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文档简介
1、实验七 尿液干化学分析仪Urinary Chemical Analyzer实验原理1仪器工作原理 多联试带模块与尿样中相应成分发生特异性呈色反应,颜色深浅与相应物质浓度成正比。光源扫描各模块产生的反射光,经球面积分仪的滤光片得到单色光,照射光电二极管转化为电信号。微处理系统结合参考系统将电信号校正为测定值,以定性或半定量方式打印出结果。2试带基本结构 如图5-3,碘酸盐层可破坏尿中维生素C等还原性物质,消除干扰;无此层的试带含一个检测维生素C的模块,以便进行有关项目的校正。塑料底层吸水层试剂层碘酸盐层尼龙膜图5-3 尿液干化学分析仪试剂块组成示意图3试带模块反应原理 各模块反应的原理、参考范围
2、、常见干扰项目等见表5-10。表5-10 尿液干化学分析仪检查项目、原理、参考范围及主要干扰因素检测项目反应原理灵敏度参考范围干扰因素假阳性假阴性酸碱度 (pH)酸碱指示剂法4.59.057标本久置后,细菌繁殖或CO2丢失,pH 试带浸尿时间过长,pH 蛋白(PRO)pH指示剂蛋白质误差法对白蛋白敏感(70100mg/L),对球蛋白、粘蛋白、本周蛋白敏感性差阴性pH8,奎宁、磺胺嘧啶、聚乙烯吡咯酮等药物,季铵类消毒剂pH3,高浓度青霉素,高盐,球蛋白、本周蛋白等非电解质蛋白葡萄糖 (GLU)葡萄糖氧化酶法250mg/L阴性过氧化物、强氧化剂污染高VitC、乙酰乙酸,L-多巴代谢物,高比密低pH
3、尿酮体(KET)亚硝基铁氰化钠法乙酰乙酸: 50 100mg/L;丙酮: 400700mg/L;与-羟丁酸不反应阴性苯丙酮、L-多巴代谢物、酮体以-羟丁酸为主,陈旧尿隐血(BLD)过氧化物酶法Hb0.30.5mg/L;RBC10/l阴性肌红蛋白、易热性触酶、氧化剂和菌尿 VitC、蛋白尿、糖尿胆红素 (BIL)偶氮法5mg/L阴性吩噻嗪类药物VitC、亚硝酸盐、光照尿胆原(UBG)偶氮法或Ehrich反应10mg/L阴性或弱阳性吩噻嗪类药物、胆色素原、胆红素、吲哚亚硝酸盐、光照、重氮药物亚硝酸盐 (NIT)偶氮法0.50.6mg/L阴性陈旧尿、亚硝酸盐或偶氮试剂污染、食物硝酸盐含量丰富pH5、
4、尿量过多、食物硝酸盐含量过低、尿在膀胱内停留4h、非含硝酸盐还原酶细菌感染、VitC、亚硝酸盐白细胞(LEU/WBC)中性粒细胞酯酶法25/l阴性甲醛、氧化剂、胆红素、呋喃类药以淋巴或单核细胞为主、蛋白、庆大霉素比密(SG)多聚电解质中H+解离量与离子浓度相关1.0101.0301.0151.025电解质性尿蛋白致SG碱性尿致SG维生素C(VitC)酸性环境中还原染料50 mg/L阴性巯基化合物、胱氨酸、内源性酚碱性尿仪器组成1机械系统 将试带传送至预定检测区,检测完成后送到废物盒。2光学系统 光线照射到试带表面产生反射光,反射光强度与反应颜色成正比。不同强度的反射光经光电转换为电信号进行处理
5、。(1)光源:提供特定波长的光源如发光二极管(1ight emitting diode,LED)。(2)单色装置:球面积分仪使模块表面的反射光转变成单色光。(3)光电检测器:将反射光信号转换为电信号,如电荷耦合器件(charge coupled device, CCD)。3电路系统 将电信号放大,经模/数转换后送微处理器(computer unit, CPU)处理,计算最终检测结果。然后将结果输出到屏幕显示并打印。4微处理器 除了与参照系统比较,处理和校正检测信号外,还控制整个仪器运作。尿干化学分析仪结构见图5-4。光源检测器光电转换器微处理器打印输出模块扫描结构(可移动)试带进样结构尿多联试
6、带(位置固定)图5-4 尿干化学分析仪结构示意图试剂器材1试剂 人工尿质控液低浓度和高浓度各l份。2器材 尿液干化学分析仪、尿干化学试带。操作步骤1开机 打开电源开关,等待仪器自检完成后,进入主菜单。2检测质控试带 将质控试带置于检测槽内,启动仪器运行键,自动检测。待仪器打印出质控结果,显示“正常”后,取回质控带保存。3浸渍试带 将试带完全浸入尿样中12s,取出,吸干试带多余的尿样。4标本检测 同步骤2,直到仪器自行打印报告或将数据输出。性能评价目前各医院使用的尿液分析仪的厂家、种类不一,型号各异,但其性能评价及仪器的校正均应包括以下5个方面。1校正仪器(1)按仪器制造商规定的要求,调正仪器使
