2012018三年高考生物试题分项汇编--现代生物科技附解析

1、2016-2018三年高考生物试题分项汇编-现代生物科技（附解析）1.（2018江苏卷，10）下列关于采用胚胎工程技术实现某良种肉用牛快速繁殖的叙述，正确的是A.采取激素注射等方法对良种母牛作超数排卵处理B.体外培养发育到原肠胚期的胚胎即可进行移植C.使用免疫抑制剂以避免代孕牛对植入胚胎的排斥反应D.利用胚胎分割技术，同卵多胎较同卵双胎成功率更高【答案】A2.（2018北京卷，5）用XhoI和Sall两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段，酶切位点及酶切产物分离结果如图。以下叙述不正确的是A.如图中两种酶识别的核甘酸序列不同B.如图中酶切产物可用于构建重组DNAC泳道中是用Sall处理得到

2、的酶切产物D.图中被酶切的DNAt段是单链DNA【答案】D【解析】限制酶识别特定的脱氧核甘酸序列，不同的限制酶能识别不同的核甘酸序列，由电泳图可知XhoI和Sall两种酶分别切割时，识别的序列不同，A正确；同种限制酶切割出的DNAt段，具有相同的粘性末端，再用DNAil接酶进行连接，可以构成重组DNAB正确；Sall将DNAt段切成4段，XhoI将DNAt段切成3段，根据电泳结果可知泳道为Sall,泳道为XhoI,C正确；限制酶切割双链DNA酶切后的DNAt段仍然是双链DNAD错误。3.（2018江苏卷，22）如图为细胞融合的示意图，下列叙述正确的是A.若a细胞和b细胞是植物细胞，需先去分化再

3、诱导融合B.a细胞和b细胞之间的融合需要促融处理后才能实现C.c细胞的形成与a、b细胞膜的流动性都有关D.c细胞将同时表达a细胞和b细胞中的所有基因【答案】BC4.（2017?工苏卷.11）牛雄性胚胎中存在特异性H-Y抗原，可在牛早期胚胎培养液中添加H-Y单克隆抗体，筛选胚胎进行移植，以利用乳腺生物反应器进行生物制药。下列相关叙述正确的是A.H-Y单克隆抗体由骨髓瘤细胞分泌B.应选用原肠胚做雌雄鉴别C.鉴别后的雄性胚胎可直接做胚胎移植D.用H-Y抗原免疫母牛可获得相应抗体【答案】D【解析】单克隆抗体由杂交瘤细胞分泌，A错误；做雌雄性别鉴别应选择囊胚期的滋养层细胞，B错误；由于是利用乳腺生物反应

4、器进行生物制药，则鉴别后的雌性胚胎可直接做胚胎移植，雄性胚胎没有意义，C错误；H-Y抗原免疫母牛，使其体内产生体液免疫，产生相应的浆细胞，获得相应抗体，D正确。5.（2017?工苏卷.14）下列关于小鼠体外受精及胚胎发育的叙述，错误的是A.精子在获能液中于37C、5%CO2条件下培养的目的是使精子获能B.小鼠在特定光控周期条件下饲养，注射相关激素有促进超数排卵的作用C.分割的胚胎细胞有相同的遗传物质，因此发育成的个体没有形态学差异D.注射到囊胚腔中的胚胎干细胞可以参与个体器官的发育【答案】C【解析】精子在获能液中于37C、5%CO堤件下培养，可使精子获能，A正确；给小鼠注射促性腺激素可促进其超

5、数排卵，B正确；分割的胚胎细胞具有相同的遗传物质，但发育过程中基因突变或环境因素影响等，最终发育成的个体可能会有形态学差异，C错误；胚胎干细胞具有发育的全能性，能分化成各种组织器官，D正确。6.（2017?|匕京卷.5）为了增加菊花花色类型，研究者从其他植物中克隆出花色基因C（图1）,拟将其与质粒（图2）重组，再借助农杆菌导入菊花中。下列操作与实验目的不符的是A.用限制性核酸内切酶EcoRI和连接酶构建重组质粒B.用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，将C基因导入细胞C.在培养基中添加卡那霉素，筛选被转化的菊花细胞D.用分子杂交方法检测C基因是否整合到菊花染色体上【答案】C【解析】用限制性核酸内

