国产与进口齐多夫定胶囊在健康人体的药代动力学和生物等效性_图文

1、论 著O ri g ina l国产与进口齐多夫定胶囊在健康人体的药代动力学和生物等效性Phar m acoki netics and bi oequi valence of do m estic and i m ported zi dovudine capsules i n healthy vol unteers李小利,王本杰,倪梅媛,郭瑞臣(山东大学齐鲁医院临床药理研究所,济南 250012LI X i a o-l,i WANG Ben-jie,N IM ei-yuan,GUO Rui-chen(Instit u te of C li n ical Phar m acology, Q ilu

2、 H os p it a l of Shandong University, J inan 250012,China收稿日期:2005-12-19修回日期:2006-06-19作者简介:李小利(1975-,女,硕士,主要从事临床药理学研究通讯作者:郭瑞臣,教授,博士生导师Te:l(053182169636E-ma i:l grc7636126.co m 摘要:目的 研究国产与进口齐多夫定胶囊(抗艾滋病药在健康志愿者体内的药代动力学和生物等效性。方法 20名健康男性受试者随机交叉单剂量口服国产与进口齐多夫定胶囊300m g,用高效液相色谱法测定给药后不同时间的血浆浓度,计算主要药代动力学参数。结

3、果 国产与进口齐多夫定胶囊主要药代动力学参数:t1/2分别为(1.72 0.42,(1.53 0.27h;t ma x分别为(0.86 0.42,(0.88 0.30h;Cm ax分别为(1.60 0.61,(1.60 0.55g mL-1;A UC08分别为(2.06 0.37,(2.08 0.34 g h mL-1;AUC0-分别为(2.11 0.37,(2.12 0.34 g h m L-1。国产齐多夫定胶囊相对生物利用度F为(99.02 5.02%。结论 2制剂具有生物等效性。关键词:齐多夫定胶囊;药代动力学;生物等效性;高效液相色谱中图分类号:R969.1;R978.7 文献标识码:

4、A文章编号:1001-6821(200704-0288-04Abstract:Objective To study the phar m acok i n etics and b i o equ i v a lence after si n gle o ral adm i n istration o f do m estic(testand i m ported (referencezi d ovudine capsu les i n20healt h y vo l u nteers.M ethods A sing le ora l dose o f zidovudine test and r

5、eference w ere g iven accord i n g to a rando m ized t w o way cross-over desi g n.Plas m a concentration o f zi d ovu dine(300m gw as deter m ined by HPLC.R esults M ean phar m acok i netic para m eters after o ral adm i n istration of zidovud i n e test and re ference w ere as follo w s:t1/2w ere(

6、1.72 0.45,(1.53 0.27h;t m ax w ere (0.86 0.42,(0.88 0.30h;C m ax w ere(1.60 0.61,(1.60 0.56 g mL-1;AUC0-8w ere(2.06 0.36,(2.08 0.34h g mL-1;AUC0- w ere(2.11 0.36,(2.12 0.34h g m L-1.The b i o ava ilab ility of zi d ovudine test to reference w as(99.02 5.02%.Conc l u sion The results de m onstrated t

7、hat the test and refer ence of zi d ovudine capsu les w ere b i o equ i v a len.tKey words:zi d ovud i n e capsu les;phar m acokinetics;b i o equ i v a lence;H PLC齐多夫定是世界上第一个获准生产的抗艾滋病药物。1987年,在美国首次上市,主要用于治疗人类免疫缺陷病毒感染及预防H I V 母婴传染。齐多夫定可竞争性地抑制病毒逆转录酶并终止病毒DNA 链的延伸;在2种或3种药物合并用药方案中,齐多夫定与具有类似288第23卷 第4期 20

8、07年7月(总第108期或不同作用机制的多种药物间存在协同或相加抗病毒活性1。齐多夫定可竞争性抑制病毒DNA合成并终止病毒DNA链的延伸,增进细胞介导免疫并增加特异性无效病毒抗体的滴度2。本研究通过单次口服国产与进口齐多夫定胶囊的标准双交叉试验,评价2种制剂的人体生物等效性。材料、对象与方法1 药品与仪器试验制剂:齐多夫定胶囊,批号:20040517,规格:每粒:100mg,山东省医药工业研究所提供;参比制剂:齐多夫定胶囊,批号:B NX9271,规格:每粒100 m g,G laxo Sm ith K line(美国生产;齐多夫定对照品,含量:99.7%,由山东省医药工业研究所提供;内标:替

