临床病理考试

1、1 、简单设计一个免疫组织化学标记的方案来研究一个课题（一抗和二抗的名称和来源，一抗的定位预测；实验方案，生物学意义和临床意义，实验设计（每个对照组的意义） 。结果判断一抗：鼠抗人VEGF 单克隆抗体；二抗：羊抗小鼠生物素标记抗体；一抗的定位预测：表达在肺组织的细胞浆中；实验方案： 选择非小细胞肺癌组织、 癌旁组织、正常肺组织三组石蜡标本切片。通过抗体标记 VEGF ，经过免疫组化染色后判定相关蛋白表达与肺细胞癌的临床病理特征的关系。生物学意义： VEGF 是肿瘤血管生成和侵袭转移过程中的关键因素， 可以通过其相关的特异性受体选择性作用于内皮细胞发挥作用。临床意义： 通过了解非小细胞肺癌VEG

2、F 的表达， 可能预测非小细胞肺癌的转移、 预后，从而指导抗肿瘤治疗。实验设计： 通过设立癌旁组织和正常肺组织的对照组， 对比所研究蛋白在不同组织中表达的差异，进而得出实验结论。结果判断： 免疫组化染色后， 利用电脑的病理图文报告分析系统进行结果判读， 对染色结果定量分析。 掌握以下原则： 阳性细胞定位是否明确， 是胞膜、 胞浆还是胞核阳性间质清晰，无背景着色；阳性细胞要在5%以上，才能定为阳性；参考评价：<5% -, 5%25%+, 25% 50% + + , > 50% + + +。2、免疫组化的应用范围及盲点范围：提高病理诊断准确性； 对疾病的预后和治疗的意义； 癌基因蛋白的

3、应用； 对肿瘤增生程度微小病灶的发现； 在肿瘤分期上的意义； 指导肿瘤的治疗； 免疫性疾病的辅助诊断； 病原微生物的检测；盲点：由于抗体稀释度、多克隆抗体特异性问题、试剂盒选择、操作中时间、温度、染色过程等因素使其在结果判断上存在 “假阳性 ”和 “假阴性 ” ； 影响因素很多， 使结果判断的标准化问题尚难统一；存在抗原抗体交叉反应、抗原联合表达等问题3、何谓“套餐式”免疫标记？举两例说明每一种组织的标记物必须用 2 种以上的抗体，除了能够阳性正面证实的抗体，还要有能阴性反面证实的抗体。例如：a.Keratin,Vimentin,LCA,S100 四种抗体组合。 Keratin 角蛋白， 存在

4、于上皮细胞， Keratin阳性且其它阴性的结果可以筛选出可疑癌或生殖细胞瘤； Vimentin 波纹蛋白，存在于间质细， LCA 存在于血细胞， Vimentin 和 LCA 阳性的结果可以筛选出可疑淋巴瘤； S-100 存在于神经内分泌细胞， Vimentin 和 S100 阳性的结果可以筛选出可疑神经内分泌肿瘤； Vimentin 阳性的结果可以筛选出可疑肉瘤。b. 胃肠道间质瘤GIST 检测 CD117,DOG-1,CD34 ；鉴别平滑肌瘤及神经鞘瘤。4、何谓靶向治疗？举两例说明在细胞分子水平，针对已经明确的致癌位点（该位点可以是肿瘤细胞内的一个蛋白质分子，也可以是一个基因片段） ，来

5、设计相应的治疗药物，药物进入体内后会特异地作用于致癌位点，达到治疗肿瘤的目的。举例：曲妥珠单抗用于治疗Her-2 阳性乳腺癌吉非替尼治疗EGFR 阳性肺非小细胞肺癌5、靶向治疗应用现状靶向治疗是近年来肿瘤治疗领域中的热点，已经在肺癌、 胃肠间质瘤、 淋巴瘤、乳腺癌和结直肠癌等治疗中显示了一定的疗效。肺癌：部分非小细胞肺癌EGFR 过表达 /突变，采用EGFR 抑制剂进行靶向治疗， 药物有吉非替尼、西妥昔单抗等； 胃肠间质瘤：发病机制关键在于 C-kit 基因功能获得性突变以及由此导致的 Kit 蛋白异常活化，治疗药物有伊马替尼、苏尼替尼。 乳腺癌： Her-2 过表达， 治疗药物赫赛汀， 是靶

