人教版选修1专题2.课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数作业

1、课题 2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数理一理判一判1 .选择培养基只允许特定的微生物生长，而抑制或阻止其他微生物的生长。（，）2 .稀释涂布平板法能分离细菌，也能计数。（，）3 .平板划线法只能纯化细菌，不能计数。（，）4 .从土壤中取样时，土层越浅越好。（X ）5 .来自土壤的微生物稀释倍数越大越好。（X）6 测定不同微生物数量时，接种的土壤悬浮液的稀释度相同。（X ）7 .菌落特征是鉴别菌种的重要依据。（，）8 .以尿素为唯一氮源的培养基是选择培养基。（，）9 可用含酚红指示剂的培养基对筛选出的尿素分解菌作进一步鉴定。（，）悟一悟1 .可利用分离对象对某种营养物质有“嗜好”的原理，专门

2、在培养基中加入该营养物质，并且使该营养物质成为培养基中某类基本营养物质的唯一供给者，如筛选能分解尿素的细菌，就将尿素作为培养基中的唯一氮源。2 可利用分离对象对某种抑菌物质的抗性，在混合培养物中加入该抑菌物质，经培养后，其他微生物生长受到抑制，而该分离对象却可大量增殖，在数量上占据优势。3 显微镜直接计数法本身不能区分细菌的死活，因此一般用来统计总菌数。但是，通过一定的辅助处理，可以实现活菌计数， 如在计数前用台盼蓝染液进行染色，可以通过统计无色细胞的个数来进行活菌数的统计。4 对照实验中除测试因素（自变量）不同外，其他因素要保证和实验组相同且适宜，并遵循单一变量原则。5 在培养基制作和保存过

3、程中，都易出现培养基被污染、样品被污染等情况，从而对实验结果造成影响，因此必须要设置空白对照或相互对照。感悟体会：练一练1. 2019 平遥县第二中学高二月考在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时，甲组实验用以尿素为唯一氮源的培养基， 乙组实验的培养基中的氮源除尿素外还含硝酸盐，其他成分都相同，在相同条件下操作，培养观察，则乙组实验属于()A.空白对照 B.条件对照C.相互对照D.标准对照解析：生物实验中的实验可以分为空白对照，条件对照，自身对照， 相互对照等。空白对照是指不给予对照组任何处理的对照； 条件对照是指虽给对照组施以部分实验因素，但不是所要研究的处理因素；自身对照是指对照和实验

4、都在同一研究对象上进行。标准对照是指生物生理、生化的某些项目也都有相应的标准，将观察测定的实验数值与规定的标准值相比较，以确定其正常与否的对照方法。理清题目中的实验的相关条件，分析对照实验的类型。根据以上分析可知，乙组和甲组实验的培养条件不同，形成了条件对照。综上所述，B 正确，A、 C、 D 错误。答案： B2. 2019 新绛县第二中学高二月考以下关于分解尿素的 细菌的说法，正确的是()A.能分解尿素的原因是能合成分泌蛋白酶B 以尿素作为唯一的碳源C.环境中含有大量的尿素诱导该细菌产生了分解尿素的特性D 以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基培养该菌后不会使酚红指示剂变红解析：能分解尿

5、素是因为可以分泌脲酶，A 项错误；筛选分解尿素的细菌时以尿素为唯一氮源，B 项错误； 该细菌分解尿素的特性是基因控制的，C 项错误； 以尿素为唯一氮源的培养基中，只有能分解尿素的微生物可以生长，该微生物可以分泌脲酶，把尿素分解成氨，但由于酸碱缓冲液的存在，培养基的pH 可以维持稳定，故不会使酚红指示剂变红，D 项正确。答案： D3. 2019 贵州省思南中学高二月考分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是()加尿素不加尿素加琼脂糖不加琼脂糖加葡萄糖不加葡萄糖加硝酸盐不加硝酸盐A. B.C. D.解析： 分解尿素的细菌是异养微生物，因此培养基中应该加入有机碳源，如葡萄糖；分离分解尿素的细菌的培