9、硝唑,含量:99.6%,由山东省医药工业研究所提供。1100高效液相色谱仪,美国安捷伦公司产品; XK96-A快速混匀器,姜堰市新康医疗器械有限公司产品;AX-205电子天平,梅特勒-托利多仪器(上海有限公司产品;TDL-4型高速台式离心机,上海安亭科学仪器厂产品。2 受试者选择20名健康男性志愿者,年龄(23.45 1.10岁,体质量(69.35 6.15kg;试验前经病史询问、体格检查和实验室检查(心电图、临床血液学、血液生化和尿常规未发现异常。无药物过敏史、药物依赖史、精神病史及其他慢性病史。试验前向志愿者说明试验目的、药物特性、适应症、试验期间的注意事项及可能出现的不良反应,并签定书面

10、知情同意书。试验方案经本院伦理委员会批准。3 分组与给药方法采用双周期随机交叉试验设计。20名志愿者按体质量指数进行分层随机分组,2组志愿者个人资料及实验室检查数据经统计学分析无显著性差异,条件相当。志愿者于试验前1天晚10时后禁食,试验当日晨抽取空白血样后,立即空腹口服试验制剂或参比制剂300mg。110号志愿者服用试验制剂齐多夫定胶囊;1120号志愿者服用参比制剂齐多夫定胶囊,温开水200m L送服。服药2h后方能饮水,4h后进食标准低脂肪、低蛋白早餐。1周后, 2组交叉服药,进行第2周期试验。剂量、饮食、观察方法等与第1周期相同。服药期间,禁用其他药物和含咖啡因类饮料、吸烟和饮酒。4 样

11、本采集于服药前和服药后0.25,0.5,0.75, 1.0,1.5, 2.0,2.5,3.0,4.0,5.0,6.0,8.0h取肘静脉血4m L,并立即移入塑料试管中,3500r m i n-1离心15m in,取血浆分双份于-20 低温保存。5 血药浓度测定3-45.1 色谱条件D ia m onsilTM C18(5 m,4.6mm 250mm色谱柱;流动相为0.005m o l L-1磷酸二氢钠缓冲液-乙腈(80 20,用前经0.45 m微孔滤膜过滤,超声脱气;流量为1.5mL m i n-1;柱温:24 ;检测波长: 265nm;进样量20 L。5.2 样本处理取血浆0.5mL加50

12、g m L-1内标替硝唑60 L,加入2m oL L-1高氯酸100 L沉淀蛋白,10000 r m i n-1离心5m i n,进样20 L测定。6 方法学考察与评价6.1 标准曲线制备用空白人血浆将齐多夫定标准储备液稀释成不同浓度(0.01,0.1,0.2,1,2,4 g m L-1的标准液,按样品处理方法,进样测定。以齐多夫定和替硝唑峰面积比值(Y对齐多夫定浓度(X进行线性回归,直线回归方程为Y=0.92X-0.002,相关系数 = 0.9999;血浆最低检出浓度为0.01 g mL-1。齐多夫定在0.014.00 g mL-1内,线性关系良好。6.2 回收率、日内及日间精密度配制浓度0

13、.02,1,4 g mL-1的齐多夫定标准血浆各5份,于1日内连续测定,计算日内相对标准差(RSD。每日配制浓度0.02,1,4 g mL-1齐多夫定标准血浆各1份,连续测定3日,计算日间相对标准差(RSD。结果见表1。Tab l e1.Recove ry rate and prec ision o f z i d ovud ineAdded ( g mL-1W it h i n-day( g mL-1RSD(%Bet w een-day( g mL-1RSD(%R ecovery rate(%0.020.02 0.006.460.02 0.004.5697.00 2.741.001.00 0

