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文档简介
1、专题专题1 传统发酵技术的应用传统发酵技术的应用1.制作果酒制作果酒酵母菌酵母菌2.制作果醋制作果醋醋酸菌醋酸菌菌种菌种名称名称生物学生物学分类分类代谢代谢类型类型适宜适宜温度温度繁殖方繁殖方式式对氧的需求对氧的需求酵母菌酵母菌真核生真核生物物异养异养兼性厌氧兼性厌氧最适最适2020出芽生出芽生殖殖前期需氧,前期需氧,后期不需氧后期不需氧醋酸菌醋酸菌 原核生原核生物物异养异养需氧需氧30303535二分裂二分裂一直需氧一直需氧三、繁殖方式和代谢类型三、繁殖方式和代谢类型(4.05.84.05.8)(5.46.35.46.3)C6H12O6+6O2+6H2O 6CO2+12H2O+能量能量酶酶C
2、6H12O6 2C2H5OH+2 CO2+酶酶酵母菌酵母菌制酒制酒酶酶 C6H12O6 +2O22CH3COOH+ 2CO2 酶酶酶酶2CH3CHO+O2 2CH3COOH(醋酸)(醋酸)醋酸菌醋酸菌制醋制醋 选择新鲜的葡萄,榨汁前先将葡萄进行冲洗,选择新鲜的葡萄,榨汁前先将葡萄进行冲洗,除去枝梗。除去枝梗。、取葡萄、取葡萄500g500g,去除枝梗和腐烂的叶子。,去除枝梗和腐烂的叶子。、用清水冲洗葡萄、用清水冲洗葡萄1 12 2次除去污物。次除去污物。 讨论:讨论:你认为应该先冲洗葡萄还是先除去枝梗?你认为应该先冲洗葡萄还是先除去枝梗?为什么?为什么? 应该先冲洗,然后再除去枝梗,以避免除应
3、该先冲洗,然后再除去枝梗,以避免除去枝梗时引起葡萄破损,增加被杂菌污染的机会去枝梗时引起葡萄破损,增加被杂菌污染的机会课本问题答案对正实验案例实验案例制作葡萄酒和葡萄醋制作葡萄酒和葡萄醋建议将实验安排在秋季的9月或10月进行。在这段时间内进行实验,有如下优点:(1)正值收获季节,葡萄的价格便宜,品种多样;(2)此时葡萄上的酵母菌数量多且生活力强,发酵酿酒的效果好;(3)温度适宜,发酵现象非常明显。 实验的具体操作步骤如下。实验的具体操作步骤如下。1.对发酵瓶、纱布、榨汁机、盛葡萄汁的器皿等实验用具进行清洗并消毒对发酵瓶、纱布、榨汁机、盛葡萄汁的器皿等实验用具进行清洗并消毒。先用温水反复冲洗几次
4、。先用温水反复冲洗几次,再用体积分数为再用体积分数为75%的酒精擦拭消毒,晾干待的酒精擦拭消毒,晾干待用。用。2. 取葡萄取葡萄500 g,去除枝梗和腐烂的子粒。,去除枝梗和腐烂的子粒。3. 用清水冲洗葡萄用清水冲洗葡萄12遍除去污物,注意不要反复多次冲洗。遍除去污物,注意不要反复多次冲洗。4. 用榨汁机榨取葡萄汁后,将其装入发酵瓶中(装置参见教材图用榨汁机榨取葡萄汁后,将其装入发酵瓶中(装置参见教材图1-4b),),或将葡萄打成浆后,用洁净的纱布过滤至发酵瓶中,盖好瓶盖。如果没或将葡萄打成浆后,用洁净的纱布过滤至发酵瓶中,盖好瓶盖。如果没有合适的发酵装置,可以用有合适的发酵装置,可以用500
5、 mL的塑料瓶替代,但注入的果汁量不要的塑料瓶替代,但注入的果汁量不要超过塑料瓶总体积的超过塑料瓶总体积的2/3。5. 将发酵瓶置于适宜的温度下发酵。将发酵瓶置于适宜的温度下发酵。6. 由于发酵旺盛期由于发酵旺盛期CO2的产量非常大,因此需要及时排气,防止发酵瓶爆的产量非常大,因此需要及时排气,防止发酵瓶爆裂。如果使用简易的发酵装置,如瓶子(最好选用塑料瓶),每天要拧裂。如果使用简易的发酵装置,如瓶子(最好选用塑料瓶),每天要拧松瓶盖松瓶盖24次,进行排气。次,进行排气。7. 10 d以后,可以开始进行取样检验工作。例如,可以检验酒味、酒精的以后,可以开始进行取样检验工作。例如,可以检验酒味、
6、酒精的含量、进行酵母菌的镜检等工作。含量、进行酵母菌的镜检等工作。8. 当果酒制成以后,可以在发酵液中加入醋酸菌或醋曲,然后将装置转当果酒制成以后,可以在发酵液中加入醋酸菌或醋曲,然后将装置转移至移至3035 的条件下发酵,适时向发酵液中充气。如果找不到醋酸菌的条件下发酵,适时向发酵液中充气。如果找不到醋酸菌菌种或醋曲,可尝试自然接种,但效果不是很好。如果没有充气装置,菌种或醋曲,可尝试自然接种,但效果不是很好。如果没有充气装置,可以将瓶盖打开,在瓶口盖上纱布,以减少空气中尘土等的污染。可以将瓶盖打开,在瓶口盖上纱布,以减少空气中尘土等的污染。课题成果评价课题成果评价(一)果酒的制作是否成功发
7、酵后取样,通过嗅味和品尝进行初步鉴定。此外,还可用显微镜观察酵母菌,并用重铬酸钾检重铬酸钾检验酒精的存在。如果实验结果不理想,请学生分析失败原因,然后重新制作。(二)果醋的制作是否成功首先通过观察菌膜的形成、嗅味和品尝进行初步鉴定,再通过检测和比较醋酸发酵前后的pH作进一步的鉴定。此外,还可以通过在显微镜下观察发酵液中是否有醋酸菌,并统计其数量作进一步鉴定。(一)旁栏思考题(一)旁栏思考题1.你认为应该先冲洗葡萄还是先除去枝梗?为什么?你认为应该先冲洗葡萄还是先除去枝梗?为什么?答:应该先冲洗,然后再除去枝梗,以避免除去枝梗时引起葡萄破答:应该先冲洗,然后再除去枝梗,以避免除去枝梗时引起葡萄破
