农业部饲料工业中心M A F I C

1、农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I CAlternatives of Alternatives of antibiotics for pigsantibiotics for pigs猪用抗生素的替代猪用抗生素的替代Defa Li 李德发李德发Ministry of Agriculture Feed Industry Centre 农业部饲料工业中心农业部饲料工业中心20062006年年11 11月月3030日于北京日于北京农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I C猪营养猪营养营养需要营养需要与代谢与代谢分子生物学分子生物学植物提取

2、物植物提取物免疫学免疫学微生物学微生物学分析化学分析化学营养与免疫营养与免疫基因工程菌基因工程菌细胞生物学细胞生物学分子营养分子营养与肉品质与肉品质团队研究团队研究农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I CAntibiotics抗生素抗生素 Residue残留残留Resistance耐药性耐药性Harmful to animal and human health影响动物和人类的健康影响动物和人类的健康Reduce the use of antibiotics减少抗生素的使用减少抗生素的使用 EU欧盟欧盟China中国中国Current situation and

3、future development 现状与展望现状与展望农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I CAlternatives of antibiotics 抗生素替代抗生素替代uAntimicrobial peptides 抗菌肽抗菌肽 uHerbal extracts 天然提取物天然提取物uEnzyme preparations 酶制剂酶制剂uProbiotics 益生素益生素农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I C农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I CLactobacillus乳酸杆菌乳酸杆菌M

4、echanism机理研究机理研究Application应用研究应用研究绿色荧光蛋白绿色荧光蛋白(GFP)GFP)标记标记蛋白组学蛋白组学粘附位点粘附位点无抗发酵饲料无抗发酵饲料蛋白差异蛋白差异复合发酵培养复合发酵培养悉生动物悉生动物模型模型信号传导信号传导作用机制作用机制农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I C Targeting distribution 目的细菌在肠道中的定位分布情况，其与肠道菌系之目的细菌在肠道中的定位分布情况，其与肠道菌系之 间的关系间的关系 Specific passway and function 具体作用途径与功能的研究具体作用途径

5、与功能的研究空白组空白组农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I C农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I CFermentative respiratory membrane发酵呼吸膜发酵呼吸膜 Single way valve 单向阀门单向阀门 CO2 venting, preventing air to enter 排出袋内微生物产生的排出袋内微生物产生的CO2，阻止大气进入，阻止大气进入农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I CA, E. coli K88 大肠杆菌大肠杆菌K88B, E. coli

6、 K99 大肠杆菌大肠杆菌K99C, S. typhimurium 鼠伤寒沙门氏菌鼠伤寒沙门氏菌 D, Staph. Aureus 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌Int. J. Gener. Mol. Microbiol., X. H. Guo, Defa Li, 2006Inhibitory activity of Bacillus spp. 139 against pathogenic bacteria, but not Lactobacillus外源芽孢杆菌可抑制有害菌，对乳酸菌无影响外源芽孢杆菌可抑制有害菌，对乳酸菌无影响农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F

7、I CMulti-strains combination, creating anaerobic condition automatically 多菌种组合，自身创造厌氧环境多菌种组合，自身创造厌氧环境Yeast酵母菌酵母菌Bacillus spp.芽胞杆菌芽胞杆菌好氧好氧兼性兼性兼性兼性Lactobacillus reproduction in anaerobic condition 乳酸杆菌乳酸杆菌厌氧发酵厌氧发酵Oligosaccharide寡糖寡糖NSP enzyme非淀粉多糖酶非淀粉多糖酶Activator激活剂激活剂 刺激刺激Activate农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业

8、 中中 心心 M A F I CInoculating, packing, then fermentation先接种、包装，后发酵先接种、包装，后发酵接菌接菌激活剂激活剂原料原料发酵发酵轻工业副产物：玉米浆、果渣轻工业副产物：玉米浆、果渣农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I CEffect of fermentation time on energy and gossypol能量与游离棉酚随发酵时间的变化能量与游离棉酚随发酵时间的变化 Decrease the content of gossypol 降低游离棉酚的含量降低游离棉酚的含量Fermentation

