湖南农大中药成分分析重点

1、中药成分分析一、 名词解释1、 中药成分分析：以中医药基本理论为指导，运用现代科学技术特别是运用物理、化学的理论和方法研究中药成分，以达到控制中药质量的一门学科。2、 准确度：指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度。3、 精确度：指在规定的条件下，同一均匀样品，经过多次取样测定的结果之间的接近程度。4、 检测限：指在一定条件下试样中被测物能被检出的最低浓度或最小量。5、 定量限：样品中被测物能被定量测出的最低量。6、 灵敏度：指单位浓度或单位量的待测物质引起的仪器响应值的变化7、 *杂质限量：指药物中所含杂质的最大允许量，通常用百分之几（%）或百万分之几（ppm）来表示。杂质限量=（杂

2、质最大允许量样品量）100%8、 *重金属系：指在实验条件下能与S作用显色的金色杂质，在检查时以铅为代表。（2012年5月6日湖南农大考的）9、 *总灰分：中药经粉碎后加热，高温炽灼至灰化，则其细胞组织及其内含物成为灰烬而残留，由此所得的灰分为“生理灰分”，即总灰分（2012年5月6日湖南农大考的）10、 *酸不溶性灰分：中药经高温炽灼得到的总灰分加盐酸处理，得到不溶解于盐酸的灰分11、 干燥失重：药物在规定条件下经干燥后所减少的重量，主要是水分，也包括其他挥发性物质。12、 *超临界流体：指当物质处于临界温度和临界压力以上时，则不论加多大压力，气体也不会被液化，此时既非气体，也非液体，称之为

3、超临界流体13、 分离度（R）：指相邻两组分色谱峰的保留时间之差与其峰宽均数的比值，是衡量分离效果的指标，当R1.5时认为两峰完全分开。14、 特征指纹峰：指由一系列在所有样品中均存在的色谱峰所组成的峰群，它含有已被认定的这类药材的有效成分或特殊成分15、 共轭效应：在具有多重键或共轭多重键的分子体系中，由于电子转移导致某基团的电子云密度和磁屏蔽改变的一种效应。16、 化学位移：不同质子由于在分子中所处的化学环境不一样，因而在不同的磁场下的共振的现象。17、 偶合常数：H核的偶合作用使氢谱谱线发生裂分，其裂分间的距离，用J来表示。18、 恒重：指供试品连续两次干燥或炽灼后的重量差在0.3mg以

4、下的重量，除另有规定外。（2012年5月6日湖南农大考的）19、 *药典：指是一个国家药品质量规格标准的法典，一般由国家主持编撰并由政府颁布执行。（2012年5月6日湖南农大考的）20、 特殊杂质：指在中药材种植、加工炮制、贮存过程中产生的与其中所含的化学成分有着密切的相关性的一类杂质（2012年5月6日湖南农大考的）二、 简答题1、 当采用硅胶薄层色谱法鉴别生物碱成分时，为什么常有斑点Rf值较小或斑点明显拖尾的现象？可采用哪些方法克服？答：当使用硅胶做吸附剂是，由于硅胶显弱酸性，强碱性的生物碱在硅胶色普板上能形成盐，使Rf值较小或拖尾、形成复斑等。克服办法：在硅胶吸附薄层色谱中，常用碱性系统

5、（常加入二乙胺、氨水等）或在碱性条件下（用氨蒸气饱和平衡）展开。2、 酸性染料比色法测定中药制剂中生物碱成分时，关键是什么？答：该法的关键是介质的pH。适宜的pH可使阴阳离子定量结合，如果pH偏低，虽然可以使生物碱以生物碱盐的形式存在，但染料仍以酸的形式存在；如果pH偏高，染料以阴离子的形式存在，而生物碱却以游离形式存在，两种情况均不能使阴阳离子定量结合。pH值可用磷酸盐缓冲溶液、邻苯二甲酸氢钾缓冲液、醋酸盐缓冲液等控制。2、 简述聚酰胺薄层色谱分离黄酮类化合物的原理和特点。答：聚酰胺薄层色谱主要用于分离检识汉游离酚羟基的黄酮及其苷类，一般认为是“氢键吸附”，即聚酰胺的吸附作用是通过其酰胺羰基