6、向 Her-2 胞外区的人单克隆抗体。存在的问题： 一些癌症的分子发病机制尚不完全清楚， 使得靶向药物的应用范围受到限制。存在不良反应。临床疗效存在个体差异性。靶向治疗药物耐药。6、分子病理学临床应用的进展，举例说明肺癌的分子病理学胃肠道间质瘤 （GIST） 的分子病理学乳腺癌的分子病理学： 在我国， 乳腺癌已经成为女性最常见的恶性肿瘤之一， 居女性恶性肿瘤死亡率的首位。研究发现，有20-30% 的乳腺癌患者，临床表现为乳腺癌显著扩散，化疗效果差且易早期复发，预后较差，原因是这些患者均为 Her-2 阳性，且 Her-2 过度表达。Her-2/neu 基因是一种原癌基因，参与调控细胞生长、增殖

7、及分化，是公认的重要肿瘤标记之一。 30% 的浸润性乳腺癌和70% 的导管原位癌存在Her-2 基因过表达。 Her-2 阳性同时预示着肿瘤对内分泌治疗和常规CMF 方案相对耐药。经 FDA 批准的乳腺癌细胞Her-2 的检测仅有两种， a. 免疫组织化学方法测定C-erbB-2 蛋白表达； b. 荧光原位杂交法（ FISH 法） ：定量检测 Her-2 基因扩增，是Her-2 诊断金标准， 注射用曲妥珠单抗（赫赛汀）是用于治疗Her-2 FISH 阳性乳腺癌患者的分子靶向药物结直肠癌的分子病理学恶性淋巴瘤的分子病理学7、免疫病理、超敏反应、肿瘤免疫逃逸的概念免疫病理学：研究免疫系统功能异常和

8、免疫应答所引起的病理现象的科学，设计范围较广，包括自身免疫病、超敏反应、免疫缺陷、免疫增生等。超敏反应： 又称变态反应， 是指机体受同一抗原物质再次刺激后产生的一种异常的或病理性的免疫应答。肿瘤免疫逃逸： 机体免疫系统具有免疫监视功能， 当体内出现恶变细胞时， 免疫系统能够识别并通过免疫机制特异地清除这些“非己”细胞，抵御肿瘤的发生发展。然而，恶变细胞在某些情况下能通过多种机制逃避机体的免疫监视，在体内迅速增殖，形成肿瘤。8、自身免疫病有哪些共同特征，为什么体内会产生自身抗原，发生组织损害的可能机制共同特征 ：病程反复发作、慢性迁延；血清 Ig 升高，自身抗体升高、与自身成分起反应的致敏淋巴细

9、胞；重叠：一个患者同时患两种或更多的属同一类的自身免疫病；治疗：皮质激素或其他免疫抑制剂能缓解；与遗传、性别和年龄有关。自身抗体产生：自身抗原物理、化学、生物等性质的改变；外来交叉抗原激活；隐蔽抗原的释放；表位扩展：自身反应性T 细胞不断识别自身抗原的隐蔽决定簇。发病机制：抗原因素：自身Ag 性质的改变；交叉抗原的作用；隐蔽Ag 的释放；表位扩展。机体免疫功能的异常：1. MHC- n类Ag表达T ; 2.免疫调节异常：包括调节性T细胞亚群异常、协同刺激分子异常表达、多克隆激活作用、凋亡途径异常等；遗传因素；其他因素年龄性别神经内分泌等其他因素。9 、免疫调节异常的机制有哪些，调节性 T 细胞

