基于组合化学库的药物设计

1、本章本章内容内容组合化学的基本原理组合库的构建高通量筛选技术概念原理设计构建方法合成技术生分物结活构性识成别概念组成计虚算拟机筛 选发的现基药本物过 程 人体内重要的生物大分子：人体内重要的生物大分子：蛋白质蛋白质糖糖核酸核酸第一节 组合化学的基本原理一、组合化学(Combinatorial chemistry) 是将一些基本的小分子构建模块如氨基酸、单核苷酸、单糖及各种各样的化学小分子通过化学或者生物合成的手段，将他们系统地用共价键装配成不同的组合，构建由此得到大量的具有结构多样性的分子，从而建立化学分子库的方法。用灵敏、快速的分子生物学检测方法，筛选其活性，发现具有应用开发潜力的化合物或化

2、合物群，然后测定其结构，批量合成，并进一步评价其药理活性。二、二、组合化学组合化学的的原理原理 传统的化学合成，每次进行一个反应，生成一个化合物，经过分离、纯化后进行下一个反应，以此反复， 最终得到目标产物(图1) 。A + B AB；AB + C ABC；ABC + D ABCD； 图图1.传统化学合成原理图示传统化学合成原理图示特点：效率低、速度慢、周期长、成本高、反应的步骤数远大于所需的化合物数。 组合合成选择一系列结构、反应性能接近的构建模块(A1An)与另一构建模块(B1Bn)进行反应(图2)，这样进行一步，就可生成 n n 个化合物。若将AiBj 与构建模块(C1Cn)和(D1Dn

3、)反应，可生成更多的化合物。A1A2A3An特点：能在短时间内合成大量的化合物B1B2B3BnAiBj(i=1n;j=1n)图2 组合化学合成原理图示 组合合成的特点是能在短时间内合成大量的化合物，用少数的几步就可以得到数以万计的化合物。从表 1 可看出，库中分子数与模块数成线形关系，与反应步骤数成指数关系。表1.库中分子数与构建模块数及反应步骤数的关系第二节 组合化学库的构建一、组合库的设计 虚拟组合库的设计 虚拟组合库(vartual combinatorial library)即应用电子信息技术生成和贮存的组合库。 实验组合库的设计 实验组合库的实质就是将设计的含大量化合物的虚拟组合库进

4、行精选和优选。虚拟组合库的虚拟组合库的设计步骤：设计步骤：根据已知的药物实践以及分子生物学等其他学科的成果根据已知的药物实践以及分子生物学等其他学科的成果确定组合合成的目标；确定组合合成的目标；根据合成的目标设计合适的组合合成策略，选择和设计根据合成的目标设计合适的组合合成策略，选择和设计组合合成路线；组合合成路线；根据组合合成路线以及所能得到的基本构建单元，选定根据组合合成路线以及所能得到的基本构建单元，选定组合合成的维数和各维合成的集合；组合合成的维数和各维合成的集合；获得虚拟组合库。获得虚拟组合库。二、组合库的构建方法二、组合库的构建方法(一) 平行法 特点：合成速度较快、化合物的结构测

5、定相对容易、化合物数目较大、可用于固相组合合成和液相组合合成中。l 是指在合成过程中以平行的方式同时合成多种反应产物。l 每个反应是独立进行的，如上述反应当每个反应同时独立进行时，即为平行合成方式。 SR1R2R3R4SR1SR2SR3SR4 1 多针法(poly pin) 是Geyson发明的用于多肽合成的一种以96孔微量滴定板反应装置为基础的平行合成法。 操作步骤：将浸在丙烯酸溶液中的聚乙烯小棒用射线照射，使针的表面活化，活化后的针被羧基覆盖，把不同的氨基酸溶液反应试剂转移到96孔微板的每个孔中，即可对每一根针进行独立的合成反应。2 茶叶袋法(tea bags) 该法是Houghten发明

6、的一种组合合成的方法。其固相载体为聚苯乙烯二酯，反应容器为化学惰性的多孔PE小袋，袋子的大小尺寸约为1522，茶叶袋网眼74m，可防止树脂珠漏出，保证可溶性物质的出入。为了高通量合成大容量的多肽库，节省时间和工作量，在相同的化学反应步骤中，每一个反应器中可容纳多个袋子，同时进行反应，集中进行洗涤、脱保护和中和，在集中切除树脂珠。3 点阵法(dot matrix) 是一种以纤维素纸片作为固相载体的合成技术。 特点：操作简便，但不耐受强酸环境，仅适合Fmoc保护方式的模块。4 光印法(optical printing) 是一种将固相合成技术与光敏式印刷技术结合为一体的高通量合成方法。(二二) 混分

