医院消毒灭菌的效果监测

1、现在学习的是第一页，共68页l 一、前言一、前言：l 1.医院消毒是预防医院内感染的重医院消毒是预防医院内感染的重要措施之一要措施之一l 2. 消毒效果的监测是评价消毒效果的监测是评价l 3.消毒设备运转是否正常消毒设备运转是否正常l 4.消毒药剂是否有效消毒药剂是否有效l 5.消毒方法是否合理消毒方法是否合理l 6.消毒效果是否达标的唯一手段消毒效果是否达标的唯一手段现在学习的是第二页，共68页l 监测人员需经过专业培训，掌监测人员需经过专业培训，掌握一定的消毒知识；握一定的消毒知识；l 熟悉消毒设备和药剂性能熟悉消毒设备和药剂性能;l 具备熟练的检验技能具备熟练的检验技能;l 选择合理的采

2、样时间选择合理的采样时间(消毒后、消毒后、使用前使用前);l 遵循严格的无菌操作。遵循严格的无菌操作。现在学习的是第三页，共68页l（一（一）压力蒸汽灭菌效果监测方法压力蒸汽灭菌效果监测方法l 1 1、化学监测法、化学监测法: :l 化学指示卡化学指示卡(管管)监测方法监测方法l 既能指示蒸汽温度，又能指示温度持既能指示蒸汽温度，又能指示温度持续时间续时间l 化学指示管化学指示管(卡卡)放入放入大包和难以消毒大包和难以消毒部位部位的的物品包中央物品包中央l （旧版消毒技术规范是放入每一待灭（旧版消毒技术规范是放入每一待灭菌的物品包中央）菌的物品包中央）现在学习的是第四页，共68页l 化学指示胶

3、带监测法：化学指示胶带监测法：l 将化学指示胶带粘贴于每一将化学指示胶带粘贴于每一待灭菌物品包外待灭菌物品包外现在学习的是第五页，共68页l 对预真空和脉动真空压力蒸汽灭对预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌，每日进行一次菌，每日进行一次B-D试验。试验。l 设计原理设计原理l a. 使实验包成为灭菌器内残留空气使实验包成为灭菌器内残留空气的聚焦点，它相对较大的面积和可透气的聚焦点，它相对较大的面积和可透气布料易吸附、布料易吸附、“捕捉捕捉”残留空气。残留空气。l b.真空测试图上的化学试剂对残留空真空测试图上的化学试剂对残留空气具有敏感性。气具有敏感性。现在学习的是第六页，共68页现在学习的是第七页

4、，共68页现在学习的是第八页，共68页l 将测试图置于实验包中间位置；将测试图置于实验包中间位置；l 然后，将实验包放于灭菌器室然后，将实验包放于灭菌器室内排气口处，关闭柜门；内排气口处，关闭柜门；l 进行进行1345分钟灭菌处理分钟灭菌处理完毕，打开柜门，观察测试结果。完毕，打开柜门，观察测试结果。现在学习的是第九页，共68页l 实验包由实验包由4650cm8090cm纯棉布纯棉布巾组成，布巾先横折为三层，再纵折成六巾组成，布巾先横折为三层，再纵折成六层。将折好的布巾一条摞一条至层。将折好的布巾一条摞一条至25cm高度。高度。摞放时，各层布巾按折叠侧左右交替摆摞放时，各层布巾按折叠侧左右交替

5、摆好，以使两侧厚度相等。布巾摆好后，好，以使两侧厚度相等。布巾摆好后，将真空测试图夹放于中央布巾之间，然将真空测试图夹放于中央布巾之间，然后用布包巾包好，外面用化学指示胶带后用布包巾包好，外面用化学指示胶带固定好，成为一个实验包。整个实验包固定好，成为一个实验包。整个实验包的大小高约的大小高约25cm，宽约宽约23cm，长约长约27cm，重约重约5kg。现在学习的是第十页，共68页l 实验规定在实验规定在134蒸汽条件下，蒸汽条件下，使用使用3.5分钟观察结果，最长不超分钟观察结果，最长不超4分钟。分钟。l 测试图必须夹放于布包的中测试图必须夹放于布包的中央层位置。央层位置。l 实验包放在灭菌

