湿热灭菌柜方案

1、湿热灭菌验主方案 湿热灭菌验主方案验证方案的审批项目（Items）内容（Content）姓名（Name）部门/职位（Dep./Post）签名（Signature）日期（Date）起草人（Prepared by）QC审核人(Reviewed by)设备部审核人(Reviewed by)质量部批准人(Approved by)质量负责人目 录1 目的32 范围33 概述34 验证类别55 验证前准备55.1验证人员及职责55.2验证引用文件的确认65.3仪器仪表校验的确认66 验证内容及合格标准76.1相关条件的确认76.2验证步骤86.3验证合格标准106.4数据统计及分析117 偏差分析118

2、变更处理119 验证结论及评价1110 再验证周期1111 文件修订1212 附录及附表121目的本验证是为了确认灭菌器的各种功能可以达到生产要求，设备能够在预定的操作范围之内稳定运行，其性能满足生产工艺的要求。2范围本验证范围是确认微生物实验室灭菌柜能够满足生理盐水、微生物检测用具等物品的灭菌要求，此次验证主要包括空载热分布测试、满载热分布测试、满载热穿透实验。此验证方案计划于2014年1月17日-10月25日给予实施。3 概述3.1 设备描述设备名称压力蒸汽灭菌器设备编号制造商合肥华泰医疗设备有限公司灭菌容积150L安装地点材质设备结构描述设备主要由主体、密封圈、灭菌筐、加热盘管几部分组成

3、。主要技术参数最高工作压力0.165MPa额定工作温度125热均匀度±1电源电压220V50Hz电热管功率45KW工作原理描述预热阶段：将水温升至100。升温阶段：放入物品后继续加热，使柜内温度逐渐升高。灭菌阶段：升温至设定值后，保持一定时间灭菌。冷却阶段：排放内部蒸汽。结束：当柜内压力达到安全压力时，工作结束。主要用途用于*等物品的灭菌。3.2灭菌程序描述灭菌程序采用不低于121，30min。湿热灭菌程序包括以下阶段或步骤：ü 通饱和蒸汽；ü 加热；ü 灭菌；ü 冷却。实现灭菌的三个重要条件分别是：温度，时间和饱和蒸汽。典型的灭菌Tt曲线如下

4、：3.3验证方法学描述3.4 D、Z、F0值D值是微生物的耐热参数，是指在一定温度下将微生物杀灭90%，即使之下降一个对数单位所需的时间。D值越大，微生物耐热性越强。Z值是灭菌温度系数，是指某一种微生物的D值变化一个对数单位，灭菌温度应升高或下降的度数。其描述的是微生物对温度变化的敏感程度，Z值越大，微生物对温度变化的敏感程度越弱；通常Z取10。F0值为121下的标准灭菌时间。灭菌采用过度杀灭（Over Kill）的概念，即F030。非121时的F0值按下公式进行计算：灭菌时间；Z：灭菌温度系数，Z通常取10；3.5工艺参数设定项目温度/运行时间空载热分布测试121/30min满载热分布测试1

5、21/30min满载热穿透测试及微生物挑战测试121/30min4验证类别再验证5验证前准备5.1验证人员及职责 QC负责起草、审核验证方案和报告；负责对参与验证的所有人员进行方案的培训，确定所有人员有能力实施本方案。按照验证方案执行验证，收集验证数据并分析、总结报告；负责记录验证执行过程中出现的所有偏差，对关键的偏差应调查，在偏差关闭之前不得执行随后的验证工作。质量部负责审核验证方案和报告；负责验证过程样品的检测。负责审核方案和验证报告；参与验证过程偏差的调查；负责验证技术支持；负责对环境进行监测；质量负责人负责批准验证方案和报告。5.1.2验证小组成员及分工姓名部门在本验证小组中担任的职务

6、岗位职责柴景明质管部组长负责方案的起草，对验证方案进行培训并组织实施。质管部组员质微生物检验员负责设备运行前各项目检查及设备运行的操作。质量部组员负责生物指示剂的培养检测。王莹质量部组员监督过程的实施，并负责取样5.1.3人员资格审查及方案培训的确认本验证小组所有成员在验证之前应接受相关的培训，如验证方案、设备操作SOP、安全注意事项等，并有记录。培训记录见附表1人员培训记录。审查项目审查方法存放地点人员培训档案检查职工培训记录卡职工档案验证方案的培训记录检查培训记录卡验证报告结论：确认人/日期：复核人/日期：5.2验证引用文件的确认5.2.1审查项目、审查方法、接受标准审查项目审查方法接受标

