天然药化常见的鉴别反应

1、天然药化常见的鉴别反应(部分)一、颜色反应的对比(一)、三菇类的颜色反应1 .Liebermann-Burchard反应将样品溶于乙酸酊中，加浓硫酸-乙酸酊(1:20)数滴，可产生黄-红-紫-蓝等颜色变化，最后褪色。2 .Kahldenberg反应将样品的氯仿或醇溶液点于滤纸上，喷20%五氯化睇的氯仿溶液(或三氯化睇饱和的氯仿溶液)，干燥后60c70c加热，显蓝色、灰蓝色、灰紫色等多种颜色。3 .Rosen-Heimer反应将样品溶液滴在滤纸上，喷25%三氯乙酸乙醇溶液，加热至100C,呈红色，逐渐变为紫色。4 .Salkowski反应将样品溶于氯仿，加入浓硫酸后，在硫酸层呈现红色或蓝色，氯仿

2、层有绿色荧光出现。5.Tschugaeff反应将样品溶于冰乙酸中，加乙酰氯数滴及氯化锌结晶数粒，稍加热，则呈现淡红色或紫红色。(二)、管体类化合物的颜色反应1 .Liebermann-Burchard反应将样品溶于氯仿中，加浓硫酸-乙酸酊(1:20)数滴，可产生红-紫-蓝-绿-污绿等颜色变化，最后褪色。也可将样品溶于冰乙酸，加试剂产生同样的反应。2 .Kahldenberg反应将样品的氯仿或醇溶液点于滤纸上，喷20%五氯化睇的氯仿溶液，干燥后60c70c加热，样品斑点显蓝色、灰蓝色、灰紫色等多种颜色。3 .Rosen-Heimer反应将样品溶液滴在滤纸上，喷25%三氯乙酸乙醇溶液，加热至60C

3、,呈红色，逐渐变为紫色。4 .Salkowski反应将样品溶于氯仿，加入浓硫酸后，在硫酸层呈现红色或蓝色，氯仿层有绿色荧光出现。5.Tschugaeff反应将样品溶于冰乙酸中，加乙酰氯数滴及氯化锌结晶数粒，稍加热，则呈现淡红色或紫红色。二、强心昔的颜色反应1 .C17位上不饱和内酯环的颜色反应甲型强心昔在碱性醇溶液中，五元不饱和内酯环上的双键移位产生C22活性亚甲基，能与活性亚甲基试剂作用而显色。乙型强心昔在碱性醇溶液中，不能产生活性亚甲基，无此类反应。所以，利用此类反应可区别甲、乙型强心昔。(1) Legal反应：又称亚硝酰铁氧化钠试剂反应。取样品12mg,溶于口比咤23滴中，加3%亚硝酰铁

4、氧化钠溶液和2mol/L氢氧化钠溶液各1滴，反应液呈深红色并渐渐退去。(2) Raymond反应：阳性反应是反应液呈紫红色。(3) Kedd反应：又称3,5-二硝基苯甲酸试剂反应。阳性反应是反应液呈红色或紫红色。(4) Baljet反应：又称碱性苦味酸试剂反应。阳性反应是反应液呈现橙色或橙红色。2 .a-去氧糖颜色反应(1) Keller-Kiliani(K-K)反应：此反应在冰乙酸溶液中进行，如有“-去氧糖，乙酸层显蓝色。界面的颜色随昔元羟基、双键的位置和数目不同而异，可显红色、绿色、黄色等。注意此反应只对游离的“-去氧糖或“去氧糖与昔元连接的昔显色，对a-去氧糖和葡萄糖或其他羟基糖连接的二

5、糖、三糖及乙酰化的a-去氧糖不显色。因它们在此条件下不能水解出a-去氧糖。此反应阳性可肯定a-去氧糖的存在，但对此反应不显色的有时未必具有完全的否定意义。(2)咕吨氢醇反应：反应试剂为咕吨氢醇试剂，此反应极为灵敏，只要分子中有a-去氧糖即显红色，且分子中的“去氧糖可定量地发生反应，故还可用于定量分析。(3)对-二甲氨基苯甲醛反应：分子中若有a-去氧糖可显灰红色斑点。(4)过碘酸-对硝基苯胺反应：此反应可在滤纸或薄层板上进行，反应过程是先喷过碘酸钠水溶液，再喷对硝基苯胺试液，则迅速在灰黄色背底上出现深黄色斑点，置紫外灯下观察则为棕色背底上出现黄色荧光斑点。再喷以5%氢氧化钠甲醇溶液，则斑点转为绿

