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文档简介

1、专题5检测(A)(时间:60分钟,满分:100分)一、选择题(每小题2分,共40分。在每小题给出的四个选项中,只有一项是符合题目要求的)I1.下列属于提取生物大分子基本思路的是()A.利用空间结构的不同B.利用分子质量的不同C.利用物理和化学性质的不同D.利用组成元素的不同答案:CI2.下列有关蛋白质和DNA勺提取和分离的说法,正确的是()A.可用蒸储水涨破细胞的方法从羊成熟红细胞中提取DNA蛋白质B.提取DNA寸,可用不同浓度的NaCl溶液反复溶解以析出蛋白质C.透析法分离蛋白质的依据是大分子蛋白质不能通过半透膜D.用玻璃棒快速搅拌有利于提取DNA解析:哺乳动物的成熟的红细胞没有细胞核,不能

2、提取到DNA不同浓度的NaCl溶液反复溶解可去除杂质,在NaCl溶液的物质的量浓度为0.14mol/L时,DNA溶解度最小;用玻璃棒快速搅拌容易使DNA断开,不利于DNA的提取。答案:CI3.下列叙述错误的是()A.改变NaCl溶液的浓度只能使DNA溶解而不能使其析出B.在沸水浴中,DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色C.用电泳法可分离带电性质、分子大小和形状不同的蛋白质D.用透析法可去除蛋白质样品中的小分子物质解析:当NaCl溶液的物质的量浓度为0.14mol/L时可以析出DNA答案:AC4.在以鸡血为材料对DNAS行粗提取的实验中,若需进一步提取杂质较少的DNA,可以依据的原理是()A.在物质的量

3、浓度为0.14mol/L的NaCl溶液中DNA的溶解度最小B.DNA遇二苯胺在沸水浴的条件下会显蓝色C.DNA不溶于酒精而细胞中的一些物质易溶于酒精D.质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液具有抗凝血作用解析:DNAfi提取原理有DNA在物质的量浓度为0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最小和DNA溶于体积分数为95%勺冷7W精,进一步提取杂质较少的DNA的原理为后者。B项为DNA鉴定的原理。D项中柠檬酸钠的作用是防止血液凝固。答案:C15.在DNA的粗提取过程中,先后两次向烧杯加入蒸储水的作用分别是()A.稀释血液;冲洗样品B.使血细胞破裂;降低NaCl浓度使DNAW出C.使血细胞破裂;

4、增大DNA解量D.使血细胞破裂;提取含杂质较少的DNA解析:第一次加入蒸储水的作用是使血细胞过度吸水而破裂,使细胞内核物质释放。第二次加入适量蒸储水,是为了将NaCl溶液的物质的量浓度降低到0.14mol/L,使DNA因溶解度达到最小而析出。答案:BI6.下列符合PC或应条彳的是()稳定的缓冲液环境DNA莫板引物四种脱氧核甘酸TaqDNA聚合酶解旋酶限制性内切酶温控设备A.B.C.D.解析:PC或应应模拟生物细胞内DNA复制的条件,只是无须解旋酶(可热变性),也不需要基因工程的工具酶(限制性内切酶)。答案:DC7.已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子,其分子大小、所带电荷的性质和数

5、量情况如下图所示。下列有关该样品中蛋白质的分离的叙述,正确的是()+和对分子康氏丙,乙,5甲*II占I.口电荷A.将样品装入透析袋中透析12h,若分子乙保留在袋内,则分子丙也保留在袋内B.若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质,则分子甲移动速度最快C.若将样品以2000r/min的速度离心10min,分子戊存在于沉淀中,则分子甲也存在于沉淀中D.若用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离木品中的蛋白质分子,则分子甲和分子戊形成的电泳带相距最远解析:分子乙留在透析袋内,说明其相对分子质量比较大,分子丙比分子乙相对分子质量大,所以分子丙也留在袋内;分子甲的相对分子质量最小,因能进入凝胶内部通道而导致移动速度慢;分

