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文档简介
1、 临床微生物室临床微生物室 提高细菌培养药敏检测质量提高细菌培养药敏检测质量 临床医生护士临床医生护士 送合格标本送合格标本 准确解读报告单准确解读报告单 一般原则一般原则 抗生素使用前采集抗生素使用前采集 采集后及时送检采集后及时送检,最好在最好在0.5h0.5h内内,不得超过不得超过2h2h。延迟送。延迟送检或待处理标本应置于检或待处理标本应置于4 4保存,保存标本应在保存,保存标本应在24h24h内内处理。处理。 避免正常菌群的污染避免正常菌群的污染 标本量足够标本量足够 专用培养杯专用培养杯 痰液标本的采集以清晨为好,因此时痰量痰液标本的采集以清晨为好,因此时痰量多,含菌量大多,含菌量
2、大 。 在医生或护士指导下取样。在医生或护士指导下取样。 嘱病人漱口三遍以除去浅表固有定植菌。嘱病人漱口三遍以除去浅表固有定植菌。 指导病人深咳以取得下呼吸道标本(而不指导病人深咳以取得下呼吸道标本(而不是是唾液及鼻咽部的分泌物唾液及鼻咽部的分泌物 )置于一无菌容)置于一无菌容器器 。 注意注意: :咳痰不能做厌氧培养咳痰不能做厌氧培养! 如患者昏迷或无力咳嗽,先协助患者如患者昏迷或无力咳嗽,先协助患者取合适体位,叩背以使痰液松动,再用吸取合适体位,叩背以使痰液松动,再用吸痰器吸引,在吸引器吸管中段接收集器,痰器吸引,在吸引器吸管中段接收集器,按吸痰法将痰液吸入集痰器内。按吸痰法将痰液吸入集痰
3、器内。 人工气道人工气道:气管内吸引,可避免口腔正常菌群的:气管内吸引,可避免口腔正常菌群的污染。敏感性(污染。敏感性(38%-100%38%-100%)特异性()特异性(14%-100%14%-100%) PSBPSB: :保护性毛刷采样获取下呼吸道分泌物进行培保护性毛刷采样获取下呼吸道分泌物进行培养。敏感性(养。敏感性(33%-100%33%-100%)特异性()特异性(50%-100%50%-100%) BALFBALF: :支气管肺泡灌洗液获取下呼吸道分泌物进行支气管肺泡灌洗液获取下呼吸道分泌物进行培养敏感性(培养敏感性(42%-93%42%-93%)特异性()特异性(45%-100%
4、45%-100%) 。 血液培养 肺炎旁胸腔积液培养 不合格标本不合格标本指唾液或唾液严重污染指唾液或唾液严重污染的痰标本,含鳞状上皮的痰标本,含鳞状上皮细胞多,而白细胞少。细胞多,而白细胞少。白白细胞:鳞状上皮细胞细胞:鳞状上皮细胞2.5:12.5:1。n 合格标本合格标本 下呼吸道咳出的痰,含下呼吸道咳出的痰,含鳞状上皮细胞少,白细鳞状上皮细胞少,白细胞较胞较多多。白白细胞:鳞状细胞:鳞状上皮细胞上皮细胞2.5:1。 判断是否合格标本:白细胞:鳞状上皮细胞判断是否合格标本:白细胞:鳞状上皮细胞2.52.5:1 1 痰涂片:平时处理痰标本就必须涂片,这是基本工作之一,痰涂片:平时处理痰标本就
5、必须涂片,这是基本工作之一,不会因为院感和临床医生的要求而增加,也不会因为他们不会因为院感和临床医生的要求而增加,也不会因为他们不要求,或者人手不足就不做。就如同建房子之前要挖地不要求,或者人手不足就不做。就如同建房子之前要挖地基一样,不会因为客户不要求就省掉这个步骤基一样,不会因为客户不要求就省掉这个步骤 痰培养:取脓性痰、粘液脓性痰痰培养:取脓性痰、粘液脓性痰有无阳性检测结果有无阳性检测结果感染,定植,污染?感染,定植,污染?耐药药物耐药药物可供选用的治疗药物可供选用的治疗药物 血或胸液培养到致病菌血或胸液培养到致病菌 经气管镜或人工气道吸引的标本培养到病经气管镜或人工气道吸引的标本培养到
6、病原菌浓度原菌浓度10105 5cfu/mlcfu/ml(半定量培养(半定量培养+) BALFBALF标本标本10104 4cfu/mlcfu/ml(半定量培养(半定量培养+) PSBPSB标本标本10103 3cfu/mlcfu/ml(半定量培养(半定量培养+)+) 合格痰标本培养优势菌中度以上生长合格痰标本培养优势菌中度以上生长( (+)+); 合格痰标本少量生长,但与涂片镜检结果合格痰标本少量生长,但与涂片镜检结果一致一致( (肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌) ); 3d3d内多次培养到相同细菌;内多次培养到相同细菌; 涂片革兰染色镜检发现典型涂