6、与黄酮类化合物分子上的酚羟基形成氢键缔合而产生的。由于聚酰胺对黄酮类成分的吸附能力强，需要选择极性较强的展开剂。在聚酰胺薄层中，亲脂性溶剂分离黄酮类苷元效果较好，黄酮类与相应的苷元相比较，一般苷的Rf值较相应苷元的大。4、 简述HPLC-ELSD检测人参皂苷等成分的优点。（相对不重要）答：人参皂苷等大多数三萜皂苷类成分在用蒸发光散射检测器（ELSD）检测时，系统平衡快（大约30分钟），基线相当稳定，重现性、灵敏度均较好，且通过自然对数拟合，峰面积值与进样量之间呈良好的线性关系，因而结果较准确。5、 总多糖的主要含量测定方法有哪些？答：3,5-二硝基水杨酸（DNS）比色法Somogyi-Nels

7、on法（硫酸铜-砷钼酸）苯酚-硫酸法蒽酮-硫酸法等。6、 一般取样的原则？（看看就行，有个梗概）答：取样前应进行检查和计录，凡有异常情况的包件要单独检验。同批药材中抽取检定用样品药材总包件数在100件以下的，取样5件；1001000件，按5%取样；超过1000件的，超出部分按1%取样；不足5件的，逐件取样；贵重药材，不论包件多少均逐件取样。对于大小在1cm以下的药材采用探子抽取样品，每包件至少在不同部位抽取23份样品；包件少的抽取总量不少于实验用量的3倍；包件多的，每包取样量是一般药材100-500g；粉末状药材25g，贵重药材5-10g；个件大的药材，根据实际情况抽取代表性的样品。将所取品样

8、混合在一起即为总样品对于个体较小的药材，采用“”法来平均样品个体大的药材，采用适当的方法去平均样品。平均样品的量一般不少于实验用量的3倍，即1/3供分析用，1/3供复核用，其余1/3留样保存，保存期至少一年。7、雷氏盐比色法测定生物碱成分时，需注意哪些问题？答：雷氏盐试剂室温下即易分解，故需新鲜配制，并在低温进行；反应液的浓度不能过低，注意杂质干扰；雷氏盐丙酮液吸收值随时间有变化，故应尽快测定。 8、中药制剂杂质来源的主要途径是什么？答：主要有三种途径：一是由中药材原料中带入；二是在生产制备过程中引入；三是贮存过程中受外界条件的影响而使中药制剂的理化性质改变而产生。*9、生物碱类的供试品试液的

9、制备的常用方法和定量分析的常用方法。（2012年5月6日湖南农大考的）答：供试品试液的制备方法：化学方法和色谱法（TLC、PC、HPLC、GC）。定量分析的常用方法：酸碱滴定法、分光光度法、TLC、HPLC、GC、CE等。*10、为什么要进行黄曲霉素的限量检查？黄曲霉素的测定方法有哪些？（2012年5月6日湖南农大考的）答：因为黄曲霉毒素分布范围很广，能引起人类及各种饲养动物的急性中毒死亡，还能致癌、致畸、致突变，即使每千克含几十微克的量仍有很大的毒性。因此对人和家禽的健康威胁很大。而中药材在制备、贮藏、运输的过程中很容易发生霉变，污染黄曲霉毒素。所以要进行黄曲霉毒素的限量检查。测定方法：TL

10、C、微柱筛选法、HPLC、荧光分析法和酶联免疫吸附法（ELISA）。11、 进行砷盐检查时，反应液中加入KI和氯化亚锡的目的是什么？答：碘离子将五价砷还原为三价砷。溶液中的碘离子，与反应中产生的锌离子能形成配合物，使生成砷化氢的反应不断进行。抑制锑化氢生成。氯化亚锡可在锌粒表面形成锌锡齐起去极化作用，放出氢气均匀，使产生的砷化氢气体一致，有利于砷斑的形成。三、 计算1、霍香正气水中乙醇量GC测定测定法中系统适用性试验为：用直径为0.250.18mm的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球作为载体,柱温为120150；另精密量取无水乙醇4、5、6mL，分别精密加入正丙醇5mL（作为内标准）加水稀释

11、至100mL，混匀，照气相色谱法测定，应符合下列要求：用正丙醇计算的理论塔板数应大于700；乙醇和正丙醇两峰的分离度应大于2；上述3份溶液各注射5次，所得15个校正因子的变异系数不得大于2.0%。本次试验结果：正丙醇出峰保留时间为tR=5.32min、峰宽为0.61min；乙醇出峰的保留时间是3.85min、峰宽为0.66min；所得15个校正因子的变异系数不大于1.67%。计算出理论塔板数；计算乙醇和正丙醇两峰的分离度；以上试验结果是否符合要求？答：正丙醇出峰保留时间为tR=5.32min、峰宽为0.61min；用正丙醇计算理论塔板数=16（5.32min/0.61min)2=1216.8大

