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文档简介
1、课时跟踪检测(十二)DNA的粗提取与鉴定、选择题1.下列关于 DNA 的粗提取与鉴定实验的相关叙述,错误的是 ()A 可以选择 DNA 含量较高的生物组织为材料,如鸡的血细胞BDNA 不溶于酒精,且在 0.14 mol/L 的氯化钠溶液中析出C .可以利用嫩肉粉把杂质多糖和RNA 去除D 洗涤剂可以瓦解细胞膜,从而获得含有DNA 的滤液解析 :选 C 鸡血细胞中含有 DNA ,可作为提取 DNA 的生物材料,不可选用哺乳动 物成熟的红细胞; DNA 不溶于酒精,且 NaCl 溶液浓度为 0.14mol/L 时 DNA 溶解度最小, 两者均可将 DNA大量析出; 嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶, 可将蛋
2、白质水解, 从而除去蛋白质; 洗涤剂可以瓦解细胞膜,从而获得含有 DNA 的滤液。2.“DNA 的粗提取与鉴定”实验中,提取鸡血细胞的核物质和析出含解析 :选 C 第一次加蒸馏水的目的是使鸡血细胞涨破,释放出核 馏水的目的是将 NaCl 溶液浓 度降低到 0.14 mol/L ,使 DNA 析出。3. 某同学用洋葱进行 DNA 粗提取和鉴定实验,操作错误的是 (A .加入洗涤剂后用力进行快速、充分地研磨B.用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的DNAC 加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌D .加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热解析 :选 A 加入洗涤剂后,搅拌动作要轻缓、柔和,否则容易产生大量的泡沫,不 利于后续步
3、骤的操作;用蛋白酶分解过滤后的研磨液中的蛋白质,可纯化过滤后研磨液中 的 DNA ;加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌的目的是保证DNA 分子不断裂,保持其完整性;加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热才能出现颜色反应。4若从植物细胞中提取DNA ,发现实验效果不好,如看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定时颜色反应不明显等。其可能的原因是 ()植物细胞中不含 DNA研磨不充分 过滤不充分冷酒精的量过大A .C .解析:选 D 研磨不充分会使细胞核内的 DNA 释放不完全,提取的 DNA 量变少;过 滤不充分也DNA 的黏稠物这两步中都用到了蒸馏水,其作用分别是 ()A .防止鸡血细胞失水皱缩和稀释NaCl 溶液至 0
4、.14 mol/L 使 DNA 析出B.防止鸡血细胞失水皱缩和溶解DNAC .使鸡血细胞吸水涨破和稀释NaCl 溶液至 0.14 mol/L 使 DNA 析出D .使鸡血细胞吸水涨破和溶解DNADNA ,第二次加蒸B.D .会导致提取的 DNA 量过少;若用于沉淀 DNA 的酒精量过少,也会导致 DNA 的沉淀量少,从而影响实验效果。5在“ DNA 的粗提取与鉴定”实验中,如果实验材料是植物细胞,需要进行研磨并 搅拌。下列相关说法正确的是()A .在切碎的植物材料中加入一定量的洗涤剂和蒸馏水,充分研磨后过滤获取滤液B.加入洗涤剂是为了瓦解细胞膜和核膜C .要快速搅拌产生泡沫以加速细胞膜的溶解D
5、 .先加入洗涤剂,搅拌和研磨后再加入食盐解析:选 B 提取植物材料中的 DNA 时,需在切碎的组织中加入一定量的洗涤剂和食 盐。加入洗涤剂的目的是瓦解细胞膜和核膜,以利于DNA 的释放,同时要进行充分地搅拌和研磨,使 DNA 完全释放。搅拌时应轻缓、柔和,避免产生大量泡沫,以利于后续操作。6.下表是关于 DNA 的粗提取与鉴定实验中所使用的材料、操作及其作用的表述,正确的是()选项试剂操作作用A柠檬酸钠溶液与鸡血混合有利于血液凝固B蒸馏水与鸡血细胞混合保持细胞形状C蒸馏水加入溶解有 DNA 的 NaCI 溶液中析出 DNA 丝状物D冷却的酒精加入过滤后的 NaCI 溶液中产生特定的颜色反应解析