6、切酶EcoRI处理目的基因和质粒，可以使目的基因两侧和质粒产生相同的黏性末端，再用连接酶把切口连起来就能构建成重组质粒，A正确；农杆菌转化法适用于双子叶植物或裸子植物，菊花属于双子叶植物，故可用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，将C基因导入细胞，B正确；质粒中只有潮霉素抗性基因，被转化的菊花细胞只对潮霉素具有抗性，在培养基中添加卡那霉素，不能筛选被转化的菊花细胞，C错误；检测目的基因是否整合到受体细胞的染色体上，可采用DN网子杂交技术，D正确。7.（2016江苏卷.9）下列有关细胞工程的叙述，正确的是A.PEG是促细胞融合剂，可直接诱导植物细胞融合B.用原生质体制备人工种子，要防止细胞破裂C.

7、骨髓瘤细胞经免疫处理，可直接获得单克隆抗体D.核移植克隆的动物，其线粒体DNAt自供卵母体【答案】D8.（2016江苏卷.11）印度沙漠猫是一种珍惜猫科动物，通过胚胎工程技术，可以让家猫代孕而繁育，主要步骤如图所示。下列相关叙述正确的是A.步骤甲、乙分别是指精子获能、胚胎分离B.诱导超数排卵所注射的激素只能作用于特定细胞C.受精卵发育成早期胚胎所需营养主要来源于营养液D.步骤甲使用的培养液和早期胚胎培养液成分基本相同【答案】B【解析】步骤甲、乙分别指受精作用、胚胎移植，A错误；诱导超数排卵所注射的激素是促性腺激素，只能作用于性腺，B正确；受精卵发育成早期胚胎所需营养主要来自受精卵，C错误；受精

8、过程使用的培养液是获能溶液或专用的受精溶液，与早期胚胎培养液有区别，D错误。9.（2017碉南卷.31）选修3:现代生物科技专题（15分）甲、乙两名同学分别以某种植物的绿色叶片和白色花瓣为材料，利用植物组织培养技术繁殖该植物。回答下列问题：（1）以该植物的绿色叶片和白色花瓣作为外植体，在一定条件下进行组织培养，均能获得试管苗，其原理是。（2）甲、乙同学在诱导愈伤组织所用的培养基中，均加入一定量的蔗糖，蔗糖水解后可得到。若要用细胞作为材料进行培养获得幼苗，该细胞应具备的条件是（填“具有完整的细胞核”“具有叶绿体”或“已转入抗性基因”）。（3）图中A、B、C所示的是不同的培养结果，该不同结果的出现

9、主要是由于培养基中两种激素用量的不同造成的，这两种激素是。A中的愈伤组织是叶肉细胞经形成的。（4）若该种植物是一种杂合体的名贵花卉，要快速获得与原植株基因型和表现型都相同的该种花卉，可用组织培养方法繁殖，在培养时，（填“能”或“不能”）采用经减数分裂得到的花粉粒作为外植体，原因是【答案】（1）绿色叶片和白色花瓣的细胞具有全能性，在一定条件下能发育成完整的植株。（2）葡萄糖、果糖具有完整的细胞核（3）细胞分裂素、生长素脱分化（4）不能对杂合体的植株来说，具体细胞的基因型相同，而花粉粒的基因型与体细胞的基因型不同。用花粉粒进行组织培养得到花卉基因型不同于原植株。（3）影响植物组织培养的两种主要激素