6、养基从功能上属于选择培养基，应该以尿素为唯一氮源；从物理性质上属于固体培养基，因此应加入凝固剂琼脂糖，正确；故选 C项。答案： C考点 1 实验原理1.2019 贵州省铜仁第一中学高二期中下列关于统计菌落数目的方法的叙述，正确的是()A.采用平板计数法获得的菌落数往往多于实际的活菌数B 当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落C.为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数D 采用平板划线法和稀释涂布平板法都可以对培养基中的菌落进行计数解析： 平板划线法不能用于计数，用于计数的是稀释涂布平板法， A 项错误；当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落，B项正确；为了保证结果准确，

7、一般选取菌落数在30300 之间的平板进行计数，C 项错误； 稀释涂布平板法又称活菌计数， 是由一个单细胞繁殖形成单个菌落这一培养特征设计的计数方法，可对微生物进行计数，而平板划线法不能用于计数，D项错误。答案： B2. 2019 四川树德中学高二月考在做分离分解尿素的细菌实验时，A 同学从对应稀释倍数为10 6 的培养基上筛选出大约150 个菌落， 而其他同学只选择出大约50 个菌落。 产生 A 同学结果的原因可能有()土样不同培养基污染操作失误没有设置对照八、A. B.C. D.解析： 同一稀释浓度下菌落数不同，产生 A 同学结果的可能的原因可能是土样不同、培养基污染，或者操作失误，未达到

8、相应的稀释倍数。答案： D3. 2019 广西高二期末用稀释涂布平板法测定同一土壤样品的细菌数，在对应稀释倍数为10 6 的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是()A.涂布了一个平板，统计的菌落数是230B 涂布了两个平板，统计的菌落数分别是251 和 260 ，取平均值256C 涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21 、 212 、 256 ，取平均值163D 涂布了三个平板，统计的菌落数分别是210 、 240 和250 ，取平均值233解析：用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数时，在每一个梯度浓度内，至少要涂布3 个平板， 确定对照组无菌后，选择菌落数在30300的进行记数，求

9、其平均值，再通过计算 得出土壤中细菌总数。答案： D考点 2 实验设计4. 2019 四川高二期末请选出分离土壤细菌的正确操作步 骤()土壤取样称取 10 g 土壤，加入盛有90 mL 无菌水的锥形瓶中吸取 0.1 mL 进行平板涂布将菌液依次稀释至 101、 102、 103、 104、 105、 106、 107倍A.-B.-C.- D.-解析： 分离纯化土壤微生物的正确的操作步骤：土壤取样f制备土壤溶液：称取 10 g 土壤，加入盛有90 mL无菌水 的锥形瓶中一制备土壤样品稀释液：将菌液依次稀释至101、102、103、104、105、106、107倍涂布平板分离：吸取 0.1 mL

10、进行平板涂布。答案： C5. 2019 贵州省铜仁第一中学高二期中下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述，错误的是 ()A.该实验需要设置空白对照组，以检验培养基是否受到杂菌污染B 分解尿素的细菌能产生脲酶，脲酶能分解尿素产生氮气和 CO 2C.统计尿素分解菌的数目时，以菌落数在 30300以内的平板进行计数D 该实验所用培养基应以尿素作唯一氮源、并加有酚红指示剂鉴定尿素分解菌解析： 该实验需要设置空白对照组，以检验培养基是否受到杂菌污染，A 项正确；分解尿素的细菌能产生脲酶，将尿素分解为氨和CO2， B 项错误； 统计尿素分解菌的数目时，以菌落数在30300以上的平板进行计数

11、，求其平均值， C项正确；用尿素为唯一氮源、加有酚红指示剂的培养基培养尿素分解菌，指示剂变红，D 项正确。答案： B6. 2019 吉林白城一中高二月考在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂的目的是()A.筛选出能分解尿素的细菌B 对分离的菌种作进一步鉴定C.作细菌的营养成分D 如指示剂变蓝就能准确地认定该菌能分解尿素解析：尿素分解菌可以产生脲酶将尿素分解分解为氨，使pH 升高， 培养基中加入酚红指示剂后，氨可以使指示剂呈红色，据此可以用酚红指示剂鉴别尿素分解菌。答案： B7. 2019 湖北高二月考可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是 ()A.以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B 以尿

