外源化学物致癌作用及方法

1、2022-3-171外源化学物致癌作用及方法外源化学物致癌作用及方法2022-3-172研究的意义：研究的意义：死因顺位的改变死因顺位的改变研究的历史研究的历史人类癌症相关的环境因素人类癌症相关的环境因素2022-3-173死因顺位改变死因顺位改变2022-3-174死因顺位改变死因顺位改变2022-3-175研究历史研究历史17751775年年英国英国Pott Pott 烟囱工烟囱工 阴囊癌阴囊癌18951895年年德国德国Rehn Rehn 染料工人染料工人 职业性膀胱癌职业性膀胱癌19151915年年日本山极、市川日本山极、市川 煤焦油诱发皮肤癌煤焦油诱发皮肤癌19221922年年英国英

2、国Kennway Kennway 煤焦油分离出多环芳烃煤焦油分离出多环芳烃 动物皮肤癌动物皮肤癌 19451945年年英国英国Case Case B-B-萘胺及联苯胺萘胺及联苯胺 膀胱癌膀胱癌2022-3-176环境因素环境因素百分比百分比（）（）环境因素环境因素百分比百分比（）（）烟草烟草3030职业职业4 4酒精酒精3 3污染污染2 2饮食饮食3535工业产品工业产品11食品添加剂食品添加剂11药品和医学处置药品和医学处置1 1感染感染1010地球物理因素地球物理因素3 3生殖和性行为生殖和性行为7 7Doll and Peto 归因于环境因素的癌死亡百分比归因于环境因素的癌死亡百分比20

3、22-3-177肿瘤肿瘤（tumortumor，neoplasmneoplasm） 指有分裂潜能的细胞受致癌因素指有分裂潜能的细胞受致癌因素作用后发生恶性转化和克隆性增生所作用后发生恶性转化和克隆性增生所形成的新生物。形成的新生物。2022-3-178良性良性恶性恶性呈膨胀性生长，与周围组织有明显的呈膨胀性生长，与周围组织有明显的界限，有包膜，生长有界限，有包膜，生长有“自限性自限性”，对机体破坏较小。对机体破坏较小。呈增殖失控，细胞异常分化，具有呈增殖失控，细胞异常分化，具有侵袭和转移能力。侵袭和转移能力。2022-3-179化学致癌物：化学致癌物： 指凡能引起动物和人类肿瘤、增加其指凡能引

4、起动物和人类肿瘤、增加其发病率或死亡率的化学物。黄曲霉毒素和发病率或死亡率的化学物。黄曲霉毒素和苯并芘等苯并芘等化学致癌作用化学致癌作用 化学物质引起或诱导正常细胞恶性转化学物质引起或诱导正常细胞恶性转化并发展成肿瘤的过程。化并发展成肿瘤的过程。2022-3-17102022-3-17112022-3-1712一、化学致癌过程一、化学致癌过程1、细胞癌变的多阶段学说、细胞癌变的多阶段学说l 从正常细胞基因突变或表达改变，发展从正常细胞基因突变或表达改变，发展到癌细胞，直至癌转移是一个到癌细胞，直至癌转移是一个多阶段多基多阶段多基因调控多因素因调控多因素参与的过程。参与的过程。l化学致癌作用三个

5、阶段学说：化学致癌作用三个阶段学说：引发阶段、引发阶段、促长阶段和进展阶段促长阶段和进展阶段。2022-3-17131、细胞癌变的多阶段学说、细胞癌变的多阶段学说1 引发阶段引发阶段l启动阶段，第一步。启动阶段，第一步。l化学致癌物对靶细胞化学致癌物对靶细胞DNA产生损伤作用经细胞分产生损伤作用经细胞分裂增殖后成为裂增殖后成为突变细胞突变细胞。l化学致癌物化学致癌物不可逆不可逆的将正常细胞转变为肿瘤细胞的将正常细胞转变为肿瘤细胞的起始步骤。的起始步骤。l引发剂引发剂l相对迅速的过程相对迅速的过程2022-3-17141、细胞癌变的多阶段学说、细胞癌变的多阶段学说2 促长阶段促长阶段l化学致癌作

