试剂盒说明书罗氏

1、11821598 322 100测试l 本试剂盒适用的分析仪Elecsys 2010MODULAR ANALYTICS E170cobas e 411cobas e 601····主要用途用免疫学方法定量测定人血清或血浆中肌酸激酶同工酶MB含量。电化学发光免疫测定试剂，适用于罗氏Elecsys和cobas e免疫测定分析仪。临床应用1、2、3肌酸激酶（CK）是一种二聚体酶，它有四种不同的形式：线粒体同工酶和胞浆同工酶CK-MM（肌型）、CK-BB（脑型）和CK-MB。血清中CK-MB的测定值是诊断心肌缺血（例如急性心肌梗塞、心肌炎等）的重要指标。CK-M

2、B在心脏症状出现38小时后即可检出并且可持续较长时间，这取决于病情经过。CK-MB还可出现在其它临床条件下，例如横纹肌溶解症和中风。实验室诊断方面，测定总体CK、肌钙蛋白T和/或肌红蛋百有助于鉴别这些临床疾病。CK-MB测定的灵敏度与取样时间有关。因此跟踪测定非常有意义。Elecsys Ck-MB测定法采用了两种不同的直接对抗人CK-MB的单克隆抗体。检测原理双抗体夹心法，总检测时间：18分钟l 第一次孵育：15l标本、生物素化的抗CK-MB单克隆抗体和钌（Ru）a标记的CK-MB特异性单克隆抗体一起反应生成抗原抗体夹心复合物。l 第二次孵育：添加包被链霉亲和素的磁珠微粒后，该复合物通过生物素

3、和链霉素之间的反应结合到微粒上。l 将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面。未与磁珠结合的物质通过ProCell被去除。给电极加以一定的电压，使复合体化学发光，并通过光电倍增器测量发光强度。l 仪器自动通过2点校正的定标曲线计算得到检测结果。a)Tris(2,2-bipyridyl) ruthenium(II)- complex (Ru(bpy)三联吡啶钌试剂工作溶液M包被链霉亲和素的磁珠微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml；包被链霉亲和素的磁珠微粒，0.72mg/ml；防腐剂。R1 生物素化的抗CK-MB抗体（灰盖），1瓶，10mL：生物素化抗CK-MB单克隆抗体（小鼠）1.2

4、mg/L；磷酸盐缓冲液100mmol/L，pH值7.0；防腐剂。R2 Ru(bpy)32+标记的抗CK-MB抗体（黑盖），1瓶，10mL；钌标记的抗CK-MB单抗1.2mg/L；磷酸盐缓冲液100mmol/L，pH值 7.0；防腐剂。警告和注意事项仅用于体外诊断。在使用本试剂盒时必需遵循所有试验室试剂操作的注意事项。所有废弃物必需按照当地法规进行处置。专业人员可要求获得安全数据报告。避免试剂和样本（样本、定标液和质控品）产生气泡。试剂处理试剂盒为即用型，不能分开使用。试剂相关信息可以通过试剂条形码阅读获取。储存及稳定性存放于28。请垂直摆放Elecsys CK-MB试剂盒，确保使用前仪器通过自

5、动搅拌能够完全混匀磁珠微粒。稳定性：未开封试剂，28有效期内均可使用开封试剂，2812周放置分析仪MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 6018周放置分析仪Elecsys 2010 和 cobas e 411上8周样本的采集和准备仅以下罗列的样本通过检测要求。血清样本须用标准试管或有分离胶的真空管收集。肝素锂、肝素钠、K3-EDTA和枸橼酸钠抗凝的血浆都适用。使用枸橼酸钠抗凝的血浆时，结果必须按10校正。标准：回收率在血清值的90-110%以内或斜率0.9-1.1截距<±2×分析灵敏度（LDL）相关系数>0.95。稳定性：18-23保存4