6、子戊比分子甲的相对分子质量大,分子甲可能不存在于沉淀物中;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中,电泳迁移率完全取决于分子的大小,相对分子质量相差越大,形成的电泳带相距越远。答案:AL8.下列关于凝胶色谱法的原理及操作的说法,错误的是()A.是利用凝胶把分子大小不同的物质分离开的一种方法B.在洗脱过程中,大分子不能进入凝胶内部而最先流出,而小分子可以进入凝胶内部而流速缓慢,最后流出C.凝胶内部有很微细的多孔网状结构,其孔隙大小与被分离的物质分子的大小无相应关系D.一般情况下,凝胶对要分离的物质没有吸附作用,因此所有要分离的物质都应该被洗脱出来解析:凝胶色谱法是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法,凝

7、胶是由多糖类化合物构成的,是一些微小的多孔球体,相对分子质量小的蛋白质可以进入凝胶内部,路程较长,移动速度慢,而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部,路程较短,移动速度快,因此在洗脱过程中相对分子质量较大的蛋白质先被分离。不同的凝胶,其立体网状结构不同,孔隙大小不同,因此可分离的分子大小也不同。凝胶一般对分离的物质无吸附作用,所有要分离的物质都应该被洗脱出来,这是凝胶色谱法与一般层析法的不同。答案:CI9.下列关于红细胞的洗涤过程的叙述,正确的是()A.低速长时间离心,如500r/min,12min,以保证达到很好的分离效果B.离心后用胶头吸管吸出下层透明的红色血浆C.将下层暗红色的红细胞

8、液倒入烧杯,再加入五倍体积的蒸储水D.直至上清液中没有颜色,表明红细胞已洗涤干净解析:红细胞洗涤过程中,应低速短时间离心,以避免白细胞、淋巴细胞等一同沉淀,影响血红蛋白的提纯;离心后血浆在上层,并呈现黄色;洗涤红细胞时应用生理盐水而不用蒸储水,否则,将导致红细胞破裂影响实验结果。答案:DI10.下列操作中,对DNA的提取量影响较大的是()使鸡血细胞在蒸储水中充分破裂,释放出DNA等核物质搅拌时,要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动在析出DNA占稠物时,要缓缓加蒸储水,直至溶液中黏稠物不再增多在用酒精沉淀DNA时,要使用冷酒精,甚至再将混合液放入冰箱中冷却A.B.C.D.解析:可充分释放出细胞中的DNA

9、分子,使进入滤液中的DNA量尽量多;是让DNA充分沉淀,保证DNA的量,的道理同。所述的操作可以保证DNA分子的完整性,但不影响提取量。除了影响DNA勺提取量外,使用塑料器皿也可以减少DNA在操作中的损失。答案:CI11.下列各项中,哪项不是电泳使样品中各分子分离的原因?()A.带电性质差异B.分子的大小C.分子的形状D.分子的变性温度解析:电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程,带电性质不同、分子的大小和形状不同都会影响带电粒子在电场中的迁移速度,但迁移速度与分子变性温度无关。答案:DI12.下列关于DNAm合酶催化合成DNA子链的说法,正确的是()A.DNA聚合酶是以DNW模板,使D

10、NA子链从5端延伸到3端的一种酶B.TaqDNA聚合酶必须在每次高温变性处理后再添加C.DNA聚合酶能特异性地复制整个DNA的全部序列D.TaqDNA聚合酶是从深海生态系统中发现的解析:在PCRT增DN后子的过程中,各种组分要一次性加入;DNA聚合酶不能从头开始催化合成DNA,需要引物,所以DNA聚合酶不能催化复制整个DNA的全部序列;TaqDNA聚合酶是从美国黄石国家公园的一个热泉中发现的Taq细菌中分离得到的。答案:AI13.PCR-般要经过三十多次循环,从第二次循环开始,上一次循环的产物也作为模板参与反应。由引物I延伸而成的DNA单链作模板时将()A.仍与引物I结合进行DNA子链的延伸B

11、.无须与引物结合,在酶的作用下从头合成子链C.同时与引物I和引物H结合进行子链延伸D.与引物H结合进行DNA子链的延伸解析:PCRT增中,从第二次循环开始,由引物I延伸而成的DNA单链作模板时将与引物n结合进行DNA?链的延伸;由引物H延伸而成的DNA单链作模板时将与引物I结合进行DNA子链的延伸。答案:DI14.多聚酶链式反应(PCR技术)是体外酶促合成特异DNA段的一种方法,由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA导以迅速扩增,其简要过程如下图所示。下列关于PCR技术的叙述,错误的是()KA样肪,一.口双链分正*-1=1循拜!以单悌为成子代DNA-A.P