7、法混分法 基本原理：将几个模块分别混合或者将几个模块分别与反应珠上的功能集团衔接后混合等分成n份，然后分别与m个构建中的每一个进行反应，所得产物再混合并分成p等份，分别与p个构建中的每一个反应。，如此逐步继续，直到反应结束。最后得到的是一组一组的混合物，所得合物的总数是nmp。图图3 混分法合成过程混分法合成过程XYZYZZXXYZYYXXZXXYYZZXYZZZZYYYXXXXZZYXXZYYXYYZXXYZZYZXZXYXYXZYXYXYXZXXXYYYXZZXYZYZXZXYZZYZYXZXZYXXZYYZZZYXYZ混合均分偶联混合均分偶联 如三个构建单元X、Y、Z，经三次组合合成，得

8、3组混合物，每组9个化合物，一共有333共27个化合物(图3)。缺点：缺点：必须鉴定混合物，当获得具有活性的物质时，要经过回溯合成鉴定可能活性化合物的结构，耗费时间和财力重要重要三、组合库合成技术三、组合库合成技术(一) 固相合成技术 固相合成是使用固态的聚合物载体，在其上进行合成反应，所得最终产品用化学或者光化学法使其与作为支点的聚合物脱离。 关键：载体，连接载体和反应底物的连接基团，相应的从载体上解离产物的方法。v 载体的要求： 对合成过程中的化学和物理条件稳定； 有可使目标化合物连接的反应活性位点； 对所用的溶剂有足够的溶胀性； 用温和的条件可使目标化合物从载体上选择性卸脱。 将三氯三嗪

9、与结合于PEG-PS的各种氨基酸反应，得到结合于固相载体的二氯三嗪，后者仍有两个位置可发生亲核取代反应，从而可引入新的结构多样性中心，在亲核取代胺化反应之后，将产物用氨从固相载体上切割下来。第一个反应用20个结合于PEG-PS的氨基酸；第二、第三个反应，依次用30个和20个胺分别进行两次胺化反应，可得到12000个化合物的化合物库。v反应类型：反应类型： 亲核取代反应、缩合反应、杂化合成反应、环加成反应等。固相合成的优缺点：优点：优点： 可用过量的试剂使反应完全，不受反应收率低的限制； 可用过滤，洗涤的办法去掉多余的试剂及副产物，分离、纯化简单； 可用混合法等，反应序列可自动化； 一次合成化合

10、物数量可以很多。缺点：缺点： 需有和固相载体连接和解离的步骤； 载体和连接基团限制了一些反应的应用； 鉴定反应的方法还不够完善； 产物量有限制。(二) 液相合成技术 1 液相组合合成液相组合合成(LPCS) 是一种将固相合成易分离的优点与液相反应结合起来，用可溶性的高分子载体代替不溶性的交联树脂来解决产物的提纯(如进行重结晶、超过滤等)问题的技术。 LPCS的载体需满足： 1) 易得或易和成； 2) 有良好的机械和化学稳定性； 3) 含有能键合有机小分子的官能团，并在适当条件下可以解离； 4) 显示较好的溶解性能，能在有机溶剂中与有机小分子互溶。2 树状载体组合合成 是在树状载体上进行的液相组

11、合合成。在概念上类似于固相组合合成，不同的是反应在液相中进行。树状载体的结构是从一个中心出发形成许多支链，其分子量比有机小分子要大，但又比高分子载体小得多，因而其负载容量比固相载体要大。反应结束后，树状中间体可通过大小排斥色谱或超过滤等方法进行分离，最后得到的树状载体可回收利用。图图5 树状载体组合合成树状载体组合合成AAAAAAAABABAABABBABAABABBABA3 氟合成 利用含氟的有机分子在有机(水)相中不溶的特点，进行“氟相有机相”萃取操作。 如先将过量的烯丙醇与溴硅烷反应进行标记，再与腈N-氧化物进行环加成反应，产物异噁唑啉带有氟标记，可萃取进氟溶剂相，与未反应的起始原料分离