6、小时，2-8保存8小时，-20保存3个月。样本只能冰冻一次。CK-MB稳定性与温度的相关性极强。样本在32下储存1小时后，CK-MB减少量超过10。选择合适的试管进行不同类型样本的采集，不是所有的试管均可用于检测。不同厂商的样本采集系统可能含有不同的物质，某些情况下会影响检测结果。如果使用原始管进行检测（样本前处理系统）时，应遵循生产商所提供的指导。有沉淀的样本和冰冻样本检测前必须先作离心处理。避免使用热灭活的样本。避免使用添加叠氮化合物的样本和质控品。检测前，样本、定标液及质控品须室温平衡(20-25)。由于蒸发因素的影响，样本、定标液及质控品在分析仪上的检测必须2小时内完成。提供的物品参阅

7、“试剂工作溶液”章节。需要的物品（未提供）l 货号11821601，CK-MB定标液，4×1mLl 货号04917049，PreciControl Cardiac II，PreciControl Cardiac II 1和2分别为2×2mL，或货号03530477，PreciControl Cardiac，PreciControl Cardiac 1和2分别为2×2mLl 货号11732277，Diluent Universal，2×16ml样本稀释液，或者货号03183971，Diluent Universal，2×36ml样本稀释液l 实验

8、室基础设备l Elecsys 2010、MODULAR ANALYTICS E170或cobas e分析仪Elecsys 2010和cobas e 411分析仪所需材料：l 货号11662988，ProCell，6×380 mL，系统缓冲液l 货号11662970，CleanCell，6×380mL，测量池洗液 l 货号11930346，Elecsys SysWash，1×500mL，附加洗液l 货号11933159，SysClean适配器l 货号11706802，Elecsys 2010分析杯，60×60反应管l 货号11706799，Elecsys

9、2010分析吸头，30×120移液管吸头MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601分析仪所需材料：l 货号04880340，ProCell M，2×2L系统缓冲液l 货号04880293，CleanCell M，2×2L测量池洗液l 货号12135027，CleanCell M，1×2L测量池洗液（美国专用）l 货号03023141，PC/CC杯，12个用于在检测前预热Procell M及Cleancell Ml 货号03005712，ProbeWash M，12×70mL 清洗液，用于在检测完毕后或更换试剂时清洗试剂

10、针l 货号12102137，反应杯/吸头组合装×84反应杯/吸头组合装48盒，废物袋 l 货号03023150，WasteLiner，废物袋 l 货号03027651，系统清洁适配器M所有分析仪需要：l 货号11298500，Elecsys SysClean，5×100mL系统清洗液l 货号11776622，Elecsys Ck-MB CalCheck，3种浓度范围检测要优化检测性能，请遵照本说明书中有关分析仪的相关指导，并参照分析仪操作手册。试剂使用前分析仪自动搅拌磁珠微粒，使其处于悬浮状态。试剂相关信息可通过条形码自动读取，在特殊情况下，分析仪无法自动读取条码信息时，请

11、输入条码标签上的15位数字序列。MODULAR ANALYTICS E170、Elecsys2010和cobas e分析仪：将冷藏试剂室温平衡至20°C左右，放置分析仪的试剂盘（20°C）内。避免泡沫产生。分析仪能自动调节试剂温度和开、关各试剂盒瓶盖。定标溯源性：通过使用来自Seradyn的人重组CK-MB（货号AKC0325；批号M25082）可改善Elecsys CK-MB4检测的线性。本测试按线性化的CK-MB STAT测定法进行标准化。每个Elecsys CK-MB试剂组都有一张条形码编码的标签，其中含有定标各个试剂批次的专用信息。通过使用Elecsys CK-MB

12、定标液，预定义的厂商定标曲线适用于分析仪。定校频率：新鲜试剂必须进行定标（新试剂盒注册后在分析仪上放置不能超过24小时）。以下情况建议重新进行定标：l 使用同一批号试剂，1月后（28天）l 7天后（同一试剂盒在分析仪上使用）l 根据需要：如失控。质控质控可使用Elecsys PreciControl II 1和2或Elecsys PreciControl Cardiac 1和2。可添加其他适用的质控品。多个浓度范围的质控品至少每24小时内检测一次，每次更换试剂盒或定标后也须进行质控。每个实验室可根据各自的情况设定合适的控制限和质控周期。质控值必须处于规定的控制限内。若失控每个试验室必须采取相应