9、time (h)EnergyGossypolGossypol（mg/kg）Energy（kcal/g）农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I CEffects of antibiotics-free fermented feed on growth performance in pigs无抗发酵饲料对猪生产性能的影响无抗发酵饲料对猪生产性能的影响P 0.05农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I CRFID systemRFID RFID 追溯系统追溯系统 基因芯片基因芯片uGene chip ：The on line examina

10、tion technique of antibiotics 基因芯片：快速检测分割肉中的抗生素含量（基因芯片：快速检测分割肉中的抗生素含量（20-100 ppb）农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I C农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I CJ. Nutr., J. J. Wang, Defa Li, 2006蛋白质组学蛋白质组学双向电泳双向电泳样品制备样品制备数据库比对鉴定蛋白数据库比对鉴定蛋白相互作用机制相互作用机制生物功能生物功能差异蛋白差异蛋白质谱分析质谱分析图像分析图像分析胶内酶切胶内酶切蛋白蛋白Lactobacillu

11、s乳酸杆菌乳酸杆菌Intestinal epithelial cells肠道上皮细胞肠道上皮细胞等点聚焦等点聚焦SDS-PAGE农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I CIntestinal cellsAdhered or notLactobacillus fermentum I5007 cellsCulture medium, 37C 3737C温箱温箱4 hRabbit jejunum兔子空肠兔子空肠lTwo-dimensional gel electrophoresis 双向电泳双向电泳37C 1 hlMass spectrometry 质谱质谱Differ

12、ential proteins差异蛋白差异蛋白农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I CLactobacillus in rabbit jejunum culture兔子空肠培养条件下乳酸杆菌表达差异的蛋白兔子空肠培养条件下乳酸杆菌表达差异的蛋白Electrophoresis, F. Yang, Defa Li, 2006Glycoside hydrolase糖苷水解酶（粘蛋白的分解酶）糖苷水解酶（粘蛋白的分解酶）降解肠粘膜表达的粘蛋白降解肠粘膜表达的粘蛋白有利于乳酸杆菌粘附定植有利于乳酸杆菌粘附定植Fructose-6-phosphate Phosphoketo

13、lase (F6PPK) 6-6-磷酸果糖磷酸酮酶磷酸果糖磷酸酮酶Lactate dehydrogenase乳酸脱氢酶乳酸脱氢酶Dihydrolipomide dehydrogenase二氢硫辛酸脱氢酶二氢硫辛酸脱氢酶（丙酮酸脱氢酶系）（丙酮酸脱氢酶系）糖酵解糖酵解三羧酸循环三羧酸循环磷酸戊糖途径磷酸戊糖途径减少氧自减少氧自由基产生由基产生NADPHNADPH生成增加生成增加有利于乳酸杆菌存活有利于乳酸杆菌存活农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I CIntestinal cells after Lactobacillus adhesion肠细胞被乳酸杆菌粘附条件

14、下表达差异的蛋白肠细胞被乳酸杆菌粘附条件下表达差异的蛋白Electrophoresis, F. Yang, Defa Li, 2006Voltage-dependent anion channel 1 电压依从性阴离子通道电压依从性阴离子通道1 1Glutathione transferase 谷胱甘肽转移酶谷胱甘肽转移酶Heat shock protein gp96 热应激蛋白热应激蛋白gp96gp96调控膜通透性调控膜通透性改善机体免疫改善机体免疫减少氧化应激减少氧化应激改善肠道完整性改善肠道完整性及其健康及其健康农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I C农农

15、 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I CFunctional mechanism of synbiotics 合生素的作用机理合生素的作用机理Synbiotics 合生素合生素Bacillus subtilis枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌Astragalus, aloe polysaccharide, etc.黄芪多糖，芦荟多糖黄芪多糖，芦荟多糖等等Immunity免疫力免疫力Antibacterial substance 抑菌物质抑菌物质Organic acid有机酸有机酸Health动物健康动物健康农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I

16、 C Bacteriophagel 产生抗菌素产生抗菌素l 挥发性脂肪酸：乙酸、丙酸、丁酸挥发性脂肪酸：乙酸、丙酸、丁酸 Tolerance of the intestinal environment 耐受肠道内环境耐受肠道内环境Bacillus subtilis枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I C农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I CIntestine function肠道功能肠道功能Enteric nervous system 肠神经系统肠神经系统Feed intake采食量采食量Diarrhea

