肠球菌 奈瑟菌 卡他莫拉菌

1、肠球菌属、奈瑟菌属、肠球菌属、奈瑟菌属、卡他莫拉菌卡他莫拉菌 肠球菌属 （Enterococcus）肠球菌属分类肠球菌属分类l肠球菌原归于链球菌属，与 D 群链球菌血清型相同 。l1984年 Schleifer 和 Kipper-Bale 将其单独成立为肠球菌属 。l分子方法证实迄今有近20种肠球菌 。临床意义临床意义l是人和动物肠道正常菌群肠道正常菌群之一 。l严重基础疾病的老年人和免疫力低下的患者易被感染。l主要引起尿路感染尿路感染，腹腔和盆腔的伤口感染次之，亦可引起全身性感染等。l随着抗生素耐药率的增加，肠球菌的感染随着抗生素耐药率的增加，肠球菌的感染率正不断上升。率正不断上升。 形态特

2、征形态特征形态：形态：球形或球形或椭圆形椭圆形。排列：排列：单个、成对或短链单个、成对或短链状排列。状排列。特殊结构：特殊结构：无芽胞和荚膜，无芽胞和荚膜，少数菌株有稀疏鞭毛。少数菌株有稀疏鞭毛。 染色性：革兰染色性：革兰阳性阳性。培养特性培养特性n兼性厌氧菌兼性厌氧菌n最适生长温度最适生长温度35353737，大多数可在大多数可在 10-4510-45范围内生长。范围内生长。n营养要求营养要求不高不高。 n血平板：灰白色圆形凸血平板：灰白色圆形凸起，有起，有或或溶血溶血菌落。菌落。n麦康凯：较小、稍干燥、麦康凯：较小、稍干燥、粉红色菌落粉红色菌落 。粪肠球菌粪肠球菌生化特征生化特征l氧化酶（

3、）、触酶（）氧化酶（）、触酶（）l6.5%NaCl 6.5%NaCl 培养基上生长。培养基上生长。l胆汁七叶苷试验阳性。胆汁七叶苷试验阳性。l含链球菌含链球菌 D D 群抗原。群抗原。l一般水解一般水解PYRPYR。l发酵糖类产酸发酵糖类产酸6.5%NaCl6.5%NaCl生长生长肠球菌属的细菌分组肠球菌属的细菌分组试验试验群群 群群 群群 群群 群群 甘露醇 + + +- - -+ +山梨糖 + +- - - - -精氨酸 - -+ + +- - -各组所含肠球菌l群群：鸟肠球菌、恶臭肠球菌、假鸟肠球菌、棉子糖肠球菌、解糖肠球菌、E.gilvus、E.pallens l群群：粪肠球菌、屎肠球

4、菌粪肠球菌、屎肠球菌、铅黄肠球菌、鸡肠肠球菌、孟氏肠球菌 l群群：殊异肠球菌、坚韧肠球菌、希氏肠球菌、E.porcinus、E.ratti l群群：盲肠肠球菌、硫磺肠球菌、E.asinil群群：鸽肠球菌、黄色肠球菌 临床常见肠球菌的鉴别临床常见肠球菌的鉴别 粪肠球菌粪肠球菌与与屎肠球菌屎肠球菌的鉴别表的鉴别表细菌细菌阿拉伯糖阿拉伯糖 亚硝酸盐亚硝酸盐 丙酮酸盐丙酮酸盐 粪肠球菌 -+屎肠球菌 +- 尿液、脓液等尿液、脓液等 血液血液 葡萄糖肉汤增菌葡萄糖肉汤增菌 直接直接 血平板血平板 （5%CO5%CO2 2） 涂片涂片 分离培养分离培养（4545可生长）可生长） 可疑菌落可疑菌落 药敏试验