8、损,增加被杂菌污染的机会。损,增加被杂菌污染的机会。2.你认为应该从哪些方面防止发酵液被污染?你认为应该从哪些方面防止发酵液被污染?提示:需要从发酵制作的过程进行全面的考虑。例如,榨汁机、发提示:需要从发酵制作的过程进行全面的考虑。例如,榨汁机、发酵装置要清洗干净;每次排气时只需拧松瓶盖、不要完全揭开瓶盖酵装置要清洗干净;每次排气时只需拧松瓶盖、不要完全揭开瓶盖等。等。3.制葡萄酒时,为什么要将温度控制在制葡萄酒时,为什么要将温度控制在1825 ?制葡萄醋时,为?制葡萄醋时,为什么要将温度控制在什么要将温度控制在3035 ?答:温度是酵母菌生长和发酵的重要条件。答:温度是酵母菌生长和发酵的重要
9、条件。20 左右最适合酵母菌左右最适合酵母菌繁殖。因此需要将温度控制在其最适温度范围内。而醋酸菌是嗜温繁殖。因此需要将温度控制在其最适温度范围内。而醋酸菌是嗜温菌,最适生长温度为菌,最适生长温度为3035 ,因此要将温度控制在,因此要将温度控制在3035 。4.制葡萄醋时,为什么要适时通过充气口充气?制葡萄醋时,为什么要适时通过充气口充气?答:醋酸菌是好氧菌,在将酒精变为醋酸时需要氧的参与,因此要答:醋酸菌是好氧菌,在将酒精变为醋酸时需要氧的参与,因此要适时向发酵液中充气。适时向发酵液中充气。(二)资料发酵装置的设计讨论题(二)资料发酵装置的设计讨论题请分析此装置中的充气口、排气口和出料口分别
10、有哪些作请分析此装置中的充气口、排气口和出料口分别有哪些作用。为什么排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接用。为什么排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接?结合果酒、果醋的制作原理,你认为应该如何使用这个?结合果酒、果醋的制作原理,你认为应该如何使用这个发酵装置?发酵装置?答:充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的;排答:充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的;排气口是在酒精发酵时用来排出气口是在酒精发酵时用来排出CO2的;出料口是用来取样的;出料口是用来取样的。排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接,其目的。排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接,其目的是防止空气中微生物的污
11、染,其作用类似巴斯德的鹅颈的是防止空气中微生物的污染,其作用类似巴斯德的鹅颈瓶。使用该装置制酒时,应该关闭充气口;制醋时,应将瓶。使用该装置制酒时,应该关闭充气口;制醋时,应将充气口连接气泵,输入氧气。充气口连接气泵,输入氧气。(三)练习(三)练习2.提示:大规模生产时需要进行更为全面周详的考虑,如提示:大规模生产时需要进行更为全面周详的考虑,如原料的来源与选择、菌种的培育与选择、发酵的设备、发原料的来源与选择、菌种的培育与选择、发酵的设备、发酵条件的自动化控制,以及如何严格控制杂菌污染;等等酵条件的自动化控制,以及如何严格控制杂菌污染;等等。此外,无论是葡萄酒或葡萄醋,实验时所检测的发酵液。
12、此外,无论是葡萄酒或葡萄醋,实验时所检测的发酵液,并非商品意义上的产品。在实际生产中还需沉淀过滤、,并非商品意义上的产品。在实际生产中还需沉淀过滤、灭菌装瓶等获得成品酒或醋。葡萄酒还需在一定设施和条灭菌装瓶等获得成品酒或醋。葡萄酒还需在一定设施和条件下(如橡木桶和地窖)进行后续发酵,以获得特定的风件下(如橡木桶和地窖)进行后续发酵,以获得特定的风味和色泽。味和色泽。3.提示:需考虑厂房、设备投资、原材料采购、工人人数提示:需考虑厂房、设备投资、原材料采购、工人人数及工资、产品种类、生产周期、销售渠道、利润等问题。及工资、产品种类、生产周期、销售渠道、利润等问题。专题专题1 传统发酵技术的应用传
13、统发酵技术的应用一、一、 基础知识基础知识 据史料记载,早在公元据史料记载,早在公元5世纪魏代古籍中,就有腐世纪魏代古籍中,就有腐乳生产工艺的记载,到了明乳生产工艺的记载,到了明代我国就大量加工腐乳,而代我国就大量加工腐乳,而今腐乳已成长为具现代化工今腐乳已成长为具现代化工艺的发酵食品。艺的发酵食品。 小资料小资料1. 你能利用所学的知识,解释豆腐长白毛是怎么一你能利用所学的知识,解释豆腐长白毛是怎么一回事吗?回事吗?想一想2. 王致和为什么要撒许多盐,将长毛的豆腐腌起来?王致和为什么要撒许多盐,将长毛的豆腐腌起来?腐乳制作的原理腐乳制作的原理1、参与腐乳制作的主要微生物、参与腐乳制作的主要微
14、生物主要作用青霉青霉曲霉曲霉酵母酵母毛霉毛霉1 1、关于毛霉:关于毛霉:(1 1)毛霉是一种)毛霉是一种丝状真菌丝状真菌。 繁殖方式为繁殖方式为孢子生殖孢子生殖, 新陈代谢类型为新陈代谢类型为异养需氧异养需氧型。型。(2 2)毛霉在腐乳制作中的作用:)毛霉在腐乳制作中的作用:在豆腐的发酵过程中,毛霉等微生物产生的在豆腐的发酵过程中,毛霉等微生物产生的蛋白酶蛋白酶能将豆腐的蛋白质分解成能将豆腐的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸小分子的肽和氨基酸,脂肪酶脂肪酶可将脂肪水解为可将脂肪水解为甘油和脂肪酸甘油和脂肪酸在多种微生物的协同作在多种微生物的协同作用下,普通的豆腐转变成我们爱吃的腐乳用下,普通的豆