12、于700；R=2（）/(0.66+0.61)=2.315大于2；所得15个校正因子的变异系数不大于1.67%。小于2.0%故以上试验结果符合要求用正丙醇计算塔板理论公式n= 16（保留时间/峰宽）2分离度计算公式R=2（tR2-tR1）/(w1+w2)理论塔板数=5.54（保留时间/半高峰宽）2有效塔板数=5.54 （调整保留时间/半高峰宽）22、 三黄片中大黄素、大黄酚的含量测定方法（HPLC）为：取本品10片，仔细刮去糖衣，精密称定重量，研细。称取相当于一片重量的细粉置于锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称重。水浴加热回流1小时，放冷，密塞，称重并补足至原量，滤过。精密吸取续滤液10m

13、l于锥形瓶中，蒸干，加1mol/L的硫酸5ml，超声5min，加氯仿10ml，水浴回流1小时。放冷，转入分液漏斗中，再用氯仿萃取两次，每次10ml。合并氯仿液，水洗至中性，分取氯仿液，加少量无水硫酸钠，振摇，取上清液水浴蒸干，残渣用甲醇溶解并定容至5ml。过0.45m滤膜，取续滤液即得供试品溶液。流动相为甲醇0.1%磷酸=8515请简述上述划线部分的操作依据。 答：仔细刮去糖衣是为了除去杂质（糖）在测定过程的干扰作用；精密称定重量是为了最后计算含量；研细是为了能充分溶解提取；甲醇用于提取大黄素和大黄酚等有效成分；精密加入为了计算浓度；加入硫酸是为了使大黄素和大黄酚成游离状体，为后步萃取做准备；

14、加氯仿回流是为了萃取出游离的大黄素和大黄酚；萃取两次是为了保证充分萃取干净；加少量的无水硫酸钠是为了吸取氯仿液中的水分；过0.45um滤膜是为了除去在供试品中肉眼看不见的颗粒防止堵塞色谱柱。*3、 易激宁颗粒中的芍药苷含量（HPLC法）测定如下：（2012年5月6日湖南农大考的）称取样品粉末约0.1g，精密称定，置于100ml容量瓶中，准确加入流动相100ml，称重，超声提取30min，称重后用流动相补足重量，过滤，精密吸取续滤液2.0ml于10ml容量瓶，流动相定容，过0.45m滤膜，取续滤液作为供试品溶液。精密吸取供试品溶液和20.0g/ml的芍药苷对照品溶液各20L进样测定。已知：供试品

15、峰面积为1620；芍药苷对照品溶液峰面积为1985；易激宁颗粒称样量为0.1012g，请解释画线部分的操作目的和计算样品中芍药苷的含量（mg芍药苷/g易激宁）。答：补足重量是为了准确计算浓度；过0.45um滤膜是为了除去溶液中微小的机械杂质以防止堵塞色谱柱。芍药苷的含量=（1620/1985）20.0g/ml（10ml/2.0ml）100ml/0.1012g=80.64mg芍药苷/g易激宁四、 填空与选择1、 中药包括中药材、中药饮片和中成药，药用功能成分分析的主要对象是中药中的活性成分、标志性化学成分和毒性成分2、 定性分析是判断中药真伪；杂志检查是判断中药所含杂质是否符合各种限量要求；定量

16、分析是判断中药质量的优劣。3、 中药成分分析的基本任务：种植采收过程中的质量控制炮制加工过程中的质量分析贮存过程中的质量考察4、 中药成分分析的主要特点在于中药成分的复杂性5、 中药成分分析的内容：样品的制备定性分析杂质检查定量分析（HPLC）结构分析原始记录和检验报告6、 常用的提取方法：溶剂提取法：浸渍法煎煮法回流提取法连续回流提取法（索氏提取器）超声波提取法水蒸气蒸馏法、超临界流体萃取法、升华法、微波法等；（2012年5月6日湖南农大考的）7、 常用的分离的方法：溶剂法沉淀法色谱法（2012年5月6日湖南农大考的）8、 生物碱与碘化铋钾生成黄至橘红色沉淀；二氢黄酮、二氢黄酮醇与四氢硼钠显

