第七节 白喉棒状杆菌

1、第七节 白喉棒状杆菌 白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌(C.diphtheriae),俗称白俗称白喉杆菌，是白喉的病原菌。喉杆菌，是白喉的病原菌。白喉是一种急性呼吸道传白喉是一种急性呼吸道传染病，患者咽喉部出现灰染病，患者咽喉部出现灰白色的假膜。该菌能产生白色的假膜。该菌能产生强烈外毒素，进入血液可强烈外毒素，进入血液可引起全身中毒症状。亚碲引起全身中毒症状。亚碲酸钾培养基能使其菌落呈酸钾培养基能使其菌落呈黑色。黑色。 一、生物学特性一、生物学特性1.形态与染色形态与染色 革兰阳性，菌体细长微弯，一端革兰阳性，菌体细长微弯，一端或 两 端 膨 大 呈 棒 状 。或 两 端 膨 大 呈 棒 状 。 直

2、径 为直 径 为0.30.8m，菌体粗细不匀，着，菌体粗细不匀，着色不均，排列不规则，呈栅栏状、色不均，排列不规则，呈栅栏状、V字形或字形或L字形字形;无荚膜，无鞭毛，无荚膜，无鞭毛，不产生芽孢不产生芽孢; 美蓝或奈瑟染色，菌体两端或一美蓝或奈瑟染色，菌体两端或一端可见着色较深的异染颗粒端可见着色较深的异染颗粒，在，在鉴定时有重要意义鉴定时有重要意义革兰染色革兰染色 阳性阳性异染颗粒异染颗粒2.培养特性培养特性v需氧或兼性厌氧需氧或兼性厌氧v营养要求较高营养要求较高v吕氏血清培养基上吕氏血清培养基上（含有凝固血清）上（含有凝固血清）上生长迅速生长迅速细小、细小、灰白色灰白色S型小菌落型小菌落（

3、形态典型，异染颗（形态典型，异染颗粒明显）粒明显）v亚碲酸钾亚碲酸钾（K2TeO23H2O）血平板血平板黑色菌落黑色菌落 亚碲酸钾培养基亚碲酸钾培养基 轻型小菌落轻型小菌落 重型菌落重型菌落department of microbiology Chenlingzhi 2009/8 对寒冷、干燥和日光的抵抗力强 对湿热抵抗力弱，100C1min或58C10min即可被杀死 对一般消毒剂敏感，1%苯酚，3%来苏儿10min均可被杀死 对青霉素、氯霉素、红霉素敏感等广谱抗生素敏感，对磺胺不敏感 在衣服，玩具，用具上可存活数日至数周。3.抵抗力二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性1.致病物质致病物质白

4、喉毒素白喉毒素（主要致病因素）：（主要致病因素）：棒状杆菌噬菌体带有编码外棒状杆菌噬菌体带有编码外毒素的毒素的tox基因基因,在溶原阶段基因整合到染色体上即可产生在溶原阶段基因整合到染色体上即可产生 A肽链肽链毒性功能毒性功能结构结构 B肽链肽链与受体结合（心脏、神经、肾上腺等）与受体结合（心脏、神经、肾上腺等） 协助协助A链进入易感细胞内链进入易感细胞内毒性机制：蛋白质合成中必需的延伸因子毒性机制：蛋白质合成中必需的延伸因子灭活灭活抑制抑制肽链延长肽链延长蛋白合成受阻蛋白合成受阻组织变性坏死组织变性坏死索状因子索状因子：细菌表面一种糖脂，破坏线粒体膜，影响细：细菌表面一种糖脂，破坏线粒体膜，

5、影响细胞呼吸和能量产生胞呼吸和能量产生K抗原抗原：抗吞噬，有利定植：抗吞噬，有利定植2.所致疾病所致疾病白喉（白喉（急性呼吸道传染病）传染源：病人、带菌者传染源：病人、带菌者传播途径：呼吸道（飞沫）传播途径：呼吸道（飞沫）或污染或污染易感人群：易感人群：6月月-5岁，岁，成人也有可能成人也有可能潜伏期：潜伏期：2-7天天部位：咽、喉、气管和鼻腔粘膜，也可侵犯眼结部位：咽、喉、气管和鼻腔粘膜，也可侵犯眼结膜、阴道等处黏膜，甚至皮肤创口膜、阴道等处黏膜，甚至皮肤创口根据主要病变部位，临床上有咽白喉、鼻白喉、根据主要病变部位，临床上有咽白喉、鼻白喉、气管白喉之分。气管白喉之分。临床表现：引起局部炎症