15、腐转变成我们爱吃的腐乳毛霉菌落形态毛霉菌落形态总状毛霉菌落形态总状毛霉菌落形态思思考考题题1. 1. 我们平常吃的豆腐,哪种适合用来做腐乳?我们平常吃的豆腐,哪种适合用来做腐乳?2. 2. 吃腐乳时,你会发现腐乳外部有一层致密的吃腐乳时,你会发现腐乳外部有一层致密的“皮皮”。这层。这层“皮皮”是怎样形成的呢?它对人体有害是怎样形成的呢?它对人体有害吗?它的作用是什么?吗?它的作用是什么?2、微生物的作用机理、微生物的作用机理 酿造腐乳的主要工序是将豆腐进行酿造腐乳的主要工序是将豆腐进行前期发前期发酵酵和和后期发酵后期发酵。 前期发酵过程中,毛霉在豆腐(毛坯)上前期发酵过程中,毛霉在豆腐(毛坯)
16、上生长。毛霉生长大约生长。毛霉生长大约5天后使白坯变成毛坯。天后使白坯变成毛坯。豆腐表面被一层菌膜包住,形成腐乳的豆腐表面被一层菌膜包住,形成腐乳的“体体”。同时毛霉分解以蛋白质为主的蛋白酶,将豆腐同时毛霉分解以蛋白质为主的蛋白酶,将豆腐所含有的蛋白质分解为各种氨基酸。所含有的蛋白质分解为各种氨基酸。 在后期发酵过程中,酶与微生物协同在后期发酵过程中,酶与微生物协同作用,通过研制并配入各种辅料(红曲、作用,通过研制并配入各种辅料(红曲、面曲、酒酿),是蛋白酶作用缓慢,促进面曲、酒酿),是蛋白酶作用缓慢,促进其他生化作用,生成腐乳的香气。其他生化作用,生成腐乳的香气。二二 、 实验设计实验设计让
17、豆腐上长让豆腐上长出毛霉出毛霉加盐腌制加盐腌制加卤汤装瓶加卤汤装瓶密封腌制密封腌制温度保持在温度保持在15-18;豆腐水分;豆腐水分控制在控制在70%左右。左右。逐层加盐,随层数的加高而增逐层加盐,随层数的加高而增加盐量,腌制大约加盐量,腌制大约8天左右。天左右。卤汤由酒及各种香辛料配制而成。卤汤由酒及各种香辛料配制而成。封瓶时瓶口通过酒精灯火焰防封瓶时瓶口通过酒精灯火焰防止瓶口污染。止瓶口污染。腐乳制作的具体操作步骤:腐乳制作的具体操作步骤:1. 将豆腐切成将豆腐切成3cm3cm1cm的若干块;的若干块;2. 将豆腐块平放在铺有干粽叶的盘内,粽叶可以提将豆腐块平放在铺有干粽叶的盘内,粽叶可以
18、提供菌种,并能起到保温的作用,每块豆腐等距离供菌种,并能起到保温的作用,每块豆腐等距离排放,周围留有一定距离,豆腐上面再铺上干净排放,周围留有一定距离,豆腐上面再铺上干净的粽叶;的粽叶;3. 将平盘放入温度保持在将平盘放入温度保持在15-18的地方;的地方;4. 当毛霉生长旺盛,并呈淡黄色时,去除包当毛霉生长旺盛,并呈淡黄色时,去除包裹平盘的保鲜膜以及扑在上面的粽叶,使裹平盘的保鲜膜以及扑在上面的粽叶,使豆腐块的热量和水分能够迅速散失,同时豆腐块的热量和水分能够迅速散失,同时散去霉味;散去霉味;5. 当豆腐凉透后,将豆腐块间连接在一起的当豆腐凉透后,将豆腐块间连接在一起的菌丝拉断,并整齐排列在
19、容器内,准备腌菌丝拉断,并整齐排列在容器内,准备腌制;制;6. 长满毛霉的毛坯与盐的质量分数比为长满毛霉的毛坯与盐的质量分数比为5: 1,分层加盐,在瓶口表面盐要铺厚些,大约分层加盐,在瓶口表面盐要铺厚些,大约腌制腌制8天;天;7. 将黄酒、米酒和糖,按口味不同而配将黄酒、米酒和糖,按口味不同而配以各种香辛料(如胡椒、花椒、八角以各种香辛料(如胡椒、花椒、八角茴香、桂皮、姜、辣椒等)混合制成茴香、桂皮、姜、辣椒等)混合制成卤汤;卤汤;8. 将广口玻璃瓶洗净,用高压锅在将广口玻璃瓶洗净,用高压锅在100蒸气灭菌,将腐乳咸坯摆入瓶中,加蒸气灭菌,将腐乳咸坯摆入瓶中,加入卤汤和辅料,密封放置,常温六
20、个入卤汤和辅料,密封放置,常温六个月可以成熟。月可以成熟。三三 、 操作提示操作提示1、控制好材料的用量、控制好材料的用量a. 腌制时注意控制盐的用量腌制时注意控制盐的用量 盐的浓度过低不足以抑制微生物生长,可能导致豆腐腐败变质;浓度过高会影响腐乳的口味。b.卤汤中酒的含量应控制在卤汤中酒的含量应控制在12%左右左右 酒精含量过高将会延长腐乳成熟的时间;含量过低不足以抑制微生物生长,可能导致豆腐腐败。2、防止杂菌污染、防止杂菌污染用来腌制腐乳的玻璃瓶,洗刷干净后要用沸水用来腌制腐乳的玻璃瓶,洗刷干净后要用沸水消毒。消毒。装瓶时,操作要迅速小心。装瓶时,操作要迅速小心。封瓶时,最好将瓶口通过酒精
21、灯的火焰,防止封瓶时,最好将瓶口通过酒精灯的火焰,防止瓶口被污染。瓶口被污染。四、四、 结果分析与评价结果分析与评价A 是否完成腐乳的制作是否完成腐乳的制作a) 能够合理的选择实验材料与用具;能够合理的选择实验材料与用具;b) 前期发酵后豆腐的表面长有菌丝,后期发酵制前期发酵后豆腐的表面长有菌丝,后期发酵制 作基本没有杂菌的污染。作基本没有杂菌的污染。B 腐乳质量的评价腐乳质量的评价成功的腐乳应具有以下特点:成功的腐乳应具有以下特点: 色泽基本一致、味道鲜美、咸淡适口、无异色泽基本一致、味道鲜美、咸淡适口、无异味、块形整齐、厚薄均匀、质地细腻、无杂质。味、块形整齐、厚薄均匀、质地细腻、无杂质。
22、C 能否总结不同条件对腐乳风能否总结不同条件对腐乳风味和质量的影响味和质量的影响 从盐、酒的用量、发酵的温度、发酵时间从盐、酒的用量、发酵的温度、发酵时间的长短、以及香辛料等因素中的某一因素说明的长短、以及香辛料等因素中的某一因素说明其对腐乳风味或质量的影响。其对腐乳风味或质量的影响。制作制作原理原理实验实验设计设计主要微生物主要微生物根霉根霉酵母酵母结果分析与评价结果分析与评价毛霉毛霉蛋白酶蛋白酶蛋白质蛋白质小分子肽和氨基酸小分子肽和氨基酸腐腐乳乳的的制制作作曲霉曲霉机理机理脂肪酶脂肪酶脂肪脂肪甘油和脂肪酸甘油和脂肪酸让豆腐上让豆腐上长出毛霉长出毛霉加盐加盐腌制腌制加卤汤加卤汤装瓶装瓶密封密