14、.010.981.01 0.010.8599.74 0.864.004.01 0.040.974.03 0.030.7399.90 0.38 n=5,m ean SD6.3 稳定性考察存放期间 取健康人空白全血数份,分别加入齐多夫定标准溶液,使血浆中齐多夫定的浓度分别为0.02,1,4 g mL -1,放置在-60 冰箱中,分别于第0,2,7天取样分析,考察其在存放期间的稳定性。结果表明,血浆样品在-60 至少能保存7天。多次冻融 取健康人空白血浆数份,分别加入齐多夫定标准溶液,使血浆中齐多夫定的浓度分别为0.02,1,4 g mL -1,-60 放置,然后反复冻融2次测定其浓度,考察其冻融稳

15、定性。结果表明,血浆样品冻融2次后,血药浓度无明显变化。6.4 方法的专属性在选定色谱条件下测得的色谱图见图1。由图1可见,齐多夫定与内标替硝唑的保留时间分别为4.78m i n 和6.43m in ,2者峰形良好,分离完全,无杂质峰 干扰。F igure 1.Chromatogra m s of z i dovud i neA.Z i dovudi n st andard ;B.In t ernal st andard;C.Z i dovud i n e and i n ternal standard ;D.B l ank plas m a ;E.B l ank plas m a sp i

16、ked w it h zidovud i ne and i n t ernal standard;F .Plas ma sa mp le s p i k ed w it h i n ternal standard7 数据处理用DAS 2.0程序计算药代动力学参数及相对生物利用度,主要药代动力学参数进行方差分析、双单侧t 检验和(1-2 置区间分析,评价受试制剂和参比制剂的生物等效性。结 果1 血药浓度-时间曲线20名健康志愿者单次口服齐多夫定胶囊受试制剂与参比制剂300m g 后的平均血浓度-时间曲线见图2。2 药代动力学参数20名健康志愿者口服齐多夫定胶囊受试制剂和参比制剂后300m g 主

17、要药代动力学参数见表2。3 生物等效性评价齐多夫定胶囊受试制剂和参比制剂的C max 、t max 、AUC 0-8和AUC 0- 经对数转换后进行方差分析、双单侧检验及90%可信限考察,结果显示,制剂间和周期290第23卷 第4期 2007年7月(总第108期间无显著差异;但个体间存在显著差异。In AUC 0-8、I nAUC 0- 、I n C max 、t max 90%双单侧检验结果分别为97.00%100.84%,97.48%101.30%,91.70%104.86%,90.11%107.03%,提示2制剂具有生物 等效性。F i gu re 2.M ean p las ma co

18、ncentrati on -ti m e curves of z i dovudi n e after as i ngle oral dos e of 300mg test and ref eren ce i n 20heal thy vol unteersTab l e 2.The ma in phar m acokine tic pa rame t e rs a fter sing le o ra l dose o f 300mg z i d ovud ine t e st and re f e rence in 20hea lt hy vo lunteersPara m eterTest

19、 Ref eren ce AUC 0-8( g h mL -1 2.06 0.362.08 0.34AUC 0- ( g h mL -1 2.11 0.372.12 0.34C m ax ( g mL -11.60 0.611.60 0.55t m ax (h0.86 0.420.88 0.30t 1/2ke (h 1.72 0.421.53 0.27F (%99.02 5.02讨 论本文用高效液相色谱法测定血浆中齐多夫定浓度,方法简便、经济、灵敏度高,重现性好。在本条件下,齐多夫定及内标测定均不受血浆中内源性物质的干扰,最低定量限、精密度、准确度、回收率以及稳定性完全符合生物样本中药物分析的

20、方法学要求。20名健康志愿者单次口服国产或进口齐多夫定300m g 后,2制剂在健康人体内的吸收、分布过程相似。主要药代动力学参数个体间存在统计学差异,但周期间及制剂间均无统计学差异。与文献报道2一致。国产齐多夫定胶囊相对生物利用度F 为(99.02 5.02%,表明2制剂的吸收程度相似。方差分析和双单侧t 检验证明,2制剂具有生物等效性。参考文献:1Langtry HD,Ca m poli-R i chards D M.Z i dovud i ne :A revie w of its phar m acodyn a m ic and phar m acok i n etic prop erties and t herap euti c efficacy J.D rug s ,1989;37:408-450.2