5、药敏试验 PYR(+)PYR(+)、6.5%NaCL6.5%NaCL生长（生长（+ +） G G+ +C C 触酶触酶 胆汁七叶苷试验（胆汁七叶苷试验（+ +） 血清学鉴定为血清学鉴定为D D群群 肠球菌属细菌肠球菌属细菌 各种生化代谢鉴定到种各种生化代谢鉴定到种微生物学检查微生物学检查 氨基糖苷类抗生素高水平耐药肠球菌的检测：氨基糖苷类抗生素高水平耐药肠球菌的检测： （high-level aminoglycosidehigh-level aminoglycoside resistance resistance，HLARHLAR） 培养基：培养基：MHMH琼脂琼脂 菌液浓度：菌液浓度：0.5

6、0.5麦氏单位麦氏单位 孵育时间：孵育时间：161618h18h 药敏纸片：庆大霉素（药敏纸片：庆大霉素（120ug/120ug/片）链霉素（片）链霉素（300 ug300 ug/ /片）片） 结结 果：果：6mm=HLAR6mm=HLAR，7-9mm7-9mm不确定，不确定，10mm10mm敏感敏感 意意 义义：不可用常规青霉素氨基糖苷类抗生素联合治疗：不可用常规青霉素氨基糖苷类抗生素联合治疗肠球菌的抗生素敏感试验l抗生素的选择：抗生素的选择： A A组组：青霉素或氨苄青霉素 B B组组：万古霉素、利奈唑胺、奎奴普丁/达福普丁 C组：庆大霉素、链霉素 U U组组：环丙沙星、诺氟沙星、四环素肠

7、球菌天然耐药天然耐药的抗生素： 复方磺胺增效剂（SMZ-TMP）、头孢菌素类、氨基糖苷类（常规剂量）、头霉素类、氯洁霉素、苯唑西林、林可霉素等。 奈瑟菌属和莫拉菌属奈瑟菌属和莫拉菌属 (Neisseria and Moraxella)分分 类类l奈瑟菌属和莫拉菌属属于奈瑟菌科。奈瑟菌属和莫拉菌属属于奈瑟菌科。l脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和卡他莫拉 菌是主要致病菌。 淋病奈瑟菌奈瑟菌 (N.gonorrhoeae)l淋病是淋病奈瑟菌引起的各种化脓性感染，是一种经典的常见的性传播疾病。l淋球菌的原发性感染部位主要为男性尿道或女性宫颈管内膜，引起泌尿生殖道的化脓性炎症。淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌致病性致病性

8、l人类是淋病奈瑟菌的唯一天然宿主l传播方式： 成人-性接触 初生婴儿-患病母亲产道感染 l致病物质： 菌毛、外膜蛋白、脂多糖、IgA 蛋白酶淋球菌淋球菌 柱状上皮细胞表面柱状上皮细胞表面 大量繁殖大量繁殖 细胞裂解细胞裂解 粘膜下层粘膜下层中性粒细胞聚集吞噬中性粒细胞聚集吞噬 急性炎症反应急性炎症反应 局部充血水肿局部充血水肿 粘膜糜烂、脱落粘膜糜烂、脱落 尿尿道脓性分泌物道脓性分泌物 入尿道腺体和隐窝潜伏。入尿道腺体和隐窝潜伏。借菌毛粘附借菌毛粘附吞饮入胞吞饮入胞逸至逸至部分部分发病机理发病机理所致疾病所致疾病l男性-急性淋菌性尿道炎l女性-淋菌性宫颈炎、尿道炎l初生婴儿-淋菌性结膜炎 发展

9、：l男性-后尿道炎、前列腺炎、精囊炎、 附睾炎等 l女性-子宫内膜炎、输卵管炎等淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌形态特征淋病奈瑟菌形态特征l菌体：菌体：肾形或咖啡豆状肾形或咖啡豆状。l排列：排列：凹面相对、成对排列凹面相对、成对排列l特殊结构：特殊结构：幼龄菌可有荚膜及菌毛。l染色：染色：革兰阴性革兰阴性。l脓液中位于脓液中位于中性粒细胞内中性粒细胞内。l慢性淋病常位于细胞外。慢性淋病常位于细胞外。淋病奈瑟菌培养特征淋病奈瑟菌培养特征l最适最适 pH 7.5pH 7.5。l最适温度最适温度 35-3735-37。 低于低于3030不生长不生长 l普通培养基上不生长，普通培养基上不生长， 需用需用