12、素为唯一氮源的培养基中加入伊红美蓝试剂C.以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹田试剂D 以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂解析： 在以尿素为唯一氮源的培养基中，不能分解尿素获得氮源的细菌不能生长，而分解尿素的细菌能利用尿素作氮源，将尿素分解为氨，使pH 升高。若培养基中加入酚红指示剂，指示剂将变红，A 项正确；伊红美蓝试剂是鉴定大肠杆菌的，不能分离出分解尿素的细菌，B 项错误；苏丹III 试剂是鉴定脂肪的，不能分离出分解尿素的细菌，C 项错误； 双缩脲试剂是鉴定蛋白质的，不能分离出分解尿素的细菌，D 项错误。故选A 项。答案： A8. 人和哺乳动物的尿中含有尿素，环境中大量尿素的存在会造成

13、污染。土壤中有些细菌含有月尿酶， 可通过降解尿素作为其 生长的氮源。某研究小组对土壤中的这类细菌进行分离，用以回收氮源，同时可净化环境。请回答下列相关问题：（1）分离培养细菌时必须进行无菌操作。配制培养基时，灭 菌与调节pH的先后顺序是 o（2）采用 法将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养。在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在旁进行操作。（3）用 培养基筛选获得能分泌月尿酶的细菌，从功能上划分该培养基属于 培养基。若培养基中存 在能分泌月尿酶的细菌，其菌落周围会出现 ,这是由于尿 素被分解产生,遇培养基中加入的酚红指示剂产生的颜 色变化，从而证明这一菌株可以尿素为氮源。变色区域越大，表 明该

14、菌株利用尿素的能力。解析：（1）配制培养基时，应先调 pH ,后灭菌，灭菌后再 调节pH可能导致培养基的污染。（2）将样液进行一系列的梯度稀 释，应采用稀释涂布平板法接种，然后培养。在稀释土壤溶液的 过程中每一步都要在酒精灯火焰旁进行操作，以避免污染杂菌。 获得能分泌月尿酶的细菌，可以用以尿素为唯一氮源的培养基 筛选，从功能上划分该培养基属于选择培养基。若培养基中存在能分泌月尿酶的细菌，尿素被分解后产生氨，可以使培养基中加入 的酚红指示剂产生红色， 使菌落周围出现红色圆环， 从而证明这 一菌株可以尿素为氮源。变色区域越大，表明该菌株分解的尿素 越多，利用尿素的能力越强。答案：（1）先调pH ,

15、后灭菌（2）稀释涂布平板 酒精灯火焰 以尿素为唯一氮源 选择 红色圆环现象 氨 越强9. 2019 黑龙江大庆实验中学高二期末某研究小组从牛 的瘤胃中采集样本，进行分解尿素的微生物的分离与计数。 实验 基本步骤如下，请回答下列问题：配制培养基灭菌、倒平板培养 接种 观察、统计（1）分解尿素的微生物含有 ,因此，配制 培养基时以尿素作为唯一氮源， 尿素会被分解成 使培养基的碱性增强。培养基中添加 作为指示剂，可使目标菌落的周围产生红色环带。（2）该小组在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培 养了一段时间，这样做的目的是 ;然后将1 mL瘤 胃样液稀释1 000倍，在3个平板上用涂布平板法分别

16、接入 0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板的菌落数分别为 49、47 和45。据此可得出每升瘤胃样液中分解尿素的微生物活菌数为,理论上，统计的菌落数 （低、等、高）于接种 的实际活菌数目。解析：（1）分解尿素的微生物含有月尿酶（分解尿素的酶），因此， 配制培养基时以尿素作为唯一氮源，尿素会被分解成氨（NH»使培养基的碱性增强；培养基中添加酚红作为指示剂，可使目标菌落的周围产生红色环带。（2）接种前，随机取若干灭菌后的空白 平板培养一段时间，观察培养基上是否有菌落生成，用来进行对照，以检测培养基平板灭菌是否合格；根据题意可知，3个平板上生长的平均菌落数 C = （49 +47 +

17、45） +3 = 47个，涂布平板 时所用的稀释液的体积 V = 0.1 mL ,稀释倍数M=103,所以每 毫升瘤胃样液中分解尿素的微生物活菌数为（C + V） X M =（47 +0.1） X 103 = 4.7 X 10 5个，则每升瘤胃样液中分解尿素的微生物 活菌数为4.7 X 105X 10 3 = 4.7 X 108个。当两个或多个细胞连 在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此，理论上，统计 的菌落数往往低于接种的实际活菌数目。答案：（1）月尿酶（分解尿素的酶）氨（NH3）酚红（2）检测培养基灭菌是否合格4.7X108低一、选择题1 . 2019 北京四中高二期中“分离土壤中以