23、封腌制腌制操作提示操作提示控制盐酒的用量控制盐酒的用量防止杂菌污染防止杂菌污染课堂小结课堂小结课本问题答案对正(一)旁栏思考题(一)旁栏思考题1.你能利用所学的生物学知识,解释豆腐长白毛是怎么一回事?你能利用所学的生物学知识,解释豆腐长白毛是怎么一回事?答:豆腐上生长的白毛是毛霉的白色菌丝。严格地说是直立菌丝,答:豆腐上生长的白毛是毛霉的白色菌丝。严格地说是直立菌丝,在豆腐中还有匍匐菌丝。在豆腐中还有匍匐菌丝。2.王致和为什么要撒许多盐,将长毛的豆腐腌起来?王致和为什么要撒许多盐,将长毛的豆腐腌起来?答:盐能防止杂菌污染,避免豆腐腐败。答:盐能防止杂菌污染,避免豆腐腐败。3.我们平常吃的豆腐,
24、哪种适合用来做腐乳?我们平常吃的豆腐,哪种适合用来做腐乳?答:含水量为答:含水量为70%左右的豆腐适于作腐乳。用含水量过高的豆腐制左右的豆腐适于作腐乳。用含水量过高的豆腐制腐乳,不易成形。腐乳,不易成形。4.吃腐乳时,你会发现腐乳外部有一层致密的吃腐乳时,你会发现腐乳外部有一层致密的“皮皮”。这层。这层“皮皮”是怎样形成的呢?它对人体有害吗?它的作用是什么?是怎样形成的呢?它对人体有害吗?它的作用是什么?答:答:“皮皮”是前期发酵时在豆腐表面上生长的菌丝(匍匐菌丝),是前期发酵时在豆腐表面上生长的菌丝(匍匐菌丝),它能形成腐乳的它能形成腐乳的“体体”,使腐乳成形。,使腐乳成形。“皮皮”对人体无
25、害。对人体无害。(二)练习1.答:越接近瓶口,杂菌污染的可能性越大,因此要随着豆腐层的加高增加盐的用量,在接近瓶口的表面,盐要铺厚一些,以有效防止杂菌污染。专题专题1:1:传统发酵技术的应用传统发酵技术的应用 乳酸菌乳酸菌是是发酵糖类发酵糖类主要产物为主要产物为乳酸乳酸的一类的一类细菌的总称。细菌的总称。 属于属于原核生物原核生物 乳酸菌乳酸菌种类多,分布广种类多,分布广,常见乳酸菌有乳,常见乳酸菌有乳酸链球菌和酸链球菌和乳酸杆菌乳酸杆菌(用于制酸奶)。(用于制酸奶)。乳酸链球菌(球状)乳酸链球菌(球状)乳酸杆菌(杆状)乳酸杆菌(杆状)分布:分布:在自然界分布在自然界分布广泛广泛,空气、土壤、
26、,空气、土壤、植物体表、人或动物肠道内部都有植物体表、人或动物肠道内部都有繁殖:繁殖:以二分裂方式进行繁殖(无性生殖)以二分裂方式进行繁殖(无性生殖)代谢类型:代谢类型:异养异养厌氧型厌氧型C6H12O6 2C3H6O3+能量能量酶酶乳酸菌耐盐,最适乳酸菌耐盐,最适pH=5,为发酵中的先锋队,为发酵中的先锋队为什么含有抗生素的牛奶不能发酵为酸奶?为什么含有抗生素的牛奶不能发酵为酸奶? 牛奶发酵为酸奶主要依靠乳酸菌的发酵牛奶发酵为酸奶主要依靠乳酸菌的发酵作用,而作用,而抗生素能够杀死或抑制乳酸菌抗生素能够杀死或抑制乳酸菌。二、亚硝酸盐二、亚硝酸盐 自然界中,亚硝酸盐自然界中,亚硝酸盐分布广泛分布
27、广泛,蔬菜、咸菜、,蔬菜、咸菜、豆粉中均含有。豆粉中均含有。 亚硝酸盐为亚硝酸盐为白色粉末白色粉末,外观与食盐相似,有,外观与食盐相似,有咸味,易溶于水,可作咸味,易溶于水,可作食品添加剂食品添加剂。 亚硝酸盐为亚硝酸盐为强氧化剂强氧化剂,能够把血液中携带氧的,能够把血液中携带氧的低铁血红蛋白转变为高铁血红蛋白,从而导致缺低铁血红蛋白转变为高铁血红蛋白,从而导致缺氧性中毒症状。氧性中毒症状。 膳食中的亚硝酸盐膳食中的亚硝酸盐一般不会危害人体健康一般不会危害人体健康,但,但是,当人体摄入的亚硝酸盐总量达到是,当人体摄入的亚硝酸盐总量达到0.30.5g时,时,会会引起中毒引起中毒,当摄入总量达到,
28、当摄入总量达到3g时,会时,会引起死亡引起死亡。 膳食中的膳食中的绝大部分绝大部分亚硝酸盐亚硝酸盐随尿排出随尿排出,只有在,只有在特定的条件下才会转变成致癌物特定的条件下才会转变成致癌物亚硝胺亚硝胺,亚,亚硝胺对动物还具有致畸和致突变作用(亚硝酸盐硝胺对动物还具有致畸和致突变作用(亚硝酸盐本身不是致癌物质)。本身不是致癌物质)。 亚硝酸盐在亚硝酸盐在pH=3,温度适宜和一定微生物的,温度适宜和一定微生物的作用下转变成致癌物质亚硝胺,因此,霉变的食作用下转变成致癌物质亚硝胺,因此,霉变的食品亚硝胺可增至数十倍至数百倍。品亚硝胺可增至数十倍至数百倍。 我国卫生标准规定:亚硝酸盐的残留量我国卫生标准
29、规定:亚硝酸盐的残留量 在在肉制品肉制品中不得超过中不得超过30mg/kg, 酱菜酱菜中不超过中不超过20mg/kg, 而而婴儿奶粉婴儿奶粉中不得超过中不得超过2mg/kg。选泡菜坛预处理新鲜蔬菜 配置盐水装坛发酵成品泡菜测定亚硝酸盐含量检查方法:坛口向上,检查方法:坛口向上,压入水中,看坛内壁有压入水中,看坛内壁有无渗水现象。无渗水现象。无裂纹、无砂眼无裂纹、无砂眼坛沿深、盖子坛沿深、盖子吻合好吻合好火火候候好好蔬菜处理蔬菜处理 将鲜菜将鲜菜修整、洗涤、阳光下晾晒修整、洗涤、阳光下晾晒,到菜表皮,到菜表皮萎焉时收下,切分成条状或片状。萎焉时收下,切分成条状或片状。配制盐水配制盐水 清水与盐按
30、4:1的比例配制好后煮沸冷却煮沸冷却。盐的作用:调味,抑制微生物生长,所以盐含量盐的作用:调味,抑制微生物生长,所以盐含量过低会造成细菌污染。过低会造成细菌污染。煮沸的目的:杀菌煮沸的目的:杀菌冷却是为了不影响乳酸菌的生命活动冷却是为了不影响乳酸菌的生命活动。装坛发酵装坛发酵坛沿注满水是为了保证坛内乳酸菌的发酵所需的无坛沿注满水是为了保证坛内乳酸菌的发酵所需的无氧环境。氧环境。腌制条件腌制条件 温度不能过高温度不能过高 食盐含量不能过低食盐含量不能过低 腌制时间不能过短腌制时间不能过短细菌污染大量繁殖后,细菌污染大量繁殖后,亚硝酸盐含量增加亚硝酸盐含量增加腌制过程中,亚硝酸盐含量先增多,后减少