10、 TM TM 培养基培养基l需需 5-10%CO5-10%CO2 2 和和湿度湿度的环境的环境 。l菌落：光滑、凸起、菌落：光滑、凸起、半透明、半透明、湿润。湿润。lTMTM培养基成分：培养基成分：1 1、GCGC基础培养基基础培养基2 2、抑菌制：万古霉素、多粘菌素、抑菌制：万古霉素、多粘菌素E E和制和制 霉菌素。霉菌素。3 3、增菌剂、血红蛋白溶液、增菌剂、血红蛋白溶液培养法是培养法是WHOWHO推荐的筛查淋病病推荐的筛查淋病病人的唯一方法，也是诊断淋病的人的唯一方法，也是诊断淋病的金标准方法。金标准方法。抵抗力极弱抵抗力极弱l在干燥、高热的环境中极易死亡在干燥、高热的环境中极易死亡l一

11、般消毒剂或肥皂液均能使其丧失活动力一般消毒剂或肥皂液均能使其丧失活动力。淋病奈瑟菌培养特征淋病奈瑟菌培养特征 淋病奈瑟菌检验程序 标本标本直接涂片直接涂片 巧克力、巧克力、TMTM培养基培养基分离培养分离培养（5%CO5%CO2 2） (24(24-48h)-48h) 露滴样小菌落露滴样小菌落 药敏试验药敏试验 涂片染色、涂片染色、氧化酶（氧化酶（+ +） 葡（葡（+ +）、）、麦（麦（- -） 果（果（- -）、蔗（）、蔗（- -） 乳（乳（- -） 报告报告标本的采集和运送标本的采集和运送l在取材作涂片时，应先用灭菌盐水洗净在取材作涂片时，应先用灭菌盐水洗净尿道口，然后用手指挤出脓液，用棉

12、拭尿道口，然后用手指挤出脓液，用棉拭轻轻涂布于载玻片上。轻轻涂布于载玻片上。l从男性病人尿道取材作培养时，应用拭从男性病人尿道取材作培养时，应用拭子深入尿道子深入尿道2cm-4cm2cm-4cm，旋转取出分泌物。，旋转取出分泌物。从女性病人的宫颈取材时，应将棉拭插从女性病人的宫颈取材时，应将棉拭插入宫颈口入宫颈口1.5cm1.5cm，稍转动并停留，稍转动并停留10s-15s10s-15s。l淋球菌抵抗力很弱，最好床边接种，尽淋球菌抵抗力很弱，最好床边接种，尽快送检。快送检。治治 疗疗 头孢三嗪（头孢三嗪（ceftriaxonceftriaxon，菌必治），菌必治）250mg250mg一次肌注，

13、一次肌注，有合并症者连用有合并症者连用1010天。天。 壮观霉素（壮观霉素（spectinomycinspectinomycin，淋必治），淋必治）2g2g，一次肌，一次肌注，有合并症者连用注，有合并症者连用1010天。天。 氟哌酸氟哌酸200mg200mg口服，一日口服，一日3 3次共次共7 7日；氟嗪酸日；氟嗪酸200mg200mg每每日日2 2次口服共次口服共7 7日。日。 脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌 (N.meningitidis)密切接触咳嗽、喷嚏脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌临床意义临床意义60%-70%60%-70%隐性感染，隐性感染，30%30%上呼吸道感染和出血点型，典型流脑上呼吸道

14、感染和出血点型，典型流脑仅占仅占1%1%。感染后终生免疫。感染后终生免疫。流行特征流行特征: :全年发病，以冬春为主，全年发病，以冬春为主，3-43-4月为高峰。月为高峰。病人病人带菌者带菌者易感人群易感人群特别是特别是5 5岁以下儿童岁以下儿童l致病物质：内毒素致病物质：内毒素, ,菌菌毛是细菌主要致病因素毛是细菌主要致病因素l分类：按其夹膜多糖抗分类：按其夹膜多糖抗原分原分1313个血清群个血清群, ,其中其中我国我国A A群占群占95%95%l抵抗力：对外界抵抗力抵抗力：对外界抵抗力弱，对消毒剂敏感，有弱，对消毒剂敏感，有自溶酶。自溶酶。脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌临床意义临床意义脑膜炎奈瑟