6、用第二步，即促进形成化学致癌作用第二步，即促进形成肿瘤细胞分裂肿瘤细胞分裂生长生长的作用阶段。的作用阶段。l特点：特点：促癌物的作用促癌物的作用长期、慢性长期、慢性；引发物和引发物和促癌物单独作用均不能引起肿瘤；引发必须发促癌物单独作用均不能引起肿瘤；引发必须发生在促长之前；引发作用是不可逆改变，促长生在促长之前；引发作用是不可逆改变，促长作用在作用在早期是可逆的早期是可逆的。l促长剂促长剂2022-3-17151、细胞癌变的多阶段学说、细胞癌变的多阶段学说3 进展阶段进展阶段l化学致癌作用第三阶段。化学致癌作用第三阶段。l指在肿瘤形成过程中，在指在肿瘤形成过程中，在促进之中或之后促进之中或之

7、后，细胞，细胞表现出表现出不可逆不可逆的遗传学改变的遗传学改变。l标志：标志：遗传不稳定性增加遗传不稳定性增加和和恶性转化恶性转化，在形态上，在形态上或功能代谢及行为方面逐渐表现出肿瘤的特征。或功能代谢及行为方面逐渐表现出肿瘤的特征。2022-3-17162022-3-17172、遗传易感性和化学致癌、遗传易感性和化学致癌致癌因素致癌因素遗传易感性遗传易感性特定基因的多态性特定基因的多态性肿瘤肿瘤单核苷酸多态性单核苷酸多态性 （SNP）代谢酶、代谢酶、DNA修复酶修复酶2022-3-1718二、化学致癌机制二、化学致癌机制化学致癌作用化学致癌作用-多基因多因多基因多因素参与的多阶段过程素参与的

8、多阶段过程化学致癌机制化学致癌机制突变学说突变学说非突变学说非突变学说基因的改变基因的改变基因表达调控失常基因表达调控失常2022-3-1719（一）体细胞突变学说（一）体细胞突变学说2022-3-1720l前致癌物（前致癌物（precarcinogensprecarcinogens）：本身不直接致癌，必须）：本身不直接致癌，必须在体内经代谢转化后才具致癌作用的物质。在体内经代谢转化后才具致癌作用的物质。l近致癌物（近致癌物（proximate carcinogensproximate carcinogens）：前致癌物经代）：前致癌物经代谢活化过程形成的一种或一系列中间代谢产物。谢活化过程形

9、成的一种或一系列中间代谢产物。l终致癌物（终致癌物（ultimate carcinogensultimate carcinogens）：不需代谢活化的）：不需代谢活化的直接致癌物和间接致癌物经代谢活化所形成的具有致癌作直接致癌物和间接致癌物经代谢活化所形成的具有致癌作用的代谢物的统称。用的代谢物的统称。 代谢活化代谢活化 代谢灭活代谢灭活致癌物分类致癌物分类（一）体细胞突变学说（一）体细胞突变学说2022-3-1721（1 1）DNADNA加合物的形成加合物的形成l终致癌物与终致癌物与DNADNA形成形成共价结合共价结合，导致，导致DNADNA的突变的突变l突变的结局有多种，其中部分可发展成恶

10、性转突变的结局有多种，其中部分可发展成恶性转化，产生肿瘤。化，产生肿瘤。l化学致癌物诱导生成化学致癌物诱导生成DNADNA加合物的加合物的数量、位置数量、位置和性质和性质等与致癌性有密切关系。等与致癌性有密切关系。（一）体细胞突变学说（一）体细胞突变学说2022-3-1722如：加合物位于鸟嘌呤如：加合物位于鸟嘌呤O O6 6位置上，就会位置上，就会引起酮烯醇型的电荷分布，这样的鸟引起酮烯醇型的电荷分布，这样的鸟嘌呤的嘌呤的N N2 2就会形成脱氢核（去质子化），就会形成脱氢核（去质子化），不再与胞嘧啶形成氢键，而与胸腺嘧啶不再与胞嘧啶形成氢键，而与胸腺嘧啶氢核的氢核的N N1 1形成氢键。因