17、腹泻腹泻生产性能生产性能Growth performanceGastrointestinal hormones胃肠激素胃肠激素Mast cell mediators肥大细胞介质肥大细胞介质Intestinal IGF-1 system小肠小肠IGF-1IGF-1系统系统 Hormone on eating采食相关激素采食相关激素ZnO农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I CP = 0.008Increase the expression of the Ghrelin gene 显著提高断奶仔猪胃底腺显著提高断奶仔猪胃底腺GhrelinGhrelin基因的表达基因

18、的表达, , 提高采食提高采食量量农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I C Improve the intestinal function 药理剂量氧化锌促进仔猪肠道健康药理剂量氧化锌促进仔猪肠道健康The small intestinal morphology of weaned pigs receiving a diet with or without supplementation of 3000 mg/kg Zn 日粮中添加日粮中添加3000 mg/kg3000 mg/kg氧化锌氧化锌ZnO对仔猪小肠形态对仔猪小肠形态的影响的影响J. Nutr., X.

19、 L. Li, Defa Li, 2006ItemsZnSO4ZnO groupSEMPVillus height, m 341 387 14 0.036Crypt depth, m 194 179 8 0.248农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I C Increase the expression of IGF-1 gene 提高小肠提高小肠 IGF-1 IGF-1 基因的表达基因的表达 通过通过IGF-1IGF-1的旁分泌作用促进仔猪肠道健康和生长的旁分泌作用促进仔猪肠道健康和生长Effects of dietary supplement of 3000

20、mg/kg ZnO on the expression of small-intestinal mucosa IGF-1 gene in piglets日粮中添加日粮中添加3000 mg/kg3000 mg/kg氧化锌对仔猪小肠粘膜氧化锌对仔猪小肠粘膜IGF-1IGF-1基因表达的影响基因表达的影响P = 0.012P = 0.041ab libitum Pair-fedJ. Nutr., X. L. Li, Defa Li, 2006农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I CuDecrease the release of the histamine in th

21、e small intestine 高锌显著降低断奶仔猪小肠组胺的释放高锌显著降低断奶仔猪小肠组胺的释放稳定小肠通透性稳定小肠通透性P = 0.005P = 0.049P = 0.049Duodenum Jejunum Ileum 农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I CThe numbers of mast cells (cell/cm2) in the small intestine of weanling piglets fed diets containing normal or high-levels of zinc oxide高锌日粮对断奶仔猪小肠肥

22、大细胞数量的影响高锌日粮对断奶仔猪小肠肥大细胞数量的影响 Decrease the numbers of the mast cells in the small intestine 高锌显著降低断奶仔猪小肠各层肥大细胞数高锌显著降低断奶仔猪小肠各层肥大细胞数改善小肠功能改善小肠功能LocationControlTreatmentP Duodenum mucosa74.9 21.936.7 8.90.01Jejunum mucosa99.7 13.1 48.8 13.20.01Ileum mucosa81.4 19.555.1 3.40.01农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心

23、M A F I CmRNA and protein levels for the stem cell factor (SCF) gene in the mid jejunum of weanling piglets fed diets containing normal and high-levels of ZnO高锌对空肠中段干细胞因子表达（基因与蛋白）的影响高锌对空肠中段干细胞因子表达（基因与蛋白）的影响 Decrease the expression of SCF 高锌显著降低空肠干细胞因子的表达高锌显著降低空肠干细胞因子的表达 调控肥大细胞数量及介质释放调控肥大细胞数量及介质释放P =

24、 0.016ProteinNormal ZnOHigh ZnOP = 0.024mRNANormal ZnOHigh ZnO农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I CComp. Biochem. Physiol., Z. K. Feng, 2006 Zn improves tight junction permeabilityl 高锌降低断奶仔猪小肠粘膜跨上皮电位差高锌降低断奶仔猪小肠粘膜跨上皮电位差l 维持肠道紧密连接的完整性维持肠道紧密连接的完整性ItemsDietsSEMPZn2500DietZnDiet Zn- Zn+ ZnIscZn (m/cm2)9.0