31、。腌制过程中,亚硝酸盐含量先增多,后减少。泡菜发酵的阶段泡菜发酵的阶段 泡菜在发酵期间,由于乳酸菌的发酵作用,发泡菜在发酵期间,由于乳酸菌的发酵作用,发酵产物乳酸不断累积,因此可以根据微生物的酵产物乳酸不断累积,因此可以根据微生物的活动情况和乳酸积累量,将泡菜发酵过程分为活动情况和乳酸积累量,将泡菜发酵过程分为三个阶段。三个阶段。特点:还有一点点氧气,微生物(大肠杆菌,酵特点:还有一点点氧气,微生物(大肠杆菌,酵母菌)发酵,产生代谢产物,母菌)发酵,产生代谢产物,特点特点:乳酸菌逐渐占据优势,其他发酵微生物受乳酸菌逐渐占据优势,其他发酵微生物受到抑制,乳酸积累增多到抑制,乳酸积累增多此阶段泡菜
32、酸度过高、风味不协调。此阶段泡菜酸度过高、风味不协调。特点:乳酸含量过高,抑制乳酸菌活动,乳酸特点:乳酸含量过高,抑制乳酸菌活动,乳酸菌减少。菌减少。 避光保存避光保存氢氧化铝乳液氢氧化铝乳液氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液制备样品制备样品样品处理液的制备样品处理液的制备增加亚硝酸盐的增加亚硝酸盐的溶解度溶解度中和乳酸中和乳酸吸附杂质,脱色,吸附杂质,脱色,净化作用净化作用比色比色样品即滤液加入比色管样品即滤液加入比色管显色反应显色反应:先加 ,后加 比色比色:显色后与标准显色液对比,找出颜色:显色后与标准显色液对比,找出颜色最相近的记录对应亚硝酸盐含量最相近的记录对应亚硝酸盐含量测定反应原理总结酸化
33、酸化:重氮化重氮化:酸酸显色显色:重氮盐+ 比色:样品和标准比色液对比,比色:样品和标准比色液对比,估算估算亚硝酸盐含量亚硝酸盐含量玫瑰红色玫瑰红色基本基本知识知识实验实验设计设计乳酸菌发酵乳酸菌发酵定义定义分类分类分布分布亚硝酸盐亚硝酸盐操作提示操作提示泡菜坛选择泡菜坛选择腌制条件腌制条件泡泡菜菜的的制制作作及及亚亚硝硝盐盐检检测测发酵原理发酵原理乳酸杆菌乳酸杆菌 乳酸链球菌乳酸链球菌葡萄糖葡萄糖乳酸乳酸国家标准国家标准危害危害泡菜制作泡菜制作亚硝酸盐含量测定亚硝酸盐含量测定时间、温度、食盐用量、微生物时间、温度、食盐用量、微生物测定亚硝酸盐含量的操作测定亚硝酸盐含量的操作结果分析与评价结果
34、分析与评价课堂小结课堂小结酵母菌,酵母菌,真菌,兼真菌,兼性厌氧性厌氧醋酸菌,醋酸菌,细菌,好细菌,好氧菌氧菌毛霉,真毛霉,真菌,好氧菌,好氧乳酸菌,细乳酸菌,细菌,厌氧菌菌,厌氧菌酵母菌的酵母菌的无氧呼吸无氧呼吸产生酒精产生酒精1825 1825 ,无氧无氧重铬酸钾重铬酸钾与其反应与其反应呈灰绿色呈灰绿色醋酸菌的醋酸菌的有氧呼吸有氧呼吸产生醋酸产生醋酸30353035,通,通入氧气入氧气品尝、品尝、pHpH试纸试纸检测检测毛霉产生毛霉产生蛋白酶和蛋白酶和脂肪酶脂肪酶15151818接接种,酒精含种,酒精含量控制在量控制在1212左右左右乳酸菌无乳酸菌无氧呼吸产氧呼吸产生乳酸生乳酸常温,无常温
35、,无氧条件氧条件pHpH检测,亚检测,亚硝酸盐的检硝酸盐的检测方法测方法 某学生把甘蓝切丝后制作泡菜,为了探究甘蓝在不某学生把甘蓝切丝后制作泡菜,为了探究甘蓝在不同的温度下经过同的温度下经过3天发酵后所生成的乳酸量,在第天发酵后所生成的乳酸量,在第4天检天检测的实验结果如表:测的实验结果如表: (1)分析资料,你可以得出什么结论分析资料,你可以得出什么结论?(2)在泡菜制作时,乳酸含量大致在在泡菜制作时,乳酸含量大致在0. .8左右时风味最左右时风味最好,此时维生素好,此时维生素C的保存率也较高,结合以上材料,你的保存率也较高,结合以上材料,你在制作泡菜时应该注意什么在制作泡菜时应该注意什么?
36、练习题练习题(1)分析资料,你可以得出什么结论分析资料,你可以得出什么结论? 从表中数据分析可得知,甘蓝在从表中数据分析可得知,甘蓝在31时所生时所生成的乳酸含量最多,低于或者高于这个温度所生成的乳酸含量最多,低于或者高于这个温度所生成的乳酸量都比较少一些。成的乳酸量都比较少一些。(2)在泡菜制作时,乳酸含量大致在在泡菜制作时,乳酸含量大致在0.8左右时风左右时风味最好,此时维生素味最好,此时维生素C的保存率也较高,结合以上的保存率也较高,结合以上材料,你在制作泡菜时应该注意什么材料,你在制作泡菜时应该注意什么?注意把温度控制在注意把温度控制在16左右为宜左右为宜2001年年1月月4日日(封坛
37、前)(封坛前)2001年年1月月8日日2001年年1月月12日日2001年年1月月15日日2001年年1月月19日日0.15 0.600.200.100.101号坛号坛2号坛号坛0.15 0.200.100.050.053号坛号坛0.15 0.800.600.200.20课本问题答案对正课题成果评价课题成果评价(一)泡菜腌制的质量如何可以根据泡菜的色泽和风味进行初步的评定,还可以在显微镜下观察乳酸菌形态,比较不同时期泡菜坛中乳酸菌的含量。(二)亚硝酸盐含量的测定配制的亚硝酸盐标准使用液与样品液显色后,目测比色效果如何,是否与标准液的浓度相吻合。如果不吻合,还应在已知浓度范围内,改变浓度梯度,进