6、器底层，靠近实验包放在灭菌器底层，靠近柜门与排气口处。柜门与排气口处。l 实验在每天第一次灭菌前空实验在每天第一次灭菌前空锅进行。锅进行。现在学习的是第十一页，共68页l结果判断结果判断合格：合格：测试图变黑且均匀，即中央部测试图变黑且均匀，即中央部分和边缘部分颜色一致，表示灭菌分和边缘部分颜色一致，表示灭菌器抽真空系统良好。器抽真空系统良好。不合格：不合格：测试图变色不均匀，通常中测试图变色不均匀，通常中央比边缘部分颜色浅，表示空气排央比边缘部分颜色浅，表示空气排除不彻底，须检查、修理后使用除不彻底，须检查、修理后使用.现在学习的是第十二页，共68页现在学习的是第十三页，共68页 指示菌株：

7、指示菌株：指示菌株为耐热的嗜指示菌株为耐热的嗜热脂肪杆菌芽孢热脂肪杆菌芽孢( (ATCC 7953ATCC 7953或或SSIK 31SSIK 31株株) )， 菌 片 含 菌 量 为， 菌 片 含 菌 量 为 5 .5 . O O l 0l 05 5c f u /c f u /片片5.5.O Ol0l06 6cfucfu片，在片，在121121O.5O.5条件条件下，下，D D值（杀灭值（杀灭90%90%微生物所需时间）为微生物所需时间）为1.31.3min1.9minmin1.9min，杀灭时间杀灭时间( (KTKT值值)19)19minmin，存活时间存活时间( (STST值值) )为为

8、3.93.9minmin。 培养基：培养基：试验用培养基为溴甲酚试验用培养基为溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基。紫葡萄糖蛋白胨水培养基。现在学习的是第十四页，共68页l 将两个嗜热脂肪杆菌芽孢菌片分别将两个嗜热脂肪杆菌芽孢菌片分别装入灭菌小纸袋内，置于标准试验包中装入灭菌小纸袋内，置于标准试验包中心部位。心部位。l 在下排气压力蒸汽灭菌柜室内，排在下排气压力蒸汽灭菌柜室内，排气口上方放置一个标准试验包气口上方放置一个标准试验包( (由由3 3件平件平纹长袖手术衣，纹长袖手术衣，4 4块小手术巾，块小手术巾，2 2块中手块中手术巾，术巾，1 1块大毛巾，块大毛巾，3030块块lOcmlOcmlOcm

9、 8lOcm 8层层纱布敷料包裹成纱布敷料包裹成(25(25cmcm30cm30cm30cm30cm大大小小) )。 现在学习的是第十五页，共68页 预真空和脉动真空压力蒸汽灭预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌器灭菌柜室内，排气门上方放置一菌器灭菌柜室内，排气门上方放置一个标准测试包个标准测试包(由由16条全棉手术巾条全棉手术巾4lcm66cm，将每条手术巾的长边先将每条手术巾的长边先折成折成3层，短边折成层，短边折成2层然后叠放，作成层然后叠放，作成23cm23cml5cm大小的测试包大小的测试包) 。现在学习的是第十六页，共68页l 手提压力蒸汽灭菌器用通气手提压力蒸汽灭菌器用通气贮物盒贮物盒(

10、22cml3cm6cm)代替代替标准试验包，盒内盛满中试管，标准试验包，盒内盛满中试管，指示菌片放于中心部位的两只灭指示菌片放于中心部位的两只灭菌试管内菌试管内(试管口用灭菌牛皮纸包试管口用灭菌牛皮纸包封封)，将贮物盒平放于手提压力蒸，将贮物盒平放于手提压力蒸汽灭菌器底部。汽灭菌器底部。现在学习的是第十七页，共68页l 经一个灭菌周期后，在无菌条经一个灭菌周期后，在无菌条件下，取出标准试验包或通气贮物件下，取出标准试验包或通气贮物盒中的指示菌片，投入溴甲酚紫葡盒中的指示菌片，投入溴甲酚紫葡萄 糖 蛋 白 胨 水 培 养 基 中 ， 经萄 糖 蛋 白 胨 水 培 养 基 中 ， 经565611培