10、的特点、功能及其与疾病的关系机制：自身抗体对细胞的溶解作用：n型过敏反应，补体依赖的细胞毒作用、ADCC （抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用） ；免疫复合物对组织的损伤作用：出型过敏反应；致敏T细胞对组织的损伤作用：IV型过敏反应。调节 T 细胞：调节性 T 细胞是一具有免疫调节（或免疫抑制）作用的细胞群，能够主动抑制自身反应性 T 细胞的活化，维持自身免疫耐受，防止自身免疫病的发生。调节性T 淋巴细胞/致病性 T 淋巴细胞平衡是机体调节免疫反应的重要模式之一，其紊乱可能是很多自身免疫性疾病的发病机制，并与肿瘤等多种疾病的发生发展密切相关。心肌病：由不同原因 （遗传性病因多见） 引起的心肌病变

11、导致心肌机械或心电功能障碍， 常表现为心室肥厚或扩张， 可局限于心脏本身， 亦可为系统性疾病的部分表现， 最终可导致心源性死亡或进行性心力衰竭。AKAP ：A 激酶锚定蛋白是一组结构各异但功能相关的蛋白质，因其具有与 PKA 结合的特性。目前研究发现AKAP 除了作为 A 激酶锚定分子外，还是会聚和传播高度有序的细胞信号的一个平台， 在心肌细胞的收缩、 能量代谢、离子通道的启闭、 基因表达等方面均扮演重要角色。Z 线：每条肌原纤维表面有明暗相间的带交替排列， 分别称为明带和暗带， 明带中央有一根深色的线称为Z 线，两条相邻Z 线之间的一段肌原纤维称为肌节。横纹肌：肌肉中的一种，包括骨骼肌和心肌

12、。 1 骨骼肌：每个肌原纤维的明带暗带都与邻近肌原纤维的明带暗带准确地排在同一水平面上， 因此整个肌细胞显示出横纹， 也称随意肌。 2 心肌为心脏所特有的肌肉组织， 由心肌细胞组成。 肌原纤维的结构与骨骼肌的相似， 但横纹不明显。其显著不同点在于心肌细胞有闰盘，闰盘对兴奋传导有重要作用。心肌除有收缩性、兴奋性和传导性外，还有自动的节律性。肌小节的结构：在光学显微镜下， 我们可以看到肌原纤维沿长轴呈现有规则的明暗交替的带状区域， 分别称之为明带和暗带。暗带的中央有相对较亮的区域称之 H 带。 H 带的中央可见一条横向暗线，叫做“M线”。明带的中央也有一条横向的暗线，称为“Z 线（Z line）

13、”，Z线为中间纤维。两条相邻的 Z 线之间包含着中间的暗带和两侧各1/2 的明带，其长度在静息时为2.02.5科成这样的一段结构叫做“肌小节”，它是肌纤维收缩的基本功能单位。心肌细胞的钙信号：肌膜上动作电位沿T 管膜传至肌细胞内部，激活T 管膜和肌膜上的 L 钙通道，少量钙离子内流，与JSR 膜中钙结合位点结合，再引起JSR 膜中钙释放通道开放，结果使钙离子水平上升百倍。钙触发心肌收缩，然后激活JSR 膜上钙泵，回收钙离子，心肌舒张。心肌病的主要分类和各自的主要特征：扩张性心肌病：左心室（多数）或右心室有明显扩大，且均伴有不同程度的心肌肥厚，心室收缩功能减退，以心脏扩大、心力衰竭、心律失常、栓

14、塞为基本特征。常伴有心律失常，病死率较高。肥厚性心肌病： 是一种遗传性心肌病， 以心室非对称性肥厚为解剖特点， 是青少年运动猝死最主要原因之一。根据左心室流出道有无梗阻可分为梗阻性和非梗阻性肥厚型心肌病。限制性心肌病： 以心室壁僵硬增加、 舒张功能降低、 充盈受限而产生临床右心衰症状的一类心肌病。患者心房明显扩张，但早期左心室不扩张，收缩功能多正常， 室壁不增厚或轻度增厚。目前心脏病治疗的基础和临床研究的方向心脏病基因检测共识： 13 种遗传性心脏病 （包括长 QT 综合征、 Brugada 综合征、 短 QT综合征、心房颤动、肥厚性心肌病、致心律失常性心肌病、扩张性心肌病等） 。心肌再生与缺