12、CR技术是在实验室中以少量DNA制备大量DNA勺技术B.反应中新合成的DN取可以作为下一轮反应的模板C.PCR技术以核糖核甘酸为原料,DNA分子以指数方式扩增D.应用PCR术与探针杂交技术可以检测基因突变解析:PCR术是人工合成DNA勺方法,原料是脱氧核甘酸,而不是核糖核甘酸。答案:CC15.PC或应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性结果的产生。防止污染的办法不包括()A.将样品的处理、配制PC或应?夜、PCR1环扩增及PCRT物的鉴定等步骤分区或分室进行B.吸样枪吸样要慢,吸样时尽量一次性完成,枪头、小离心管应一次性使用,以免交

13、叉污染C.所有的PCR式剂都应放置于大瓶中,以减少重复加样次数,避免污染机会D.PCR试齐J、PC或应液应与样品及PCRT物分开保存,不应放于同一冰盒或同一冰箱解析:所有的PCR式剂都应分装放置于小瓶中,一次性用完,以避免因多次使用造成污染。答案:CI16.下列关于PCR弓I物的说法,错误的是()A.引物是PCR程中与模板DNAB分序列互补,并能引导模板DNA的互补链合成的核甘酸序列B.引物常根据需要扩增的目的DNA勺碱基序列用化学合成的方法获得C.PCR过程中只需要一种引物D.引物的3端具有游离的一OH解析:由于DNA聚合酶不能从头合成DNAB1,因此引物是PCR程中与模板DNAB分序列互补

14、,并能引导模板DNA勺互补链合成的核甘酸序列,A项正确;PCR扩增的DNM段取决于两种引物的结合位点,因此所用的引物通常是根据需要扩增的目的DNA的碱基序列用化学合成的方法获得,B项正确,C项错误;引物的3端具有游离的一OH,D项正确。答案:CI17.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳中,加入SDS的作用是()A.增大蛋白质的相对分子质量B.改变蛋白质的形状C.掩盖不同种蛋白质间的电荷差别D.减少蛋白质的相对分子质量解析:加入SDS的作用是使蛋白质发生完全变性,解聚成单条肽链;SDS还能与各种蛋白质形成蛋白质-SDS复合物,SDS所带电荷量远远超过了蛋白质原有带电量,掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别,使电

15、泳迁移率完全取决于分子的大小。答案:CL18.下列有关凝胶色谱法和电泳法的说法,正确的是()A.它们都是分离蛋白质的重要方法B.它们的原理相同C.使用凝胶色谱法需要使用缓冲溶液而电泳法不需要D.以上说法都正确解析:凝胶色谱法和电泳法都是分离蛋白质的重要方法,但它们的原理不同,凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的方法,而电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同,使带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中各种分子的分离。这两种方法都需要缓冲液。答案:AI19.从细胞中提取某种特定的蛋白质比提取DNA隹度大,其原因不包括()A.蛋白质对温度、盐浓度、pH

16、等条件更敏感,更易失活B.蛋白质的空间结构多样,理化性质各不相同,使得蛋白质的提取没有统一的方法C.提取某种特定蛋白质时需根据其特性摸索提取的程序D.提取血红蛋白程序可分为样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定四大步解析:提取蛋白质比提取DNA勺难度大,是因为与DNAf比,蛋白质对温度、盐浓度、pH等条件更敏感,更容易失活;并且蛋白质的空间结构多样,理化性质各不相同,使得蛋白质的提取没有统一的方法,只能根据特定蛋白质的特性摸索提取的条件,设计特定的方法;血红蛋白这种位于红细胞内的含Fe2+的蛋白质,其分离和提取程序大致为样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定,但这一点不是提取蛋白质难度大的原因。答案:DI

17、20.下列关于DN限制和PCR技术的比较,描述正确的是()A.两个过程都是边解旋边复制B.两个过程都是随时都能进行C.两个过程都需要相同的酶催化D.两个过程都遵循碱基互补配对原则解析:DNAM制是边解旋边复制,而PCR中DNA军旋与复制分开、循环进行。DNAM制发生在细胞有丝分裂间期和减数第一次分裂前的间期,而PCR只要反应条件合适随时可以进行。DNA复制需要解旋酶、DN咪合酶等,而PCR只需要耐高温的TacDNA聚合酶,不需要解旋酶。答案:D二、非选择题(共60分)I21.(12分)下图是“DNA提取与鉴定”相关实验步骤,请据图分析并回答问题。(1)鸡血细胞是进行该实验较好的实验材料,这是因