6、：假膜；临床表现：引起局部炎症：假膜； 全身中毒症状全身中毒症状:心肌炎、软腭麻痹等。心肌炎、软腭麻痹等。白喉棒状杆菌（鼻咽腔）飞沫、污染物品白喉棒状杆菌在呼吸道局部繁殖，产生白喉毒素局部细菌和毒素的作用（局部炎症反应）灰白色假膜（纤维蛋白、坏死上皮细胞、白细胞、细菌组成，通过纤维蛋白凝结在一起）粘膜水肿及假膜脱落，引起呼吸道阻塞，甚至窒息死亡。外毒素入血毒血症心肌肝肾上腺外周神经内脏出血心肌炎膈肌麻痹-呼吸困难声带麻痹-声音嘶哑软颌麻痹-吞咽困难 肾上腺功能障碍2-7天潜伏期作用机制感染后机体可获得牢固的免疫力感染后机体可获得牢固的免疫力抗毒素的中和作用，因为外毒素入血，免疫原性很抗毒素的中

7、和作用，因为外毒素入血，免疫原性很强强抗毒素免疫抗毒素免疫 免疫机制：免疫机制：抗毒素阻止白喉毒素抗毒素阻止白喉毒素B链与易感细胞结链与易感细胞结合，使合，使A链不能进入细胞内发挥毒性作用。链不能进入细胞内发挥毒性作用。机体还可通过其它方式获得免疫力：机体还可通过其它方式获得免疫力：n六月以下婴儿六月以下婴儿-母亲母亲n成人成人-隐性感染、疫苗隐性感染、疫苗3、免疫性锡克试验(Schick test) 是测定人体对白喉杆菌的免疫状态的一种皮内试验 原理：是毒素与抗毒素中和反应。 方法： 试验侧：一侧前臂用 0.1ml含1/50 最小致死量（MLD）的白喉外毒素皮内注射（毒性、蛋白质） 对照侧：

8、另一侧前臂皮内注射0.1ml加热破坏的毒素（无毒、蛋白质） 结果判定：2448H后观察结果， 局部出现红肿 阳性反应 机体无免疫力 局部无红肿 阴性反应 体内有免疫力（有抗毒素） 应用：检查机体对白喉的免疫力 预防接种前的筛选与接种后效果观察 因观察时间长现已很少采用 目前有人采用白喉毒素致敏的红细胞做凝集试验来测定血清中的抗毒素，该方法比较简便快速。 Schick test结果分析 试验侧试验侧 对照侧对照侧 本质本质阴性反应阴性反应 有免疫力有免疫力阳性反应阳性反应 2448h h 无免疫力无免疫力 47d d达峰达峰假阳性反应假阳性反应 6 618h18h红肿红肿 同前同前 有免疫力，超

9、敏反应有免疫力，超敏反应 1 12d2d消退消退混合反应混合反应 6 618h18h红肿红肿 6 618h18h红肿红肿 无免疫力，超敏反应无免疫力，超敏反应 4 47d7d达峰达峰 3 34d4d反应消退反应消退三、微生物学检查法 标本：标本：棉拭子取病变部位假膜边缘棉拭子取病变部位假膜边缘 直接涂片镜检直接涂片镜检形态，异染颗粒形态，异染颗粒可辅助诊断可辅助诊断 分离培养分离培养-接种吕氏血清斜面（灰白色小菌接种吕氏血清斜面（灰白色小菌落）或接种亚碲酸钾血琼脂平板（黑色菌落）落）或接种亚碲酸钾血琼脂平板（黑色菌落） 毒力鉴定毒力鉴定鉴别白喉棒状杆菌与其他无毒棒鉴别白喉棒状杆菌与其他无毒棒状杆菌。状杆菌。 体外法：体外法：ElekElek平板毒力实验，平板毒力实验，SPASPA协同协同凝集试验凝集试验 体内法：豚鼠做体内中和试验体内法：豚鼠做体内中和试验Elek平板试验结果Elek Test沉淀线(阳性)含白喉抗毒素滤纸片白喉杆菌菌苔四、防治原则-与破伤风类似 预防预防人工主动免疫：注射白喉人工主动免疫：注射白喉类毒素类毒素（白百破三联（白百破三联疫苗）疫苗）我国扩大国家免疫规划疫苗免疫程序规定，我国扩大国家免疫规划疫苗免疫程序规定，儿童儿童3 3月龄、月龄、4 4月龄、月龄、5 5月龄和月龄和18241824月龄各接种月龄各接种1 1剂次百白破疫苗