38、一步配制标准使用液。(三)是否进行了及时细致的观察与记录在实验进行过程中,应及时对泡菜中亚硝酸盐含量进行鉴定,比较不同时期亚硝酸盐含量的变化及其对泡菜质量的影响。(一)旁栏思考题1.为什么含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶?答:酸奶的制作依靠的是乳酸菌的发酵作用。抗生素能够杀死或抑制乳酸菌的生长,因此含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶。2.为什么日常生活中要多吃新鲜蔬菜,不吃存放时间过长、变质的蔬菜?答:有些蔬菜,如小白菜和萝卜等,含有丰富的硝酸盐。当这些蔬菜放置过久发生变质(发黄、腐烂)或者煮熟后存放太久时,蔬菜中的硝酸盐会被微生物还原成亚硝酸盐,危害人体健康。3.为什么泡菜坛内有时会长一层白膜?你
39、认为这层白膜是怎么形成的?答:形成白膜是由于产膜酵母的繁殖。酵母菌是兼性厌氧微生物,泡菜发酵液营养丰富,其表面氧气含量也很丰富,适合酵母菌繁殖。(二)练习2.答:果酒的制作主要利用的是酵母菌的酒精发酵,果醋的制作利用的是醋酸菌将酒精转变为醋酸的代谢,腐乳的制作利用的主要是毛霉分泌的蛋白酶等酶类,泡菜的制作利用的是乳酸菌的乳酸发酵。传统发酵技术都巧妙地利用了天然菌种,都为特定的菌种提供了良好的生存条件,最终的发酵产物不是单一的组分,而是成分复杂的混合物。划分标准划分标准培养基种类培养基种类特点特点用途用途物理性质物理性质化学成分化学成分天然培养基天然培养基合成培养基合成培养基用途用途鉴别培养基鉴
40、别培养基培养基的种类培养基的种类不加凝固剂不加凝固剂加凝固剂,如琼脂加凝固剂,如琼脂工业生产工业生产观察微生物的运动、观察微生物的运动、分类鉴定分类鉴定微生物分离、鉴定、微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌活菌计数、保藏菌种种含化学成分不明确的天然物含化学成分不明确的天然物质质工业生产工业生产培养基成分明确培养基成分明确分类、鉴定分类、鉴定在培养基中加入某种化学物在培养基中加入某种化学物质质, ,以抑制不需要的微生物以抑制不需要的微生物的生长的生长, ,促进所需要的微生促进所需要的微生物的生长物的生长培养、分离出特培养、分离出特定微生物定微生物在培养基中加入某种指示剂在培养基中加入某种指示剂或化
41、学药品或化学药品, ,用以鉴别不同用以鉴别不同种类的微生物种类的微生物鉴别不同种类微鉴别不同种类微生物生物选择培养基选择培养基液体培养基液体培养基半固体培养基半固体培养基固体培养基固体培养基课本问题答案对正(一)旁栏思考题(一)旁栏思考题1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?其他外来微生物污染外,还有什么目的?答:无菌技术还能有效避免操作者自身被微答:无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。生物感染。2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。灭菌。如
42、果需要,请选择合适的方法。(1) 培养细菌用的培养基与培养皿培养细菌用的培养基与培养皿(2) 玻棒、试管、烧瓶和吸管玻棒、试管、烧瓶和吸管(3) 实验操作者的双手实验操作者的双手答:(答:(1)、()、(2)需要灭菌;()需要灭菌;(3)需要消毒)需要消毒。(二)倒平板操作的讨论(二)倒平板操作的讨论1.培养基灭菌后,需要冷却到培养基灭菌后,需要冷却到50 左右时,才能用来倒平板。左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度?你用什么办法来估计培养基的温度?提示:可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温提示:可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就
43、可以进行倒平板了。度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?答:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。答:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置?平板冷凝后,为什么要将平板倒置?答:平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面答:平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造
44、成污染。染。4.在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?答:空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生答:空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生,因此最好不要用这个平板培养微生物。,因此最好不要用这个平板培养微生物。(三)平板划线操作的讨论(三)平板划线操作的讨论1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么?