7、片革兰染色镜检发现典型肺炎链球菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌之类的苛养菌,即使培养阴性,也流感嗜血杆菌之类的苛养菌,即使培养阴性,也有重要参考意义有重要参考意义 痰培养有上呼吸道正常菌群痰培养有上呼吸道正常菌群( (如草绿色链球如草绿色链球菌、表皮葡萄球菌、非致病奈瑟菌、类白喉杆菌、菌、表皮葡萄球菌、非致病奈瑟菌、类白喉杆菌、念珠菌等念珠菌等) ); 痰培养为多种病原菌少量痰培养为多种病原菌少量(+)(+)生长;生长; 不符合上述可确诊或有意义检测结果中的不符合上述可确诊或有意义检测结果中的任何一项任何一项; 对革兰阴性杆菌培养和涂片均阳性时才有意对革兰阴性杆菌培养和涂片均阳性时才有意义,仅培养
8、阳性而涂片阴性则大多属污染菌或低义,仅培养阳性而涂片阴性则大多属污染菌或低浓度定植菌浓度定植菌部位部位 常见菌种常见菌种口腔口腔链球菌(甲型或乙型)、乳酸杆菌、螺旋体、梭形杆链球菌(甲型或乙型)、乳酸杆菌、螺旋体、梭形杆菌、白色念球菌、表皮葡萄球菌、肺炎球菌、奈瑟菌、白色念球菌、表皮葡萄球菌、肺炎球菌、奈瑟氏球菌、类白喉杆菌等氏球菌、类白喉杆菌等鼻咽腔鼻咽腔 甲型链球菌、奈氏球菌、肺炎球菌、流感杆菌、乙型甲型链球菌、奈氏球菌、肺炎球菌、流感杆菌、乙型链球菌、葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、变形杆链球菌、葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、变形杆菌等菌等较之上呼吸道较之上呼吸道, ,下呼吸道则在机体免疫
9、功能下呼吸道则在机体免疫功能的作用下自始至终保持基本无菌状态。的作用下自始至终保持基本无菌状态。 当药敏报告为敏感(当药敏报告为敏感(S S),表示用常规剂量治疗可),表示用常规剂量治疗可获得临床疗效;获得临床疗效; 药敏报告是中介度(药敏报告是中介度(I I)表示加大剂量或药物浓缩)表示加大剂量或药物浓缩部位可有疗效;部位可有疗效; 药敏报告耐药(药敏报告耐药(R R)表示该药无疗效。)表示该药无疗效。 临床分离到革兰阴性杆菌,尤其是大肠埃希菌和临床分离到革兰阴性杆菌,尤其是大肠埃希菌和克雷伯菌等,均应检测是否产克雷伯菌等,均应检测是否产ESBLsESBLs 对产对产ESBLsESBLs细菌
10、,青霉素类和头孢菌素均耐药。即细菌,青霉素类和头孢菌素均耐药。即使体外试验对某些青霉素类、头孢菌素敏感,临使体外试验对某些青霉素类、头孢菌素敏感,临床上也应视为耐药,原则上不选用。即床上也应视为耐药,原则上不选用。即不管体外不管体外试验结果如何,所有的产试验结果如何,所有的产ESBLsESBLs细菌均应视为对第细菌均应视为对第三、四代头孢菌素耐药。三、四代头孢菌素耐药。 对产对产ESBLsESBLs细菌:宜选择碳青霉烯类、头霉素类、细菌:宜选择碳青霉烯类、头霉素类、 -内酰胺类内酰胺类/-/-内酰胺酶抑制剂复方制剂。氨基内酰胺酶抑制剂复方制剂。氨基糖苷类可作为产糖苷类可作为产ESBLsESBL
11、s细菌严重感染时的联合用药细菌严重感染时的联合用药之一之一 药敏结果药敏结果 临床疗效:临床疗效: 敏感敏感有效有效 耐药耐药无效无效 敏感敏感无效(假敏感)无效(假敏感) 耐药耐药有效(假耐药)有效(假耐药) 临床医师正确评价药敏试验结果的同时,临床医师正确评价药敏试验结果的同时,必须参考病人机体状况、临床治疗效果以必须参考病人机体状况、临床治疗效果以及药动学、药物毒副作用和药物价格以及及药动学、药物毒副作用和药物价格以及本地区本医院等细菌耐药监测数据合理选本地区本医院等细菌耐药监测数据合理选用药物。用药物。 对于痰培养分离到的细菌是否为可能的感染菌,最简单和最直接的证据就是痰涂片痰涂片,首