12、。氟化氢催化切割氟标记物，经三相分配萃取，纯的异噁唑啉产物存在于有机溶剂相中。4 高聚物试剂的使用 使用一种特殊高聚物固相试剂，将试剂被“封锁”在树脂珠内。因而，选用这种高聚物试剂和合适的底物，在同一容器中反应，当反应完成后，产物扩散回溶液中，在进入另一个树脂珠内，与封锁在其中的试剂反应，之后，产物在扩散回溶液中，如此，直到最后获得所需要的化合物库。 如取代吡唑的合成，在环己烷中，将底物-苯乙醇和三种树脂试剂混合。依次发生氧化、溴化、醚化反应，以48的总收率分离出产物，而分布反应中收率为42.液相合成技术的优缺点液相合成技术的优缺点优点：优点： 原则上所有的有机反应都可采用，且已知的反应条件可

13、直接反应； 无须多余的步骤，如固相载体的连接与解离； 产量较大。缺点：缺点： 分离、纯化较为困难； 一次合成化合物的数量受限制； 反应收率要求80%以上。 组合化学的运用加快了制造许多化合物的速度，以求提高发现新药的成功率。组合库的合成和筛选工作是按先后顺序独立进行的，从所合成的组合库中是否能筛选出有效的生物活性分子，取决于化学家分子设计的工作经验，并有相当大的幸运成分。 近年来出现了一些新尝试：其一，把按先后顺序进行的组合库生产和筛选工作改为同时进行。在组合库的生产过程中加入了筛选的模板，所形成的部分化合物就可能是模板的配体，成为有效的生物活性分子。其二，如果化合物形成的反应是可逆的，模板的

14、引进可促使反应达到一个新的平衡，从而模板配体(与模板结合的化合物)的比例逐渐变大，这是一个分子识别自组装过程。结合这两个特点，动态组合化学因而问世。(三) 动态组合化学(dynamic combinatorial chemistry,DCC)图图7 动态组合化学库的图解动态组合化学库的图解 DCC 的概念可以用锁与钥匙的关系来形象的描述。(I)由初始三组分子单元A1、A2、B1、 B2和C1、C2拼组构成的数个可逆变化的“钥匙”D1(A1B1C1)、D2(A1B1C2)、D3(A1B2C1)、D7(A2B2C1)、D8(A2B2C2)，形成了一个潜在的动态库。()在分子“锁”E(模板)加入后，

15、“ 钥匙”D8与“锁”E结合从中筛选出与分子“锁”结合最紧密的结合体F ()，剩下的D1D7离解，放出分子单元，其中包含A2，B2和C2；它们通过(I)和()的过程 ，进行重排以便产生更多的结合体F。四四 化合物库生物活性成分结构识别化合物库生物活性成分结构识别 组合化学的目的是通过活性筛选发现新的先导化合物或者对先导化合物进行优化。因此，在整个组合合成中确定生物活性化合物的结构至关重要。 目前，获取目标分子信息的方法有： 1) 结构同步识别法； 2) 利用编码的方式记录； 3) 直接进行结构测定。(一)结构同步识别法 1 循序筛选 是基于裂分合成组合库时，活性评价在最后合成的几个子库中进行，

16、而每个子库中混合物最后耦联的残基是唯一的原理，通过重复的的合成与活性鉴定，得到活性化合物的结构信息。图8 循序筛选法的原理2 正交组合 正交组合库的每个化合物被合成两次，但设计每个化合物在两次合成中处于不同的组合之中，通过两个库中活性最高的两个混合物确定活性最高化合物的结构。3 亲核性与质谱丰度相关法 配体与受体竞争性结合时，活性最强的组分与受体的结合量最多，在质谱(MS)中的离子强度也最大。结合反应后先经电喷雾化质谱(ESI-MS)气化，再将一定强度的受体配体n-n- 峰成分解离，去除受体。最后经傅立叶变换将配体峰的组分放大，即可读出活性结构。4 索引组合 与正交组合类似，找出活性最强的两组

17、，由互补的组成推出先导化合物结构。以二元索引组合库的构建为例，在A+B AB反应中，假设用10中A构件与20中B构件按图9方式编组合成和筛选。图图9 索引组合库的合成、筛选和先导化合物识别索引组合库的合成、筛选和先导化合物识别A1B1-20A2B1-20.A10B1-20A库，200个产物，分10份样品筛选，每份含20个产物A1-10B1A1-10B2.A1-10B20 B库，200个产物，分20份样品筛选，每份含10个产物筛选筛选A7B1-20(活性最强)A1-10B19(活性最强)A7B19(活性结构)5 定位扫描法 在这一方法中，不是合成一个库，而是合成几个库，这几个库中包含的化合物种类