11、养培养7 7d(d(自含式生物指示自含式生物指示物按说明书执行物按说明书执行) )，观察培养基颜色，观察培养基颜色变化。检测时设阴性对照和阳性对照。变化。检测时设阴性对照和阳性对照。现在学习的是第十八页，共68页现在学习的是第十九页，共68页l 每个指示菌片接种的溴甲酚紫每个指示菌片接种的溴甲酚紫蛋白胨水培养基都不变色，判定为蛋白胨水培养基都不变色，判定为灭菌合格：指示菌片之一接种的溴灭菌合格：指示菌片之一接种的溴甲酚紫蛋白胨水培养基，由紫色变甲酚紫蛋白胨水培养基，由紫色变为黄色时，则灭菌过程不合格。为黄色时，则灭菌过程不合格。l 注意事项：注意事项：监测所用菌片须经卫监测所用菌片须经卫生部认

12、可，并在有效期内使用，生物生部认可，并在有效期内使用，生物指示物监测应指示物监测应1 1月月1 1次。次。现在学习的是第二十页，共68页l 1 1、化学检测法、化学检测法l 检测方法：检测方法：将既能指示温度又能将既能指示温度又能指示温度持续时间的化学指示剂指示温度持续时间的化学指示剂3 3个个5 5个个分别放入待灭菌的物品中，并置于灭菌器分别放入待灭菌的物品中，并置于灭菌器最难达到灭菌的部位。经一个灭菌周期后，最难达到灭菌的部位。经一个灭菌周期后，取出化学指示剂，据其颜色及性状的改变取出化学指示剂，据其颜色及性状的改变判断是否达到灭菌条件。判断是否达到灭菌条件。 现在学习的是第二十一页，共6

13、8页l 检测时，所放置的指示管的检测时，所放置的指示管的颜色及性状均变至规定的条件，颜色及性状均变至规定的条件，则判为达到灭菌条件；若其中之则判为达到灭菌条件；若其中之一未达到规定的条件，则判为未一未达到规定的条件，则判为未达到灭菌条件。达到灭菌条件。 现在学习的是第二十二页，共68页l 检测方法：检测方法：检测时，将多点温度检检测时，将多点温度检测仪的多个探头分别放于灭菌器各层内、测仪的多个探头分别放于灭菌器各层内、中、外各点。关好柜门，将导线引出，由中、外各点。关好柜门，将导线引出，由记录仪中观察温度上升与持续时间。记录仪中观察温度上升与持续时间。l 结果判定：结果判定：若所示温度若所示温

14、度(曲线曲线)达到达到顶置温度，则灭菌温度合格。顶置温度，则灭菌温度合格。 现在学习的是第二十三页，共68页l 指示菌株：指示菌株：枯草杆菌黑色变种芽孢枯草杆菌黑色变种芽孢( (ATCC9372)ATCC9372)，菌片含菌量为菌片含菌量为5.05.010105 5cfu/cfu/片片5.05.010106 6cfu/cfu/片。其抗力要求同上。片。其抗力要求同上。l 检测方法：检测方法：将枯草杆菌芽孢菌片将枯草杆菌芽孢菌片分别装入灭菌中试管内分别装入灭菌中试管内(1(1片片/ /管管) )。灭菌。灭菌器与每层门把手对角线内，外角处放置器与每层门把手对角线内，外角处放置2 2个含菌片的试管，试

15、管帽置于试管旁，个含菌片的试管，试管帽置于试管旁，关好柜门，经一个灭菌周期后，待温度关好柜门，经一个灭菌周期后，待温度降至降至8080时，加盖试管帽后取出试管。时，加盖试管帽后取出试管。 现在学习的是第二十四页，共68页l在无菌条件下在无菌条件下 ，加入普通营养肉汤培养基，加入普通营养肉汤培养基(5(5mlml管管) )，以，以363611培养培养4848h h，观察初步观察初步结果，无菌生长管继续培养至第七日。结果，无菌生长管继续培养至第七日。l 结果判定结果判定: :若每个指示菌片接种的肉汤若每个指示菌片接种的肉汤管均澄清，判为灭菌合格，若指示菌片之一管均澄清，判为灭菌合格，若指示菌片之一