6、色。三、醍类化合物的颜色反应醍类的颜色反应主要基于其氧化还原性质以及分子中的酚羟基性质。(1)Feigl反应：所有醍类衍生物在碱性条件下经加热能迅速与醛类及邻二硝基苯反应生成紫色化合物。(2)无色亚甲蓝显色试验：无色亚甲蓝溶液为苯醍类及蔡醍类的专用显色剂。蓝色斑点，与葱醍类化合物相区别。(3) Borntrger反应：羟基醍类在碱性溶液中发生颜色改变，会使颜色加深。多呈橙、红、紫红及蓝色。羟基葱醍以及具有游离酚羟基的葱醍昔均可呈色，但慈酚、慈酮、二慈酮类化合物则需氧化形成羟基葱醍类化合物后才能呈色也就是不显色。(4) KestingCraven反应(活性亚甲基)：苯醍及蔡醍类化合物当其醍环上有

7、未被取代的位置时，可在碱性条件下与一些含有活性次甲基试剂(如乙酰乙酸酯、丙二酸酯、丙二睛等)的醇溶液反应，生成蓝绿色或蓝紫色。蔡醍的苯环上如有羟基取代，此反应即减慢反应速度或不反应。意醍类化合物因醍环两侧有苯环，不能发生该反应，故可加以区别。(5)与金属离子的反应：在葱醍类化合物中，如果有“-酚羟基或邻二酚羟基结构时，则可与Pb2+、Mg2+等金属离子形成络合物。反应灵敏，生成的颜色因分子中羟基的位置不同而不同，有助于识别羟基位置显的颜色不同：环上有1个a-羟基橙色邻二酚羟基一一蓝紫色对二酚羟基一一显紫到紫红色各有1个a-羟基或还有间位羟基一一橙红色至红色(6)对亚硝基二甲苯胺反应：9位或10

8、位未取代的羟基慈酮类化合物，尤其是1,8-二羟基衍生物，其厥基对位的亚甲基上的氢很活泼，可与0.1%对亚硝基-二甲苯胺毗咤溶液反应缩合而产生各种颜色。本反应可作为慈酮类化合物的定性鉴别反应，不受葱醍类、黄酮类、香豆素类、糖类及酚类化合物的干扰。四、香豆素的颜色反应(1)异羟曲酸铁反应香豆素类成分具有内酯结构，在碱性条件下开环，与盐酸羟胺缩合生成异羟的酸，在酸性条件下再与Fe3+络合而显红色。此反应为香豆素的检识或结构鉴定。(2)酚羟基反应香豆素类成分常具有酚羟基取代，可与三氯化铁溶液反应产生绿色至墨绿色沉淀。常利用与三氯化铁溶液的反应判断酚羟基的有无。四、黄酮类颜色反应HCl-Mg：多数黄酮、

9、黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇类化合物显红紫红色；四氢硼钠还原反应：二氢黄酮类化合物专属性较高；错盐-枸檬酸反应：3-OH,5-OH;氨性氯化锂反应：邻二酚羟基；五氯化睇：查耳酮。1.还原反应(1)盐酸-镁粉反应鉴定黄酮类化合物最常用的颜色反应；多数黄酮、黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇类化合物显红紫红色，少数显蓝色或绿色，分子中特别是当B-环上有-OH或-OCH3取代时，呈现的颜色亦即随之加深。查耳酮、橙酮、儿茶素类无该显色反应；异黄酮类除少数例外，也不显色。注意事项：利用此反应进行黄酮类化合物的鉴别时，需注意花色素类及部分橙酮、查耳酮类等单纯在浓盐酸酸性下也会发生颜色变化，出现假阳性结果。操作：

10、必要时需预先作空白对照实验，即在供试液中不加镁粉，而仅加入浓盐酸进行观察，若产生红色，则表明供试液中含有花色素类或某些橙酮或查耳酮类。(2)钠汞齐还原反应黄酮、二氢黄酮、异黄酮、二氢异黄酮类显红色；黄酮醇类显黄淡红色；二氢黄酮醇类显棕黄色。(3)四氢硼钠还原反应四氢硼钠(NaBH4)是对二氢黄酮类化合物专属性较高的一种还原剂，此反应可在试管中或滤纸上进行。现象：二氢黄酮类或二氢黄酮醇类被还原产生红紫红色，其他黄酮类均为负反应。应用：可用于鉴别二氢黄酮类、二氢黄酮醇类和其他黄酮类化合物。2.与金属盐类试剂的络合反应具有3-羟基、4-默基或5-羟基、4-默基或邻二酚羟基等结构，则可以与许多金属盐类