18、相同，定位扫描法的第一个应用实例中是用18种氨基酸作为单体合成了一个六肽库，相同的化合物被合成6次，见图10。第1个库用来确定第1位上的氨基酸，根据O1位上氨基酸的不同分为18个组，根据表现出的活性不同，由活性最高的组定出O1位上的氨基酸，其他5个库分别定出另五位氨基酸。第第1 个库个库O1XXXXX-NH2 第第4 个库个库XXXO4XX-NH2第第2 个库个库XO2XXXX-NH2 第第5 个库个库XXXXO5X-NH2第第3 个库个库XXO3XXX-NH2 第第6 个库个库XXXXXO6-NH2O 代表在其位置上单体的种类是确定的代表在其位置上单体的种类是确定的; X 代表在其位置上单体

19、的种类是所有可能单体的等摩尔混合物代表在其位置上单体的种类是所有可能单体的等摩尔混合物图图10 用定位扫描法确定活性化合物用定位扫描法确定活性化合物(二) 利用编码的方法记录化合物的结构信息1 物理编码1) 茶袋法 在聚丙烯袋中放入供肽偶联反应的支持物树脂珠, 聚丙烯袋的网眼的大小可以保证溶剂和反应物进入“茶袋”而树脂珠不会漏出, “茶袋”每进行一次偶联反应, 就用笔记录在标签上, 为了节省时间和工作量, 操作相同时, 将“茶袋”放在一起进行, 经过几次“茶袋”的重组和偶联反应之后, 每一个“茶袋”中的树脂珠上为一种特定的肽序列。反应结束后, 将肽从树脂珠上解离下来, 进行性质测定及活性筛选,

20、 当然定性分析是为了验证标记结果, 化合物的结构可以直接从“茶袋”的标签上读出。“茶袋”的标记由手工操作, 效率低, 在库容量大时, 使用受到限制。2）高周波标记 在惰性的多孔容器中装入树脂球和芯片，用高周波在芯片上记录下树脂球所发生化学反应的历史，或者将芯片预先编码，信息可通过微片发射的高周波在75 150 mm 的距离内读出，根据编码的信息进行化学反应。与“茶袋”法相比，它的优点在于可以省去大量繁琐的手工操作，尤其在库容量大时该优点更为突出。3）激光编码法 在一块10mm10mm的平板状固相合成载体( 也叫激光合成芯片) 的中间是一个3mm3mm惰性的氧化铝陶瓷片，在进行组合化学反应之前，

21、用二氧化碳激光在陶瓷片上蚀刻上二维条码，在进行每一步反应之前，根据条码上的信息对芯片进行定向分类，这种方法可以在每块芯片上合成一种特定的化合物，反应后根据条码信息确定库化合物的化学结构。2 化学编码 在每一个珠子上合成一种或几种标记化合物用以标记该珠子上库化合物的合成历史，标记化合物的结构很容易通过光谱、色谱法解析，从而间接推出活性库化合物的结构。用于标记的化合物应满足以下条件：用于标记的化合物应满足以下条件：标记化合物的合成标记化合物的合成不能干扰库化合物的合成；不能干扰库化合物的合成；标记化合物必须能与库化合物分开；标记化合物必须能与库化合物分开；标记化合物的浓度应该尽量低，标记化合物的浓

22、度应该尽量低，否则占据珠子上过多的功能基；否则占据珠子上过多的功能基；标记化合物应该改能够应用标记化合物应该改能够应用光谱和色谱法快速测定其结构。光谱和色谱法快速测定其结构。(三) 直接对活性化合物进行结构鉴定 为了避开库的重复合成和复杂的编码解码过程，人们设想是否存在一种能直接鉴定出组合库中活性化合物的方法。在这方面组合化学工作者做了一些尝试。 在研究合成肽库与天然抗体万古霉素结合活性的研究中，将万古霉素加入到毛细管电泳缓冲溶液中，肽库中100个化合物的混合物注入毛细管电泳柱中，与万古霉素有亲合力的肽在电泳过程中就进行缔合与解离过程，而使其在电泳中移动速度减慢，与其他组份分开，流出顺序与亲合