6、:选 C 在 DNA 的粗提取与鉴定实验中,柠檬酸钠可以防止血液凝固;鸡血中加入蒸馏水可以使细胞膜和核膜破裂;DNA 在不同浓度的 NaCI 溶液中溶解度不同,在物质的量浓度为 0.14 moI/L 的 NaCI 溶液中溶解度最低,有利于 DNA 析出;DNA 不溶于酒精,而蛋白质溶于冷却的酒精可以获得较纯的DNA , DNA 遇二苯胺(沸水浴加热)呈蓝色。7.DNA 粗提取与鉴定实验中有以下过滤:过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液;过滤含黏稠物的 0.14 moI/L 的 NaCI 溶液;过滤溶解有 DNA 的 2 mol/ L 的 NaCI 溶液,以 上过滤分别为了获得()A.含核物质的滤液、
7、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液B. 含核物质的滤液、滤液中 DNA 黏稠物、含 DNA 的滤液C .含核物质的滤液、滤液中DNA 黏稠物、纱布上的 DNAD .含较纯的 DNA 滤液、纱布上的黏稠物、含DNA 的滤液解析:选 A 用蒸馏水稀释鸡血细胞液,使血细胞的细胞膜、核膜破裂,释放出核物 质,此时过滤只能得到含 DNA 和其他物质如蛋白质的滤液,这种滤液必须经过实验中其他步骤的相继处理,方能得到较纯的DNA。DNA 在 0.14 moI/L NaCI 溶液中溶解度最低,呈丝状黏稠物,经过滤留在纱布上。8.下列关于“ DNA 粗提取与鉴定实验”的叙述,正确的是()A .洗涤剂能瓦解细胞膜并增
8、大DNA 在 NaCI 溶液中的溶解度B.将 DNA 丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝C .常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA 的提取D 用玻璃棒缓慢搅拌滤液会导致DNA 获得量减少解析:选 C 洗涤剂能瓦解细胞膜,但对DNA 在 NaCI 溶液中的溶解度无影响;DNA丝状物需先溶解在适宜浓度的NaCI 溶液中,然后加入二苯胺试剂,混合均匀后沸水浴加热,待冷却后观察到溶液变蓝;常温下菜花匀浆中有些水解酶可能会使DNA 水解而影响 DNA的提取;用玻璃棒朝一个方向缓慢搅拌可减轻对DNA 分子的破坏,有利于 DNA 分子的提取。9.下列与析出 DNA 黏稠物有关的叙述,不.正确的是()A
9、操作时缓缓滴加蒸馏水,降低DNA 的溶解度B.在操作时,用玻璃棒轻缓搅拌,以保证DNA 分子完整C 加蒸馏水可同时降低 DNA 和蛋白质的溶解度,两者均可析出D .当丝状黏稠物不再增加时,NaCI 溶液的物质的量浓度约等于0.14 moI/L解析:选 C 向含有 DNA 的溶液中加入蒸馏水后,NaCI 溶液的浓度会变小,当 NaCI溶液的物质的量浓度为 0.14 moI/L 时,DNA 溶解度最小,而此时蛋白质溶解在 NaCI 溶液中。10.在利用鸡血进行“ DNA 的粗提取与鉴定”的实验中,相关叙述正确的是()A .用蒸馏水将 NaCI 溶液浓度调至 0.14 moI/L,滤去析出物B.调节
10、 NaCI 溶液浓度或加入木瓜蛋白酶,可去除部分杂质C .将丝状物溶解在 2 moI/L NaCI 溶液中,加入二苯胺试剂即呈蓝色D 用菜花替代鸡血作为实验材料,其实验操作步骤相同解析:选 B 用蒸馏水将 NaCI 溶液浓度调至 0.14 moI/L 后,过滤并收集析出物;利用 二苯胺试剂鉴定 DNA 时,需沸水浴加热几分钟, 才呈蓝色;用菜花替代鸡血作为实验材料, 需加入洗涤剂和食盐,并对材料进行研磨。调节 NaCI 溶液浓度改变不同物质在其中的溶解 度,加入木瓜蛋白酶分解蛋白质都可以去除部分杂质。二、非选择题11. 如图是“ DNA 粗提取与鉴定”相关实验步骤。请据图分析回答:ABGD(1
11、)鸡血细胞是进行该实验较好的实验材料,这是因为 _ 。从鸡血细胞中释放出核物质的处理方法是 _ 。(2) 图 A 表示释放核物质后进行过滤的过程, 过滤后取 _ (填“滤液”或“析出物” )进行下一步实验;图B 表示的相关操作过程中,加入 2 mol/L NaCl 溶液的作用是_;图 C 表示在滤液中加入冷却的 95% 的酒精,其目的是 _ 。(3)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是 DNA ,可滴加溶液,结果丝状物被染成绿色。(4)图 D 中 a 试管为对照组,b 试管为实验组。1a 试管现象_ ; b 试管现象_。2在沸水中加热的目的是 _ ,同时说明 DNA 对高温有较强的 _。3a 试管