15、菌临床表现脑膜炎奈瑟菌临床表现1 1. . 潜伏期潜伏期1-101-10天，短者仅为数小时，多为天，短者仅为数小时，多为2-32-3天天。2 2. . 病程病程l前驱期：鼻咽部充血和分泌物增多，咽痛，低热前驱期：鼻咽部充血和分泌物增多，咽痛，低热l败血症期：突发寒战、高热。伴恶心呕吐、全身不适。败血症期：突发寒战、高热。伴恶心呕吐、全身不适。皮肤黏膜瘀点，瘀斑等皮肤黏膜瘀点，瘀斑等l脑膜炎期：剧烈头痛、频繁呕吐、烦躁不安，以及颈脑膜炎期：剧烈头痛、频繁呕吐、烦躁不安，以及颈项强直等脑膜刺激症状等项强直等脑膜刺激症状等l恢复期：症状缓解恢复期：症状缓解l病程（暴发型）：起病急骤，病情凶险。如不及

16、时抢病程（暴发型）：起病急骤，病情凶险。如不及时抢救，常在救，常在2424小时内危及生命小时内危及生命3 3. . C C群流脑具有易传播、隐性感染比例高等特点，临床上群流脑具有易传播、隐性感染比例高等特点，临床上 常表现为暴发型。常表现为暴发型。脑膜炎奈瑟菌形态特征脑膜炎奈瑟菌形态特征l菌体：菌体：肾形或咖啡豆状。肾形或咖啡豆状。l排列：排列：凹面相对、成双排列凹面相对、成双排列l特殊结构：幼龄菌可有荚膜特殊结构：幼龄菌可有荚膜和菌毛。和菌毛。l染色：染色：革兰阴性革兰阴性, ,有抵抗脱有抵抗脱色现象。色现象。l脑脊液标本中大多位于白细脑脊液标本中大多位于白细胞内。胞内。脑膜炎奈瑟菌培养特征

17、脑膜炎奈瑟菌培养特征l最适温度最适温度 35-3735-37。l最适最适pH7.4-7.6pH7.4-7.6。 l含血液、血清的培养基上才能生长。含血液、血清的培养基上才能生长。 l专性需氧，需专性需氧，需5-10%CO5-10%CO2 2 和湿度和湿度环境。环境。l血平板或巧克力血平板或巧克力: :光滑、凸起、光滑、凸起、半透明半透明菌落。菌落。 微生物检查微生物检查脑脊液脑脊液 瘀点、穿刺液瘀点、穿刺液 渗出物、鼻咽分泌物渗出物、鼻咽分泌物 血液血液离心离心 血平板或巧克力血平板或巧克力 葡萄糖肉汤增菌葡萄糖肉汤增菌 （5%CO5%CO2 2） （5%CO5%CO2 2） 上清上清 沉淀沉

18、淀 可疑菌落（露滴样）可疑菌落（露滴样） 药敏试验药敏试验检查检查 抗原抗原 涂片镜检涂片镜检 涂片涂片G G- -双球菌双球菌 氧化酶（氧化酶（+ +） 葡（葡（+ +）、麦（）、麦（+ +） 果（果（- -）、蔗（）、蔗（- -）、乳（）、乳（- -） 报告报告 淋淋 脑脑l葡萄糖葡萄糖 + + +l麦芽糖麦芽糖 - +- +l果糖果糖 - - -l蔗糖蔗糖 - - -l乳糖乳糖 - - -l氧化酶氧化酶(+)(+)触酶触酶(+)(+)脑膜炎奈瑟菌生化反应脑膜炎奈瑟菌生化反应淋病奈瑟菌和脑膜炎奈瑟菌鉴别淋病奈瑟菌和脑膜炎奈瑟菌鉴别菌种菌种35 35 营养琼脂营养琼脂麦芽糖氧化产酸麦芽糖氧化

