圆二色性光谱及其应用_第1页
圆二色性光谱及其应用_第2页
圆二色性光谱及其应用_第3页
圆二色性光谱及其应用_第4页
圆二色性光谱及其应用_第5页
已阅读5页,还剩3页未读 继续免费阅读

下载本文档

版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领

文档简介

1、圆二色性光谱及其应用 (Circular Dichroism,CD)光学活性分子对左、右圆偏光的吸收率的差值1、自然光 · 光具有波、粒二象性,是横电磁波。只有横波才有偏振现象: 光矢量的振动方向与光的传播方向垂直, 在垂直于光传播方向的平面内, 有不同的振动方向。· 电场矢量E和磁场矢量H互相垂直、位相相同。 · 由于感光作用都是E 引起的,因而,将E 作为光矢量。 · 振动面:E 与光传播方向组成的平面。从统计规律上说,自然光的光振动:· 在垂直于光速的平面上遍布所有方向,· 沿各方向振动的光矢量呈对称分布,· 相应光矢

2、量的振幅(光强度)相等。· 超高压短弧氙灯: 在高压纯净氙气中放电发光。(1) 高亮度的点光源; (2)日光色。色温接近6000K;(3)在可见光区连续光谱;(4)高显色性,显色指数95;(5)在整个寿命期内维持光色特性;(6)高电弧稳定性;(7)热重启能力;(8)启动后即能达到接近最大光输出;(9)电弧光斑小、易聚光。2、光的偏振双折射现象: 一束光射入各向异性晶体后有两束折射光。 尼科耳棱镜。 在生物样品中,肌肉纤维、骨骼和牙齿等具有各向异性,淀粉粒、染色体和纺锤体等具有双折射性,因此被用于组织细胞的化学研究。名称 折射定律 折射率 传播方向 寻常光 (o光) 遵守 对

3、于晶体一切方向都具有相同的折射率 在入射面内 非常光 (e光) 不遵守 折射率随方向而变化 不一定在入射面内 o光和e光:频率相同、振动方向相互垂直、平面偏振光 光的吸收和圆二色性(circular dichroism, CD)· 化合物在正常情况下,处于低能的基态,电子占据所有的成键轨道(、n轨道)。如果电子吸收了外界的能量,它就从基态跃迁到激发态能级。· 如果所有的跃迁仅在基态的最低振动能级和第一激发态之间,吸收光谱将是很狭窄而不连续的谱线。· 由于分子的价电子跃迁总伴随着振动和转动能级的跃迁,所以,紫外分光光度计测定物质的吸收光谱,虽然有一最大吸收峰值,但都

4、是具有一定波长宽度并相对平滑的曲线。应用氨基酸的圆二色性 可见光区:各种氨基酸都没有光吸收。 紫外光区:只有芳香族色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸有吸收。 氨基酸分子内的紫外生色基团:吲哚基、酚羟基、苯基、二硫键、咪唑基和羧基等。肽的圆二色谱· 活性肽构象与其生理功能的关系· 肽的构象也是蛋白质构象的一种模型。· 肽的圆二色性为研究肽在溶液中的构象提供了重要信息。· Far-UV (250-170nm) Secondary Structure: -helix, -sheet, -turn, random Tertiary Structure Class: all

5、-, +, /, all-I, all-II · Near-UV (320-250nm): aromatic side chain· Near-UV Near-infrared (300-1000nm): colored proteins芳香氨基酸残基及二硫键处于不对称微环境时,在近紫外区表现出CD信号· 苯丙氨酸( phenylalanine, Phe):255、261和268nm附近;· 酪氨酸( tyrosine, Tyr) :277nm左右;· 色氨酸( tryptophan, Trp) : 279、284和291nm附近;·

6、 二硫键的变化反映在整个近紫外区。 Far UV CD spectra of poly-L-LysMain CD features of protein 2ndary structures - band (nm) + band (nm) -helix 222208 192 -sheet 216195 -turn 220-230 (weak)180-190 (strong) 205 polypro II helix 190 210-230 weak Random coil 200 2123、估算蛋白质二级结构含量仅适合a含量较高的蛋白质!未知结构的蛋白的CD信号 将测得的CD曲线与标准曲线拟合。xa+ xb + xc = 1.0 qt = xaqa + xbqb + xcqc 改变xa、xb和xc,使qt与样本曲线最佳拟合(最小二乘法,least squares minimization ) CD signal of a protein depends on its 2ndary structure磁圆二色谱( Magnetic Circular Dichr

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

评论

0/150

提交评论