17、红色或紫红色9、 黄酮类成分：盐酸-镁粉反应：黄酮、黄酮醇、二氢黄酮和二氢黄酮醇显橙红紫红查耳酮、橙酮、儿茶素、异黄酮不显色*四氢硼钠反应：二氢黄酮和二氢黄酮醇（专属）显红紫红金色络合反应三氯化铝反应（常作为黄酮类成分的显色剂，黄绿色）锆盐-枸橼酸反应（黄绿色，鉴定3-或5-OH的存在）氨性氯化锶反应（绿色至棕色乃至黑色沉淀，邻二酚羟基）醋酸镁反应（区分二氢黄酮）色谱法吸附剂：聚酰胺槐米、黄芩、葛根、银杏叶10、 生物碱成分：常用的生物碱沉淀剂：改良的碘化铋钾（色谱显色剂）雷氏铵盐（硫氰酸铬盐，季铵型生物碱生成红色沉淀）碘-碘化钾、碘化汞钾、苦味酸、硅钨酸定量分析中比色法：酸性染料比色法（BT

18、B溴麝香草酚蓝）（甲基橙、溴甲酚紫、溴甲酚绿和溴酚蓝）异羟肟酸铁比色法（含酯键结构的）薄层色谱吸附剂：硅胶或氧化铝麻黄、黄柏、延胡索、洋金华、马钱子、乌头、苦参11、 醌类成分：酸碱性酸性：-COOH含2个以上-OH含一个-OH含2个-OH含一个-OH碱性：微弱，溶于浓硫酸，颜色发生改变，呈红至红紫色醋酸镁反应：含-OH或邻二酚羟基（帮助确定羟基的取代位置）薄层色谱吸附剂：硅胶紫草、丹参、大黄12、 薄层色谱法中最常使用的吸附剂是：硅胶、氧化铝和聚酰胺（2012年5月6日湖南农大考的）13、 定量分析中制作标准曲线的目的确定线性范围和回归方程（2012年5月6日湖南农大考的）14、 农药残留量

19、的检查中最常用的有机溶剂是：丙酮。提取方法：匀浆、捣碎法；索氏提取法；超声波提取法。纯化方法最常用的是：液-液分配色谱法。检测方法：HPLC、GC（2012年5月6日湖南农大考的）15、 砷盐的检查砷斑是出现在碘化汞试纸上（2012年5月6日湖南农大考的）16、 定性分析和定量分析主要是针对活性成分和指标性成分的分析（2012年5月6日湖南农大考的）17、 UV的原理所依附的依据的方程是：Lambert-Beer定律。（2012年5月6日湖南农大考的）18、 TLCS的原理所一副的依据的方程是：Kubelka-Munk理论。（2012年5月6日湖南农大考的）19、 不饱和度的公式：=1+N4+

20、（N3-N1）/2（N4表示4价的原子个数，N3表示3价原子个数，N1表示1价原子个数，2价的原子计算在内）。20、 HPLC中流动相的纯度应达到色谱纯；HPLC、GC的定性分析是利用保留时间，定量分析是利用色谱峰面积或峰高作为依据（2012年5月6日湖南农大考的）21、 内标物的作用：消除进样误差；天然（人工）牛黄的测定用：IR（2012年5月6日湖南农大考的）22、 薄层色谱吸附剂的活化条件：硅胶（105-110，30min），氧化铝（200，4h级；150-160，4h级）（2012年5月6日湖南农大考的）23、 AAS（原子吸收光谱法）被测试样需稀释是：无机试样是用水稀释，有机试样用甲

21、基异丁酮或石油溶剂稀释；有机固体试样处理，一般先用干式灰化法或湿式灰化法分解消化有机物，易挥发的不宜采用干式灰化法24、 皂苷类化合物的检识常用的显色剂有：浓硫酸、50%或10%硫酸乙醇溶液、三氯醋酸、磷钼酸、三氯化锑等（2012年5月6日湖南农大考的）五、 解析题1、某化合物其分子式为C3H6O2，其IR数据如下：3000cm-1、1700cm-1，其NMR数据如下：11.3（单峰，1H）、2.3（四重峰，2H）、1.2（三重峰，3H），请写出其结构式并分析其原因。（2012年5月6日湖南农大考的）解：（1）=1+3+（0-6）/2=1,无苯环存在。（2）NMR出三个峰，所以有三种不同的质子

22、存在（3）=1.2处有3H，表明有-CH3，其裂分为三个峰，说明其临近处有2个质子与其偶合。（4）=2.3处有2H，表明可能有-CH2，其裂分为四个峰，说明其临近处有3个质子与其偶合，所以应有CH3-CH2-（5）=11.2处有1H，且为单峰，又因为IR在3000cm-1与1700cm-1有吸收峰，所以有-COOH综上可得该化合物的结构式为：CH3CH2COOH.2、一个化合物的分子式为C10H12O，其NMR谱图如下所示，是推断该化合物的结构。其中：3.75ppm（s，3H）为CH3O的特征峰；=69之间的一般说明有以苯环；=56.5之间的说明一般有-CH=CH-解：（1）=1+10+（0-

