人类基因组DNA提取_第1页
人类基因组DNA提取_第2页
人类基因组DNA提取_第3页
人类基因组DNA提取_第4页
人类基因组DNA提取_第5页
已阅读5页，还剩14页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、人类类基因组组DNA提取 人类类基因组组 1.真核生物DNA一般存在于细胞核染色体上以及线粒体上，基因组DNA一般又称核DNA。 2.哺乳动物的一切有核细胞都可以用来制备DNA，除特殊要求外，白细胞、肝或脾组织是最常用的材料。 3.原始材料较少或较难获得时，还必须经过细胞培养来获得足够量的细胞;有时为了简便易行起见，还可以无创伤地采集材料，如用口腔上皮细胞、发根细胞。产前诊断所用的材料为胎儿的羊水细胞或绒毛膜细胞。 提取基因组组DNA原理基因组组DNA提取主要步骤骤不同组织细胞基因组DNA提取方法有所不同，分离方法也有所差异，但原理相似，因此他们具有共同的步骤：四、DNA分离纯纯化总总原则则1

2、、保证核酸一级结构完整2、排除其他分子的污染： 细胞内：蛋白质、糖类、脂类、RNA等 提取过程：有机溶剂、金属离子、外源DNA基因组组DNA提取注意事项项常用方法：从口腔上皮脱落细胞中提取从口腔上皮脱落细胞中提取实验实验材料与试剂与试剂材料：人口腔上皮细胞试剂试剂：抽提缓冲液 水饱和酚 氯仿/异戊醇（V/V=24：1） 75%乙醇、95%乙醇 TE缓冲液实验实验操作步骤骤继续抽提缓缓冲液：由SDS,EDTA,蛋白酶K组成 SDS：SDS是一种已知的能够使蛋白质变性的去污剂。它用于确定蛋白分子量的聚丙烯酰胺凝胶电泳。它也可以用于核酸抽提操作中破坏细胞壁及裂解核酸蛋白复合物。在较高温度下，破坏蛋白质与DNA的结合，使DNA释放出来。在乳液聚合反应中，可充当两相溶液的乳化剂。试验中用来裂解细胞。EDTA: 一种重要的络合剂，能和碱金属、稀土元素和过渡金属等形成稳定的水溶性配合物。试验中用来络合镁等二价金属离子，防止DNA酶对DNA的降解作用。蛋白酶K: 一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶，用于生物样品中蛋白质的一般降解。返回试剂说试剂说明：75%乙醇：去盐，洗涤DNA沉淀 TE溶液：溶解DN

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论