7、准文件的审批检查文件文件经有资格的人员起草、审核和批准文件的执行检查文件文件在执行期内5.2.2验证引用文件的确认序号文件/资料名称文件编码执行日期版本号1湿热灭菌标准操作规程3*灭菌标准操作规程4洁净服、洁净鞋灭菌标准操作规程5药品生产验证指南20036验证管理标准结论：确认人/日期：复核人/日期：5.3仪器仪表校验的确认5.3.1审查项目、审查方法、接受标准审查项目审查方法接受标准校验记录仪器仪表校验记录及其校验合格证仪器仪表都经过了校验，且都在校验期内、校验结果为合格。仪器仪表校验的确认见附表2仪器仪表校验记录结论：确认人/日期：复核人/日期：6验证内容及合格标准6.1相关条件的确认6.

8、1.1设备确认6.1.1.1检查方法：确认设备安装位置及安装牢固性，各附件完整性，检查设备密封圈密封性能及灭菌器各接口处密封是否良好。6.1.1.2接受标准：设备安装位置正确，安装牢固，各附件完整，密封圈密封性能及灭菌器各接口处密封良好，均符合技术参数要求和工艺要求。6.1.1.3测试记录：见附表3设备确认记录。结论：确认人/日期：复核人/日期：6.1.2公用设施连接确认6.1.2.1检查方法：检查灭菌柜是否连接电源、水源、管路开关等设施。6.1.2.2接受标准：均已连接。6.1.2.3测试记录：见附表4公用设施连接检查记录。结论：确认人/日期：复核人/日期：6.1.3清洗确认6.1.3.1检

9、查方法：要求用不脱落纤维的已清洁的抹布擦拭灭菌器内部。6.1.3.2接受标准：清洁部位光亮，用洁净抹布擦拭无黑点等异物。6.1.3.3测试记录：见原始记录湿热灭菌器清洁记录。结论：确认人/日期：复核人/日期：6.1.4水位检查。6.1.4.1检查方法：查看灭菌器内水位是否在现位器以上，以确认灭菌柜使用的水源是否合格。6.1.4.2可接受标准：水位在现位器以上。结论：确认人/日期：复核人/日期：6.1.5 生物指示剂确认6.1.5.1可接受标准：指示剂在有效期内；每支指示剂含芽孢不少于1×106。6.1.5.2确认记录名称生产批号有效期至含芽孢量D值生产厂家嗜热脂肪芽孢杆菌孢子生物指示

10、剂（ATCC7953）结论：确认人/日期：复核人/日期：6.2验证步骤6.2.1空载程序验证6.空载热分布测试（1）将12支留点温度计入灭菌室内。（2）一支留点温度计放在温度控制传感器旁，其于留点温度计均置于腔室各处（留点温度计分布见下图），留点温度计的测温点不得与金属其他表面接触。24151611210119867514313后门门前门探头分布整体透视图其他分布点的具体位置如上图所示：（3） 启动灭菌器，达到灭菌温度后，温度应不低于121，运行30min。（4）灭菌结束降温后，取出温度计记录数据分析，如果符合空载热分布测试的标准，依照此操作程序进行其余两次测试。（5）测试见附表7空载热分布测

11、试记录。结论：确认人/日期：复核人/日期：6.满载热分布测试（1）最大装载量的确认:装载方式：无菌服；（8件/包）；细布20块、*。正视图 A层/俯视图卸载侧A层B层C层（2）满载热分布测试A、在灭菌器中按最差装载方式放入*物品，把12支留点温度计按照热分布探头布局图（照片见附表16）所示放入室内。B、启动灭菌器，达到灭菌温度后，温度应不低于121，运行30min。C、灭菌结束降温后，取出温度计记录数据并分析，如果符合满载热分布测试的标准，依照此操作程序进行其余一次测试。D见附表8满载热分布测试记录。结论：确认人/日期：复核人/日期：6.2.1.3热穿透实验(1）打开灭菌器，按照指定的最差装载