18、尿素为氮源的微生物”实验，配制 LB 全营养培养基的目的是()A.作为实验组，分离尿素分解菌B 作为对照组，检测培养基灭菌是否彻底C.作为对照组，观察尿素分解菌在含有酚红培养基上的菌落形态D 作为对照组，观察全营养条件下能生长的土壤微生物的种类和数量解析： “分离土壤中以尿素为氮源的微生物”实验，应设置实验组和对照组，实验的变量是培养基的不同，故实验组应配置以尿素为唯一氮源的培养基，属于选择培养基，对照组为全营养培养基，因此，配制LB 全营养培养基的目的是作为对照组，观察全营养条件下能生长的土壤微生物的种类和数目，以区分选择培养基是否有选择作用，D 项正确。答案： D2 在做分离分解尿素的细菌

19、实验时，甲同学从对应稀释倍数为 10 6 的培养基上筛选出大约150 个菌落，而其他同学只选择出大约50 个菌落。 下列有关叙述，出现科学性错误的是()A.甲同学出现这种结果的原因可能是由于土样不同，也可能是操作过程出了问题B 可以将甲同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染C.将其他同学用与甲同学一样的土壤进行实验，如果结果与甲同学一致，则可以证明甲同学无误D B 、 C 选项的实验思路都遵循了实验的对照原则解析： 甲同学获得的菌落远大于其他同学，可能是由于所取的土样不同，也可能操作过程被污染，A 项正确；污染可能是培养基灭菌不彻底，或操作过程没有保证

20、无菌操作，将甲同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染，B 项正确；若是土样不同造成的，让其他同学用与甲同学一样的土壤进行实验，如果结果与甲同学一致，则可以证明甲同学操作正确，C 项正确；B 选项的实验思路遵循了实验的对照原则，C 选项的实验思路遵循了实验的重复性原则，D 项错误；故选D 项。答案： D3. 2019 四川闽中中学高二期中下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述，正确的是 ()A.分解尿素的细菌能产生月尿酶，将尿素分解产生氮气B 在稀释度足够高时，所形成的单个菌落一定是由最初的一个细胞繁殖而来的C 统计尿素分解菌的数目时，以

21、菌落数在300 以上的平板进行计数D 用尿素为唯一氮源、加有酚红指示剂的培养基培养尿素分解菌，指示剂变红解析： 分解尿素的细菌能产生脲酶，将尿素分解产生二氧化碳和氨气，A 项错误；在稀释度足够高时，所形成的单个菌落可能是由最初的一个细胞繁殖而来的，也可能几个细胞未分开，繁殖形成一个菌落，B 项错误；统计尿素分解菌的数目时，以菌落数在30300以内的平板进行计数，C项错误；用尿素为唯一 氮源、加有酚红指示剂的培养基培养尿素分解菌，指示剂变红，D 项正确。答案： D4. 2019 四川雅安中学高二月考分离土壤中尿素分解菌的实验操作中，无法分离得到尿素分解菌的原因最可能是()A.制备浸出液的土壤取自

22、土壤的表层B 未对土壤样液进行稀释就进行涂布培养C.牛肉膏蛋白陈培养基中添加尿素作为氮源D 接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒解析： 制备浸出液的土壤取自土壤的表层与纯化的尿素分解菌的单菌落有关，但影响不大，A 项不符合题意；未对土壤样液进行稀释，土壤样液中的尿素分解菌浓度大，容易分离得到尿素分解菌，B 项不符合题意；该培养基必须以尿素为唯一的氮源，不能使用牛肉膏蛋白胨培养基或在其中添加尿素作为氮源，否则大量的微生物都能生长，该培养基就无法起到选择的作用，即无法分离得到尿素分解菌，C 项符合题意；接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒，可能会造成污染，但对分离尿素分解菌影响不大， D 项不符合题意