15、血性心肌病的治疗干细胞治疗心脏病MIRNA 、 LNCRNA 在心脏病的作用。研究方向：基因监测，治疗，细胞信号通路研究10 、基因病理检测特定疾病所包含的某种基因， 简单的如单基因突变， 也包括多基因、 环境、 不稳定 DNA和表观遗传所引起的复杂的基因遗传模式的改变。11 、疾病环境和基因的分子基础酶的改变：苯丙氨酸羟化酶，剪切点突变引起苯丙酮尿症酶抑制剂的改变：a 1抗胰蛋白酶，错义突变引起肺气肿和肝脏疾病受体的改变：低密度脂蛋白受体，缺失或点突变引起家族性高胆固醇转运或载体蛋白的改变：剪切点突变引起3珠蛋白生成障碍性贫血，缺失或点突变引起囊性 纤维化凝血因子的改变：缺失、插入和无义突变

16、引起血友病A结构蛋白的改变：原纤维带白基因突变引起马方综合征生长调节： Rb 基因引起视网膜母细胞瘤12 、分子病理的应用，举例说明诊断：从小分子水平筛查疾病；阐明病因；更全面的理解疾病治疗：靶向治疗预后：特定分子类型所代表的疾病结果13 、 GWAS全基因组关联分析，是指在人类全基因组范围内找出存在的序列变异，即单核苷酸多态性（ SNP ） ，从中筛选出与疾病相关的 SNPs 。14 、外显子组测序及其主要步骤外显子组测序技术师利用目标序列捕获技术将全基因组中的所有外显子区域DNA 序列捕获并富集后再进行高通量测序获得蛋白编码区域DNA 的基因组分析方法。主要步骤：目标序列富集、 DNA 测

17、序、生物信息学统计M 蛋白：浆细胞或 B 淋巴细胞单克隆恶性增殖所产生的一种大量的异常免疫球蛋白，其本质是一种免疫球蛋白或免疫球蛋白的片段。MGUS ：意义不明的单克隆丙球蛋白病，实验室检查在稳定状态期间，血清 M蛋白水平（3g/dl）或尿M蛋白水平（300mg/24h）均较低，其他血清免疫蛋白水平正常并且尿本周蛋白阴性,髓象仅见轻度浆细胞增多。许多病例表现为良性， 然而有 25% 的患者在 20 年后可进展为 B细胞恶性肿瘤或多发性骨髓瘤，此时才出现临床症状.病程不可预测。多发性骨髓瘤的临床症状：骨痛、贫血及出血、反复感染、肾脏损害、高钙血症、高粘滞血症、高尿酸血症、神经系统损害、淀粉样变性

18、、肝脾肿大15 、引起急性肺损伤的病因直接损失：肺炎、烟雾和有毒气体吸入、淹溺间接损失：脓毒症、输血、休克等16 、急性肺损伤的病理机制炎症细胞（巨噬细胞、中性粒细胞、血管内皮细胞、血小板）及其释放的炎症介质时启动早起炎症反应的两个主要因素，炎症细胞产生多种炎症介质和细胞因子，最重要的是TNF- a和 IL-1 ，导致大量中性粒细胞在肺内聚集、激活，并通过呼吸爆发释放氧自由基、蛋白酶和炎症介质， 引起靶细胞损害， 表现为肺毛细血管内皮细胞和肺泡上皮细胞损伤， 肺微血管通透性增高和微血栓形成， 大量富含蛋白质和纤维素的液体渗出至肺间质和肺泡， 形成非心源性肺水肿，透明膜形成。17 、哮喘的分子病