11、此，鸟嘌呤形成氢键。因此，鸟嘌呤O O6 6上上的加合物在细胞复制时就会造成的加合物在细胞复制时就会造成G G与与T T的的错配。最终导致错配。最终导致DNADNA突变。突变。2022-3-1723（2）癌基因、原癌基因、抑癌基因）癌基因、原癌基因、抑癌基因癌基因癌基因(oncogene)：指一类在自然或实验条件下具有诱发指一类在自然或实验条件下具有诱发恶性转化的潜在基因，它们是化学致癌物作用的主要靶分子，恶性转化的潜在基因，它们是化学致癌物作用的主要靶分子，在细胞癌变过程中起着关键作用。在细胞癌变过程中起着关键作用。原癌基因原癌基因(proto-oncogene)：指机体内正常细胞所具有指机

12、体内正常细胞所具有的能致癌的遗传信息。正常情况下呈静止状态，对细胞无害的能致癌的遗传信息。正常情况下呈静止状态，对细胞无害且具有重要生物学功能（调控细胞生长分化、分裂增殖等）且具有重要生物学功能（调控细胞生长分化、分裂增殖等）抑癌基因抑癌基因(anti-oncogene)：是正常细胞分裂生长的负性是正常细胞分裂生长的负性调节因子，其编码的蛋白质能够降低或抑制细胞分裂活动。调节因子，其编码的蛋白质能够降低或抑制细胞分裂活动。（一）体细胞突变学说（一）体细胞突变学说2022-3-1724原癌基因原癌基因2022-3-1725抑癌基因抑癌基因2022-3-17262022-3-1727（3）DNA修

13、复和化学致癌修复和化学致癌（一）体细胞突变学说（一）体细胞突变学说2022-3-1728（二）非突变致癌机制（二）非突变致癌机制（1）表观遗传调控失常）表观遗传调控失常表观遗传学表观遗传学（Epigenetics）：是研究机）：是研究机体发育和细胞增殖中的体发育和细胞增殖中的遗传遗传的改变，的改变，但但不改变不改变DNA序列序列，受环境因素的影响。，受环境因素的影响。表观遗传学修饰包括表观遗传学修饰包括DNA甲基化和组蛋甲基化和组蛋白转录后修饰，即组蛋白甲基化，乙酰白转录后修饰，即组蛋白甲基化，乙酰化、磷酸化和化、磷酸化和ATP依赖性的染色质结构依赖性的染色质结构修饰。修饰。2022-3-17

14、29（二）非突变致癌机制（二）非突变致癌机制（2）细胞增生异常）细胞增生异常2022-3-1730（2）细胞增生异常）细胞增生异常诱发致癌相关的细胞增殖的主要机制：诱发致癌相关的细胞增殖的主要机制：l再生细胞增殖：再生细胞增殖：癌前损伤的细胞比正常细胞更癌前损伤的细胞比正常细胞更能耐受毒性效应，从而癌细胞可优先生长增殖。能耐受毒性效应，从而癌细胞可优先生长增殖。l有丝分裂剂引起的增殖：有丝分裂剂引起的增殖：某些化学物能直接某些化学物能直接诱导细胞增殖，且具有组织特异性。诱导细胞增殖，且具有组织特异性。2022-3-1731（3）免疫抑制）免疫抑制l免疫缺陷：易发肿瘤免疫缺陷：易发肿瘤l免疫功能