16、接种的肉汤管混浊，判为不合格。接种的肉汤管混浊，判为不合格。l对难以判定的肉汤管，取对难以判定的肉汤管，取o o1ml1ml接种于营养接种于营养琼脂甲板，用灭菌琼脂甲板，用灭菌L L棒涂匀，放棒涂匀，放363611培培养养4848h h，观察菌落形态，并做涂片染色镜检，观察菌落形态，并做涂片染色镜检，判断是否有指示菌生长，若有指示菌生长，判断是否有指示菌生长，若有指示菌生长，判为灭菌不合格；若无指示菌生长，判为灭判为灭菌不合格；若无指示菌生长，判为灭菌合格。菌合格。 现在学习的是第二十五页，共68页l 灭菌效果监测灭菌效果监测l 每次每次灭菌均应进行程序监测灭菌均应进行程序监测l 每个每个灭菌

17、物品的外包装应粘贴包外化灭菌物品的外包装应粘贴包外化学指示胶带，作为灭菌过程的标志；包内学指示胶带，作为灭菌过程的标志；包内放置化学指示卡，作为灭菌效果的参考。放置化学指示卡，作为灭菌效果的参考。l 每月每月应做生物监测，移植物必须等应做生物监测，移植物必须等生物监测结果为阴性时方可使用。生物监测结果为阴性时方可使用。 现在学习的是第二十六页，共68页现在学习的是第二十七页，共68页现在学习的是第二十八页，共68页l 一般每月用生物指示物监测一次。生物一般每月用生物指示物监测一次。生物指示物用枯草杆菌黑色变种芽孢指示物用枯草杆菌黑色变种芽孢( (ATCC9372)ATCC9372)，抗 力 要

18、 求 为 ： 菌 量 在抗 力 要 求 为 ： 菌 量 在 5 5 1 01 05 5c f uc f u 片片5510106 6cfucfu片，在环氧乙烷剂量为片，在环氧乙烷剂量为600600mgmgL L30mg/L30mg/L，作用温度为作用温度为545422，相对湿度为，相对湿度为60601010条件下，其杀灭条件下，其杀灭9090该微生物的该微生物的D D值为值为2.62.6minmin5.8min5.8min，存活时间应存活时间应7.87.8minmin，死亡死亡时间应时间应5858minmin。现在学习的是第二十九页，共68页l 菌量为菌量为5 510103 3cfucfu片片5

19、510104 4cfucfu片。通片。通常做常采用以下数量的生物指示物较为适宜：常做常采用以下数量的生物指示物较为适宜：l 灭菌器柜室可用体积小于灭菌器柜室可用体积小于5m3时，至少时，至少放置放置10个菌片；个菌片；l 灭菌器柜室可用体积为灭菌器柜室可用体积为5m3至至10m3时，时，每增加每增加1m3，增加增加1个菌片；个菌片；l 灭菌器柜室可用体积大于灭菌器柜室可用体积大于10m3时，每增时，每增加加2m3，增加增加1个菌片。个菌片。l生物指示物应放在那些在性能鉴定时发现是最生物指示物应放在那些在性能鉴定时发现是最难灭菌的部位，并均匀分布于整个灭菌物品中。难灭菌的部位，并均匀分布于整个灭

20、菌物品中。现在学习的是第三十页，共68页 每次灭菌都应进行灭菌过程监测。每次灭菌都应进行灭菌过程监测。l 检测所用化学和微生物指示物必须检测所用化学和微生物指示物必须经卫生部批准，并在有效期内使用。经卫生部批准，并在有效期内使用。现在学习的是第三十一页，共68页l 紫外线灯管辐照度值的测定紫外线灯管辐照度值的测定l 1 1、紫外线辐照计测定法：、紫外线辐照计测定法：l 开灯开灯5min后，将测定波长为后，将测定波长为253.7nm的紫外线辐照计探头置于被的紫外线辐照计探头置于被检紫外线灯下，待仪表稳定后，读数。检紫外线灯下，待仪表稳定后，读数。 现在学习的是第三十二页，共68页l 开启紫外线灯