12、方式将被灭菌物品放置在腔室中，随后将12个温度计按预先确定的布点图，放置在被灭菌物品内部，同时每只温度计上放置一个生物指示剂，其中在最差装载条件下得出的冷点位置放置两个生物指示剂，上盖密封。(2） 使用嗜热脂肪芽胞杆菌孢子生物指示剂Bacillus stearothermophilus。(3）启动灭菌器，达到灭菌温度后，温度应不低于121，运行30min。(4）灭菌结束，待冷却后，立即取出所有生物指示剂，进行微生物培养。(5）分别在嗜热脂肪芽胞杆菌孢子生物指示剂培养基中培养，培养温度55-60，24h后、48h后及7天后记录指示剂变化情况，并记录，同时取一支未经处理的生物指示剂作为阳性对照。(

13、6）培养后的生物指示剂如有任何一支指示剂变黄，则表明有细菌生长，如果颜色没有变化，则表明灭菌有效。(7）灭菌结束降温后，取出温度计记录数据并分析。(8）见附表9-11满载热穿透测试记录、生物指示剂测试记录生物指示剂孢子数量确认记录。结论：确认人/日期：6.2.1.4灭菌后物品质无菌检查 （1）测试程序：满载测试时，每次选取接近灭菌柜最冷点的物品两套。同时将上述三批物品放置至有效期（24小时）后，再进行一次无菌检查。（2）检查方法A、灭菌后检查：按照洁净区微生物监测标准操作规程对灭菌后的物品进行菌落检查。接触面积2430cm2，迅速盖好盖，放入3035倒置恒温培养72小时，同时取三个空白双碟做阴

14、性对照，计菌落数，填写物品菌落检测记录。B、有效期检查：将物品存放在* 级下，放置24小时后取出，按照按照洁净区微生物监测标准操作规程进行检测，样品编号分别为（A24、）。C 标准：灭菌后及放置到有效期后的物品菌落数为0，检查合格率100%。空白培养基对照均无菌生长。D、见附表12-13物品菌落检测记录、物品菌落检测记录结论：确认人/日期：复核人/日期：复核人/日期：6.3验证合格标准项目温度/运行时间保压实验压力达到0.15MPa,保持15min，密封圈无泄漏。连续三次空载热分布温度计全部在121123，灭菌时间30min，灭菌温度波动2，灭菌温度均匀性±1。连续三次满载热分布温度

15、计全部在121123，灭菌时间30min，灭菌温度波动2，灭菌温度均匀性±1。连续三次满载热穿透实验及生物指示剂实验各点温度均在121.1以上，灭菌时间30min，Fo值30min。在55-60下嗜热脂肪芽胞杆菌孢子生物指示剂培养7天后，指示剂不变色，对照样在24h内，指示剂变黄色。灭菌后物品无菌检查灭菌后及放置到有效期后的物品菌落数为0，检查合格率100%。空白培养基对照均无菌生长。6.4数据统计及分析对验证结果进行数据统计分析确认脉动真空灭菌柜测试符合要求。7偏差分析对验证过程中所发生的偏差进行处理和分析，并制定纠正预防措施，必要时要重新进行验证。如有偏差，要完成偏差处理与分析报

16、告表。见附表15。在验证过程中如果出现个别项目的不合格情况，应该对不符合项进行偏差分析，找出原因进行整改。对不符合项重新确认。在检测过程中如果出现检测项目不合格的情况，认真分析原因，如果属系统问题，进行整改，整改后重新验证。如果是取样或化验原因，重新取样对不合格的指标重新化验。结论： 评价人/日期：8变更处理本方案在实施过程中如发生变更，应将与变更有关的所有信息记录下来，并进行分析与评价，填写验证变更申请表。见附表16。结论： 评价人/日期：9验证总结及评价通过对灭菌器性能的检测结果进行数据分析总结，确认灭菌器及辅助系统的每一部分功能都能达到生产工艺要求，由验证小组组长对验证过程及结果进行综合

17、评价，评价所要验证的内容是否已达到验证合格标准，验证结论是否有效。确定本次验证的结论。结论评价人/日期：10再验证周期灭菌器验证周期为1年；发生以下变更时，需要再验证：（1）设备更换、改造或大修后；灭菌工艺发生改变；（2）灭菌物品发生改变；（3）灭菌物品装载形式、装载量发生变化。11文件的修订根据本方案实施过程中所发现的问题，对相应的SOP进行补充和完善，补充及完善的内容列入下表中。文件编号文件名称修订内容12附表及附录附表清单序号编号名称1培训确认表2仪表校验检查记录3设备确认记录4泄漏测试记录5空载热分布测试记录6满载热分布测试记录7满载热穿透测试记录8生物指示剂测试记录9生物指示剂孢子数