23、常数有关，流出的组份用电喷雾离子化质谱直接测定其结构。同一研究小组，将库扩展为1000个化合物，也能通过这一方法进行研究。 第三节 高通量筛选技术 一、概念 高通量筛选(High throughput screening,HTS)技术是指以分子水平和细胞水平的实验方法为基础，以微板形式作为实验工具载体，以自动化操作系统执行试验过程，以灵敏快速的检测仪器采集实验结果数据，以计算机对实验数据进行分析处理，同一时间对数以千万样品检测，并以相应的数据库支持整体运转的技术体系。二二、高通量筛选技术体系的组成高通量筛选技术体系的组成 化合物样品库化合物样品库自动化的操作系统自动化的操作系统高灵敏度的检测系

24、统高灵敏度的检测系统数据库管理系统数据库管理系统 (一一) 化合物样品库化合物样品库 v 传统化学合成、分离合成化合物分离的天然产物纯化合物和粗提物、有效部位经典方法分离纯化、结构鉴定、活性测试费时、效率低，远远不能满足现代高通量筛选的需要。从结构多样性的角度考虑，大自然可能给予我们的结构多样性大大高于组合化学，因而天然产物或天然来源的样品的重要性不容忽视。v 组合化学合成从化合物数量和结构多样性上，充实供筛选的化合物库v 与其他机构的合作、交换或购买(二) 自动化的操作系统 一般采用具有固定分布模式的微孔板作为反应容器，不同的微孔板通过条形码加以标记。由计算机及其操作软件、自动化加氧设备、温

25、孵、离心等组成。通过光电阅读器可在特定的微孔板的特定位置进行操作，并将操作结果及相关数据存储在计算机中，使筛选结果准确，实验过程快速。Matrix of Wells864963841536 WellRowColumnVolume9681230038416241001536324810v微孔板的颜色和材料v微孔板微孔的设计和密度 微孔板微孔密度的增加可以显著提高单位时间内筛选的通量。 节约成本。 提高筛选质量。lWhatman过滤型孔板是种多孔形状物体，便于快速和批量处理样品。板上刻有号码适合于各种微孔板配用仪器和白动控制装置。l微孔板振荡器的特点独立设定温度，振荡速度和混合时间；混匀器可以编程

26、设定运行一定时间或者瞬时混合3秒；内置的盖可以减少污染，样品挥发或者噪音的危险。l一次性吸取大量液体，然后每次按动按钮，仅仅释放小量等体积的液体。大量液体进行等体积分装。连续移液器连续移液器v条形码 条形码(barcode)是将宽度不等的多个黑条和空白，按照一定的编码规则排列，用以表达一组信息的图形标识符。常见的条形码是由反射率相差很大的黑条（简称条）和白条（简称空）排成的平行线图案。215全自动移液工作站1.大容量，可自动处理12个96孔反应板或480个试管的样品。 2.特别适合于HPLC或LC/MS的样品处理。 3.使用709软件，有易用的图示管架编辑器。 4.无论开口试管或密封试管都有很

27、高精确度。5.Micro215进样量可低至0.5ul。 6.多通道215自动样品处理系统可同时处理8个样品。 (三) 高灵敏度的检测系统 高通量药物筛选模型只有采用适当的检测方法，才能以可视化的形式将分子、细胞水平上的相互作用反映出来，因此，高通量筛选的检测技术是实现高通量筛选的关键技术之一。 高通量筛选现代检测技术可分为光学检测技术和色谱-光谱联用检测技术。1 光学检测技术 (1) 紫外-可见光检测技术： 主要用于酶抑制药物的高通量筛选中，通过酶促反应产物的光吸收强度来测定酶活力，从而评价不同抑制剂的抑制程度。 (2) 发光检测技术： 通过产物的化学发光信号强度来评价药物的生物活性。(3)

28、荧光标记检测技术： 基于有些物质可以发出荧光的原理设计而成，但对于缺乏荧光活性的筛选系统，一般采用将荧光活性分子与筛选系统内分子键合标记，作为探针反映样品的作用情况。 (4)邻近闪烁检测技术(Scintillation Proximity Assay, SPA)： 应用一种键和有受体分子的荧光微球，当放射性核素标记的配体与受体分子结合，放射性核素分子与荧光微球之间的距离足够近，此时放射性核素发射出的粒子能够激发微球发射荧光，而游离的放射性核素标记的配体与荧光微球之间的距离较远，不能激发荧光，因此无须分离游离的和结合的标记配体，只要通过检测筛选系统的荧光强度的变化就可以实现受体的亲和力筛选。 S