25、12.45.10.450.230.84GZn (ms/cm2)1.3a 0.4bc0.30.03 0.0010.82农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I C农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I CComplex enzyme-mutation and selection复合酶复合酶诱变选育诱变选育 Aspergillus sulphureus-MAFIC001 可高产复合酶的硫色曲霉及其诱变筛育方法和固态发酵制可高产复合酶的硫色曲霉及其诱变筛育方法和固态发酵制备饲用复合酶的应用备饲用复合酶的应用 High yield of com

26、plex enzyme: xylanase, -glucanase, pectinase, etc. 高产复合酶：木聚糖酶、高产复合酶：木聚糖酶、 -葡聚糖酶、果胶酶等葡聚糖酶、果胶酶等 Industrial production 工业化生产，商业利润超过工业化生产，商业利润超过1000万元万元 Aspergillus niger-MAFIC005 饲用非淀粉多糖酶高产菌种的选育及其固态发酵生产技术饲用非淀粉多糖酶高产菌种的选育及其固态发酵生产技术 High yield of complex enzyme: xylanase, -glucanase, pectinase, etc. 高产复合酶

27、：木聚糖酶、葡聚糖酶、果胶酶等高产复合酶：木聚糖酶、葡聚糖酶、果胶酶等农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I CExisting questions and the methods to increase the yield of -mannanase存在问题及提高存在问题及提高 - -甘露聚糖酶产量的方法甘露聚糖酶产量的方法 Low yield and enzymatic activity, difficult for massive application of -mannanase 产量低，酶活力不高，使产量低，酶活力不高，使 - -甘露聚糖酶不能大量推广使

28、用甘露聚糖酶不能大量推广使用uScreening high yielding A. sulphureus MAFIC001 -mannanase strains by a mutant treatment 诱变选育高产硫色曲霉诱变选育高产硫色曲霉MAFIC001 MAFIC001 - -甘露聚糖酶菌种甘露聚糖酶菌种uModifying -mannanase gene sequence according to codon bias 根据密码子偏好性，优化根据密码子偏好性，优化 - -甘露聚糖酶基因序列甘露聚糖酶基因序列 -mannanase-Aspergillus sulplhureus MA

29、FIC001 -甘露聚糖酶硫色曲霉甘露聚糖酶硫色曲霉MAFIC001农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I CRT-PCR and rapid amplification of cDNA ends (RACE) techniqueRT-PCRRT-PCR和和cDNAcDNA末端快速扩增技术末端快速扩增技术Partial sequence C-terminal domain N-terminal domain 5-RACE (5-full RACE Core Set)3-RACE (3-full RACE Core Set)Primer 1：5-TTCAACGACG

30、TCAACAC -3Primer 2：5-A（T/C）CCAGCC（G/A）TTGCCCCA-3 Primer 1 and Primer 2 used to amplify the partial sequence of -mannanase 设计引物设计引物Primer 1Primer 1和和Primer 2Primer 2扩增扩增 - -甘露聚糖酶部分序列甘露聚糖酶部分序列 Obtain the N-terminal and C-terminal of -mannanase gene sequence using RACE technique 使用使用RACERACE技术获得技术获得 -

31、-甘露聚糖酶的甘露聚糖酶的N-N-端和端和C-C-端序列端序列农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I C1375 bp947 bp1152 bpJ Biotechnol., X. L. Chen, Defa Li, 2006The first time clone the full-length gene sequence of A. sulphureus MAFIC001 -mannanase (GenBank accession no. DQ328335)首次克隆了硫色曲霉首次克隆了硫色曲霉MAFIC001-MAFIC001-甘露聚糖酶全基因序列甘露聚糖酶全基

32、因序列农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I C Modifying the mature -mannanase gene sequence by codon bias 密码子优化改造密码子优化改造 - -甘露聚糖酶成熟编码基因序列甘露聚糖酶成熟编码基因序列Constructing P. pastoris expression vector pPICZA, high density fermentation of recombinant -mannanase in 10 L fermenter 构建毕赤酵母表达载体构建毕赤酵母表达载体pPICZpPICZAA，实现

33、重组，实现重组 - -甘露聚糖甘露聚糖 酶在酶在10 L10 L发酵罐中高密度发酵发酵罐中高密度发酵Pichia pastoris expression vector毕赤酵母表达载体毕赤酵母表达载体 AFermentation device （10 L）发酵装置发酵装置（10升）升）农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I CSDS-PAGE of expressed -mannanase in fermentor with different induction times 发酵罐中发酵罐中 - -甘露聚糖酶在不同时甘露聚糖酶在不同时间的表达量间的表达量 High