11、试剂如铝盐、错盐、锯盐等反应，生成有色的络合物或有色沉淀，有的还产生荧光。(1)三氯化铝反应生成的络合物多呈黄色，置紫外灯下显鲜黄色荧光，但4'-羟基黄酮醇或7,4'-二羟基黄酮醇显天蓝色荧光。(2)错盐-枸檬酸反应应用：利用此反应鉴别黄酮类化合物分子中3-或5-OH的存在与否。若出现黄色，说明3-OH或5-OH与错盐生成了络合物。继之再加入枸檬酸，如黄色不减褪，示有3-OH或3,5-二OH;如果黄色显著减褪，示无3-OH,但有5-OH。原理：因为5-羟基、4-厥基与错盐生成的络合物没有3-羟基、4-厥基错络合物稳定。容易被弱酸分解。此反应也可在滤纸上进行，得到的错盐络合物斑点

12、多呈黄绿色并有荧光。(3)氨性氯化锂反应如产生绿色至棕色乃至黑色沉淀，则表示有邻二酚羟基。(4)三氯化铁反应多含有酚羟基，能与三氯化铁水溶液或醇溶液发生显色反应，可呈现紫、绿、蓝等不同颜色。3 .碱性试剂反应生成黄色、橙色或红色等。4 .硼酸显色反应5-羟基黄酮、6'-羟基查耳酮，可与硼酸反应，产生亮黄色。一般在草酸存在下显黄色并具有绿色荧光。在枸檬酸丙酮存在的条件下，则只显黄色而无荧光。5 .五氯化睇反应查耳酮类则生成红色或紫红色沉淀，而黄酮、二氢黄酮及黄酮醇类显黄色至橙色。应用：区别查耳酮类与其他黄酮类化合物。6 .其他显色反应应用：Gibb's反应也可用于鉴别酚羟基对位是

13、否被取代。方法：酚羟基对位未被取代者在加入Gibb's试剂后即显蓝色或蓝绿色。1 .还原反应(1)盐酸-镁粉反应鉴定黄酮类化合物最常用的颜色反应；多数黄酮、黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇类化合物显红紫红色，少数显蓝色或绿色，分子中特别是当B-环上有-OH或-0CH3取代时，呈现的颜色亦即随之加深。查耳酮、橙酮、儿茶素类无该显色反应；异黄酮类除少数例外，也不显色。注意事项：利用此反应进行黄酮类化合物的鉴别时，需注意花色素类及部分橙酮、查耳酮类等单纯在浓盐酸酸性下也会发生颜色变化，出现假阳性结果。操作：必要时需预先作空白对照实验，即在供试液中不加镁粉，而仅加入浓盐酸进行观察，若产生红色，则表

14、明供试液中含有花色素类或某些橙酮或查耳酮类。(2)钠汞齐还原反应方法：样品的乙醇溶液中加入钠汞齐，放置数分钟至数小时或加热，过滤，滤液用盐酸酸化。现象：黄酮、二氢黄酮、异黄酮、二氢异黄酮类显红色；黄酮醇类显黄淡红色；二氢黄酮醇类显棕黄色。(3)四氢硼钠还原反应四氢硼钠(NaBH4)是对二氢黄酮类化合物专属性较高的一种还原剂，此反应可在试管中或滤纸上进行。现象：二氢黄酮类或二氢黄酮醇类被还原产生红紫红色，其他黄酮类均为负反应。应用：可用于鉴别二氢黄酮类、二氢黄酮醇类和其他黄酮类化合物。2 .与金属盐类试剂的络合反应黄酮类化合物分子中若具有3-羟基、4-默基或5-羟基、4-默基或邻二酚羟基等结构，

15、则可以与许多金属盐类试剂如铝盐、错盐、锯盐等反应，生成有色的络合物或有色沉淀，有的还产生火光。(1)三氯化铝反应方法：此反应可在滤纸、薄层上或试管中进行。现象：生成的络合物多呈黄色，置紫外灯下显鲜黄色荧光，但4'-羟基黄酮醇或7,4'-二羟基黄酮醇显天蓝色荧光。(2)错盐-枸檬酸反应应用：利用此反应鉴别黄酮类化合物分子中3-或5-OH的存在与否。方法：是取样品0.51mg,用甲醇10ml溶解，加2%二氯氧错甲醇溶液1ml,若出现黄色，说明3-OH或5-OH与错盐生成了络合物。继之再加入2%枸檬酸甲醇溶液，如黄色不减褪，示有3-OH或3,5-二0H;如果黄色显著减褪，示无3-OH