10、是细胞分裂素和生长素。愈伤组织是叶肉细胞经脱分化形成的。（4）由于花粉粒的基因型与体细胞的基因型不同，组织培养得到花卉基因型不同于原植株，导致不能保留亲本性状。10.（2017渐课标I卷.38）生物一一选修3:现代生物科技专题（15分）真核生物基因中通常有内含子，而原核生物基因中没有，原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA#列的机制。已知在人体中基因A（有内含子）可以表达出某种特定蛋白（简称蛋白A）。回答下列问题：（1）某同学从人的基因组文库中获得了基因A,以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白A,其原因是o（2）若用家蚕作为表达基因A的受体，在噬菌体和昆虫病毒两种载体中，不选用作为载

11、体，其原因是o（3）若要高效地获得蛋白A,可选用大肠杆菌作为受体。因为与家蚕相比，大肠杆菌具有（答出两点即可）等优点。（4）若要检测基因A是否翻译出蛋白A,可用的检测物质是（填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗体”）。（5）艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明DN强遗传物质做出了重要贡献，也可以说是基因工程的先导，如果说他们的工作为基因工程理论的建立提供了启示，那么，这一启示是o【答案】（1）基因A有内含子，在大肠杆菌中，其初始转录产物中与内含子对应的RNAff列不能被切除,无法表达出蛋白A（2）噬菌体噬菌体的宿主是细菌，而不是家蚕（3）繁殖快、容易培养（4）蛋白A的抗体（5）DN阿以从一种生物个

12、体转移到另一种生物个体【解析】（1）基因A的编码区中有内含子，在真核生物细胞内把内含子转录来的RN砌除，而原核生物细胞内基因转录后不切除，转录后直接表达，所以翻译形成的蛋白质不是蛋白A。（2）由于噬菌体是专性寄生在细菌体内的病毒，无法侵染到真核生物家蚕细胞内，所以不能用噬菌体作为运载体。而家蚕属于昆虫，故可用昆虫病毒作为运载体。（3）大肠杆菌作为受体菌具有繁殖周期短、易培养。（4）检测目的基因是否表达通常用抗原-抗体杂交技术。（5）艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明DN猥遗传物质做出了重要贡献，证明了生物的遗传物质是DNA还为基因工程理论的建立提供了启示，这一启示是DNAM以从一种生物转移到

13、另一种生物个体。11.（2017渐课标II卷.38）生物选修3:现代生物科技专题（15分）几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：（1）在进行基因工程操作时，若要从植物体中提取几丁质酶的mRNA常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料，原因是提取RNA时，提取液中需添加RNA1抑制剂，其目的是（2）以mRNM材料可以获得cDNA其原理是33）若要使目的基因在受体细胞中表达，需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞，原因是（答出两点即可）。（4）当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DN旌接酶催化形成的

14、化学键是（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是【答案】（1）嫩叶组织细胞易破碎防止RNAI解（2）在逆转录酶的作用下，以mRNAl模板按照碱基互补配对的原则可以合成cDNA（3）目的基因无复制原点；目的基因无表达所需启动子（4）磷酸二酯键（5）目的基因的转录或翻译异常12.（2017渐课标出卷.38）生物一一选修3:现代生物科技专题（15分）编码蛋白甲的DNAff列（序列甲）由AB、C、DE五个片段组成，编码蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段组成，如图1所示。回答下列问题：（1）现要通过基因工程的方法获得蛋白乙，

15、若在启动子的下游直接接上编码蛋白乙的DNAff歹U（TTCGCTTCT-CAGGAAGXGAIU所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白乙，原因是（2）某同学在用PCR技术获取DNAt段B或D的过程中，在PCR5应体系中加入了DNAt合酶、引物等，还加入了序列甲作为加入了作为合成DNA勺原料。（3）现通过基因工程方法获得了甲、乙、丙三种蛋白，要鉴定这三种蛋白是否具有刺激T淋巴细胞增殖的作用，某同学做了如下实验：将一定量的含T淋巴细胞的培养液平均分成四组，其中三组分别加入等量的蛋白甲、乙、丙，另一组作为对照，培养并定期检测T淋巴细胞浓度，结果如图2。由图2可知，当细胞浓度达到a时，添加蛋白乙