7、其处于最佳工作状态,包括仪器安装的位置、工作室温度和湿度、检测速度、打印显示功能是否在规定范围之内。避免阳光等其他光源的直接照射、外源性振动、外源性电源干扰等。(2)检查仪器检测系统:用标准试带校正条对仪器进行检测,观察其是否在规定的范围内。2检查仪器和多联试带的准确性 按仪器规定的测定范围配制一定浓度的标准物,在严格操作的前提下,每份标准物重复检测3次,观察其符合程度。3检查仪器和多联试带的精确性 取人工尿质控液(低浓度和高浓度各1份)和自然尿标本(正常尿和异常尿各1份),连续检测20次,观察每份标本每次检测是否在靶值允许的范围内(一般每次检测最多相差一个定性等级)。4评价敏感性(S)和特异
8、性(Sp) 将尿液干化学分析仪和传统显微镜及尿液理化检查结果进行对比,以传统法为基准,计算仪器检测的S和Sp。5建立仪器检测参数的参考范围 以传统法为基准,结合多联试带检测范围,建立符合本实验室尿分析仪的参考范围。质量控制尿液干化学分析存在的局限性和影响因素较多,容易产生假阳性或假阴性。因此,必须十分重视尿干化学分析仪和多联试带质量控制。使用尿干化学分析仪应以传统法为基准,结合多联试带检测范围,建立符合本实验室尿液分析仪的参考范围。其质量控制的主要环节如下:1分析前的质量控制(1)尿样收集:告知病人正确留取尿样的方法。根据检测内容留取适当的标本,防止非尿液成分(如阴道分泌物等)混入。要使用1次
9、性尿杯,有明显的标签,含患者姓名、病历号、收集时间和检验项目等。(2)了解患者可能影响尿化学检测的进食及使用药物的情况。(3)尿样保存:尿样收集后应在2h之内完成检测,否则选用适当的防腐剂并冷藏保存。注意准确有效地标记尿标本。2分析中的质量控制 包括仪器和试带的准确性、试带的有效期、仪器操作正确程度和仪器的校正等方面。(1)严格按操作步骤进行检测。(2)使用质控尿液,根据尿化学质控液的期望值判断尿液分析仪的工作状态是否正常。自制人工尿质控液对尿葡萄糖、蛋白质、血红蛋白基本能满足要求,但尿胆红素、尿胆原结果不能令人满意,尿酮体也有问题。国外公司的商品质控液效果较好,如Bio-Rad公司的Rout
10、ine Urine Chemistry Control。(3)质控步骤:在对分析仪全面鉴定和定期校正的基础上,每日对仪器和试带按图5-3程序进行检查。每次使用“正常”和“异常”两种浓度的质控物进行检查:同1天内最好使用同l份质控物标本;质控物任一膜块的测定结果与“靶值”允许有1个定性等级的差异(靶值的±),超过此范围或结果由“正常”变成 “异常”或由“异常”变成“正常”均应视为失控。尿液分析中质量控制程序见图5-5。图5-5 尿液分析中质量控制程序用质控物进行质控质控允许范围内超出质控允许范围标本测定检查质控物是否失效 No Yes 重复试验 重新试验使用新质控物质控允许范围内 质控
11、允许范围外 继续标本测定 配制新质控物质控允许范围内质控允许范围外标本测定重新试验另一批号新试带新试带废弃失效试带质控允许范围内 质控允许范围外标本测定检修或校正仪器新批号试带废弃全部失效试带质控允许范围外质控允许范围内启用同一批号试带 继续标本测定使用新质控物废弃旧质控物3分析后的质量控制 包括试验结果与显微镜检结果的相关性、是否受药物或病理物质的干扰、参考范围的认可、报告单书写是否规范和报告单回报时间是否及时等方面。(1)化学分析结果与显微镜检结果之间的关联性:如出现表5-11情况表示尿化学检测结果可疑,应进一步查明原因。表5-11 尿干化学结果可疑情况化学分析显微镜检查隐血()大量红细胞
12、亚硝酸盐()白细胞()蛋白质()红细胞、白细胞和管型增多(2)综合考虑患者的病史:特别是肾脏疾病患者,尿蛋白定性应当用磺基水杨酸法。如尿化学分析结果与镜检不一致,应进一步查明原因。(3)参考范围的认可:尿干化学分析仪检测白细胞、红细胞出现“假阴性”时,应以镜检为准;但当“假阳性”时,仪器的结果可能正确。这种情况见于白细胞:当尿在膀胱贮存时间长,白细胞破坏,中性粒细胞酯酶释放到尿中,导致仪器分析(),镜检反而();红细胞:肾病患者尿中红细胞常破坏而释出血红蛋白或某些病人尿中有高活性不耐热的触酶时均可导致仪器分析(),镜检却为()。尿液煮沸冷却后再测试可排除不耐热的触酶造成的假阳性。其他情况要结合临床实践,不能一概否定或肯定仪器检测结果,更不能随意调节改
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