15、增强：肿瘤自行消退。免疫功能增强：肿瘤自行消退。l免疫逃避：肿瘤生长、扩散、转移免疫逃避：肿瘤生长、扩散、转移l免疫抑制：影响肿瘤的生成，启动免疫逃避。免疫抑制：影响肿瘤的生成，启动免疫逃避。（二）非突变致癌机制（二）非突变致癌机制2022-3-1732（4）内分泌激素失衡）内分泌激素失衡l环境内分泌干扰物环境内分泌干扰物：一些外源化学物能通过干扰体内激一些外源化学物能通过干扰体内激素的产生、释放、转运、代谢和清除，与相应的受体结合随素的产生、释放、转运、代谢和清除，与相应的受体结合随之在细胞内产生效应，干扰血液中激素正常水平的维持，模之在细胞内产生效应，干扰血液中激素正常水平的维持，模拟或干

16、扰正常激素的生理生化功能。拟或干扰正常激素的生理生化功能。l健康影响健康影响：生殖障碍、出生缺陷、发育异常、代谢紊乱、生殖障碍、出生缺陷、发育异常、代谢紊乱、肿瘤肿瘤。l致癌机制尚不明确致癌机制尚不明确：可能干扰激素正常代谢、拟激素作可能干扰激素正常代谢、拟激素作用、形成加合物、影响神经免疫等其他系统。用、形成加合物、影响神经免疫等其他系统。（二）非突变致癌机制（二）非突变致癌机制2022-3-1733（5）过氧化酶体增殖剂激活受体）过氧化酶体增殖剂激活受体l过氧化酶体过氧化酶体l过氧化酶体增殖剂（过氧化酶体增殖剂（peroxisome proliferator）：）：氯贝丁酯、异丙酯、苯二甲

17、酸氯贝丁酯、异丙酯、苯二甲酸l作用模式：受体介导模式作用模式：受体介导模式 PPAR-PPAR-。l诱发肿瘤可能机理：诱导氧化应激状态、导致过诱发肿瘤可能机理：诱导氧化应激状态、导致过氧化氢的产生和降解失衡、损伤细胞内膜或氧化氢的产生和降解失衡、损伤细胞内膜或DNADNA，继，继而诱导而诱导DNADNA复制，干扰细胞周期调控，影响分化和增复制，干扰细胞周期调控，影响分化和增生。生。（二）非突变致癌机制（二）非突变致癌机制2022-3-1734三、化学致癌相关的分子事件三、化学致癌相关的分子事件基因突变基因突变端粒调控与细胞永生化端粒调控与细胞永生化 “端粒假说端粒假说”细胞周期调控紊乱细胞周期

18、调控紊乱 重要因子功能障碍重要因子功能障碍细胞凋亡与肿瘤发生细胞凋亡与肿瘤发生 干扰正常凋亡过程干扰正常凋亡过程 2022-3-1735（1）基因突变）基因突变l癌基因、抑癌基因癌基因、抑癌基因lDNADNA修复基因修复基因l细胞凋亡调控基因细胞凋亡调控基因l维持基因组稳定维持基因组稳定2022-3-17362022-3-17372022-3-17382022-3-1739（2）端粒调控与细胞永生化）端粒调控与细胞永生化l细胞永生化是细胞恶性转化的必经阶段细胞永生化是细胞恶性转化的必经阶段lp53p53和和RbRb失活失活l端粒酶激活端粒酶激活2022-3-1740端粒长度端粒长度细胞分裂次数

19、细胞分裂次数2022-3-1741（3）细胞周期调控紊乱）细胞周期调控紊乱2022-3-1742（4）细胞凋亡和肿瘤发生）细胞凋亡和肿瘤发生2022-3-1743 在正常情况下，机体内细胞分裂增殖的在正常情况下，机体内细胞分裂增殖的速度和细胞死亡的速度大致相等，细胞群体速度和细胞死亡的速度大致相等，细胞群体的数量处于动态平衡的状态，各种组织器官的数量处于动态平衡的状态，各种组织器官的生理恒定得以维持。如果由于某种内因或的生理恒定得以维持。如果由于某种内因或外因的作用，致使细胞群体只有增殖而无死外因的作用，致使细胞群体只有增殖而无死亡，或者细胞增殖速度太快，自然死亡速度亡，或者细胞增殖速度太快，