19、理机制及常用的动物模型18 、肺纤维化的机制肺泡上皮反复发生微小损伤后的异常修复。 反复的微小损伤导致肺泡上皮凋亡， 上皮异常激活产生多种生长因子和趋化因子诱导固有成纤维细胞增生， 趋化循环心啊为细胞到肺脏损伤部位，刺激上皮基质转化 EMT 和成纤维细胞分化为肌成纤维细胞，促进成纤维细胞和肌成纤维细胞灶的形成。 肌成纤维细胞增生分泌过量细胞外机制， 导致纤维瘢痕形成、 风窝囊形成、非结构破坏和功能丧失。炎症细胞浸润(淋巴细胞、单核细胞、浆细胞) ，后期胶原增多、成纤维细胞增生、肺胞壁增厚，肺泡上皮细胞化生为鳞状上皮细胞。肺泡上皮损伤与异常修复。内源性肺泡II 型上皮细胞 Shp2 敲除导致自发

20、肺纤维化19 、分子病理学在肝脏疾病发病机制研究中的作用和意义20 、分子病理学在肝纤维化诊治中的作用和前景。21 、抗胰蛋白酶缺乏症的发病机制及病理学特征最常见的a 1-AT基因突变型是 S型和Z型，都属于单碱基改变型。 S突变型是a 1-AT基因 的外显子出中发生单个碱基取代，致使合成的a 1-AT分子中的264G1U被264Val代替；Z 突变型是a 1-AT外显子E中发生单个碱基取代，其合成的a 1-AT分子中的342Glu被342Lys 代替。a 1-AT缺乏症患者的纯合子和杂合子的肝细胞内质网内，可见过碘酸Schiff试验(periodic acid schiff ， PAS )阳

21、性的耐淀粉酶颗粒。22 、 HMGB1 在肝脏疾病中的作用和潜在的临床应用价值HMGB1 是一种高度保守的广泛表达的核蛋白，活化的单核/ 巨噬细胞HMGB1 可以主动释 HMGB1 ， 坏死细胞可以被动释放 HMGB1 。 胞外的 HMGB1 通过 RAGE 和 TLR4 等受体发挥促炎症因子的作用。 毒性损伤的肝细胞或缺血肝细胞释放大量的 HMGB1 ， 后者使巨噬细胞活化， 再进一步加重对乙酰氨基酚相关性肝炎或缺血再灌注性肝损伤。 HMGB1 可能是调节急性肝衰竭时巨噬细胞活性的一个有效的分子靶标。23 、肿瘤细胞起源当机体内一种正常细胞响应某种特定基因突变而癌变， 这种正常细胞就被称之为

22、对应癌症的细胞起源。24 、分子诊断对指导恶性胶质瘤临床治疗的重要性1p/19q缺失预测胶质瘤亚型以及预后，MGMT启动子甲基化决定放化疗敏感性25、什么是肿瘤的异质性(heterogeneity ) ?请列举可能造成肿瘤异质性的原因？就个人 的理解谈谈肿瘤异质性对于肿瘤分型带来哪些挑战？异质性：同一肿瘤中可以存在有很多不同的基因型或者亚型的细胞。因此同一种肿瘤在不同的个体身上可表现出不一样的治疗效果及预后，甚至同一个体身上的肿瘤细胞也存在不同的特性和差异。肿瘤微环境和基因突变。同一肿瘤的不同部位可能有不同的分子亚型，更难以对肿瘤做明确的分型。26、神经退行性疾病是一类慢性、随着年龄增长而进行

23、性加重的神经系统疾病，由神经退行性病变而引起。27、以阿尔茨海默病为例，简述神经退行性疾病中相关蛋白异常聚集的原因基因突变或过表达可导致相关蛋白生成增加蛋白质折叠异常影响蛋白质的降解和清除28、简述蛋白质异常聚集引起神经退行性病变的机理凋亡信号通路的激活必要细胞因子的捕获离子通道的形成氧化应激的产生29、 EMT上皮细胞在形态学上发生向间质细胞表型的转变并获得迁移的能力。30、瓦伯格效应肿瘤组织的代谢明显增强，即使在有氧条件下肿瘤细胞仍主要利用糖酵解提供能量，因而其耗糖速度远大于正常细胞，这种现象被称为瓦伯格效应或有氧糖酵解。31、乳腺癌分子分型包括那些管腔上皮A型管腔上皮B型Her2过表达型