23、12）/2=5，所以可能还有一个苯环和一个双键。NMR中有五组峰，说明有五种氢；（2）=6.57.5之间出峰（即A、B处），说明有一个苯环。69之间有两组峰，且都裂分为2个峰，符合n+1规则，说明其临近处各有一个H与其偶合，且苯环为对位取代（若为其他取代的话将会有4组峰出现）（3）=56.5（C处）处有出峰，说明有-CH=CH-（4）3.75ppm（s，3H）（D处）为CH3O的特征峰，说明分子中有CH3O-（5）=1.75ppm（s，3H）（E处）有出峰，裂分为2个峰，说明其临近处有1H与-CH3偶合，结合（3），可知其分子中含有CH3-CH=CH-结构综上可知其分子式为：CH3-O-苯环-

24、CH=CH-CH3。成分名性质生物碱黄酮类成分醌类成分香豆类成分木质素萜类甲戊二羟酸三萜皂苷甾体皂苷挥发性成分是否结晶多数乌头原碱为非晶体；烟碱为液体多数少数为无定型粉末苯、萘醌有结晶，蒽醌常以苷的形式存在游离的；一些呈液态多数单萜和倍半萜油状液体或低熔点固体，二萜和二倍半萜多为结晶性固体，三萜都为结晶，环烯醚萜多以苷形式存在多为无定形粉末，少为晶体大多无定形粉末大多数透明液体；少数结晶（脑）颜色一般为无色或白色黄色；二氢黄酮，二氢黄酮醇及黄烷醇无色；有颜色：黄、橙、棕红等无色或浅黄色无色无色或白色无色或白色大多数无色或淡黄色；少数有其他颜色挥发性槟榔碱、烟碱、麻黄碱小分子的苯酚、萘酚分子量小

25、的游离的一般无单萜和倍半萜有升华性个别游离的蒽醌多具分子量小的游离的少数（二氢愈创木质素）味道和气味多具苦味大多有香味单萜和倍半萜有特异性香味；苦味（苦味素）辛辣、苦味多具浓烈的特异性嗅味旋光性有些具有，左旋的有生物活性多数苷元无，成苷有，为左旋；二氢黄酮，二氢黄酮醇、黄烷醇、二氢异黄酮有成苷有成苷有大多，遇碱易异构化（生理活性与旋光度有关）大多数有有皂苷和苷元均有旋光性，且多为左旋萜类有溶解度亲水季铵类和N-O小分子和液态（麻黄碱和烟碱），羧酸、酚羟基、含内酯的可溶于碱性溶液中二氢黄酮、二氢黄酮醇、异黄酮、花色素。黄酮苷难溶于氯仿、乙醚成苷后易溶于甲乙醇和热水，难溶于苯、乙醚、氯仿等游离的能

26、溶于沸水；成苷能溶于水、甲乙醇，不溶于乙醚、苯；内酯的碱水解成苷的可溶于甲乙醇；有酚羟基的可溶于碱水中萜类成苷能溶于热水，易溶于甲乙醇，不溶于亲脂性有机溶剂可溶于水，易溶于热水、热甲乙醇，具内酯的溶于碱水，不溶丙酮、乙醚可溶于水，易溶于热水，稀醇，难溶于丙酮，不溶于石油醚、苯、乙醚不溶于水；能全部溶于高浓度乙醇，在低浓度乙醇中部分溶亲脂游离的仲铵、叔铵类游离苷元，易溶于甲乙醇、乙酸乙酯、氯仿、乙醚、稀碱水游离的溶于甲醇、丙酮、氯仿、苯等游离的易溶于甲乙醇、氯仿、乙醚游离的易溶于苯、氯仿、乙醚、丙酮、乙醇，在石油醚中溶解小溶于甲乙醇，易溶于乙醚、氯仿、乙酸乙酯、苯皂苷元（三萜皂苷的苷元专用）苷元易溶于甲乙醇、氯仿、乙醚易溶于亲脂性有机溶剂如石油醚、乙醚、二硫化碳、油脂酸碱度酸性7，4-OH7或4-OH一般-OH5-OH-COOH含2个以上-OH含一个-OH含2个-OH含一个-OH含酚羟基有微弱的酸性含酚羟基有微弱的酸性含酚羟基或羧基有微弱的酸性有（被称为酸性皂苷）含酚羟基有微弱的酸性有些有碱性胍类季铵碱脂肪胺芳杂环（吡啶）酰胺类spspsp微弱，能溶于浓硫酸、盐酸，且显色微弱的碱性，溶于浓硫酸，颜色改变，呈红至红紫川芎嗪、槟