叶绿体色素提取和分离

1、叶绿体 色素提取和分离中学 生物 实验实验目的和材料实验目的实验目的v 初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。v 探索叶绿体中有几种色素。探索叶绿体中有几种色素。实验材料实验材料实验原理1 1、叶绿体中含有两大类色素（叶绿素和类胡、叶绿体中含有两大类色素（叶绿素和类胡萝卜素），它们溶于有机溶剂，因此可选用萝卜素），它们溶于有机溶剂，因此可选用乙醇或丙酮进行提取。乙醇或丙酮进行提取。2 2、层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂，叶、层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂，叶绿体内的色素在层析液中的溶解度各不相同，绿体内的色素在层析液中的溶解度各不相同，溶解度越高，在滤

2、纸上的扩散速度越快，反溶解度越高，在滤纸上的扩散速度越快，反之则慢，可以将叶绿体中的色素分离开来。之则慢，可以将叶绿体中的色素分离开来。因此采用纸层析法进行分离。因此采用纸层析法进行分离。实验原理3 3、绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙、绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中，提取绿叶中的色素。（相似相溶）醇中，提取绿叶中的色素。（相似相溶）4 4、SiO2SiO2：使绿叶充分研磨，释放叶绿体中的：使绿叶充分研磨，释放叶绿体中的色素。色素。5 5、CaCO3CaCO3：防止研磨时色素受到破坏。：防止研磨时色素受到破坏。叶绿体中色素组成叶绿体中叶绿体中的色素的色素叶绿体中色素的对比项目项目

3、色素颜色色素颜色吸收光谱吸收光谱滤纸色素层滤纸色素层谱谱叶绿素叶绿素a蓝绿色红光中下层、蓝绿色叶绿素b蓝绿色蓝紫色最下层、黄绿色类胡萝卜素胡萝卜素橙黄色蓝光最上层、橙黄色叶黄素黄色蓝紫光中上层、黄色实验步骤用天平称取用天平称取5 5克菠菜叶，剪碎克菠菜叶，剪碎少许二氧化硅、碳酸钙少许二氧化硅、碳酸钙+5ml+5ml丙酮丙酮 取单层尼龙布折叠，放入漏斗，取单层尼龙布折叠，放入漏斗，把漏斗放入试管，架到试管架上把漏斗放入试管，架到试管架上将研磨好的菠菜叶加到漏斗中过滤将研磨好的菠菜叶加到漏斗中过滤研钵研钵迅速、充分地进行研磨迅速、充分地进行研磨 注意：收集好的研磨液及时用注意：收集好的研磨液及时用

4、棉塞塞紧。棉塞塞紧。 二氧化硅：为二氧化硅：为了使研磨充分；了使研磨充分； 碳钙：保护色碳钙：保护色素免受破坏；素免受破坏； 丙酮：色素的丙酮：色素的溶剂。溶剂。 注意防止丙酮挥发。注意防止丙酮挥发。实验步骤铅笔画线，剪角铅笔画线，剪角用毛细吸管吸取少量滤液用毛细吸管吸取少量滤液 ，画线，重复，画线，重复2-32-3次次 烧杯中倒入层析液（不要没过滤液线），将滤纸条轻烧杯中倒入层析液（不要没过滤液线），将滤纸条轻轻插入，培养皿盖住小烧杯轻插入，培养皿盖住小烧杯 具体实验步骤材料剪碎材料剪碎加入有机溶剂加入有机溶剂研磨、匀浆研磨、匀浆过滤过滤提取液提取液实验结果实验关键v选材时应注意选择鲜嫩、色

5、浓绿、无浆汁选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的叶片。如菠菜叶、棉花叶、洋槐叶等。的叶片。如菠菜叶、棉花叶、洋槐叶等。v画滤液细线时，应以细、直、颜色浓绿为画滤液细线时，应以细、直、颜色浓绿为标准，重复画线时必须等上次画线干燥衙标准，重复画线时必须等上次画线干燥衙再进行，重复再进行，重复2-32-3次。次。v层析时不要让滤液细线触及层析液层析时不要让滤液细线触及层析液 注意事项v因丙酮和层析液都是易挥发且有一定毒性的有机因丙酮和层析液都是易挥发且有一定毒性的有机溶剂，所以研磨要快，收集的滤液要用棉塞塞住，溶剂，所以研磨要快，收集的滤液要用棉塞塞住，层析时要加盖，尽量减少有机溶剂的挥发。层析时要加盖，尽量减少有机溶剂的挥发。v在研磨时要加少许二氧化硅，目的是为了研磨充在研磨时要加少许二氧化硅，目的是为了研磨充分，有利于色素的提取；加少许碳酸钙的目的是分，有利于色素的提取；加少许碳酸钙的目的是为了防止研磨过程中，叶绿体中的色素受到破坏。为了防止研磨过程中，叶绿体中的色素受到破坏。v分离色素时，一定不要让滤纸条上的滤液细线接分离色素时，一定不要让滤