21、开启紫外线灯5min后，将指示卡后，将指示卡置紫外灯下垂直距离置紫外灯下垂直距离lm处，有图案一处，有图案一面朝上，照射面朝上，照射lmin(紫外线照射后，紫外线照射后，图案正中光敏色块由乳白色变成不同图案正中光敏色块由乳白色变成不同程度的淡紫色程度的淡紫色)，观察指示卡色块的，观察指示卡色块的颜色，将其与标准色块比较，读出照颜色，将其与标准色块比较，读出照射强度。射强度。现在学习的是第三十三页，共68页l 普通普通30w直管型紫外线灯，新灯辐照直管型紫外线灯，新灯辐照强度强度90W/cm2为合格；使用中紫外线为合格；使用中紫外线灯辐照强度灯辐照强度70W/cm2为合格；为合格；30W高高强度

22、紫外线新灯的辐照强度强度紫外线新灯的辐照强度180W/cm2为合格。为合格。l注意：测定时电压注意：测定时电压220V5V，温度温度2025，相对湿度，相对湿度60%，紫外线辐，紫外线辐照计必须检定。指示卡应获得卫生许可批照计必须检定。指示卡应获得卫生许可批件。件。现在学习的是第三十四页，共68页l 无菌检验是检查无菌物品是否无菌无菌检验是检查无菌物品是否无菌的一种方法。的一种方法。l 注意：注意：l 1、无菌检验应在洁净度为无菌检验应在洁净度为100级单向级单向流空气区域内进行，应严格遵守无菌操作，流空气区域内进行，应严格遵守无菌操作，避免微生物污染；对单向流空气区域及工避免微生物污染；对单

23、向流空气区域及工作台面，必须进行洁净度验证。作台面，必须进行洁净度验证。l 2、采样时间在灭菌后，保存有效期采样时间在灭菌后，保存有效期内。内。现在学习的是第三十五页，共68页l 洗脱液与培养基无菌性试验：洗脱液与培养基无菌性试验：无菌试验前无菌试验前3d，于需于需-厌养培养基厌养培养基与霉菌培养基内各接种与霉菌培养基内各接种lml洗脱液，洗脱液，分别置分别置3035与与2025培培养养72h，应无菌生长。应无菌生长。现在学习的是第三十六页，共68页l 取缝合针、针头、刀片等取缝合针、针头、刀片等小件医疗器械小件医疗器械5件直接浸入件直接浸入6管管需需厌氧培养管厌氧培养管(其中一管作其中一管作

24、阳性对照阳性对照)与与4管霉菌培养管。管霉菌培养管。培养基用量为培养基用量为15ml/管。管。现在学习的是第三十七页，共68页l 取取5付注射器，在付注射器，在5ml洗脱液中反复洗脱液中反复抽吸抽吸5次，洗下管内细菌，混和后接种需次，洗下管内细菌，混和后接种需-厌养菌培养管厌养菌培养管(共共6管，其中管，其中1管作阳性对管作阳性对照照)与霉菌培养管与霉菌培养管(共共4管管)。接种量：。接种量：lml注注射器为射器为0.5ml，2ml注射器为注射器为lml，5ml10ml注射器为注射器为2ml，20ml50ml注射器注射器为为5ml。l 培养基用量：培养基用量：接种量为接种量为2ml以下为以下为

25、15ml/管，接种量管，接种量5ml为为40ml/管。管。现在学习的是第三十八页，共68页l 手术钳、镊子等大件医疗器械取手术钳、镊子等大件医疗器械取2件用沾有无菌洗脱液的棉拭子件用沾有无菌洗脱液的棉拭子反复反复涂涂抹采样，将棉拭子投入抹采样，将棉拭子投入5ml无菌洗脱液无菌洗脱液中，将采样液混匀，接种于需中，将采样液混匀，接种于需厌氧厌氧培养管培养管(共共6管，其中管，其中1管作阳性对照管作阳性对照)与与霉菌培养基霉菌培养基(共共4管管)。接种量为。接种量为1ml/管，管，培养基用量为培养基用量为15ml/管。管。现在学习的是第三十九页，共68页l 将需将需厌氧培养管以及阳性与阴性对厌氧培养