13、的纠正措施。计算分析仪自动计算每份样本的分析物浓度（以ng/mL或g/L为单位）。干扰因素本测定法不受黄疸（胆红素<581mol/L或<34mg/dL）、溶血（血红蛋白<0.932mmol/L或<1.5g/dL）、脂血（脂肪乳剂<1500mg/dL）和生物素<409nmol/L或<100ng/mL的影响。标准：回收率在初始值的10之内。对于接受高剂量生物素治疗的患者（如>5mg/天），必须在末次生物素治疗8小时后采集样本。浓度为1500 IU/ml的类风湿因子对检测无影响。透析病人的样本也没有影响检测结果。CK-MB浓度为5000ng/mL没有观

14、察到高剂量钩镰效应。体外对50种常用药物进行试验，未发现会影响检测结果。对于所有含小鼠单克隆抗体的试验，在测试那些接受单克隆抗体治疗或接受单克隆抗体用于诊断目的的病人样本时可能得出错误结果。少数病例中极高浓度链霉素抗体会影响检测结果。试剂的添加物可将影响因素降到最低。极个别病例中可能有极高浓度钌抗体，会影响检测结果。作为诊断指标，必须结合患者病史，临床检查和其他临床资料来综合评估检测结果。检测范围0.100-500 ng/mL（通过最低检出限和厂商定标曲线的最高值确定）。低于检出限的值报告<0.100ng/mL。超过检测范围的值报告>500 ng/mL (1：2稀释结果可报告至10

15、00 ng/mL)。稀释高于检测范围的标本可用通用稀释液（Elecsys Diluent Universal）稀释。建议1:2稀释（MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 2010 和cobas e 分析仪可以自动稀释，也可以手工稀释）。稀释标本的Ck-MB浓度必须高于 50 ng/mL。如用手工稀释，结果应乘稀释倍数。如果是机器自动稀释，机器会自动计算结果。期望值Elecsys CK-MB STAT测定法的参考范围如下（ng/mL）：数据（状态1999年7月）来自：FRISC II（法安明在不稳定性心绞痛中的研究）研究，结果来自Upsala，1999年1月和国际Ele

16、csys 1010研究，心肌标志物，1999年3月。每个实验室应通过实验确定参考范围的适用性，必要时建立本实验室的参考范围。特殊的性能指标试剂在各分析仪上的性能试验数据如下。各实验室得出的数据可能会稍有差异。精密度NCCLS（国家临床实验室标准委员会）的改良协议（EP5-A）应用Elecsys试剂盒、人血清样本和质控品验证重复性：每日6次，共10天（n=60）；MODULAR ANALYTICS E170分析仪上验证批内精密度：n21。下面是获得的结果。分析灵敏度（最低检出限）<0.100ng/mL最低检出限指区别于零浓度的分析物最低检测浓度。最低检出限是最低浓度标准品+2SD得到的浓度

17、（厂商定标品1+2SD，批内精密度，n=21）。方法学比较使用临床标本比较Elecsys CK-MB检测线性化（y）和Elecsys CK-MB STAT检测线性化（x），相关性数据如下：标本数n=233Passing/Bablok5 线性回归y = 0.99x + 0.02 y = 1.02x + 0.07r = 0.918 r = 0.996比较样品浓度约为0.6-360 ng/mL)。分析特异性对于使用的单克隆抗体发现以下交叉反应性：CK-MB无，CK-BB 0.10.参考文献1. Rozenman Y, Gotsman MS. The earliest diagnosis of acu

18、te myocardial infarction. Annu Rev Med 1994;45:31-44.2. Adams JE, Abendschein DR, Jaffe AS. Biochemical markers of myocardial injury: Is MB Creatine kinase the choice for the 1990s? Circulation 1993;88(2):750-763.3. Apple FS. Diagnostic markers for detection of acute myocardial infarction and reperfusion. Laboratory Medicine 1992;23(5):297-322.4. Christenson RH, Vaidya H, Landt Y, Bauer RS, Green SF, Apple FA, Magneson GR, Nag S, Wu AHB, Azzazy HME. Standardization of Creatine Kinase-MB (CK-MB) Mass Ass