml)进样进样1010l, l, 杂质杂质A Ai i(A(Ai i+A+A主主）的）的1.0%1