45、线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么?答:操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生答:操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物;每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后物污染培养物;每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐渐减少,以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环,能及种的数目逐渐减少,以便得到菌落。划
46、线结束后灼烧接种环,能及时杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。时杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。2.在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线?在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线?答:以免接种环温度太高,杀死菌种。答:以免接种环温度太高,杀死菌种。3.在作第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的在作第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线?末端开始划线?答:划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一答:划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始,能使细菌的数目随着
47、划线次数的增加而逐步减次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。(四)涂布平板操作的讨论涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求,想一想,第2步应如何进行无菌操作?提示:应从操作的各个细节保证“无菌”。例如,酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围;等等。(五)练习1.提示:可以从微生物生长需要哪些条件的角度来思考。例如,微生物的生长需要水、空气、适宜的温度,食品保存可以通过保持干燥、真空的条件,以及冷藏等方法来阻止微生物的生长
48、。2.提示:可以从这三种培养技术的原理、操作步骤等方面分别进行总结归纳。例如,这三种培养技术都需要为培养物提供充足的营养,但无土栽培技术的操作并不需要保证无菌的条件,而其他两种技术都要求严格的无菌条件。3.提示:这是一道开放性的问题,答案并不惟一,重点在于鼓励学生积极参与,从不同的角度思考问题。例如,正是由于证明了微生物不是自发产生的,微生物学才可能发展成为一门独立的学科;巴斯德实验中用到的加热灭菌的方法导致了有效的灭菌方法的出现,而这一灭菌原理也适用于食品的保存等。允许允许特定种类特定种类的微生物生长,同时的微生物生长,同时抑制或阻止抑制或阻止其他种类其他种类微生物生长的培养基,叫做微生物生
49、长的培养基,叫做选择培养基选择培养基尿素尿素尿素尿素以尿素为以尿素为唯一氮源唯一氮源的培养基的培养基牛肉膏牛肉膏蛋白胨蛋白胨培养基培养基 是是分离分离尿素尿素细菌细菌判断该判断该培养基培养基有无选有无选择性择性实验组实验组对照组对照组培养基类型培养基类型是否是否接种接种 目的目的 结果结果只生长尿只生长尿素细菌素细菌生长多种生长多种微生物微生物是是在设计实验时,一定在设计实验时,一定要涂布至少要涂布至少3 3个平板,作为重复组,才能增强实验的说服力个平板,作为重复组,才能增强实验的说服力与准确性与准确性。在分析实验结果时,。在分析实验结果时,一定要考虑所设置的重复一定要考虑所设置的重复组的结果
50、是否一致,结果不一致,意味着操作有误,需要组的结果是否一致,结果不一致,意味着操作有误,需要重新实验重新实验。计算公式:计算公式:每克样品中的菌株数每克样品中的菌株数 =(CV)M某同学在稀释倍数为106 的培养基中测得平板上菌落数的平均数为234,那么每克样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1ml) ( )A. 2.34108B. 2.34109C. 234D. 23.4 B(三)设置对照(三)设置对照判断培养基中是否有杂菌污染:判断培养基中是否有杂菌污染:将未接种的培养基同时进行培养。将未接种的培养基同时进行培养。判断选择培养基是否具有筛选作用:判断选择培养基是否具有筛选作用
51、:完全培养基(营养成分齐全)接种后培养完全培养基(营养成分齐全)接种后培养观察菌落数目。观察菌落数目。主要目的是排除实验组中非测试因素对实验主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。结果的影响,提高实验结果的可信度。从肥沃、酸碱度接近中性的湿润土壤中取样。先从肥沃、酸碱度接近中性的湿润土壤中取样。先铲去表层土铲去表层土3 cm3 cm左右,再取样,将样品装入事先左右,再取样,将样品装入事先准备好的信封中。准备好的信封中。取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。 由于初次实验,对于稀释的范围没有把握,因此选
52、由于初次实验,对于稀释的范围没有把握,因此选择了一个较为宽泛的范围:择了一个较为宽泛的范围:稀释倍数为稀释倍数为103107。 准备准备牛肉膏蛋白胨培养基牛肉膏蛋白胨培养基和和选择培养基。选择培养基。每个稀释每个稀释度下需要度下需要3个选择培养基,个选择培养基,1个牛肉膏蛋白胨培养基。还个牛肉膏蛋白胨培养基。还需要需要8个灭菌试管和个灭菌试管和1个灭菌移液管个灭菌移液管 。 将稀释相同倍数的菌液,在牛肉膏蛋白胨培养基上将稀释相同倍数的菌液,在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显生长的菌落数目应明显多于多于选择培养基上的数目,因此,选择培养基上的数目,因此,牛肉膏蛋白胨培养基可以作为对照,用