20、自然死亡速度太慢，都会导致群体的增殖速度与自然死亡太慢，都会导致群体的增殖速度与自然死亡速度失衡，结果导致肿瘤的发生。速度失衡，结果导致肿瘤的发生。2022-3-1744三、化学致癌物的分类三、化学致癌物的分类（一）根据致癌物对人类和动物的致癌作用分类（一）根据致癌物对人类和动物的致癌作用分类组组1，对人类是致癌物。对人类致癌性证据充分者。，对人类是致癌物。对人类致癌性证据充分者。87种种组组2，对人类是很可能或可能致癌物。，对人类是很可能或可能致癌物。 组组2A，对人类很可能是致癌物，指对人类致癌性证据，对人类很可能是致癌物，指对人类致癌性证据有限，对实验动物致癌性证据充分。有限，对实验动物

21、致癌性证据充分。63种种 组组2B，对人类是可能致癌物，指对人类致癌性证据有，对人类是可能致癌物，指对人类致癌性证据有限，对实验动物致癌性证据不充分；或指对人类致癌性限，对实验动物致癌性证据不充分；或指对人类致癌性证据不足，对实验动物致癌性证据充分。证据不足，对实验动物致癌性证据充分。234种种组组3，现有的证据不能对人类致癌性。，现有的证据不能对人类致癌性。493种种组组4，对人类可能是非致癌物。，对人类可能是非致癌物。1种种ICRA2022-3-1745分类分类IARC US EPA人证据人证据动物证据动物证据人类致癌物人类致癌物1A充分充分充分或有限充分或有限很可能是人很可能是人类致癌物

22、类致癌物2AB1，B2a有限或不足有限或不足充分充分可能是人类可能是人类致癌物致癌物2BC缺乏或不足缺乏或不足充分或有限充分或有限b未分类未分类3D缺乏或不足缺乏或不足不足或缺乏不足或缺乏非致癌物非致癌物4E缺乏缺乏至少至少2个物种个物种阴性结果阴性结果居于证据权重的致癌物分类居于证据权重的致癌物分类2022-3-1746（二）根据化学致癌物作用机制的分类（二）根据化学致癌物作用机制的分类遗传毒性致癌物遗传毒性致癌物：进入细胞后与进入细胞后与DNA共价共价结合，引起机体结合，引起机体遗传物质改变遗传物质改变，导致突变的化学，导致突变的化学物质；遗传毒理学试验来检测该类致癌物物质；遗传毒理学试验

23、来检测该类致癌物。非遗传毒性致癌物非遗传毒性致癌物：不作用于机体遗传物不作用于机体遗传物质的化学致癌物。质的化学致癌物。2022-3-17471、遗传毒性致癌物、遗传毒性致癌物（1）直接致癌物直接致癌物：本身：本身直接直接具有致癌作用、具有致癌作用、不需不需代谢活化。如代谢活化。如烷化剂烷化剂，大多数为亲电子反应物，大多数为亲电子反应物（2）间接致癌物间接致癌物：本身本身不直接不直接致癌、致癌、需经需经代谢转代谢转化化形成代谢产物才具有致癌作用。形成代谢产物才具有致癌作用。多环芳烃多环芳烃、芳香、芳香胺胺（3）无机致癌物无机致癌物：有些是亲电子剂，有些通过选：有些是亲电子剂，有些通过选择性改变