26、管以及阳性与阴性对照管均于照管均于3035培养培养5d，霉菌培养管霉菌培养管与阴性对照管于与阴性对照管于2025培养培养7d，培培养期间逐日检查是否有菌生长。养期间逐日检查是否有菌生长。l 如加入供试品后培养基出现混浊或如加入供试品后培养基出现混浊或沉淀，经培养后不能从外观判断时，可沉淀，经培养后不能从外观判断时，可取培养液转种入另一支相同的培养基中取培养液转种入另一支相同的培养基中或斜面培养基上，培养或斜面培养基上，培养48h72h后观察。后观察。现在学习的是第四十页，共68页 （1）送检时间不得超过送检时间不得超过6h，若样若样品保存于品保存于04，则不得超过，则不得超过24h。 （2）被

27、采样本表面积被采样本表面积30m2，设设4角角及中央及中央5点，点，4角的布点部位距墙壁角的布点部位距墙壁lm处。处。 l 2、采样方法：、采样方法：将普通营养琼脂平板将普通营养琼脂平板（直径为（直径为9cm）放在室内各采样点处，采放在室内各采样点处，采样高度为距地面样高度为距地面1.5m采样时将平板盖打采样时将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露开，扣放于平板旁，暴露5min，盖好立即盖好立即送检。送检。现在学习的是第四十九页，共68页l 细菌总数细菌总数(cfu/m3)=50000N/(AT)l 式中式中A为平板面积为平板面积(cm2);T为平板暴为平板暴露时间露时间(min)；N为平均菌落数为

28、平均菌落数(cfu)。 现在学习的是第五十页，共68页l I类区域：类区域：细菌总数细菌总数10cfu/m3(或或0.2cfu/平板平板)，未检出金黄色葡萄球菌、，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格；溶血性链球菌为消毒合格；l 类区域：类区域：细菌总数细菌总数200cfu/m3(或或4cfu平板平板)，未检出金黄色葡萄球菌、溶，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格：血性链球菌为消毒合格：l 类区域：类区域：细菌总数细菌总数500cfu/m3(或或l0cfu平板平板)，未检出金黄色葡萄球菌、溶血，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格。性链球菌为消毒合格。现在学习的是第五

29、十一页，共68页l1、在消毒处理后、操作前进行在消毒处理后、操作前进行采样。采样。l2、采样前，关好门、窗，在无采样前，关好门、窗，在无人走动的情况下，静止人走动的情况下，静止10min进进行采样。行采样。 现在学习的是第五十二页，共68页l有效氯含量测定有效氯含量测定 , ,可以用试纸法测定。可以用试纸法测定。l 使用方法：使用方法：l 1、消毒剂溶液有效成分浓度在测定范消毒剂溶液有效成分浓度在测定范围内时，取试纸浸于消毒液中，即刻取出，围内时，取试纸浸于消毒液中，即刻取出，半分钟内在自然光下与标准色块比较，读半分钟内在自然光下与标准色块比较，读值。值。l 2、消毒液浓度高于试纸测定范围时，

30、消毒液浓度高于试纸测定范围时，可先稀释消毒剂，再测定。可先稀释消毒剂，再测定。l注意：试纸浸湿后时间超过注意：试纸浸湿后时间超过1分钟，颜色分钟，颜色逐渐消退，结果不准确。逐渐消退，结果不准确。现在学习的是第五十三页，共68页l 试纸法：试纸法：1、从小瓶中取出一条；从小瓶中取出一条；2 2、将指示色块完全浸没于戊二醛溶液，将指示色块完全浸没于戊二醛溶液，一秒内取出；一秒内取出；3 3、沾下瓶盖上的纸垫，去除多余的液体；沾下瓶盖上的纸垫，去除多余的液体；4 4、横置于瓶盖上，注意不要将色块面朝横置于瓶盖上，注意不要将色块面朝下以免受到污染；下以免受到污染；5 5、等候等候5858分钟判读结果。

