大型真菌试管种培养基及其制备方法

1、型真菌试管种培养基及其制备方法日前，人型真曲的试管种培养基主要分为固体物培养基，半固体形培养基，这两种培养基备有长处，但两者都存在着难以克服的缺陷口固体培养基主要有木屑培养基.木粒、竹粒培养基，谷粒、麦粒、稻谷培养基，Jt中木眉或木粒、竹粒培养基存在着缺陷是：营养成份低，制作费工费时，转接原种萌发慢，发繭势弱，谷粒、麦粒、稻谷培养基易污染、易老化、转接培养辍后易招致虫、亂害。半固形培养基主要是固体物浸出液及添加剂溶化后加入琼脂固化而得到，这种培养基最大的缺陷是易老化*降低菌丝活力，生产优势哀退，在常温下，往往需要多次转管，因此又容易导致失纯及再度退化口随着液体菌种的推广，用上述试管种的繭胎转接

2、液体种，都存在着浮力差、萌发慢直弱因而污染率高-般毎支试管种只能转接原种4T瓶或袋.规模化栽培的大型菌菇场或菌种场，一支基础菌种势必须反复扩转，极易退化哀变,所以一支性状优良的菌种，往往在栽培中表现出退化变异现象，同时大呈的理装试管增加成本、废工、废时。发明内容：本发明要解决的技术问题是提供一种大型真菌试管种培养基，克服现有技术存在的培养基营养成份低、茵种萌发慢、易老化、污染率高，需冬次反复扩转，生产成本高、生产效率低的缺陷.本发明要解决的另个技术问题是提供这种培养基的制备方法。发明人所在单位是一个售菌种呈、裁培屋都较大的单位，历年在三伏天高温季节，生产试管种、原种、裁培种，天热流汗、蚊虫叮咬

3、、深受其苦,于是近空年来，发明人一直在探索、研究培养基的组成物质，终于获得突破性进展。木发明通过以下技术方案实现，大型真悄试管种培养基，由件养液润湿草籽制成，草籽与营养液重展比为1：020.5应使草籽表面全部湿润营养液.并附着营菲液为彳权所述草籽为看麦娘、狗尾草草籽一种或两种混合。所述营养液为豆芽、麦皮、菇，经破碎、热水浸提、浓缩制得，重量百分比为豆芽2040%,麦皮130%,菇3570%；三种物质与水載量比为1：1一2。所述的菇为鲜菇，为鲜姑中的平菇、草益、廣錯、猴头菇的一种或几种混合。可根据当地的情况，选用较经济的鲜姑.上述的鲜菇根、须、茎等均可作营养液的原料.所述豆芽为大豆芽、绿豆芽、碗

4、豆芽、蚕豆芽一种或几种混合。从营养价值的角度，以大豆芽为佳.大型克菌试管种培养基的制爸方法，包括下列步骤：（1）采集看麦娘或狗尾草籽，去除杂质后放入水中浸泡48-60小时，然后取出草籽，晾干表皮水份备用；（2）制备营养液：按所述的重量百分比，以及总物质与水体积比，将巳芽、麦皮、姑放入水中煮沸，保温3Q-50分钟，然后过滤取出液体，再将液体加热浓缩，直至用玻璃体插入浓缩液中，再提起玻璃棒，有挂棒现彖为止：(3) 向步骤(2)得到的营养液中加入磷酸二氢钾，调整；(4) 用步骤(3)得到的营养液喷洒步骤(1)御到的草籽，并充分拌和均匀，使草籽表面全部湿润莒养液、并附着营养液，即得到所述的培养基：(5

5、) 装管、灭菌：将步骤(4)御到的培养基装入试管中，塞棉塞、包扎,装入高压锅中，保持15个大气压，灭菌60分钟，口然冷却至70度，开启高于锅盖取出试管，为试管温度降到25左右，在无苗操作条件下，接入基础菌种；(6) 将步骤(5)得到的试管馆种在25*0左右培养10-13天就可用于生产.看麦娘、狗尾草是一种野草，看麦娘成熟F春季、狗尾草成熟于秋季，其籽粒饱满，粒小瓦壳皎，它的体积约为麦粒的百分Z,经破碎化验，所含碳、氮比合理，营养成份优于麦粒、谷粒.由硬且光滑，因此，在制备过程中，其壳不易破碎，受污染率极低，但由于草籽壳硬且光滑，单用草籽作培养基，接种后不易发菌，经试验，将草籽壳表面湿润营养液，