53、来判断选择培养牛肉膏蛋白胨培养基可以作为对照,用来判断选择培养基是否起到了基是否起到了选择选择作用。作用。问题:问题:为什么分离不同的微生物要采用不同的稀为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度?测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分释度?测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量,选用的稀释范围相同吗?解尿素的细菌的数量,选用的稀释范围相同吗?实验时要实验时要对培养皿作对培养皿作好标记。注好标记。注明培养基类明培养基类型、培养时型、培养时间、稀释度、间、稀释度、培养物等。培养物等。1 1、取土用的小铁铲的盛土样的信封在使用前都需要灭菌。、取土用的小铁铲的盛土样的信封在使用前都需要灭
54、菌。2 2、应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入锥、应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶中,塞好棉塞。形瓶中,塞好棉塞。3 3、在稀释土壤溶液的过程中,每一步都要在火焰旁操作。、在稀释土壤溶液的过程中,每一步都要在火焰旁操作。注明培养基种类、培养日期、平板培养样品注明培养基种类、培养日期、平板培养样品的稀释度等。的稀释度等。 三、三、课本问题答案对正课题成果评价课题成果评价(一)培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出菌落对照的培养皿在培养过程中没有菌落生长,说明培养基没有被杂菌污染。牛肉膏培养基的菌落数目明显大于选择培养基的数目,说明选择培养基已筛选出一些菌落
55、。(二)样品的稀释操作是否成功如果得到了2个或2个以上菌落数目在30300的平板,则说明稀释操作比较成功,并能够进行菌落的计数。(三)重复组的结果是否一致如果学生选取的是同一种土样,统计的结果应该接近。如果结果相差太远,教师需要引导学生一起分析产生差异的原因。(一)旁栏思考题1.想一想,如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数?答:统计某一稀释度下平板上的菌落数,最好能统计3个平板,计算出平板菌落数的平均值,然后按课本旁栏的公式进行计算。2.为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度?测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量,选用的稀释范围相同吗?答:这是因为土壤中各类微生物的
56、数量(单位:株/kg)是不同的,例如在干旱土壤中的上层样本中:好氧及兼性厌氧细菌数约为2 185万,放线菌数约为477万,霉菌数约为23.1万。因此,为获得不同类型的微生物,就需要按不同的稀释度进行分离,同时还应当有针对性地提供选择培养的条件。(二)练习2.提示:反刍动物的瘤胃中含有大量的微生物,其中也包括分解尿素的微生物。由于瘤胃中的微生物多为厌氧菌,接触空气后会死亡,因此分离其中能分解尿素的微生物除了需要准备选择培养基外,还应参照厌氧菌的培养方法进行实验设计。纤维素:棉花棉花是自然是自然界中纤维素界中纤维素含量最高的含量最高的天然产物;天然产物;纤维素是地球上含量最丰富的纤维素是地球上含量
57、最丰富的多糖类多糖类物质,植物质,植物每年产生的纤维素超过物每年产生的纤维素超过7070亿吨;分布植物的亿吨;分布植物的根、茎、叶中;根、茎、叶中;1 1、在草食性动物等的消化道内,也、在草食性动物等的消化道内,也共生有分解纤维素共生有分解纤维素的微生物的微生物,其原理也是产生纤维素酶而分解纤维素,其原理也是产生纤维素酶而分解纤维素,而人没有分解纤维素的能力。而人没有分解纤维素的能力。2 2、农作物秸秆农作物秸秆 等富等富含大量的纤维素,被利用的机会很少、效率低;含大量的纤维素,被利用的机会很少、效率低; 纤维素生物燃料:纤维素生物燃料:最有希望替代石油能源最有希望替代石油能源 科学家正致力于
58、研究,怎样将科学家正致力于研究,怎样将农业废弃物、木材及生长更为迅农业废弃物、木材及生长更为迅速的草本植物,速的草本植物,转化为种类繁多转化为种类繁多的生物燃料的生物燃料(甚至是航空燃油)。(甚至是航空燃油)。一、基础知识一、基础知识纤维素酶纤维素酶纤维二糖纤维二糖C C1 1酶、酶、CxCx酶酶葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶葡萄糖葡萄糖纤维素纤维素一、基础知识一、基础知识 在在2支支20mL的试管中,分别放入的试管中,分别放入16cm的滤纸条,再分别加入的滤纸条,再分别加入pH为为4.8、物质的量、物质的量浓度为浓度为0.1mol/L的的醋酸醋酸-醋酸钠缓冲液醋酸钠缓冲液10mL、11mL。在加入。在
59、加入10mL缓冲液的试管中加入缓冲液的试管中加入1mL纤维素酶(纤维素酶(7080U/mL)。将二支试管)。将二支试管固定在固定在50mL的锥形瓶中,在摇床上以的锥形瓶中,在摇床上以140r/min的转速振荡反应的转速振荡反应1h,观察结果。,观察结果。1U表示表示1个酶活力单位,是指在温度为个酶活力单位,是指在温度为25,其他反应条件,其他反应条件,如如pH等,均为最适的情况下,在等,均为最适的情况下,在1min内转化内转化1mmol的底物所的底物所需的酶量。需的酶量。底物:酶所作用和催化的化合物。底物:酶所作用和催化的化合物。 在一支试管中添加纤维素酶,在一支试管中添加纤维素酶,另一支试管
60、不添加纤维素酶;另一支试管不添加纤维素酶;思考思考1实验分析:实验分析:P27的小的小实验是如何构成对照的?实验是如何构成对照的?滤滤纸纸崩崩溃溃法法(2 2)纤维素分解菌的筛选)纤维素分解菌的筛选1、筛选纤维素分解菌的方法、筛选纤维素分解菌的方法_。该方法可以通过该方法可以通过_反应直接筛选。反应直接筛选。刚果红染色法刚果红染色法颜色颜色2、其原理是:刚果红可以与纤维素形成、其原理是:刚果红可以与纤维素形成_,当纤维素被,当纤维素被_分解后,分解后,红色复合物无法形成,出现以红色复合物无法形成,出现以_为中心的为中心的_,可以通过,可以通过_ 来筛选纤维素分解菌。来筛选纤维素分解菌。红色复合
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