18、量确认记录10物品菌落检测记录11物品菌落检测记录12偏差处理与分析报告13验证变更申请表附表1培训确认表培训确认表编号： 版本号：00 第1页共1页主讲人日期培训内容参加人员：确认内容该验证所有参与成员均经过了培训且能胜任本次验证工作 是 否备注：确认人/日期附表2仪表校验检查记录仪表校验检查记录编号： 版本号：00 第1页共1页仪表名称型号编号有效期至检查结果检查人检查日期温度传感器压力变送器温度验证仪附表3设备确认记录设备确认记录编号： 版本号：00 第1页共1页检查项目检查方法检查结果检查人检查日期设备型号检查设备铭牌是 否 设备定位检查灭菌器安装地点和位置，在*是 否 材质该蒸汽灭菌

19、柜，采用316L不锈钢材料制作，密封圈材料为硅橡胶是 否 外观确认机器外观是否良好，无缺陷和损坏是 否 操作与维护有足够的空间进行操作和维护是 否 加热形式电加热是 否 加热功率按说明书技术参数是 否 仪表型号能满足工艺要求是 否 动力电源三相四线、接地良好是 否 附表5泄漏测试记录泄漏测试记录编号： 版本号：00 第1页共1页测试日期开始时间t1开始压力P1结束时间t2结束压力P2泄漏率 P2- P1t2 - t1标准泄漏率标准：保压15min,每分钟不得超过0.13Kpa检查人/日期复核人/日期附表7空载热分布测试记录空载热分布测试记录编号： 版本号：00 第1页共1页共运行3次第（ ）次

20、运行验证程序日期温度设定点热电偶编号开始时间灭菌开始时间结束时间灭菌结束时间总时间灭菌总时间灭菌阶段热温度计最低温度灭菌阶段热温度计最高温度最低温度热温度计位置最高温度热温度计位置确认内容全部热温度计温度在121-123是 否 灭菌时间30min是 否 每个测试点温度波动2是 否 保温期间测试点与平均值之间温度差±1是 否 备注：确认人确认日期复核人复核日期附表8满载热分布测试记录满载热分布测试记录编号： 版本号：00 第1页共1页项目满载热分布第一次第二次第三次相关数据预热时间灭菌开始时间灭菌结束时间开机温度（）灭菌温度（）验证时间验证数据灭菌段最高温度（）热电偶位置最低温度（）热

21、电偶位置温差（）确认内容全部热电偶温度在121-123是 否 灭菌时间30min是 否 每个测试点温度波动2是 否 保温期间测试点与平均值之间温度差±1是 否 备注：确认人确认日期复核人复核日期附表9满载热穿透测试记录满载热穿透测试记录编号：版本号：00 第1页共1页项目（ ）程序 满载热分布第一次第二次第三次相关数据预热时间灭菌开始时间灭菌结束时间开机温度（）灭菌温度（）验证时间验证数据灭菌段最高温度（）温度计位置最低温度（）温度计位置温差（）最小Fo值热电偶位置生物指示剂实验选点确认内容全部温度在121-123是 否 灭菌时间30min是 否 每个测试点温度波动2是 否 保温期间

22、测试点与平均值之间温度差±1是 否 Fo值30min是 否 备注：确认人确认日期复核人复核日期附表10生物指示剂测试记录生物指示剂测试记录编号： 版本号：00 第1页共1页共运行3批 （ ）程序 第（ ）次运行生物指示剂名称生物指示剂批号有效期至每片孢子数量 D值生物指示剂生产厂家生化培养箱设备编号检验条件要求：55-600C；培养7天。灭菌合格标准：指示剂无变色。 灭菌不合格：指示剂变为黄色培养温度：0C； 阳性对照24小时内是否变黄色 是否 培养时间日时分-日时分样品颜色 不变色：- 变色：+指示剂编号24小时48小时168小时对照指示剂编号24小时48小时168小时指示剂编号24小时48小时168小时检查人检查日期复核人复核日期附表11生物指示剂孢子数量确认记录生物指示剂孢子数量确认记录编号： 版本号：00 第1页 共1页日期生物指示剂名称生物指示剂批号生产厂家有效日期使用部门热处理温度热处理时间自 ： 至 ： ，共 分钟培养基名