16、的培养液中T淋巴细胞浓度不再增加，此时若要使T淋巴细胞继续增殖，可采用的方法是2细胞培养过程中，培养箱中通常要维持一定的CO舔度，CO2的作用是仅根据图、图2可知，上述甲、乙、丙三种蛋白中，若缺少（填“A，“b”,“d，或"e，）片段所编码的肽段，则会降低其刺激T淋巴细胞增殖的效果。【答案】（1）编码乙的DNAff列起始端无ATG转录出的mRNAE起始密码子（2）模板dNTP（3）进行细胞传代培养维持培养液是的pHC13.（2016江苏卷.33）（9分）下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题：（1）

17、用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒，需将其转入处于态的大肠杆菌。（2）为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加,平板上长出的菌落，常用PCR£定,所用的引物组成为图2中o若BamHI酶切的DN袜端与BclI酶切的DN袜端连接，连接部位的6个碱基对序列为，对于该部位，这两种酶（填“都能”、“都不能”或“只有一种能"）切开。（4）若用Sau3AI切图1质粒最多可能获得种大小不同的DNAt段。【答案】（1）BclI和Hindin连接感受（2）四环素引物甲和引物丙（3）都

18、不能（4）7【解析】（1）选择的限制酶应在目的基因两端存在识别位点，但BamHI可能使质粒中启动子丢失，因此只能选BclI和Hindin。酶切后的载体和目的基因片段，通过DNA1接酶酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒，需将其转入处于感受态的大肠杆菌。14.（2016课标1卷.40）某一质粒载体如图所示，外源DNAif入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活（Ampr表示氨节青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因）。有人将此质粒载体用BamH酶切后，与用BamHI酶切获得的目的基因混合，加入DNAil接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌，结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转

19、化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题：（1）质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有（答出两点即可）。而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子。（2）如果用含有氨节青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因是;并且J口的细胞也是不能区分的，具原因是在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需使用含有是的固体培养基。（3）基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DN腹制所需的原料来

20、自于【答案】（1）能够自我复制、具有标记基因、具有一个至多个限制酶切割位点（答出两点即可）（2）二者均不含氨节青霉素抗性基因，在该培养基上都不能生长含有质粒载体含有插入了目的基因的重组质粒（或答含有重组质粒）二者都含氨节青霉素抗性基因，在该培养基上均能生长四环素（3）受体细胞15.（2016新课标出卷.40）图（a）中的三个DNAt段上依次表示出了EcoRI、BamHI和Sau3AI三种限制性内切酶的识别序列与切割位点，图（b）为某种表达载体示意图（载体上的EcoRI、Sau3AI的切点是唯一的）。根据基因工程的有关知识，回答下列问题：（1）经BamHI酶切割得到的目的基因可以与上述表达载体被

21、酶切后的产物连接，理由是。（2）若某人利用图（b）所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子，如图（c）所示。这三种重组子中，不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有不能表达的原因是。（3）DNA1接酶是将两个DNAt段连接起来的酶，常见的有口,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是?【答案】（1）Sau3Al两种梅切割后产生的片段具有相同的黏性末端（2）甲和丙甲中目的基因插入在启动子的上游，丙中目的基因插入在终止子的下游，两者目的基因均不能转录（3）E?coliDNA连接酶T4DNA至接酶T4DNA51接酶16.（2016天津卷.7）（12分）人血清白蛋白（HSA）具有重要的医用价值

22、，只能从血浆中制备。下图是以基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的两条途径。（1）获取HSAS因，首先需采集人的血液，提取合成总cDNA然后以cDNA模板，采用PC旺术扩增HSAS因。下图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向，请用箭头在方框内标出标出另一条引物的位置及扩增方向。（2）启动子通常具有物种及组织特异性，构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体，需要选择的启动子是A.人血细胞启动子B.水稻胚乳细胞启动子C.大肠杆菌启动子D.农杆菌启动子（3）利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中，需添加酚类物质，其目的是（4）人体合成的初始HS够肽，需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才能有活