34、est enzymatic activity (最高酶活力最高酶活力)：1100 U/mL Purity (纯度纯度)：96 Highest protein expression level (最高蛋白浓度最高蛋白浓度)：3 g/LAccumulation of -mannanaseactivity with different induction times for fermentation发酵中发酵中 - -甘露聚糖酶活性随诱导甘露聚糖酶活性随诱导时间的积累时间的积累 1100 U/mLJAM, X. L. Chen, Defa Li, 200635 kDa 45 kDa66.2kDa 1

35、16 kDa M 1 2 3 4 5 6 7 0 h, 12 h, 24 h, 48 h, 72 h, 96 h, 120 h48 kDa农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I C3.3 fold3.9 fold -mannanase characterization: an extremely broad pH (2.2-8.0) range, optimum pH is 2.4 酶学特性：酶学特性：pHpH（2.2-8.02.2-8.0）范围宽，最适）范围宽，最适pH 2.4pH 2.4JAM, X. L. Chen, Defa Li, 2006 -manna

36、nase protein expression level - -甘露聚糖酶蛋白甘露聚糖酶蛋白表达水平表达水平 -mannanase activity - -甘露聚糖甘露聚糖酶活力酶活力农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I CFurther research进一步的研究进一步的研究 Pilot scale, mass-industrial production 中试，实现工业化生产中试，实现工业化生产 Determine the efficacy by animal feeding trials 动物试验验证其效果动物试验验证其效果National feed e

37、ngineering technology research center Nankou fermentation base国家饲料工程技术研究中心南口发酵实验基地国家饲料工程技术研究中心南口发酵实验基地农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I CEnzyme Microb. Tech., P. Deng, Defa Li, 2006Xylanase木聚糖酶木聚糖酶Aspergillus niger MAFIC005 Xylanase gene l 克隆黑曲霉克隆黑曲霉MAFIC005MAFIC005木聚糖酶木聚糖酶xynBxynB基因，基因，GenBankGenB

38、ank登录号为登录号为 DQ174549DQ174549l 实现了在大肠杆菌和毕赤酵母中的表达实现了在大肠杆菌和毕赤酵母中的表达l 酶学性质表明，与动物胃肠道环境相适应酶学性质表明，与动物胃肠道环境相适应 Aspergillus sulphureus MAFIC001 Xylanase gene l 克隆硫色曲霉克隆硫色曲霉MAFIC001MAFIC001木聚糖酶木聚糖酶xynAxynA和和xynBxynB基因，基因，GenBankGenBank 登录号分别为登录号分别为DQ355509DQ355509和和DQ168666DQ168666l 实现了在大肠杆菌和毕赤酵母中的表达实现了在大肠杆菌和

39、毕赤酵母中的表达l 酶学性质表明，与动物胃肠道环境相适应酶学性质表明，与动物胃肠道环境相适应 农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I C+Modified xynA改造改造xynA pGAPZA载体载体Constitutive expression in Pichia pastoris毕赤酵母中的组成型表达毕赤酵母中的组成型表达Aspergillus sulphureus硫色曲霉硫色曲霉Thermostability of the modified recombinant xylanase改造的重组木聚糖酶热稳定性研究改造的重组木聚糖酶热稳定性研究l Enzyma

40、tic activity: 120 U/mL 最高酶活力达最高酶活力达120 U/mL120 U/mL l Protein concentration: 3.78 mg/mL 蛋白浓度为蛋白浓度为3.78 mg/mL3.78 mg/mLl Good stability: 80C for 90 min 热稳定性好，热稳定性好，80C80C保持保持90 90 minmin农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I C农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I CInflammation reaction of LPS LPSLPS炎性反应炎性反应

41、Disorder of GH/IGF-I axisGH / IGF-IGH / IGF-I轴异常轴异常Immune suppress (cyclophosphamide) 免疫抑制（环磷酰胺，免疫抑制（环磷酰胺，CY CY ）Immune enhancement免疫增强免疫增强Immune type免疫类型免疫类型APS黄芪多糖黄芪多糖Inflammation factor secretion炎性因子分泌炎性因子分泌-？+-？-？+？-Cell culture细胞培养细胞培养？农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I C(Linear P 0.05)(Linear

