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文档简介
1、理和方法。了解糖发酵的原理及在肠道细菌鉴定中的重要作用。掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。学习微生物接菌技术。二、基本原理1、淀粉水解试验 微生物不能直接利用淀粉,必须靠自身产生的胞外淀粉酶将大分子淀粉分解成糊精、双糖和单糖才能进入细胞内,细菌是否能产生淀粉酶可通过观察细菌菌落周围的淀粉物质是否被水解来证实,淀粉遇碘液会产生蓝色,被细菌水解淀粉的区域,用碘则呈褐色。二、基本原理2、明胶水解试验 微生物不能直接利用明胶这蛋白质,必须靠自身产生的胞外明胶酶将大分子蛋白质水解成蛋白胨或氨基酸才能进入细胞内,细菌能否产生明胶酶可通过明胶穿刺培养来证实,在微生物的明胶酶作用下,明胶失去凝固性,呈液化状
2、态。二、基本原理3、糖发酵试验 糖发酵试验是常用的鉴别微生物的生化反应,在肠道细菌的鉴定中尤为重要。大肠菌群能在370C培养下,利用乳糖产酸、产气。当产酸时,溴甲酚紫指示剂可由紫色pH6.8变为黄色pH5.2)。当产气时,可通过倒置小倒管内的气泡来判断。图 糖类发酵试验 试管/每组(6人)乳糖发酵培养液 3支试管/每组(6人)葡萄糖发酵培养液 3支试管/每组(6人)2、试剂:碘液3、仪器或其他用具:培养箱、水浴锅、接种环、接种针、酒精灯、无菌培养血等。别有无淀粉水解圈2、明胶水解试验取五支明胶试管培养基 用接种针分别穿刺接入大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、普通变形杆菌,另一支不接菌为空白对照管贴好标签 200C培养3-5d 观察明胶液化情况4、葡萄糖发酵试验取三支葡萄糖蛋白胨培养基 分别接入大肠杆菌、普通变形杆菌,另一支不接菌为空白对照管 贴好标签 370C培养24小时 观察产酸、产气情况操作要点:注意无菌操作,勿染杂菌。接好菌的
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