18、为从鸡血细胞中释放出核物质的处理方法是(2)图a表示释放核物质后进行过滤的过程,过滤后取进行下一步实验。图b表示的相关操作过程中,加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液的作用(4)图c表示在滤液中加入冷却的体积分数为95%勺酒精溶液,其目的(5)DNA鉴定的原理是。答案:(1)鸡血细胞的DNA含量丰富,材料易得(鸡血细胞易吸水涨破)向鸡血细胞中加入蒸储水,并搅拌(2)滤液溶解DNA子(4)提取含杂质较少(或较纯净)的DNA(5)在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺呈蓝色I22.(16分)如今人类已跨入了蛋白质时代,对蛋白质的研究和应用,首先需要获得高纯度的蛋白质。请回答下列问题。蛋白质的提取和

19、分离一般分为四步:、和纯度鉴ao(2)如果要从红细胞中分离出血红蛋白,实验前取新鲜血液要在采血容器中预先加入柠檬酸钠,这样做的目的是。(3)血红蛋白的提取又可以细分为红细胞的洗涤、分离血红蛋白溶液和。其中分离血红蛋白溶液时需要用(仪器)分离出下层红色透明液体。(4)装填凝胶色谱柱时,要注意色谱柱内不能有气泡存在,一旦发现有气泡必须重新装,这是因为。(5)欲探究色谱柱的高度是否影响蛋白质分离的因素,应把作为自变量,把作为无关变量,把作为因变量。答案:(1)样品处理粗分离纯化(2)防止血液凝固(3)血红蛋白的释放透析分液漏斗(4)气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果(5)色谱柱的高度变

20、化缓冲液的用量和pH、样品的用量、温度等因素大小不同的蛋白质分子的洗脱间距C23.(17分)近十年来,PCR技术(多聚酶链式反应)成为分子生物学实验室的一种常规手段,其原理是利用DNA勺半保留复制,在试管中进行DNA的人工复制(如下图所示)。(1)加热使DNA链才T开,这一步是打开键,称为,在细胞中该过程是在酶的作用下进行的。(2)当温度降低时,引物与模板末端结合,在DNA聚合酶的作用下,引物沿模板链延伸,最终合成两条DNA子,此过程中原料是,遵循原则。(3)PCR技术的必需条件,除了模板、原料、引物、酶以外,至少还有三个条件,即液体环境、适宜的和。(4)通过PCRa术使DNA分子大量复制,若

21、将一个用15N标记的DNA分子放入试管中,以含有14N的脱氧核甘酸为原料,连续复制4次之后,则15N标记的DN册子占全部DNA总数的比例为。(5)现有一段DNA歹U5CAAGGATCC33GTTCCTAGG5如果它的引物1为5GGAOH,则引物2为。解析:DNA两条链之间的碱基通过氢键形成碱基对,从而将两条链连接起来,因而,要想才T开DNA双链,必须打开氢键,这一过程在细胞内是在解旋酶的作用下完成的,在细胞外(PCR)则是通过高温实现的。合成DNAt所用的原料是4种游离的脱氧核甘酸,复制过程遵循碱基互补配对原则。PCRa术的条件除了模板、原料、酶、引物以外,还要有适宜的pH、温度变化以及液体环

22、境;以含15N标记的DNA分子为模板,以含14N的脱氧核甘酸为原料,连续复制4次,共得到DNA分子数为24=16(个),其中含有15N标记白有2个,占全部DNA分子总数的1/8。答案:(1)氢解旋解旋(2)4种脱氧核甘酸碱基互补配对TaqDNA聚合pH温度变化(4)1/8(5)5CAAOHC24.(15分)下图为一种核酸的分析方法,请据图分析回答有关问题。被标记的那漕离磷酸基的材料也弹性地从内*基处断升朝机出现4种被怖记*片段d股冰动方向融.jTGGACTTGAACGCATUCTW(E工lTGG.aCTTGAAC9CATGCT驾TGGACTTGAACGCA使之分离南标记的片段R动显示所在位若(1)被分析的材料应属于一条DNA链。如果它存在另一条互补链,该互补链

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