23、。答案： C5. 2019 河南省开封市第十中学高二月考下列可以鉴定分解尿素的细菌的方法是()A.在加入尿素及其他氮源的培养基中加入酚红指示剂B 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂C.在加入尿素及其他氮源的培养基中加入伊红一美蓝试剂D 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入伊红美蓝试剂解析： 筛选尿素分解菌应采用以尿素为唯一氮源的选择培养基。培养基中加入酚红指示剂，尿素分解为氨时，培养基的pH升高，使酚红指示剂将变红。综上所述，鉴定分解尿素的细菌的方法是在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，B 项正确，A、 C、 D 三项错误。故选B 项。答案： B二、非选择题6. 2019 吉林市第

24、三中学高二月考下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方:KH 2 P。4Na2HPO4MgSO 4 7H 2O葡萄糖尿素琼脂1.4 g2.1 g0.2 g10.0 g1.0 g15.0 g蒸储水定容至1 000 mL o 请根据以上配方，回答下列问题:(1)该培养基含有微生物所需要的 类营养物质。具 中最主要的碳源是 ,唯一的氮源是。(2)该培养基按物理性质划分是 培养基,按培养基 的作用划分是埼养基。(3)培养基配制完成后，一般还要调节pH弁对培养基进行处理。解析：(1)该培养基中含有水、无机盐、碳源和氮源4类营养物质，其中最主要的碳源是葡萄糖，唯一的氮源是尿素。(2)该培养基是加入琼脂的固

25、体培养基，且以尿素为唯一氮源，能够筛选出分解尿素的细菌，属于选择培养基。(3)培养基配制完成后，一般还要调节pH弁对培养基进行灭菌处理。答案：(1)4 葡萄糖 尿素(2)固体 选择(3)灭菌7. 2019 河南高考模拟某些细菌可将尿素分解成CO2和NH 3。欲从土壤中分离能分解尿素的细菌，某研究小组利用成分为KH 2P。4、Na2HPO4、葡萄糖、琼脂、尿素的培养基进行 了相关实验。请回答：(1)在土壤微生物的培养过程中，培养基中的KH 2P。4与Na2HPO4作为无机营养被细菌利用外，它们还具有的功能为(2)该培养基对土壤中的微生物具有选择作用，理由是微生物能分解尿素的原因是这些微生物能合成

26、 。(3)为能获得目的菌的单菌落，常对土壤样液做 处理。为便于确认目的菌，可在培养基中加入 指示剂，接 种弁培养后，可根据菌落周围 来判断该菌能分解尿素。解析：(1)培养基中的KH 2P。4与Na2HPO4除作为无机营养 被细菌利用外，它们还具有的功能为：KH 2PO4和Na2HPO4可构成缓冲液，维持培养基的pH相对稳定，利于微生物的生长与 增殖。葡萄糖是细胞主要的能源物质，可为细菌的代谢提供能量， 还能为合成其他有机物提供原料。(2)该培养基中的唯一氮源为尿素，只有以尿素为氮源的细菌才能在此培养基上生长、增殖， 所以该培养基对土壤中的微生物具有选择作用。微生物能分解尿素的原因是这些微生物能

27、合成月尿酶，月尿酶可将尿素分解为氨。(3) 为能获得目的菌的单一菌落，常用无菌水对土壤样液做稀释处 理。尿素分解菌合成的月尿酶可将尿素分解形成氨，氨使培养基的pH升高，酚红指示剂将变红。所以为便于确认目的菌，可在培 养基中加入酚红指示剂，接种弁培养后，可根据菌落周围出现红 色来判断该菌能分解尿素。答案：(1)能使培养基的pH保持相对稳定，利于微生物的生 长与增殖为细菌的代谢提供能量，为合成其他有机物提供原料(2)该培养基中的唯一氮源为尿素，只有以尿素为氮源的细 菌才能在此培养基上生长、增殖月尿酶(3)稀释 酚红 出现红色8. 2019 贵州高二期中下面是尿素分解菌所用的培养基， 根据下表回答下

28、列问题：Na2HPO4K2HPO4 7H 2OMgSO4葡萄 糖尿素琼脂蒸储水2.1 g1.4 g0.2 g10.0 g1.0 g15.0 g定容至1 000 mL(1)该培养基按照物理性质来分，属于 培养基；该 培养基具有选择作用的原因是(2)鉴定某种细菌是否能够分解尿素，可向培养基中加入指示剂。若该细菌能分解尿素，则指示剂变 色，所依据的原理是o(3) 如 果 对 尿 素 分 解 菌 进 行 分 离 和 计 数 ， 可 以 采 用法接种。(4)为了保持菌种的纯净，对于长期需要保存的菌种，可以采用 的方法。解析： (1)由于培养基中有琼脂，故按照物理性质来分，该培养基属于固体培养基；该培养基