31、分钟判读结果。现在学习的是第五十四页，共68页l 1 1、涂抹法：、涂抹法：用无菌吸管吸取消毒用无菌吸管吸取消毒液液1.0ml，加入加入9.0ml含有相应中和剂的采含有相应中和剂的采样管内混匀，用无菌吸管吸取上述溶液样管内混匀，用无菌吸管吸取上述溶液0.2ml，滴于干燥普通琼脂平板，每份样滴于干燥普通琼脂平板，每份样品同时做品同时做2个平行样，一平板置个平行样，一平板置20培养培养7d，观察霉菌生长情况，另一个平板置观察霉菌生长情况，另一个平板置35温箱培养温箱培养72h记数菌落数，同时按十五记数菌落数，同时按十五的原则检测致病菌。的原则检测致病菌。l 消毒液染菌量消毒液染菌量(cfu/ml)

32、=每个平板上的菌每个平板上的菌落数落数50现在学习的是第五十五页，共68页l 用无菌吸管吸取消毒液用无菌吸管吸取消毒液1.Oml，加入到加入到9.0ml含相应中和剂的无菌生理盐水采样管含相应中和剂的无菌生理盐水采样管中混匀，分别取中混匀，分别取0.5ml放入放入2只灭菌平皿内，只灭菌平皿内，加入已熔化的加入已熔化的4548的营养琼脂的营养琼脂15ml18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，一平板置一平板置20培养培养7d，观察霉菌生长情况；观察霉菌生长情况；另一个平板置另一个平板置361培养培养72h，计数菌落计数菌落数，同时按十五的原则检测致病菌。数，同时按十五的原则检

33、测致病菌。l 消毒液染菌量消毒液染菌量(cfu/ml)=每个平板上的菌每个平板上的菌落数落数20现在学习的是第五十六页，共68页l 消毒液染菌量消毒液染菌量100cfu/ml，并未检出致病菌为合格。并未检出致病菌为合格。l 采样后采样后1h内检测。内检测。 现在学习的是第五十七页，共68页l 采样时间：采样时间：在消毒后、使用前在消毒后、使用前进行采样。进行采样。l 采样方法：采样方法：将将2.0cm2.5cm无菌滤纸片于无菌洗脱液中浸湿均匀，无菌滤纸片于无菌洗脱液中浸湿均匀，贴在食具表面，经贴在食具表面，经5min取下，每取下，每10张张滤纸合为一份样本滤纸合为一份样本(相当于相当于50cm

34、2采样采样面积面积)，投入含，投入含50m1生理盐水的生理盐水的lOOml三角烧瓶中，于三角烧瓶中，于4h内送检。内送检。 现在学习的是第五十八页，共68页l 纺 织 品 ： 细 菌 总 数纺 织 品 ： 细 菌 总 数5cfu/cm2，大肠菌群末检出。大肠菌群末检出。l 餐具若用化学消毒剂消毒，餐具若用化学消毒剂消毒，采样液中应加入相应中和剂。采样液中应加入相应中和剂。 现在学习的是第五十九页，共68页l 采样时间：采样时间：在消毒后、使用前进行在消毒后、使用前进行采样。采样。l 采样方法：采样方法：便器、尿壶等容器可便器、尿壶等容器可用沾有含相应中和剂的无菌生理盐水的用沾有含相应中和剂的无菌生理盐水的棉拭子，反复涂擦容器的内表面及内口棉拭子，反复涂擦容器的内表面及内口处，剪占手接触部位后，将棉拭子投入处，剪占手接触部位后，将棉拭子投入5ml无菌生理盐水试管中，立即送检。无菌生理盐水试管中，立即送检。l 拖把、抹布等物品可用无菌的方法剪取拖把、抹布等物品可用无菌的方法剪取lcm3cm，直接投入直接投入5ml含相应中和剂的含相应中和剂的无菌生理盐水中，立即送检。无菌生理盐水中，立即送检。 现在学习的是第六十页，共68页l未检出致病菌为消毒合格。未检出致病菌为消毒合格。 现在学习的是第六十一页，共6