磷酸盐缓冲液配制方法

1、磷酸盐缓冲液配制方法磷酸盐缓冲液（ PBS）配制方法0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4 ，pH 7.2)PBS 缓冲液（ pH7.27.4）：NaCl 137mmol/L ， KCl 2.7mmol/L ， Na2HPO4 4.3mmol/L ，KH2PO4 1.4mmol/L称 7.9g NaCl，0.2g KCl，0.24g KH2PO4(or 1.44gNa2HPO4) 和 1.8g K2HPO4 ，溶于 800 ml 蒸馏水中，用 HCl 调节溶液的 pH 值至 7.4，最后加蒸馏水

2、定容至 1 L。保存于 4冰箱中即可。需要注意的是，通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度， 而非 Na 离子或K 离子的浓度， Na 离子和 K 离子只是用来调节渗透压的。母液的配制：0.2M Na2HPO4 ：称取 71.6g Na2HPO4-12H2O ，溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4 ：称取 31.2g NaH2PO4-2H2O ，溶于 1000ml 水各种浓度 PB(pH=7.4) 的配制：先 配 0.2M PB (pH=7.4 ， 100ml) ：取 19ml 0.2mol/L 的 NaH2PO4 ， 81ml 0.2mol/L 的 Na2HP

3、O4, 即可。然后 只需将 0.2M PB (pH=7.4) 按相应比例适当稀释 即可，如：0.1M PB （PH=7.4） ：取 500ml 0.2M PB ，加水稀释至 1000ml 即可。0.01M PB （PH=7.4）：取 50ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。0.02M PB （PH=7.4）：取 100ml 0.2 M PB ，加水稀释至 1000ml 即可。若 需 要NaCl的 话 ， 加 入NaCl至0.9%（ g/100ml）即可。另：其它各种另PH 值的 0.2MPB（100ml)配方 ：pH0.2M NaH2PO4（ml）0.2MNa2HPO4 （m

4、l）5.793.56.55.89285.990106.087.712.36.185156.281.518.56.377.522.56.473.526.56.568.531.56.662.537.56.756.543.56.851496.945557.038627.133677.228727.323777.419ml81ml7.516847.613877.710.590.57.88.591.57.97938.05.394.70.01M 磷酸盐缓冲液（ PBS）配制方法称取 8g NaCl、0.2g KCl 、1.44g Na2HPO4 和 0.24g KH2PO4, 溶于 800ml 蒸馏水中，

5、用 HCl 调节溶液的 pH 值至 7.4，最后加蒸馏水定容至1L 即可。在 15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌（至少 20 分钟），保存存于室温或 4冰箱中。需要注意的是，通常所说的浓度 0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度， 而非 Na 离子或 K 离子的浓度， Na 离子和 K 离子只是用来调节渗透压的。 如果是用于免疫组化的话， 则需要在配置的时候分别加入 100 u/ml 青霉素和链霉素之后再调 PH、定容、灭菌消毒。PH7.67.47.27.0H2O1000100010001000NaCl8.58.58.58.5Na2HPO4 2.22.22

6、.22.2NaH2PO4 0.10.20.30.4根据经验来看，新鲜配置的 PBS 搅匀后其 PH 值约在 7.2-7.4 之间，可是在温度的影响下，尤其在夏天，其电离常数发生了改变， 在经过昼夜的时间后，PH 值会明显改变（我亲自测过偏酸） 。所以做实验的同学可要注意了， PH 值可能会影响实验结果， 甚至可能导致阴性。 所以务必记得这个时候和天气， 要加强实验条件控制问题。 每次使用前最好用试纸测一下过夜了的 PBS，如果发生偏酸或偏碱，注意重新换新液。PBS 缓冲液称取NaCl 8g， KCl 0.2g， Na2HPO4?12H2O3.63g, KH2PO4 0.24g，溶于 900ml

7、 双蒸水中，用盐酸调 pH 值至 7.4，加水定容至 1L，常温保存备用。PBST 缓冲液取 300 l Tween-20 加入 PBS 100ml 中，混匀后即刻使用。现用现配。如果是把所有固体加大十倍， 配置为浓缩液， 工作时候十倍稀释， 那么，在刚配好浓缩液时， PH 在 6.5 左右，明显偏酸。不能用盐酸调。虽然可以用氢氧化钠颗粒调，但是有更方便的方法。十倍稀释以后， PH 自动升高到所需要的值。不需要其它任何处理。这个可以先取少量试一试，配好之后再测一次 PH8.0 的 PBS 配方详细1. NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L ，Na2HPO4 4.3mmol/

8、L， KH2PO4 1.4mmol/L2. 向烧杯中加入约 800 ml 的去离子水，充分搅拌溶解。3. 滴加浓盐酸将 pH 值调节至 8.0，然后加入去离子水将溶液定容至 1 L。4. 高温高压灭菌后，室温保存。注意：上述 PBS Buffer 中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充 1 mM CaCl2 和 0.5 mM MgCl2 。0.05mol/L PBS(磷酸缓冲液 Phosphate Buffer Solution，PBS)的配制：甲液： 0.05mol/L Na2HPO4 溶液 ：称取磷酸氢二钠 9.465g 7.099g,加蒸 馏水至 1000ml ;乙液： 0.05mol/L KH2P04 溶液 : 称取磷酸二氢钾 , 9.07g 6.803g,加蒸馏水至 1000m1。将甲乙液分装在棕色瓶内，于 4冰箱中保存，用时甲、乙两液各按不同比例混合，即可得所需 pH 的缓冲液 ,见下表 :pH甲液 ml乙液 mI5.292.597.55.595.095.05.9110.090.06.2420.08