24、择性改变DNA复制保真性。复制保真性。镍、铬镍、铬2022-3-17482、非遗传毒性致癌物、非遗传毒性致癌物（1）促长剂促长剂：增强致癌物的致癌作用。佛波酯、苯巴比：增强致癌物的致癌作用。佛波酯、苯巴比妥、二丁基羟基甲苯、妥、二丁基羟基甲苯、DDT（2）内分泌调控剂内分泌调控剂：改变内分泌平衡和细胞分化，起促：改变内分泌平衡和细胞分化，起促长剂作用。乙烯雌酚、雌二醇、硫脲长剂作用。乙烯雌酚、雌二醇、硫脲（3）免疫抑制剂免疫抑制剂：对病毒诱导的恶性转化起增强作用。：对病毒诱导的恶性转化起增强作用。嘌呤同型物嘌呤同型物（4）细胞毒剂细胞毒剂：引起细胞死亡，导致细胞增殖活跃及癌：引起细胞死亡，导致

25、细胞增殖活跃及癌发展。次氮基三乙酸、氯仿发展。次氮基三乙酸、氯仿（5）过氧化物酶体增殖剂过氧化物酶体增殖剂：导致细胞内氧自由基过量生：导致细胞内氧自由基过量生成。祛酯乙酯、邻苯二甲酸乙基己酯成。祛酯乙酯、邻苯二甲酸乙基己酯（6）固态物质固态物质：可能涉及细胞毒性。塑料、石棉：可能涉及细胞毒性。塑料、石棉2022-3-17493、未分类、未分类 二噁英、酶舍吡伦二噁英、酶舍吡伦助致癌物助致癌物：本身不具有引发作用，也不具有促长作：本身不具有引发作用，也不具有促长作用，但可以促进引发作用和增强促长作用，既能促用，但可以促进引发作用和增强促长作用，既能促进或增强致癌过程。如进或增强致癌过程。如乙醇、

26、二氧化硫。乙醇、二氧化硫。2022-3-1750四、化学致癌物筛选的基本方法四、化学致癌物筛选的基本方法两类主要证据：两类主要证据：人群流行病学调查人群流行病学调查 动物试验动物试验流行病学调查：流行病学调查： 限制和干扰因素多限制和干扰因素多动物诱癌试验：动物诱癌试验：花费大、周期长、动物花费大、周期长、动物使用数量多使用数量多人类接触的外源化学物至少数十万种人类接触的外源化学物至少数十万种2022-3-17512022-3-17521、短期试验、短期试验（一）定量构效关系分析（一）定量构效关系分析（二）致突变试验（遗传毒性实验）（二）致突变试验（遗传毒性实验）（三）细胞转化试验（三）细胞转

27、化试验（四）哺乳动物短期致癌试验（四）哺乳动物短期致癌试验2022-3-1753（三）细胞转化试验（三）细胞转化试验 细胞转化细胞转化：指受试物与正常细胞在体外：指受试物与正常细胞在体外接触，如有致癌作用，可使正常细胞形接触，如有致癌作用，可使正常细胞形态、功能发生变化，产生与癌细胞相似态、功能发生变化，产生与癌细胞相似的特征。的特征。2022-3-1754常用细胞常用细胞1、原代细胞、原代细胞：叙利亚仓鼠胚胎细胞（：叙利亚仓鼠胚胎细胞（SHE细细胞）、人类成纤维细胞、小鼠皮肤或大鼠支胞）、人类成纤维细胞、小鼠皮肤或大鼠支气管上皮细胞；气管上皮细胞；2、细胞系、细胞系：BALB/C-3T3，C

28、3H10T1/2，BHK-21；3、病毒感染细胞、病毒感染细胞：RLV/RE细胞（劳舍尔白细胞（劳舍尔白血病病毒感染的血病病毒感染的Fisher大鼠胚胎细胞）和大鼠胚胎细胞）和SA7/SHE（猿猴腺病毒感染的（猿猴腺病毒感染的SHE细胞）。细胞）。2022-3-1755观察终点：观察终点：恶性表型细胞恶性表型细胞l细胞形态细胞形态l细胞增殖速度细胞增殖速度l生长特性（锚着独立性生长或接触抑制消生长特性（锚着独立性生长或接触抑制消失等）失等）l染色体畸变染色体畸变l接种裸鼠时形成肉眼可见的肿瘤接种裸鼠时形成肉眼可见的肿瘤2022-3-1756结果判断结果判断l 提示受试物有致癌的可能性，不能提示