29、PA技术灵敏度高、特异性强、已被广泛应用于以酶、蛋白受体为靶点的高通量筛选中。邻近邻近闪烁检测法闪烁检测法(Scintillation Proximity Assay, SPA)放射性标记配体与SPA微粒上的生物大分子结合，亲近闪烁产生可检测的光未标记配体不产生亲近闪烁-射线作用与微粒上的闪烁剂发射可检测的光SPA 微粒-射线在介质中被消散放射性标记配体 (5) 光学传感器技术 目前应用于药物筛选的光学传感器多是通过包被在传感器件敏感膜表面(sensor substrate)的生物识别分子，与筛选分子特异性结合时引起传感器件的光电物理特性(如光强、折射率或电阻等)的变化，再通过适当的换能器转换

30、为检测信号，从而定性、定量地检测样品的作用情况(图6)。图6 光学传感器的检测原理示意图2 色谱-光谱联用检测技术(1) 亲和色谱技术 是一种利用生物分子间亲和力进行分离的液相色谱技术。 常将生物靶分子固定于基质作为固定相，在色谱分离过程时样品与受体的特异性结合能力决定了样品的保留，因此通过保留时间可以直接获得样品与受体亲和力的信息，从而实现药物的活性筛选。(2)毛细管电泳技术 以常规的缓冲溶液为分离介质，进样样品为平衡的药物与受体混合物，运行过程中游离的药物与受体分离，经检测器检测形成平台峰，利用峰高可以计算游离药物的浓度，进而求得药物与受体的亲和力大小(图 7)。图7 FACE法测定药物与

31、HSA亲合力示意图: H1代表药物对照品进样分析后的峰高, H2代表药物与HSA混合物进样分析后游离药物的峰高, 两者比值 fu= H2/H1代表了药物与HAS的亲和力大小(3)质谱检测技术 应用质谱法进行药物筛选可以同时检测剩余底物量和生成产物量, 因而比光学检测技术能够提供更多的样品作用信息。如Deng等应用质谱检测技术进行了MurC酶抑制剂的筛选，方法灵敏度高、线性范围宽，与传统的比色法相比避免了大量的假阳性筛选结果。(4)电化学检测技术 膜片钳技术一般将玻璃电化学微电极尖端吸附于细胞膜，在微电极尖端的边缘与细胞膜之间形成高阻抗封接，记录通过离子通道的微小离子电流，从而研究其功能。(5)

32、 热分析检测技术 在研究药物分子与受体间相互作用时，常采用一定量的受体分子作为被滴定物，而一定浓度的药物分子作为滴定配体匀速地滴加到受体分子所处的隔热罩中，同时测量滴定过程中样品池(sample cell)和参比池(reference cell)热量差的变化，获得滴定热量差随时间的变化曲线图，结合根据单点结合模型所建立的数学表达式对该变化曲线进行非线性拟合。图图 5 等温滴定量热仪工作示意图等温滴定量热仪工作示意图(6) 核磁共振检测技术 Robert等提出将1H-NMR应用于药物筛选的方法,其主要原理在于通过滴加受体分子,根据不同受体浓度对于小分子化合物1H谱吸收峰强弱的变化,结合一定的数学

33、处理模型计算得到亲和力的大小。通过不同浓度样品与检测信号变化的关系来测定受体亲和力的大小是高通量筛选中常用的筛选形式，应用该法时一般测量6个浓度点以上样品,以便获得稳定的亲和力常数。 Microplate reader 最新的微孔板检测器具备高速，高灵敏度，通用的特点。 PerkinElmer公司的EnVision 检测器可以在36s内完成对一块1536孔板的荧光强度检测。 整合了光吸收，荧光强度，荧光偏振，时间分辨荧光，化学发光，激光等多种检测手段。EnVision (PERKINELMER)Safire (TECAN)SpectraMax M5 (Molecular Devices)(四) 数据库管理系统 1 样品库的管理功能 对进行筛选的化合物的各种理化性质进行存储管理； 对每一个新入库的化