19、产酸脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌 生长不定生长不定+ +淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌 不生长不生长- -卡他莫拉菌临床意义卡他莫拉菌临床意义 l早期认为此菌是人体早期认为此菌是人体上呼吸道无致病性的上呼吸道无致病性的正常寄居菌正常寄居菌。l近近期期发现可引起发现可引起下呼下呼吸道吸道和其它部位感染。和其它部位感染。l年老和免疫力低下的年老和免疫力低下的患者患者易感。易感。卡他莫拉菌形态特征卡他莫拉菌形态特征l菌体：肾形。菌体：肾形。l排列：排列：成双排列成双排列。l特殊结构：无鞭毛、特殊结构：无鞭毛、无芽胞、无荚膜无芽胞、无荚膜 。l染色：染色：革兰阴性革兰阴性, ,有有抗退色倾向。抗退色倾向。卡他莫拉菌

20、培养特征卡他莫拉菌培养特征l需氧菌需氧菌。l最适生长温度为最适生长温度为3535，2222也生长良好。也生长良好。 l营养要求营养要求不高不高。l血平板或巧克力：血平板或巧克力：浅棕色、不透明、光浅棕色、不透明、光滑而凸起菌落。滑而凸起菌落。l可用接种环完整推过平板表面。可用接种环完整推过平板表面。l耐受较低温度，耐干燥。耐受较低温度，耐干燥。 卡他莫拉菌卡他莫拉菌生化特征生化特征l触酶、氧化酶和触酶、氧化酶和 DNADNA酶酶均均为为阳性。阳性。l硝酸盐还原试验阳性硝酸盐还原试验阳性。l水解三丁酸甘油酯。水解三丁酸甘油酯。l不分解任何糖类不分解任何糖类。 相关种属间的区别相关种属间的区别 奈

21、瑟菌属和卡他莫拉菌及相关菌属的鉴别奈瑟菌属和卡他莫拉菌及相关菌属的鉴别 注：*：延长奈瑟菌延长亚种和硝酸盐还原亚种可为阴性。细菌细菌细菌形态细菌形态 氧化酶氧化酶 触酶触酶 葡萄糖葡萄糖奈瑟菌属双球菌/球杆菌 +*V卡他莫拉菌 双球菌 +-金氏菌属 球杆菌 +-+ 案例分析案例分析 一患者，一患者，22 22 岁，以寒战、高热、恶岁，以寒战、高热、恶心、呕吐、头痛入院，皮肤有小瘀点。心、呕吐、头痛入院，皮肤有小瘀点。2 2天后出现头痛加重，嗜睡、颈项强直等天后出现头痛加重，嗜睡、颈项强直等症状，皮肤、粘膜瘀点融合成瘀斑。症状，皮肤、粘膜瘀点融合成瘀斑。 血象：白细胞数达血象：白细胞数达2222

22、10109 9/L/L，中性，中性粒细胞在粒细胞在80%-90%80%-90%以上。以上。脑脊液（脑脊液（CSCS）WBC2.29WBC2.2910109 9/L/L ，以，以多形核细胞为主；蛋白质多形核细胞为主；蛋白质2.30 g/L2.30 g/L；葡；葡萄糖萄糖0.1mmol/L0.1mmol/L。 初步诊断？初步诊断？ 微生物学检查微生物学检查 CSCS涂片可在中性粒细胞内找到革兰涂片可在中性粒细胞内找到革兰阴性双球菌。阴性双球菌。从病人从病人CSCS或急性期血液分离到脑膜或急性期血液分离到脑膜炎奈瑟菌。炎奈瑟菌。从病人急性期血清或尿或从病人急性期血清或尿或CSCS中检测中检测到脑膜炎

23、奈瑟菌群特异性多糖抗原。到脑膜炎奈瑟菌群特异性多糖抗原。以以PCRPCR检测到病人急性期血清或检测到病人急性期血清或CSCS中中脑膜炎奈瑟菌的脑膜炎奈瑟菌的DNADNA特异片段。特异片段。肠球菌属肠球菌属【掌握】【掌握】 1. 微生物特性：形态染色、培养特点、微生物特性：形态染色、培养特点、 生化反应生化反应 2. 微生物检验：检验程序、标本直接检查、微生物检验：检验程序、标本直接检查、 分离培养与鉴定分离培养与鉴定【熟悉】肠球菌属的分类、临床意义、标本采集【熟悉】肠球菌属的分类、临床意义、标本采集奈瑟菌属和卡他莫拉菌奈瑟菌属和卡他莫拉菌 【掌握】【掌握】 1. 淋病奈瑟菌及脑膜炎奈瑟菌的微生