12、在实验中的作用是 _。4b 试管中溶液颜色的变化程度主要与 _ 有关。解析 :图 A 表示释放核物质后进行过滤的过程,纱布上的过滤物主要是细胞膜、核膜 的碎片等杂质,而 DNA 主要存在于下面的滤液中,所以过滤后应取滤液进行下一步实验。 DNA 不溶于冷酒精, 而其他一些物质可以溶于冷酒精, 从而可进一步提纯 DNA 。甲基绿为 比较常用的细胞核染色剂,染色后细胞核中染色体呈绿色,可以用来鉴定DNA 。答案 :(1)鸡血细胞核中 DNA 含量丰富, 材料易得 向鸡血细胞溶液中加入蒸馏水, 并 搅拌 (2)滤液 溶解 DNA 分子 提取杂质更少的 DNA( 或去除脂溶性杂质 ) (3)甲基绿 (
13、4)溶液不变蓝 溶液变蓝加快颜色反应速度 耐受性对照加入 DNA(丝状 物)的多少12以下是有关 DNA 粗提取实验的阅读材料:A 核酸极不稳定, 在较为剧烈的化学、 物理因素和酶的作用下很容易降解。 但柠檬酸 钠溶液对 DNA具有 保护作用。B. DNA 核蛋白在 1 mol/L NaCI 溶液中溶解度很高,但在 0.14 mol/ LNaCI 溶液中的溶 解度很低;而 RNA 核蛋白溶于 0.14 mol/L NaCl 溶液。C .用苯酚处理,可使蛋白质变性,且留在苯酚层内;在DNA 溶液中加入 2.5 倍体积、体积分数为 95% 的酒精,可将 DNA 分离出来。D. DNA 在强酸环境下
14、, 水解产生脱氧核糖等小分子物质, 它与二苯胺酸性溶液反应, 能生成蓝色化合物。E.实验材料与器械:柠檬酸钠溶液、石英砂、 0.14 mol/L NaCI 溶液、1 mol/ L NaCI 溶液、蒸馏水、苯酚、95% 酒精、二苯胺试剂、浓硫酸、花椰菜、研钵、烧杯、漏斗、玻璃棒、量筒、石棉网、酒精灯、吸管、试管等。F .实验步骤:研磨得匀浆T过滤得滤液T滤液稀释 6 倍T离心处理得沉淀物T沉淀物 再溶解T加苯酚静置后去上清液T提取出 DNATDNA 鉴定。请根据以上材料回答下列问题:(1)_ 研磨时,取 10g 花椰菜,加适量的石英砂、 _和_ 。(2)_将滤液稀释 6 倍,其目的是_ 。取沉淀
15、物,置于 2 mL 1 mol/L NaCI 溶液中,使 DNA 核蛋白再次溶解,再加 2 mL苯酚充分振荡后静置, 待其分层后弃其上层的苯酚。该步骤的目的是除去 _将剩余溶液中的 DNA 提取出来的方法是 _(5)_ 证明提取物确实是 DNA 分子的方法是_解析:( (1)在研磨时加入少许石英砂是为了增大摩擦力,加快研磨的速度。加入1 mol/LNaCI 溶液是为了溶解 DNA 核蛋白,而加入柠檬酸钠溶液是为了保护DNA 不被破坏。在0.14 mol/ L NaCI 溶液中,DNA 核蛋白的溶解度最低,所以要将1 mol/L NaCI 溶液稀释,使 DNA 核蛋白析出。前一步提取的是 DNA
16、 核蛋白,而需要的是 DNA,因此需要把 DNA 核蛋白进一步提纯。用苯酚处理,可使蛋白质变性,且留在苯酚层内,用这样的方法可以 去除蛋白质。( (4)根据题中所给信息, 在 DNA 溶液中加入 2.5 倍体积、体积分数为 95%的酒 精,可将 DNA 分离出来,可用玻璃棒搅成团取出。(5)DNA 在强酸环境下,水解产生脱氧核糖等小分子物质。它与二苯胺酸性溶液反应,能生成蓝色化合物。用此种方法可以鉴定 所提取的物质是否为 DNA。答案:(1)1 mol/L NaCI 溶液 柠檬酸钠溶液使 DNA 核蛋白的溶解度逐渐降低蛋白质( (4)向下层 DNA 溶液中加 2.5 倍体积、体积分数为 95%
17、的酒精,并用玻璃棒沿一个 方向搅拌,在玻璃棒上的成团物即是DNA (5)用适量的浓硫酸处理提取物,再滴加二苯胺酸性溶液试剂数滴,反应后有蓝色出现即可证明提取物是DNA13.如图表示以鸡血为实验材料进行DNA 的粗提取与鉴定的操作程序,请分析回答下列问题:- - DNA 的初 -再溶解| - |过滤| 步纯化 一| DNA 的鉴定五六七八(1) 步骤一中,向鸡血细胞液中加入 _ 并搅拌,可使鸡血细胞破裂。过溶解细胞核滤 -内的 DNADNA 的析出破碎细胞释放 DNA(2) 步骤二中,过滤后收集含有DNA 的_。(3)步骤三、四的操作原理是步骤四通过向溶液中加入 _调节 NaCl 溶液的物质的量浓度至 _mol/L 时,DNA 将会析出,过滤去除溶液中的杂质。(4)_ 步骤七:向步骤六过滤后的 _中, 加入等体积的冷却的 _ ,静置 23min,溶液中会出现 _ 色丝状物,这就是粗提取的DNA。(5)步骤八: DNA 遇试剂,沸水浴 5 min,冷却后,溶液呈色。解析 :破碎红细胞应
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