6、接种助发后就吃料，发閑势好、长速快。本发明与现有技术相比具有以下明显优点：一、质最好：本发明的培养基碳：氮比合理，营养充分，菌丝长速快，満管时间比谷粒种早3天，比PDA种早2大，比木屑种早10犬，比竹粒、木粒种早7天，且菌丝洁白有力。二、耐老化：本发明的培养基在常温卜待放年，活力如故，转接试管种或原种，仍农现出萌发快、发菌有力、无污染的特点。三、生产效率高：止常情况卜"，以PDA为培养基的试件种，满管需7-10天，原种満瓶、滿袋需30天，裁培种满袋需3040天，一个三级种周期约80大，由于草籽粒小、表面积大、且分散性能优越，一支试符种相当于以PDA为培养基的试管种经三级扩转后的含种量

7、，因此，本发明的试管种可宜接转接产菇袋（省掉扩转原种、裁培种工序），可以缩短裁培周期70天左右。有利于抓李节.抢早上市，提高效益。如果用本发明的试管种转接原种或裁培种.一支试管种可转接原种或裁培种200瓶（袋）左右，展常规试管种的30-50倍。四、节约成木、减轻劳动强度：用草籽试管种直接转接产姑袋，省去了原种，裁培种两个生产环节，不仅节约了原种，裁培种的原材料，而且省去了两级原料的预温配拌、装瓶、装袋、火菌、接种的劳动锻，既节本增效，又免除了天热蚊虫叮咬Z苦。五、污染率低：由于草籽粒小壳硬，因此本发明前发农面积大，萌发快，发蘭势好，污染率低。综上，本发明具有生产环节少、生产周期短、生产效率高、

8、牛产成本低、劳动强度低、经济效率高的优点。具体实旋方式，实施例1：（1）取狗尾草草籽100斤，去除杂质后放入水中浸泡55小时，然后取出草籽，晾干表皮水份备用：（2）制备营养液：取大豆芽30%、麦皮15%、鲜姑中的平菇55%放入水中煮沸（按三种物质与水重诫比为1：1.5）,保温40分钟，然后过滤収出液体，再将液体加热浓缩，直至用玻璃桂插入浓缩液中，再提起玻璃棒，有挂棒现彖为止：（3）向步骤（2）得到的营养液中加入磷酸二氢钾，调整PH至7；（4）用步骤（3）得到的营养液喷洒步骤（1）得到的草籽（草籽与营养液的垂量比为1：0.3）,并充分拌和均匀，使草籽表面全部湿润营养液、并附着营养液，即得到所述的

9、培养基；（5）装管、灭菌：将步骤（4）得到的培养基装入试管中，塞棉塞、包扎,装入高压锅中，保持1.5个大气压灭菌60分钟，自然冷却至70度，开启高于锅盖取出试管，当试管温度降到259左右，在无菌操作条件下，接入基础菌种;（6）将步骤（5）得到的试管菌种在259左右培养1013天就可用于生产。实施例2：（1）取狗尾草草籽100斤，去除杂质后放入水中浸泡50小时，然后取出草籽，晾干表皮水份备用；（2）制备营养液：取大豆芽20%、麦皮10%、鲜菇种的平菇35%放入水中煮沸（按三种物质与水重量比为1：1）,保温30分钟，然后过滤取出液体，再将液体加热浓缩，直至用玻璃棒插入浓缩液中，再提起玻璃棒，有挂棒现象为止；（3）向步骤（2）得到的营养液中加入磷酸二氢钾，调整PH至&5；（4）用步骤（3）得到的营养液喷洒步骤（1）得到的草籽（草籽与营养液的重量比为1：0.2）,并充分拌和均匀，使草籽表面全部湿润営养液、并附着营养液，即得到所述的培养棊。其余实施如实施例1.实施例3：（1）取看麦娘草籽100斤，去除杂质后放入水中浸泡60小时，然后取出草籽，晾干表皮水份涪用；（2）制备营养液：取大豆芽40%、麦皮30%、鲜菇中的平菇70%放入水中煮沸（按三种物质与水重量比为1：2）,保温50分钟，然后过滤取出液体，再将液体加热浓缩