29、中尿素作为唯一氮源，只有能分解尿素的微生物才能在此培养基上生长繁殖。(2)在细菌分解尿素的过程中，细菌合成的脲酶将尿素分解为氨，氨溶于水使培养基 pH 升高，遇酚红指示剂变红，所以在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂后，若指示剂变红，说明菌体能合成脲酶分解尿素。(3)微生物计数时常用稀释涂布平板法接种。(4)根据分析可知，菌种的长期保存常使用甘油管藏法。答案： (1)固体 该培养基中以尿素为唯一氮源，只有能分解尿素的微生物才能在此培养基上生长繁殖(2)酚红 红 在细菌分解尿素的过程中，细菌合成的脲酶将尿素分解为氨，氨溶于水使培养基pH 升高， 遇酚红指示剂变红(3)稀释涂布平板(4)甘油

30、管藏法9. 2019 广西高考模拟尿素是一种重要的农业氮肥，但是尿素不能被农作物直接吸收，只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用。请回答问题：(1) 土壤中的某些细菌能分解尿素，是因为它们能合成(2)配制好的培养基常用法进行灭菌。为了检测所用培养基平板灭菌是否合格，需要进行的操作是(3)为了筛选到能分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择尿素作为唯一氮源，原因是若平板上长出菌落，可通过加入显色剂初步鉴定该种细菌能够分解尿素，加入的显色剂是。(4)一位同学在某浓度下稀释涂布了一个平板，统计的菌落数为 230 。该同学的实验结果(填“是”或“否”)具有说服力，原因是。解析： (1)土壤

31、中的某些细菌能够合成脲酶，脲酶能够将尿素分解为氨和二氧化碳。(2)培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌。检测培养基灭菌是否合格，需要将灭菌后的空白平板培养一段时间， 观察培养基上是否有菌落产生，如果没有菌落产生证明培养基灭菌合格，否则不合格。(3)筛选尿素分解菌时需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，因为只有能够利用尿素的细菌才能在该培养基上生长，其他微生物不能分解尿素而不能生长。尿素分解菌能够将尿素分解为氨而使pH 升高， 酚红指示剂能够与氨反应呈红色，故可以用酚红指示剂检测尿素分解菌。(4)根据题意可知该同学没有设置重复组，所以结果没有说服力。答案： (1) 脲酶(2)高压蒸汽灭菌将灭菌后的空白平

32、板培养一段时间，观察培养基上是否有菌落产生(3)只有能够利用尿素的细菌才能在该培养基上生长酚红(4)否没有设置重复组10 . 2019 安徽高考模拟如图是某课题小组设计的“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”的实验流程示意图。请回答下列问题。(1) 微 生 物 接 种 的 方 法 有 很 多 ， 该 图 所 示 为法，这一方法常用来统计样品中 (填“活菌” 、 “死菌”或“活菌和死菌”)的数目。为了保证结果准确， 一般选择菌落数在的平板进行计数。 实验统计的菌落数往往比细菌的实际数目低， 这是因为(2)实验过程中，需对培养基进行灭菌，常用的灭菌方法有。 接种操作都应在火焰附近进行，目的是防止(3

33、)对分离得到的分解尿素的细菌作进一步鉴定时，可在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂进行细菌培养，其鉴定原理是解析：(1)微生物接种的方法有很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，该图所示为稀释涂布平板法，这一方法常用来统计样品中活菌的数目。为了保证结果准确，一般选择菌落数在30300的平板进行计数。实验统计的菌落数往往比细菌的实际数目低，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。（2）常见的灭菌方法有：灼烧灭菌、 干热灭菌和高压蒸汽灭菌，实验过程中，需对培养基进行灭菌， 常用的方法是高压蒸汽灭菌。 接种操作都应在火焰附近进行，酒精灯火焰附近存在无菌区域，目的是防止杂菌污染。（3）在微生物学中，将允许特