42、P 0.05)Anim. Sci., S. L. Yuan, X. S. Piao, Defa Li, 2006uImprove cell immune function, the optimal APS level was 500 mg/kgAPSAPS提高断奶仔猪的细胞免疫功能，增强其对入侵微生物和疾病提高断奶仔猪的细胞免疫功能，增强其对入侵微生物和疾病 的抵抗力，促进仔猪健康和生长的抵抗力，促进仔猪健康和生长 APSAPS在断奶仔猪日粮中的最适添加量为在断奶仔猪日粮中的最适添加量为500 mg/kg 500 mg/kg CD4+/CD8+淋巴细胞增殖淋巴细胞增殖农农 业业 部部 饲饲 料

43、料 工工 业业 中中 心心 M A F I CAnim. Sci., S. L. Yuan, X. S. Piao, Defa Li, 2006 CY CYAPSAPSAPSAPSd 14 IL-2 55.4 79.8 50.6 77.8 IFN- 133.3160.1111.7138.9Reverse CY-induced cell immune suppress and humour immune suppressl环磷酰胺免疫抑制模型研究发现，环磷酰胺免疫抑制模型研究发现，APSAPS可促进猪的正常细胞免可促进猪的正常细胞免 疫，也可逆转疫，也可逆转CYCY造成的免疫抑制造成的免疫抑制l

44、本研究建立了一种评价本研究建立了一种评价APSAPS对仔猪营养和免疫作用的有用模型对仔猪营养和免疫作用的有用模型农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I C Recover the normal function of GH/IGF-I axisv 炎性细胞因子过度分泌以及炎性细胞因子过度分泌以及GH/IGF-IGH/IGF-I轴的异常，导致断奶仔猪轴的异常，导致断奶仔猪 发生免疫炎症和生长速度下降发生免疫炎症和生长速度下降v APSAPS通过降低炎性细胞因子、通过降低炎性细胞因子、GHGH和皮质醇的含量，增加抗炎性和皮质醇的含量，增加抗炎性 因子的合成，恢复因子的

45、合成，恢复GH/IGF-IGH/IGF-I轴的正常而发挥其免疫抗炎作用轴的正常而发挥其免疫抗炎作用 Anim. Sci., S. L. Yuan, X. S. Piao, Defa Li, 2006 LPS LPSAPSAPSAPSAPSd 14 Cortisol 115.3113.0155.5136.0 GH 3.82 3.83 4.56 3.94 IGF-I 235.6240.0215.9224.9农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I CbIncrease NO and iNOS activity of the peripheral blood lympho

46、cytes in pigletsnAPSAPS显著增加仔猪外周血淋巴细胞显著增加仔猪外周血淋巴细胞NONO和和iNOSiNOS的活性，的活性，并呈剂量依赖性并呈剂量依赖性J. Anim. Sci., X. F. Mao, Defa Li, 2005农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I C* (P 0.05)*(P 0.05)Increase the IL-2 and IFN- secretionvT T细胞可能是细胞可能是APSAPS直接作用的靶细胞之一直接作用的靶细胞之一vAPSAPS可在体外促进细胞因子可在体外促进细胞因子IL-2IL-2和和IFN-IFN-

47、的分泌，这的分泌，这 可能是可能是APSAPS的免疫调节作用之一的免疫调节作用之一Anim. Sci., S. L. Yuan, X. S. Piao, Defa Li, 2006农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I CJ. Anim. Sci., X. F. Mao, Defa Li, 2005Mechanism of immune function of APSAPSAPS的免疫作用机理的免疫作用机理APSiNOSNO细胞因子表达细胞因子表达 淋巴细胞增殖淋巴细胞增殖+改善动物免疫改善动物免疫IL-2 etc.IFN-+ReceptorGene knockout 基因敲除基因敲除Signal transduction pathway 信号传导通路信号传导通路TLRsToll 样受体样受体农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I C农农 业业 部部 饲饲 料料 工工 业业 中中 心心 M A F I CAbundant and diverse groups of molecules that are encoded by definite genes 特定编码基因产生的一类小分子多肽特定编码基因产生的一类小分子多肽Important compon