24、基底样型正常乳腺样型32、简述组蛋白密码学说转录因子能够识别和结合靶基因的启动子，而表观遗传修饰酶或分子进行动态转录调控。33、基底样乳腺癌有哪些特征多发年轻女性占10-15% ,多见于重度乳腺癌极容易转移，多转移至肺和脑常有brcal突变不能使用激素和抗 her2治疗对化疗不敏感34、肿瘤细胞EMT的特征有哪些E-cadherin的减少或丢失ZO-1的丢失和重定位上调vimentin、“-SMA和FN等的表达MMPs表达增加，降解基质35、膀胱原位癌定义及临床病理意义膀胱原位癌是尿路粘膜移行上皮细胞的恶性增生,累及整个粘膜层，同时伴有或不伴有膀胱浅表性癌，其临床生物学行为早期常出现局部的浸润

25、和远处的转移。因此膀胱原位癌被定义为具有潜在浸润倾向和转移可能的膀胱恶性肿瘤，而非癌前病变。病理学特征是膀胱粘膜层扁平的、细胞分级较高的移行上皮内癌，累及整个黏膜层，通常伴有黏膜的典型和非典型增生。36、前列腺上皮内瘤变的意义及镜下主要特点PIN为前列腺的癌前病变，发生并局限于前列腺导管或腺泡内，非浸润且不形成肿块，可以进展成为前列腺癌，也可能不进展，常与前列腺癌并存。低倍镜下，和周围正常腺体比有明显深染，核拥挤，但结构是良性结构，高倍镜下有明显增大的核仁。37、膀胱尿路上皮癌细胞遗传学和分子改变特点9号染色体单体或 9P或9q缺失常见，9号染色体改变主要见于浅表乳头状肿瘤，13q缺失见于侵袭

26、性肿瘤，17P缺失或p53突变。发生的分子模式包括两条途径：一条是 9号染色体抑癌基因缺失引起浅表乳头状肿瘤，在此基础上发生p53改变，肿瘤发生浸润。另一条是通过p53突变先导致原位癌，再发生9号染色体缺失，发展为浸润癌。38、肾活检病理诊断需借助哪些技术手段化学染色；免疫荧光；电子显微镜39、肾小球常见的基本病变细胞增生；基底膜增厚和断裂；炎性渗出和坏死；玻璃样变和硬化40、狼疮肾的分型及其病理特征I型：系膜微小病变；n：系膜增生；m：局灶阶段性；W:弥漫增生；V:膜性；VI:硬41、糖尿病肾病的分期及其病理特征1期：GBM曾厚；2期：系膜基质轻度增生；3期：系膜基质重度增生；4期：系膜基质

27、结节 增生，K-W结节形成；5期：硬化42、移植肾病各阶段的病理特征超急性排斥反应（ 24h）:毛细血管弥漫性微血栓形成急性细胞性排斥反应（3-5d）:肾间质小血管周围淋巴细胞和免疫母细胞浸润急性血管性排斥反应（6d-6m）:肾动脉分支内皮细胞肿胀、变性和脱落，小动脉血栓形成 伴出血性梗死慢性排斥反应（ 6m）:闭塞性血管炎，内膜纤维性增厚，GBM增厚，双层化，肾间质硬化43、什么是 Barrett esophagus食管下段的复层鳞状上皮被单层柱状上皮替代的一种病理现象，可伴肠化或无肠化44、慢性浅表性胃炎和慢性萎缩性胃炎的区别慢性浅表性胃炎的基本病变是上皮细胞变性，小凹上皮增生及固有膜内炎性细胞的浸润，偶见表面上皮及小凹上皮肠化生，主要累及胃黏膜浅层，