29、受试物有致癌的可能性，不能替代动物试验作出肯定的结论。替代动物试验作出肯定的结论。2022-3-1757（四）哺乳动物短期致癌试验（四）哺乳动物短期致癌试验l 在短时间内完成而不是终生，观察的靶器官也在短时间内完成而不是终生，观察的靶器官也限定为一个而不是全部器官和组织。限定为一个而不是全部器官和组织。l常用的试验常用的试验l小鼠肺肿瘤诱发试验小鼠肺肿瘤诱发试验l小鼠皮肤肿瘤诱发试验小鼠皮肤肿瘤诱发试验l雌性大鼠乳腺癌诱发试验雌性大鼠乳腺癌诱发试验l大鼠肝转变灶试验大鼠肝转变灶试验给预受试物后，多次持续给预促长剂，给预受试物后，多次持续给预促长剂，20-30周左右观察局部组织有无肿瘤。周左右观

30、察局部组织有无肿瘤。2022-3-1758l 任一试验阳性结果，意义与长期动物任一试验阳性结果，意义与长期动物致癌试验致癌试验相当相当。l 但由于试验期短，又未检查其他器官和但由于试验期短，又未检查其他器官和系统，特别是皮肤肿瘤和乳腺癌的诱发试系统，特别是皮肤肿瘤和乳腺癌的诱发试验似乎仅适用于较小范围的化学物质类型，验似乎仅适用于较小范围的化学物质类型，因此阴性结果的意义较差。因此阴性结果的意义较差。2022-3-17592、哺乳动物长期致癌试验、哺乳动物长期致癌试验（1）动物选择）动物选择大鼠：肝癌大鼠：肝癌小鼠：呼吸道、肺肿瘤小鼠：呼吸道、肺肿瘤金黄地鼠、犬：膀胱癌金黄地鼠、犬：膀胱癌选择

31、依据：对诱发肿瘤的易感性。选择依据：对诱发肿瘤的易感性。物种、品系，年龄、性别，数量物种、品系，年龄、性别，数量断乳或断乳不久的动物，雌雄各半。断乳或断乳不久的动物，雌雄各半。每组动物数雌雄各每组动物数雌雄各50只。只。2022-3-1760（二）剂量设计（二）剂量设计l3个剂量组个剂量组+1个对照组个对照组l染毒剂量组：低、中、高染毒剂量组：低、中、高2022-3-1761（三）试验期限与染毒时间（三）试验期限与染毒时间原则上要求长期活终生原则上要求长期活终生一般情况下最少一般情况下最少小鼠小鼠1.5年年大鼠大鼠2年年2022-3-1762（四）结果观察、分析和评定（四）结果观察、分析和评定1、肿瘤发生率、肿瘤发生率2、多发性、多发性3、潜伏期、潜伏期肿瘤总发生率、恶性肿瘤总发生肿瘤总发生率、恶性肿瘤总发生率、各器官或组织肿瘤发生率和率、各器官或组织肿瘤发生率和恶性肿瘤发生率，各种类型肿瘤恶性肿瘤发生率，各种类型肿瘤发生率发生率一个动物出现多个肿瘤或一个器官出现一个动物出现多个肿瘤或一个器官出现多个肿瘤。多个肿瘤。每一组评价肿瘤数、每一组出现每一组评价肿瘤数、每一组出现2、3、多个肿瘤的动物数和比例多个肿瘤的动物数和比例各组第一个肿瘤出现的时间为该组潜伏期。体表肿各组第一