16、,但有5-OH。原理：因为5-羟基、4-厥基与错盐生成的络合物没有3-羟基、4-厥基错络合物稳定。容易被弱酸分解。此反应也可在滤纸上进行，得到的错盐络合物斑点多呈黄绿色并有荧光。(3)氨性氯化锂反应黄酮类化合物的分子中如果有邻二酚羟基，则可与氨性氯化锂试剂反应，如产生绿色至棕色乃至黑色沉淀，则表示有邻二酚羟基。(4)三氯化铁反应多数黄酮类化合物分子中含有酚羟基，能与三氯化铁水溶液或醇溶液发生显色反应，可呈现紫、绿、蓝等不同颜色。3 .碱性试剂反应现象：黄酮类化合物与碱性溶液可生成黄色、橙色或红色等。应用：对于鉴别黄酮类化合物的结构类型有一定意义。还可帮助鉴别分子中某些结构特征。4 .硼酸显色反

17、应5-羟基黄酮、6'夷基查耳酮类化合物在无机酸或有机酸存在条件下，可与硼酸反应，产生亮黄色。一般在草酸存在下显黄色并具有绿色荧光。在枸檬酸丙酮存在的条件下，则只显黄色而无荧光。5 .五氯化睇反应方法：样品的无水四氯化碳溶液，加2%五氯化睇的四氯化碳溶液，若为查耳酮类则生成红色或紫红色沉淀，而黄酮、二氢黄酮及黄酮醇类显黄色至橙色，应用：查耳酮类与其他黄酮类化合物。6 .其他显色反应应用：Gibb's反应也可用于鉴别黄酮类化合物酚羟基对位是否被取代。方法：将样品溶于毗咤中，酚羟基对位未被取代者在加入Gibb's试剂后即显蓝色或蓝绿色。显色总结：HCl-Mg：多数黄酮、黄酮醇

18、、二氢黄酮及二氢黄酮醇类化合物显红紫红色；四氢硼钠还原反应：二氢黄酮类化合物专属性较高；错盐-枸檬酸反应：3-OH,5-OH;氨性氯化锂反应：邻二酚羟基；五氯化睇：查耳酮。胆汁酸类除具有管体母核的颜色反应外，尚具有以下颜色反应：(1) Pettenkofer反应：取胆汁加蒸储水及10%蔗糖溶液摇匀，沿试管管壁加入浓硫酸，则在两液分界处出现紫色环。其原理是蔗糖经浓硫酸作用生成羟甲基糠醛，后者可与胆汁酸结合成紫色物质。(2) GregoryPascoe反应：取胆汁加45%硫酸及0.3%糠醛，水浴加热，胆酸存在的溶液显蓝色。本反应可用于胆酸的定量分析。(3) Hammarsten反应：取少量样品，用

19、20%铭酸溶液(20gCrO3在少量水中，用乙酸加至100m1)溶解，温热，胆酸为紫色，鹅去氧胆酸不显色。Molish反应-是糖和昔类的检识反应。样品+浓硫酸+a蔡酚=界面处紫色环。碳昔和糖醛酸与Molish阴性。Smith降解一检测糖的种类，连接方式，氧环大小特点：反应条件温和、易得到原昔元适用：昔元不稳定的昔和碳昔，不适合昔元上有邻二醇羟基或易被氧化的基团的昔。样品(含稀醇)+NaIO4哪开裂成醛+NaBH4=f白醇，再调pH=2,放置。Smith裂解获得连一个醛基的昔元异羟的酸铁反应-鉴定内酯环的存在：碱性条件下，香豆素内酯开环，并与盐酸羟胺缩合成异羟的酸，再在酸性条件下与三价铁离子络合成盐而显红色。酚羟基反应：具酚羟基取代的香豆素类在水溶液中可与三氯化铁试剂络合而产生不同的颜色。酚羟基的对位未被取代，6-位上没有取代，内酯环碱化开环后，可与Gibb's试齐J、Emerson试剂反应。Gibb's反应：2,6-二氯(澳)苯醍氯亚胺试剂蓝色。Emerson反应：2%的4-氨基安替匹林和8%的铁氧化钾试剂红色。.Fe