23、性。与途径II相比，选择途径I获取rHSA的优势是（5）为证明rHSA具有医用价值，须确认rHSA与的生物学功能一致。【答案】（12分）（1）总RNA（或mRNA（2）B（3）吸引农杆菌移向水稻受体细胞，有利于目的基因成功转化（4）水稻是真核生物，具有膜系统，能对初始rHSA多肽进行高效加工（5）HAS（2）根据启动子通常具有物种及组织特异性，在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA需选择水稻胚乳细胞启动子。（3）农杆菌转化水稻受体细胞的过程中，酚类物质可以吸引农杆菌移向水稻受体细胞，有利于目的基因的转移。（4）水稻是真核生物，具有膜系统，能对初始rHSA多肽进行高效加工，而大肠杆菌是原核生物，细胞中

24、不具有膜结构的细胞器。（5）为证明rHSA具有医用价值，须确认rHSA与天然的HS胜物学功能一致。17.（2016新课标2卷.40）生物一一选修3:现代生物科技专题（15分）下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物（二倍体）的流程。回答下列问题：（1）图中A表示正常细胞核，染色体数为2n,则其性染色体的组成可为过程表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行，去核时常采用的方法。代表的过程是。（2）经过多次传代后，供体细胞中的稳定性会降低，因此，选材时必须关注传代次数。（3）若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的角度分析其原因是。（4）与克隆羊“多莉（利）”培

25、养成功一样，其他克隆动物的成功获得也证明了。【答案】（15分）（1）XX或XY显微操作（去核法）胚胎移植（2）遗传物质（3）卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的形状产生影响（4）已经分化的动物体细胞核具有全能性。（3）克隆动物的细胞核基因来自供体，因此大部分性状与供体相同，但细胞质基因来源于受体（或提供卵母细胞的个体），即卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的形状产生影响，这就决定了克隆动物的性状与供体不完全相同。（4）克隆动物的培育采用的是核移植技术，核移植技术的原理是：已经分化的动物体细胞核具有全能性。18.（2016海南卷.31）基因工程又称为DNA®组技术，回答相关

26、问题：（1）在基因工程中，获取目的基因主要有两大途径，即和从中分离。（2）利用某植物的成熟叶片为材料，同时构建cDN故库和基因组文库，两个文库相比，cDN故库中含有的基因数目比基因组文库中的少，其原因是。（3）在基因表达载体中，启动子是聚合酶识别并结合的部位。若采用原核生物作为基因表达载体的受体细胞，最常用的原核生物是。（4）将目的基因通过基因枪法导入植物细胞时，常用的携带目的基因的金属颗粒有口颗粒。【答案】（15分）（1）人工合成生物材料（每空2分，共4分，其他合理答案可酌情给分）（2）cDNA文库中只含有叶细胞已转录（或已表达）的基因，而基因组文库中含有该植物的全部基因（5分，其他合理答案

27、可酌情给分）（3）RNA（2分）大肠杆菌（或答细菌）（2分）（4）金粉鸨粉（每空1分，共2分）（3）在基因表达载体中，启动子是RNA!合酶识别并结合的部位。采用原核生物作为基因表达载体的受体细胞，由于易于培养，最常选用大肠杆菌（或细菌）。（4）将目的基因通过基因枪法导入植物细胞时，常用的携带目的基因的金属颗粒有金粉和鸨粉颗粒。19.（2016上海卷.九）回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。在图27所示的质粒PZHZ11（总长为3.6kb,1kb=1000对碱基因）中，lacZ基因编码（3-半乳糖甘酶，后者催化生成的化合物能将白色的大肠杆菌染成蓝色。68.若先用限制酶BamHI切开pZHZ11