12、先感染菌会导致白细胞大量增加白细胞大量增加,其次由于感染早期(细菌/真菌)启动非特异性免疫因子中中性粒细胞是最主要的免疫细胞,吞噬和包裹吞噬和包裹现象是反映细菌与机体免疫系统的相关性的最重要的信号,观察这一现象有助于区别是感染还是定植。 要结合“标本涂片、培养及临床表现”,才能判定是定植还是致病菌。痰可分离到的三大类呼吸道感染的病原菌:1.公认的病原菌:结核杆菌、白喉棒状杆菌、百日咳杆菌2.逐渐被认识的CAP病原菌:肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡它布拉汉菌3.条件致病菌:肠杆菌科细菌、非发酵菌、葡萄球菌等 一般痰中分离出的90%以上是条件致病菌,是否致病取决于:患者的血象,CRP,体温,咳嗽咳痰
13、,肺部啰音等感染症状;痰涂片镜检见到大量白细胞吞噬或伴行非上呼吸道正常菌群; 痰涂片见到的细菌,培养大量生长。 针对性抗菌药物之后临床症状减轻(缓解),同时感染部位目标性细菌数减少则为病原菌; 仅有数量减少而临床症状没有改变则最大可能为定植菌定植菌。不是的不是的培养阳性培养阳性 感染,可能为污染感染,可能为污染(血培养)(血培养),可能为,可能为定植定植(痰培养)(痰培养)任何结果必须结合临床情况进行评价任何结果必须结合临床情况进行评价(很重要)(很重要)感染部位的清创、感染部位的清创、引流引流、换药比使用抗菌药物更加、换药比使用抗菌药物更加重要重要改善患者全身情况:器官功能支持,纠正酸碱平衡
14、,改善患者全身情况:器官功能支持,纠正酸碱平衡,电解质紊乱,低蛋白血症,高血糖等电解质紊乱,低蛋白血症,高血糖等 体体外药敏试验只能预测体内治疗效果,并不等同;外药敏试验只能预测体内治疗效果,并不等同; 一般来说,耐药治疗无效;一般来说,耐药治疗无效; 敏感敏感治疗有效。治疗有效。可能不是真正的致病菌(污染或定植菌)可能不是真正的致病菌(污染或定植菌)细菌本身因素(如诱导耐药,生物被膜)细菌本身因素(如诱导耐药,生物被膜)感染部位与药代动力学因素感染部位与药代动力学因素细菌的细菌的MICMIC,给药剂量和用药方式,给药剂量和用药方式药敏试验药物中有些药物单独使用无效,但可药敏试验药物中有些药物
15、单独使用无效,但可以与其他药物联合用药以与其他药物联合用药药物剂型及生物利用度(纯品、商品)药物剂型及生物利用度(纯品、商品)引流引流 某患者,呼吸道感染,亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦长期使用,疗效不理想 痰涂片:大量WBC吞噬G+球菌,偶见G-杆菌,G+球菌与G-杆菌数量约100比1 培养:生长大量铜绿假单胞菌,药敏显示亚胺培南,头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶、左旋氧氟沙星:敏感 结果分析: G+球菌繁殖速度远不如铜绿假单胞菌,24h培养铜绿假单胞菌可迅速占据平板,竞争抑制G+球菌生长。改用万古霉素治疗,疗效明显。铜绿假单胞菌为定植菌定植菌,病原菌是G+球菌。 某小孩,7岁,咳嗽、咳黄脓痰近1周,使用氨苄西林针无效 痰涂片:WBC伴大量G-小杆菌 培养:生长流感嗜血杆菌,药敏提示头孢曲松敏感,治疗3天明显好转;后复检痰培养,涂片示标本来自上呼吸道,生长大量鲍曼不动杆菌,此为典型的治疗后上呼吸道菌群失调,停用抗生素,小孩康复良好。 分析:鲍曼不动杆菌为定植菌定植菌,病原菌是流感嗜血杆菌。 患者男,84岁,慢性肾功能衰竭尿毒症期(腹膜透析)、冠心病(冠脉搭桥术后)、脑梗塞、高血压病3级极高危组、气管切开术后。长期住院治疗。突发咳嗽咳痰、痰多5天,血压180/100mmHg,双肺可闻及痰鸣音及湿罗音,胸部CT提示双肺片状阴影,痰培养3次为铜绿假单胞菌,血象未见明显异常。 如何抗感染
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