24、物特淋病奈瑟菌及脑膜炎奈瑟菌的微生物特 性：形态染色、培养特点、生化反应性：形态染色、培养特点、生化反应 2. 淋病奈瑟菌及脑膜炎奈瑟菌的检验程序、淋病奈瑟菌及脑膜炎奈瑟菌的检验程序、 标本采集、标本直接检查、分离培养与鉴定标本采集、标本直接检查、分离培养与鉴定 3. 淋病奈瑟菌及脑膜炎奈瑟菌的临床意义淋病奈瑟菌及脑膜炎奈瑟菌的临床意义 【熟悉】【熟悉】 1. 奈瑟菌属和莫拉菌属的分类奈瑟菌属和莫拉菌属的分类 思考题1. 1. 关于淋球菌不正确的说法是关于淋球菌不正确的说法是A A 人是唯一的自然宿主人是唯一的自然宿主 B B 有菌毛的菌有毒力有菌毛的菌有毒力C C 抵抗力弱抵抗力弱 D D

25、感染后可出现无症状带菌者感染后可出现无症状带菌者E E 镜检是确定诊断的依据镜检是确定诊断的依据2 2A A群链球菌与其它链球菌的主要鉴别试验是群链球菌与其它链球菌的主要鉴别试验是A A 淀粉水解试验淀粉水解试验 B B 菊糖发酵试验菊糖发酵试验 C OptochinC Optochin敏感试验敏感试验 D D 杆菌肽敏感试验杆菌肽敏感试验E E 新生霉素敏感试验新生霉素敏感试验3 3球菌中能产生自溶酶物质的有球菌中能产生自溶酶物质的有A A 葡萄球菌和肺炎链球菌葡萄球菌和肺炎链球菌 B B 脑膜炎奈瑟菌和肺炎链球菌脑膜炎奈瑟菌和肺炎链球菌C C 脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌 D D 肺炎链球菌肺

26、炎链球菌E E 肠球菌属肠球菌属思考题4 4下列哪个不是肠球菌的特点？下列哪个不是肠球菌的特点？A G+A G+球菌，成双或短链排列球菌，成双或短链排列 B B 普通培养基能生长普通培养基能生长 C 6.5%NaClC 6.5%NaCl肉汤生长肉汤生长 D 40%D 40%胆汁培养基生长胆汁培养基生长E E 只能在血平板上生长只能在血平板上生长5 5下列哪种细菌不产生溶血毒素？下列哪种细菌不产生溶血毒素？A A 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 B B 乙型链球菌乙型链球菌 C C 肺炎链球菌肺炎链球菌 D D 淋球菌淋球菌E E 铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌1.1.淋病奈瑟菌可引起哪些疾病？如何从脓

27、性分泌物中检测淋病奈瑟菌可引起哪些疾病？如何从脓性分泌物中检测出该菌？出该菌？2.2.脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌生物学特性的有何不同？脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌生物学特性的有何不同？3.3.试述肠球菌属不同于链球菌属的生化反应特征。试述肠球菌属不同于链球菌属的生化反应特征。 KEY POINT1. Members of cocci are divided into gram-positive cocci and gram-negative cocci by Gram stain. Staphyloccus, Streptococcus and Enterococcus belong to the

28、former, while Neisseria meningitidis, Neisseria gonorrhoeae and Branhamella catarrhalis belong to the latter.2. Staphyloccus is the strongest resistant organism of the nonsporeforming organisms, and MRS (Methicillin-resistant staphylococcus) puts a challenge to clinical therapy. 3. The members of the genus Enterococcus are catalase-negative cocci. They can grow in medium containing 6.5% NaCl or in the presence of bile-esculin.4. Optochin