28、然后灭活BamHBS,再加DNA1接酶进行连接，最后将连接物导入足够数量的大肠杆菌细胞中，则含3.1kb质粒的细胞颜色为；含3.6kb质粒的细胞颜色为。69.若将两端分别用限制酶BamHI和BglHI切开的单个目的基因片段置换pZHZII中0.5kb的BamHI酶切片段，形成4.9kb的重组质粒，则目的基因长度为kb。70.上述4.9kb的重组质粒有两种形式，若用BamHI和EcoRI联合酶切其中一种，只能获得1.7kb和3.2kb两种DNAt段；那么联合酶切同等长度的另一种重组质粒，则可获得kb和kb两种DNAt段。71.若将人的染色体DNAt段先导入大肠杆菌细胞中克隆并鉴定目的基因，然后再

29、将获得的目的基因转入植物细胞中表达，最后将产物的药物蛋白注入小鼠体内观察其生物功能是否发挥，那么上述过程属于。A.人类基因工程B.动物基因工程C.植物基因工程D.微生物基因工程【答案】68.白色白色和蓝色/白色或蓝色69.1.870.1.43.571.C20.（2018海南，31）甜蛋白是一种高甜度的特殊蛋白质。为了改善黄瓜的品质，科学家采用农杆菌转化法将一种甜蛋白基因成功导入黄瓜细胞，得到了转基因植株。回答下列问题：（1）用农杆菌感染时，应优先选用黄瓜_（填“受伤的”或“完好的”）叶片与含重组质粒的农杆菌共培养，选用这种叶片的理由是。（2）若在转基因黄瓜中检测到这种甜蛋白，则表明该重组质粒中

30、已转移到植物细胞中且能够表达；用该转基因黄瓜的某一植株与一株非转基因植株杂交，发现子代中含甜蛋白个体数与不含甜蛋白个体数之比为1:1,则说明甜蛋白基因已经整合到（填“核基因组”“线粒体基因组”或“叶绿体基因组”）中。（3）假设某种转基因作物因为受到病毒感染而减产，若要以该转基因作物为材料获得脱毒苗，应选用作为外植体进行组织培养。（4）通常，基因工程操作主要有4个步骤，即目的基因获取、重组表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。因此，基因工程的含义可概括为。答案（1）受伤的叶片伤口处的细胞释放出大量酚类物质，可吸引农杆菌移向这些细胞（2）甜蛋白基因核基因组（3）茎尖（4）按

31、照人们的愿望进行设计，并通过体外重组和转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出符合人们需要的新生物类型【解析】（1）用农杆菌感染时，应优先选用黄瓜受伤的叶片与含重组质粒的农杆菌共培养，理由是叶片伤口处的细胞释放出大量酚类物质，可吸引农杆菌移向这些细胞。（2）若在转基因黄瓜中检测到这种甜蛋白，则表明该重组质粒中甜蛋白基因已转移到植物细胞中且能够表达；用该转基因黄瓜的某一植株与一株非转基因植株杂交，发现子代中含甜蛋白个体数与不含甜蛋白个体数之比为1:1,则说明甜蛋白基因已经整合到核基因组中。（3）假设某种转基因作物因为受到病毒感染而减产，若要以该转基因作物为材料获得脱毒苗，应选用茎尖作为外植体进

32、行组织培养。（4）通常，基因工程操作主要有4个步骤，即目的基因获取、重组表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。因此，基因工程的含义可概括为按照人们的愿望进行设计，并通过体外重组和转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出符合人们需要的新生物类型。21.（2018全国II卷，38）某种荧光蛋白（GFP在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光，这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白（L1）基因连接在GF睡因的5'末端，获得了L1-GFP融合基因（简称为甲），并将其插入质粒P0,构建了真核表达载体P1,其部分结构和酶切位点的示意图如下，图中E

33、1E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。回答下列问题：（1）据图推断，该团队在将甲插入质粒P0时，使用了两种限制酶，这两种酶是。使用这两种酶进行酶切是为了保证也是为了保证（2）将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后，若在该细胞中观察到了绿色荧光，则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了和过程。（3）为了获得含有甲的牛，该团队需要做的工作包括：将能够产生绿色荧光细胞的移入牛的中、体外培养、胚胎移植等。（4）为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中，某同学用PC昉法进行鉴定。在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的（填“mRNA”总RNA或“核DNA）彳为PCR莫板。【答案】（1）E1和E4甲的完整甲与载体正

34、确连接（2）转录翻译（3）细胞核去核卵母细胞（4）核DNA（2）构建的真核表达载体P1中含有GF睡因，而GF睡因的表达产物“某种荧光蛋白（GFP”在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光。若在导入P1的牛皮肤细胞中观察到了绿色荧光，则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了表达，基因的表达过程包括转录和翻译。（3）若要获得含有甲的牛，可采用核移植技术，即将能够产生绿色荧光细胞的细胞核移入牛的去核卵母细胞中获得重组细胞，并将该重组细胞在体外培养成重组胚胎，再经过胚胎移植等获得含有甲的牛。（4）PC谭多聚酶链式反应的缩写，是一种在生物体外复制特定DNAt断的核酸合成技术。若利用PC昉法检测甲是否存在于克隆牛的

35、不同组织细胞中，则应分别以该牛不同组织细胞中的核DNA乍为PCR莫板。22.（2018江苏卷，32）为生产具有特定性能的-淀粉酶，研究人员从某种海洋细菌中克隆了-淀粉酶基因（1656个碱基对），利用基因工程大量制备琢-淀粉酶，实验流程见下图。请回答下列问题：（1）利用PCRK术扩增”淀粉酶基因前，需先获得细菌的。为了便于扩增的DNAt段与表达载体连接，需在引物的端加上限制性酶切位点，且常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点，主要目的是。（3）进行扩增时，反应的温度和时间需根据具体情况进行设定，下列选项中的设定与引物有关，的设定与扩增片段的长度有关。（填序号）变性温度退火温度延伸温度变性时间

36、退火时间延伸时间（4）下图表示筛选获得的工程菌中编码-淀粉酶的mRNA勺部分碱基序列：图中虚线框内mRNAt段包含个密码子，如虚线框后的序列未知，预测虚线框后的第一个密码子最多有一种。（5）获得工程菌表达的-淀粉酶后，为探究影响酶活性的因素，以浓度为1%勺可溶性淀粉为底物测定酶活性，结果如下：缓冲液50mmol/LNa2HPO4-KH2PO450mmol/LTris-HCl50mmol/LGly-NaOHpH6.06.57.07.57.58.08.59.09.09.510.010.5酶相对活性%25.440.249.863.270.195.599.585.368.163.741.520.8根据

37、上述实验结果，初步判断该“淀粉酶活性最高的条件为。【答案】（1）基因组DNA（2）5'使DNAt段能定向插入表达载体，减少自连（3）（4）813（5）pH为8.5,缓冲液为50mmol/LTris-HCl【解析】（1）%-淀粉酶基因来自于海洋细菌，因此为了利用PC敬术扩增-淀粉酶基因，必须先获得细菌的基因组DNA（3）进行扩增时，退火温度的设定与引物有关，延伸时间的设定与扩增片段的长度有关。（4）根据题意分析，虚线框内mRNAt段内含有24个碱基，每3个碱基构成一个密码子，因此包含24+3=8个密码子；构成mRNA勺碱基有4种，若虚线框后的序列未知，预测虚线框后的第一个密码子最多有4X4-3=13种。（5）根据表格数据分析可知，在pH为8.5,缓冲液为50mmol/LTris-HCl的条件下，口-淀粉酶相对活性为99.5%活性最高。23.（2018全国I卷，38）回答下